巴比妥类药物的分析

1、第五章 巴比妥类药物的分析第五章 巴比妥类药物的分析基本要求1、掌握本类药物的结构与理化性质。2、掌握典型药物苯巴比妥、司可巴比妥钠、硫喷妥钠的法定鉴别和含量测定方法（包括原 理、方法和计算）。3、熟悉本类药物的特殊杂质检查和其他定量分析方法。4、了解生物样品中本类药物的测定方法。学习要点、典型药物的鉴别、检查和含量测定典型药物化学鉴别特殊杂质检查含量测定苯巴比妥银盐反应（白色J ）、铜盐反应（紫色或紫色J ）、NaNO2-H2SO4反应（橙黄色）、 甲醛-硫酸反应（玫瑰红色环）酸度、溶液的澄清度、 中性或碱性物质原料：银量法制剂：银量法司可巴比妥钠银盐、铜盐反应（同上）、 烯丙基反应（使碘褪

2、色）、 测定衍生物熔点、Na+反应溶液的澄清度、 中性或碱性物质原料：溴量法胶囊：溴量法硫喷妥钠银盐、铜盐反应（同上）、硫元素反应（碱性下与铅生成白色J，加热，产生黑色PbSj ）、测定衍生物熔点、Na+反应紫外法注:（1）银盐反应和铜盐反应一一为含丙二酰脲结构药物的反应，巴比妥类药物与硝酸银反应 产生白色与硫酸铜-吡啶反应，产生紫色（ 区别：硫喷妥钠的铜盐反应结果为绿色）。（2）制备衍生物测定熔点：是利用巴比妥类药物的钠盐易溶于水，而其游离酸难溶于水的 性质。在钠盐中加酸使巴比妥类游离析岀，过滤、干燥后测定熔点。（3） 苯巴比妥的银量法 在碳酸钠溶液中用硝酸银滴定，以电位滴定法指示终点。硝酸

3、 银与苯巴比妥的 摩尔比为1: 1。（4）司可巴比妥钠的溴量法司可巴比妥钠分子中含有一个双键，可与溴（或碘）发生加成反应，1个双键消耗1分子Br2 （或I2 ），所以滴定剂与被测物的摩尔比为1:1、巴比妥类药物的紫外性质巴比妥类药物具弱酸性，在不同碱性条件下可发生不同程度的电离，具有不同的紫外吸收特征。在酸性条件下不电离，无紫外吸收。而含硫巴比妥在酸性、碱性条件下均有紫外吸收, 据此可以区别。内容第一节基本结构与特征-NH3 5,巨取代巴比妥2C0S)2-硫代巴比突1 /1品-取代巴比妥2CC-NH代表性药物：1、 苯巴比妥 (Phenobarbital)2、司可巴比妥钠 (Secobarbi

4、tal sodium )3、硫喷妥钠(Thiopental sodium )4、巴比妥、异戊巴比妥、戊巴比妥( barbital ，Amobarbital ， pento barbital )一、弱酸性-与强碱成盐rJrH N NHonH c o/az1 2RROHON c/ CNOex'>吐 2R;aoil二、水解反应与碱液共沸t NH fH叫*zc= 0 4- 51WH CHCOON&+ 2NH；N厂/H三、与重金属离子反应与钻、铜t 有色J,与银、汞t白色Jr 厂 co nWr/ cc-nhCO-N-|P、 Vo +h+CO-NH/MuSC>4 二2U*SI四

5、、紫外吸收光谱特征（一）、硫代巴比妥的紫外吸收（二）、5 , 5-取代巴比妥的紫外吸收特征220240 255280nm五、显微结晶（一）、药物本身的晶形1、巴比妥一一长方形结晶2、苯巴比妥球形->-> 花瓣状结晶（二）、反应产物的晶形1、巴比妥与铜-吡啶形成十字形紫色结晶2、苯巴比妥形成浅紫色不规则或菱形结晶其他巴比妥类与铜-吡啶不形成结晶，可区别第二节鉴别试验、丙二酰脲试验：（一）、巴比妥类 + Na 2CO TS+过量AgNO 白色J2+（二）、巴比妥类+吡啶溶液+ Cu - 紫色（J）（含硫巴比妥类为绿色，可与之区别）、钠盐的鉴别试验：（钠离子的焰色反应）（一）、在无色火焰

6、中燃烧，呈现黄色火焰。三、取代基试验（一）、苯环取代基反应：1、硝化反应2、亚硝酸钠-硫酸反应3、硫酸-甲醛反应苯巴比妥+ KNO3+H2SQ 黄色苯巴比妥+ NaNO2+fSO 橙黄色苯巴比妥+甲醛+ H2SO 玫瑰红色4、硫元素反应：、硫喷妥钠+NaOH+Pb+ 白色J（2）、加热PbSj（黑色）5、与香草醛反应：2戊巴比妥+香草醛0H橇工色（二）、不饱和取代基（烯丙基）反应：1、司可巴比妥钠 + I 2 （ B2）碘（溴）褪色2、或在碱性溶液中与高锰酸钾反应，使后者褪色CHj oNSr2KMnO4(Brj第三节特殊杂质检查一、苯巴比妥的特殊杂质（一）、酸度（二）、溶液的澄清度（三）、中性

7、或碱性物质控制酸性杂质苯丙二酰脲，利用其酸性较苯巴比妥强，能使甲基橙显红色， 规定一定量供试品溶液加甲基橙后不得显红色。利用杂质苯巴比妥酸在醇中溶解度小，观察苯巴比妥乙醇溶液的澄清度。要求溶液澄清。司可巴比妥钠也作此项检查，但溶剂为水控制合成副产物或分解产物。利用这类杂质不溶于氢氧化钠试液而溶于醚，而苯巴比妥溶于氢氧化钠试液的性质差别，将他们分离提取，挥干乙醚，称重残渣重量，确定是否超过限量。（司可巴比妥钠也有此检查）第四节含量测定一、银量法（一）、原理：在碳酸钠溶液中巴比妥类与硝酸银首先生成可溶性一银盐，继续滴定, 过量的银离子就和巴比妥类的一银盐形成难溶性二银盐沉淀，使溶液变浑浊而指示终点

8、。R严 zcxcON34 ASNO 4 N OjR 2C 0N H/COCOON a 44 N jHCOjCONa * A5NO3COhl，CONR1x 严、COr3 coh7（二）、方法的改进1、以甲醇替代水-丙酮为溶剂，2、电位法替代目视法指示终点，克服了温度变化影响和目视法的主观性倾向（三）、注意事项1、无水碳酸钠需新鲜配制，银电极使用前用硝酸浸洗，再用水洗净。（四）、应用：苯巴比妥、异戊巴比妥等采用该法。二、溴量法（一）、原理：司可巴比妥钠含有不饱和双键，可与溴定量发生加成反应，中国药典采用 剩余溴量法测定原料和其胶囊的含量。（二） 、方法：KBrQ + 5KBr + HCI f 3B

9、“（标准液 1）（三） 、巴比妥类+Br2 （定量过量）f加成物（四）、Br2 （剩余）+KI （过量） f I 2（五）、丨2 +2Na2S2C3 （标准液 2）f 2Nal+Na2S4O6（六）、同时做空白试验（七）、计算：、ImoIBr相当于 M/2司可巴比妥钠（2）、M=260.27（3）、所以 T=M 样品/2 X mol / L 标准液 =13.01（V 空白 -V 样品）X FX T）/（W（mg） X 100%F=C 实际 /C 理论三、紫外分光光度法（一）、直接紫外分光光度法（注射用硫喷妥钠（1）、取相当于硫喷妥钠0.25g，用水稀释至 500ml，再用0.4%氢氧化钠溶液稀

10、释至5ug/ml。另取硫喷妥为对照品，用0.4%氢氧化钠溶液稀释至约5ug/ml。分别测定吸收度，计算人曰含量、取样量中硫喷妥钠的mg数=（A样/A对）X CM 1.091 X 50（3）、1.091=硫喷妥钠分子量/硫喷妥分子量、50= （500 X 100） /1000（二）、提取分离后紫外分光光度法（苯巴比妥钠）（1）、酸化：苯巴比妥钠加水使溶解+ HCl f析岀沉淀（2）、提取：沉淀+氯仿f苯巴比妥，蒸发至近干f残渣（3）、碱化：残渣+醇+ pH10溶液f测定溶液（发生一级电离）、测定：入240nm处测定吸收度，以苯巴比妥为对照。四、差示分光光度法（一） 、原理：利用被测物在两种不同溶

11、液中吸收光谱发生了特征性变化，而共存干扰物在该两种溶液中未引起光谱变化，测定两种溶液的吸收度差值（ A值），根据A与被测物浓度C的线性关系进行定量测定。（二）、特点：简便、直观，具备一般分光光度法直接读数的优点，无需事先分离，又能 消除干扰；提供一个近似理想的参比溶液。（三）、方法：（1）、取供试品一定量，做成溶液，分成2等分（2）、1份+酸f 一定体积（测定）f A测（3）、另1份+碱 f 同样体积 （参比）f A参（4）、A 测A 参= A 样（5）、干扰物在两种溶液中吸收光谱无变化，即A杂=0,（6）、 A样只与样品浓度C呈线性关系。（7）、另取对照品同法操作，得A对，按标准对照法计算含

12、量。（四）、巴比妥类药物的差示光谱容容窖 y 71-71-71 1013性 phph酸k 240run无 h max220240260280nm1、 A240= A pH10 - 酸性，2、 A260=A pH13- A pH103、方法：（1）、样品、对照-> 同样操作，/ A样、/ A标（2）、计算：（/ A样/ / A标）X C标=C样（3）、注意：不同pH溶液中被测物的浓度必须相等4、作业:（1）、根据巴比妥类药物在不同pH条件下的光谱图，设计差示光谱的几种组合。（2）、差示光谱的目的？应用范围？（3）、举例见教材：复方苯巴比妥散、血清中巴比妥类药物的测定五、酸碱滴定法（一）、醇

13、-水混合溶剂中，用氢氧化钠溶液滴定，以麝香草酚酞为指示剂 （增加溶解度，防止滴定过程中产生的弱酸盐水解而影响终点观察）（二）、在胶束水溶液中，用氢氧化钠溶液滴定，以麝香草酚酞为指示剂（在表面活性剂的胶束水溶液中巴比妥类药物酸性增强，使终点明显）（三） 、非水溶液滴定：在非水溶剂“二甲基甲酰胺、甲醇、氯仿等”中，用甲醇钠-甲 醇溶液等滴定（非水酸量法）（四）、非水碱量法一一在酸性溶剂中用高氯酸滴定剂滴定弱碱性药物。1、常用溶剂一一冰醋酸；2、 滴定剂高氯酸滴定液；3、 指示剂结晶紫；（五）、非水酸量法一一在碱性溶剂中用甲醇钠滴定剂滴定弱酸性药物。1、常用溶剂：乙二胺、二甲基甲酰胺；2、滴定剂：甲

14、醇钠滴定液。（六）、非水碱量法1、原理：BH+ A +HCIO4T BH+ CIO4+HA2、 滴定剂：HCI04-冰HAc溶液3、非水溶剂：根据被测物的碱性强弱，常用的非水溶剂有冰醋酸、醋酐、两者混合物。4、温度影响：(1) 、标准液须注明标定时温度，(2) 、标定与测定温度不一致，须校正(温差 10C)或重新标定(温差10 °C)(3) 、 N测=N 标/1+0.0011(t 测-t 标)5、指示剂终点颜色一一由电位法确定V ( ml)E (mv)01507.002367.102477.20;2637.252787.303057.353807.4040821 体积 (ml)电位计 读数E(y)A EAVA EAVv ( 1DAV)V20刁007.1