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文档简介
1、国产C02试剂在ALCY0生化分析仪上的应用【关键词】血气分析【摘要】 目的为降低成本,探讨能否用国产 C02试剂(CO2L代替进口 C02试剂(C02在ALCYON-30生化分析仪上使用。方法北京中生C02试剂使用要求试剂与样品比例为 200: 1,而ALCYO生化分析仪对试剂与样品的 加量要求特殊,其比例为190: 1,按ALCYONE化分析仪所要求的比例将北京中 生CO2试剂应用在ALCYONE化分析仪上,与英国 RANDOX CO试剂在ALCYO生 化分析仪上的应用进行对比分析。 结果 中生CO2试剂低值、高值批内CV分别 为、(n=20),批间CV分别为、(n=20),线性范围050
2、mmol/L,与英国RANDOXO2 试剂相比,相关系数为,回归方程:丫=+。结论 评价试验表明,北京中生 CO2 试剂可以代替英国RANDOX CO试剂按ALCYO生化分析仪所要求的比例使用。【关键词】 试剂,诊断;血气分析机体在代谢过程中可产生大量酸性物质或摄入外源性的碱性物质和酸性物 质,通常情况下不会引起过酸或过碱而使生理环境改变,这是因为机体有一系列的调节系统,主要通过缓冲系统或称缓冲对(即由一种弱酸及其弱酸盐成对组成)、 呼吸系统及肾脏的调节功能来调节,以维持体内的酸碱平衡状态。机体缓冲系统 对酸碱平衡的调节很快,它可和体内产生的或外源性的酸碱发生反应,产生弱酸和弱酸盐,使体液中的
3、酸碱度不会有太大的变化。在机体缓冲对中最重要的是碳 酸盐缓冲对,可看作缓冲对中的“主力”。因为它的含量多,离合快,易于调节, HCO3与H? HCO3勺比例对血液酸碱度起重要作用,HCO3与H? HCO3S血浆中的 浓度比是20: 1,任何原因引起HCO3或H? HCO浓度改变使该比例变化都将伴随 pH值的变化1。二氧化碳结合力(CO2CP是指血浆HCO3中所含的CO2量, 测定这项指标可直接了解体内酸碱平衡失常的情况, 对酸碱平衡类型的诊断也有 很大帮助。传统的CO2CW定方法为酸碱滴定法。目前生化分析仪所用 CO2试剂一般 采用的是终点测定法,其原理是:磷酸烯醇式丙酮酸+HCO3-PEP草
4、酰乙酸+H2PO4-草酰乙酰+NADH+H+MDH果酸+NAD2。进口试剂一般价格较高,为 降低成本,我院对北京中生公司的 CO2试剂在ALCYO全自动化分析仪上的应用 情况做了一些使用探讨,现报告如下。1 材料与方法仪器 ALCYON-30C全自动生化分析仪(法国)。试剂及质控物(1)北京中生公司CO2式剂(以下缩写为CO2L,分为R1、R2两种试剂,R1为粉剂,R2为缓冲液,使用时取10ml缓冲液复溶即可。(2)(英国)RANDOCO2式剂(以下缩写为CO2,也分为R1、R2两种试剂,用 法与中生CO2式剂相同。(3)北京中生公司二氧化碳标准液,CO2浓度为25mmol/L。(4)美国Da
5、de公司质控血清(以下缩写为 QG1,批号:EX1-109, CO2浓度靶 值为/L,范围1927mmol/L。(5)美国Dade公司质控血清(以下缩写为 QG2, 批号:EX2-209, CO2浓度靶值为/L ,范围/L。方法根据试剂说明书,在ALCYON-30生化分析仪上编制应用CO2试剂的试验程序如下。TYPE(反应类型):End Pt,Unit(单位):mmol/L, First reaqent Volume (试剂量):380 卩 l,Sample Volume (样品量):卩 l,Primary Wavelength:340nm,Reaction delay (延长时间):5min
6、。其余略。2 结果批内试验 取CO2L式剂用自编试验程序在 ALCYON-30生化分析仪上 分别对高低两种不同浓度的标本连续测定 CO2 20次,同时用英国进口 CO2式剂 和原程序进行同样测定,结果见表1。表1 CO2L和CO2式剂测定CO2浓度的批内重复性(略)批间试验按与批内试验基本相同的方法,在 4天内分别对两份不同浓度的标本各测定20次,结果见表2。表2 CO2L和CO2式剂测定CO2浓度的批间重复性(略)线性试验 用CO2浓度分别为/L的系列标准液按试验程序与CO2式剂反应后,在ALCYON-30生化分析仪上测得其吸光度分别为,坐标纸上作图可见线性范围为 050mmol/L,与说明
7、书1提供的相同。准确度试验在ALCYONE化分析仪上用CO2L CO2式剂及各自的试验程序分别对两份不同浓度的质控血清进行测定,结果见表3。表3 CO2L和CO2测定不同浓度质控血清的结果(略)对比试验 用CO21和CO2式剂分别对20例任意标本进行测定,对两者 的结果进行统计,相关系数为,回归方程:丫=+。从上述中得出:批内CV分别为、(n=20),批间CV分别为、(n=20),线性范围050mmol/L,与英国RANDOCO2 试剂相比,相关系数为,回归方程:丫=+。评价试验3表明北京中生CO2式剂 可以代替英国RANDOX CO试剂按ALCYONE化分析仪所要求的比例使用。3 讨论CO2
8、吉合力测定方法以往都以酸碱滴定法手工操作为主,该方法酸碱试剂 标定较麻烦,手工操作影响因素多,而且灵敏度低,准确度及精密度差,已逐渐被淘汰4。现采用终点法上机测定,操作简单、省时、省力,不仅提高了灵敏 度,同时也提高了准确度和精密度,但英国 RANDOX CO试剂价格较贵,且由于 供贷渠道等原因难以保证及时供应。北京中生C02式剂分粉剂和缓冲液可保存至 出厂规定的保质期,使用时只需复溶即可,但混合后保存时间不长,为避免浪费, 可将当天余下试剂放入冰箱冰冻层保存,第二天放于37 C水溶箱中溶解便可照常使用,复溶时,不要来回振摇试剂,以免引起过量的 CO2吸收。另外,不要将 试剂长时间暴露于空气中
9、,贮存时一定将盖拧紧,否则试剂失效可影响试验结果的准确性。ALCYON-30全自动生化分析仪的试剂量只允许在 180380卩I间选择,标 本量只允许在230卩I间递增,这就给北京中生CO2试剂在ALCYON-30生化分 析仪上的试验程序编制带来麻烦,因为该试剂要求试剂与标本的比例为 200 : 1, 为解决这个矛盾,本试验采取试剂与标本的比例为190: 1,完全可保证反应所需的主要成分。按该比例所做评价试验中,重复性试验表明,ALCYON-30全自动生化分析仪所测得的CO2结果符合要求,从批内到批间,其 CV值逐渐增大, 符合实际情况。准确性试验表明,测定值与靶值非常接近,测得结果准确可靠。 线性试验表明,该试验在050mmol/L线性良好,超出此范围可将标本稀释后再 行测定。评价试验结果的精密度、准确性都能满足临床要求,这表明北京中生 CO2试剂可按试剂与样本的比例为190 :1应用于试验程序对试剂与标本有特殊 加量要求的ALCYON-30全自动生化分析仪上。此外,北京中生 CO2试剂还具有 价格比较便宜、供应方便等优点,值得临床推广。【参考文献】1 周新,涂植光.临床生物化学和生物化学检验.北
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