新坐标考案广东专用高考生物二轮复习专题讲练突破专题8第1讲现代生物科技专题名师优质课件

1、第第 1 1 讲讲 基因工程和细胞工程基因工程和细胞工程 维度维度1 善归纳善归纳基础回扣基础回扣 基因工程的工具及操作过程基因工程的工具及操作过程 1过程用到的操作工具有过程用到的操作工具有 限制酶、限制酶、 DNA 连接酶连接酶 及载体及载体(质粒质粒) 。 2过程常用方法为过程常用方法为 显微注射法显微注射法 ；过程所用方法；过程所用方法 为为 农杆菌转化法农杆菌转化法 ，还可使用基因枪法或，还可使用基因枪法或 花粉管通道法花粉管通道法 ；若；若2处理法处理法 Ca过程的受体细胞为大肠杆菌，则使用方法为过程的受体细胞为大肠杆菌，则使用方法为 。 启动子启动子 3重组重组Ti质粒中除含有抗

2、虫基因外，还应含有质粒中除含有抗虫基因外，还应含有 、 终止子终止子 及标记基因。及标记基因。 4(1)基因工程操作的核心步骤如图示中的基因工程操作的核心步骤如图示中的 构建构建 基因表达载体基因表达载体 。(填名称填名称) (2)过程是由人的垂体细胞转录出的生长激素过程是由人的垂体细胞转录出的生长激素mRNA获得的，这种获取目的基因的方法称为获得的，这种获取目的基因的方法称为 逆转录法逆转录法 ，由此，由此构建的基因组文库叫构建的基因组文库叫 cDNA 文库文库 。 (3)要检测抗虫基因是否翻译成抗虫毒蛋白，应从抗虫要检测抗虫基因是否翻译成抗虫毒蛋白，应从抗虫抗原抗原抗体杂交抗体杂交棉中提取

3、蛋白质，并用棉中提取蛋白质，并用 方法进行检测。方法进行检测。 5prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体，控基因来制备单克隆抗体，最可能是浆细胞，最可能是浆细胞，代表的代表的细胞具有细胞具有 无限增殖无限增殖 和和 产生特异性抗体产生特异性抗体 的特点。的特点。 6上述图示过程中涉及的生物工程技术有：基因工上述图示过程中涉及的生物工程技术有：基因工动物细胞培养动物细胞培养程、程、 、 单克隆抗体制备单克隆抗体制备 等。等。 细胞工程细胞工程 1.如图为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：如图为细胞融合的简略过程，请据图回

4、答相关问题： (1)若若a、b分别表示白菜和甘蓝两种植物的体细胞，则分别表示白菜和甘蓝两种植物的体细胞，则采用化学法形成采用化学法形成c时，一般是用时，一般是用 聚乙二醇聚乙二醇 作为诱导剂。由作为诱导剂。由d形成杂种植株的过程所依据的原理是形成杂种植株的过程所依据的原理是 植物细胞的全能性植物细胞的全能性 ，技术手段为技术手段为 植物组织培养技术植物组织培养技术 ，此技术包括两个关键，此技术包括两个关键环节：环节： 脱分化脱分化 和和 再分化再分化 。从本质上讲，。从本质上讲，“白菜白菜 甘甘蓝蓝”杂种植株具有的性状是杂种植株具有的性状是 基因选择性表达基因选择性表达 的结果。的结果。 (2

5、)若若a、b分别为骨髓瘤细胞和分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，假设仅考虑淋巴细胞，假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成某两个细胞的融合，则可形成 三三 种类型的细胞种类型的细胞d，因此需，因此需用特定的选择培养基筛选出用特定的选择培养基筛选出 杂交瘤杂交瘤 细胞用于培养。选出此细胞用于培养。选出此克隆化克隆化 培养和培养和 抗体抗体细胞后，还需进行细胞后，还需进行 检测，经多次筛检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 2下图为转基因奶牛的克隆过程，据图回答问题。下图为转基因奶牛的克隆过程，据图回答问题。 (1)过程需用过程需用 胰蛋

6、白酶胰蛋白酶 处理，培养基的营养成分处理，培养基的营养成分动物血清动物血清中，除正常的有机和无机营养外，还需加入中，除正常的有机和无机营养外，还需加入 等一些天然成分。对重组细胞进行原代培养时，会出现等一些天然成分。对重组细胞进行原代培养时，会出现 贴壁生长贴壁生长 和和 接触抑制接触抑制 等特点。等特点。 的卵母细胞，且去掉的卵母细胞，且去掉(2)过程应采集处于过程应采集处于 M 中期中期 其细胞核，去核的目的是：其细胞核，去核的目的是： 使克隆牛的遗传物质几乎使克隆牛的遗传物质几乎 全部来自供体细胞全部来自供体细胞 。 (3)过程不同于植物细胞融合的诱导方法为过程不同于植物细胞融合的诱导方

7、法为 生物法生物法 ，用用 灭活的病毒灭活的病毒 促使动物细胞发生融合。促使动物细胞发生融合。 基因工程基因工程(4)上述图示用到的生物工程技术有：上述图示用到的生物工程技术有： 、 动物细胞培养动物细胞培养 动物细胞融合动物细胞融合 体细胞核移植体细胞核移植 、 以及以及 等。等。 维度维度2 巧深化巧深化疑难突破疑难突破 基因工程的原理及蛋白质工程基因工程的原理及蛋白质工程 ? 1.基因工程的原理 ? (1)基本工具 ? 限制性核酸内切酶：识别双链 DNA的某种特定核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，形成平末端或黏性末端。 ? DNA连接酶：连接两个DNA片

8、段的磷酸二酯键，不能连接RNA。包括Ecoli DNA连接酶和T4DNA连接酶。 ? 载体：将目的基因导入受体细胞，能在宿主细胞中稳定存在并复制，具有遗传标记基因，具有多个限制性核酸内切酶的酶切位点。常使用的载体有质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒等。 ?(2)基本操作步骤 目的基因的获取 a从基因文库中获取。 b利用PCR技术扩增。 c用化学方法直接人工合成。 基因表达载体的构建 a基因表达载体的组成：目的基因启动子终止子标记基因。 b基因表达载体的构建方法基因表达载体的构建方法 ? 将目的基因导入受体细胞 植物细胞 常用方法 受体细胞 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 受精卵、体细胞 动

9、物细胞 显微注射技术 受精卵 微生物细胞 感受态细胞法(用Ca2处理) 原核细胞 ? 目的基因的检测与鉴定 ? a目的基因插入检测：DNA分子杂交技术。 ? b目的基因转录检测：(核酸)分子杂交技术。 ? c目的基因翻译检测：抗原抗体杂交技术。 ? d个体生物学水平检测：根据目的基因表达出的性状判断。 【特别提醒】【特别提醒】 限制酶切割时的注意事项限制酶切割时的注意事项 图图1 图图2 ? 1注意切割的序列是否会连接成环：切割图 1中的目的基因时，最好不要只用BamH，因为只用BamH切割时，目的基因的两端具有相同的黏性末端，易自行连接成环，因此最好同时用BamH和Hind切割。 ? 2限制

10、酶的切割序列具有包含关系：图 2中BamH和Mbo识别的碱基序列和酶切位点分别是G GATCC、 GATC，这两个限制酶都可切割同一碱基序列GGATCC。 ? 3切割时注意是否破坏所有抗性基因，导致缺乏标记基因。 2蛋白质工程蛋白质工程 (1)基本原理基本原理 (2)基本步骤基本步骤 ? 1(2013原创题)转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中Pst、Sma、EcoR、Apa等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下图表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。 ? 下列有关叙述错误的是( ) ? A获得含抗病基因的重组质粒不可用Pst、Apa限制酶切割质粒 ? B由、阶段均涉及细

11、胞的分裂与分化 ? C阶段可用不添加植物激素的培养基 ? D上述培育过程涉及的生物技术有基因工程、植物组织培养等 ? 【解析】 由为脱分化过程，细胞只分裂形成愈伤组织；而由为再分化过程，细胞既分裂又分化。 ? 【答案】 B ? 1.动物细胞培养与植物组织培养的比较 项目 动物细胞培养 植物组织培养 无菌、离体 无菌、用胰蛋白酶处理，培养前使组织细胞相互分散处理 开 葡萄糖、氨基酸、无机培养基矿质元素、蔗糖、维生素、盐、促生长因子、微成分 植物激素等 量元素、动物血清等 培养基状态 液体培养基 固体培养基 过程过程 离体的植物器官、离体的植物器官、动物胚胎或出生不久的动物胚胎或出生不久的脱分化脱

12、分化幼龄动物的器官或组织幼龄动物的器官或组织组织或细胞组织或细胞原代培养原代培养传代培养传代培养再分化再分化愈伤组织愈伤组织细胞群细胞群 根、芽根、芽植物体植物体 不能不能 能能 能否培养能否培养成个体成个体 大规模生产有重要价值大规模生产有重要价值快速繁殖、培育无快速繁殖、培育无的生物制品，如病毒疫的生物制品，如病毒疫病毒植株；生产药病毒植株；生产药应用举例应用举例 苗、干扰素、单克隆抗苗、干扰素、单克隆抗物；制造人工种物；制造人工种体等；皮肤移植；检测体等；皮肤移植；检测子；培育转基因作子；培育转基因作有毒物质的毒性等有毒物质的毒性等 物等物等 2.动物细胞克隆技术动物细胞克隆技术 (1)

13、动物体细胞核移植动物体细胞核移植 (2)单克隆抗体单克隆抗体 制备过程制备过程 特点：化学性质单一、特异性强、灵敏度高、可大特点：化学性质单一、特异性强、灵敏度高、可大量生产。量生产。 2(2013天津高考天津高考)花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体

14、融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。 ? 据图回答下列问题： ? (1)过程所需的酶是_ 。 ? (2)过程后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的_存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 ? (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_。原生质体经过_再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织。 ? (4)若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和 _植株的根尖，通过_、_、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。 (5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组采用特异性引物对花

15、椰菜和黑芥基因组DNA进行进行PCR扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的扩增，得到两亲本的差异性条带，可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株14进行进行PCR扩扩增的结果。据图判断，再生植株增的结果。据图判断，再生植株14中一定是杂种植株的中一定是杂种植株的有有 _。 (6)对杂种植株进行对杂种植株进行_接种实验，可筛选出具有接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株。高抗性的杂种植株。 ? 【解析】 熟记植物体细胞杂交过程，准确解读信息是解题关键。 ? (1)获取植物细胞的原生质体可用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞。 (2)根据题干信息可

16、知，供体使用的是叶肉细胞的原生质体，所以可将融合的细胞是否含叶绿体作为初步筛选杂种细胞的标志。(3)原生质体因没有了细胞壁，在低渗溶液中容易吸水涨破，加入甘露醇可保持一定的渗透压，以保持原生质体的完整性。原生质体需再生出细胞壁形成杂种细胞，然后经分裂、脱分化形成愈伤组织。 ? (4)若要分析再生植株的染色体变异类型，需对再生植株细胞和双亲细胞的染色体形态与数目进行比较。植物细胞有丝分裂装片的制作包括解离、漂洗、染色和制片四个步骤。(5)由图可知，植株1、2、4的条带中除了具有花椰菜的DNA片段外，还有来自黑芥的DNA片段，所以是杂种植株。(6)对杂种植株进行病原体(黑腐病菌)接种实验，若不患黑

17、腐病，即为高抗性杂种植株。 ? 【答案】 (1)纤维素酶和果胶酶 (2)叶绿体 (3)保持原生质体完整性 细胞壁 (4)双亲(或花椰菜和黑芥) 解离 漂洗 (5)1、2、4 (6)黑腐病菌 ? 1(2012广东高考T2B)培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是细胞杂交。() ? 【提示】 主要技术应为组织培养。 ? 2(2013大纲全国卷T2B)动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶。() ? 【提示】 植物组织培养不需要用胰蛋白酶。 ? 3(2013重庆高考T2A改编)与鼠骨髓瘤细胞融合的淋巴细胞是效应T细胞。() ? 【提示】 用到的淋巴细胞应为已免疫的B细胞。 ? 4(2013重庆高

18、考T5C)愈伤组织培养后的出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控。() ? 5(2013江苏高考T22B)用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列。() ? 【典例】 图1表示含有目的基因D的DNA片段长度(bp即碱基对)和部分碱基序列，图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列。现有Msp、BamH、Mbo、Sma4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C CGG、G GATCC、GATC、CCCGGG。请回答下列问题： 图图1 图图2 (1)图图1的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由的一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由_连接。连接。 (2)若用限制酶若

19、用限制酶Sma完全切割图完全切割图1中中DNA片段，产生的片段，产生的末端是末端是_末端，其产物长度为末端，其产物长度为_ _。 ? (3)若图1中虚线方框内的碱基对被TA碱基对替换，那么基因D就突变为基因d。从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶Sma完全切割，产物中共有_种不同长度的DNA片段。 ? (4)若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后进行连接，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是_。在导入重组质粒后，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加_的培养基进行培养。经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，? 【研析】 信息1：“目的基因D

20、中的一条脱氧核苷酸链中相邻的两碱基”的连接得出通过“脱氧核糖磷酸脱氧核糖”连接 信息2：由题干一个关键词“bp即碱基对”及Sma的切割位点得出切割产物为三部分，796bp的长度向左向右分别减小了3个bp 审 信息3：由“目的基因D中CG被TA替换”推出题 Sma无法再对突变后形成的d基因中突变碱基序列进行切割，即d基因只能被切割为两部分(1327bp和661 bp) 信息4：图2标记基因A(抗生素A抗性基因)、B(抗生素B抗性基因)的碱基序列分别为GGATCC、GATC推测只有BamH切割才能保留其中的一个标记基因和目的基因不受破坏 破 题 答 题 思考1：基因的平面结构中单、双链中相邻碱基间

21、的不同连接方式 思考2：限制酶在基因工程操作中的作用特点 思考3：表达载体构建时必须注意的问题 思考4：基因工程操作的基本流程 (1)忽略设问中单链脱氧核苷酸链上碱基的连接而误答为双链上两碱基间的连接“氢键” (2)忽视题干一个关键信息“DNA片段长度(bp即碱基对)” ，造成对限制酶切割后的碱基序列长度无法计算 (3)标记基因的碱基序列特点决定了对表达载体进行切割时的酶只有BamH (4)目的基因与载体连接时一定要注意彼此末端的方向性，否则连接后会造成“基因沉默”即基因不能正常表达 ? 【答案】 (1)脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖 (2)平 537bp、790bp、661 bp ? (3)4 (

22、4)BamH 抗生素B 同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接 ? 【方法总结】 ? 1熟练掌握基因工程的原理(工具及操作程序)是解答有关基因工程题目的关键。限制酶和DNA连接酶作用部位为磷酸二酯键，基本程序可概括为“切、接、增、转、检”。 ? 2依据受体细胞的种类确定导入方法；依据对表达产物的要求确定不同水平上的检测方法。 常考实验 单克隆抗体的制备 ? 【考情分析】 近几年来，对于动物细胞工程中的单克隆抗体制备的考查尤为突出。多考查制备的原理、过程及材料的选择、二次筛选的目的等知识。试题多以选择题形式呈现，如2013重庆高考T2；2012上海高考T13；2011江苏高考

23、T14等。 【真题例证】【真题例证】 (2013重庆高考重庆高考)如图是单克隆抗体制备流程的简明示如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是意图。下列有关叙述，正确的是( ) ?A是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群 【解析】 明确单克隆抗体制备过程的几个关键环节是准确解答本题的关键。是从小鼠脾脏中获得的能产生抗体的浆细胞，A项错误；中应该使用能促进细胞融合的促融剂，如聚乙二醇等，B项错误；同时具有从脾脏中分离出的浆细胞和骨髓瘤细胞的特性，C项错

24、误；是经筛选培养获得的能产生特异性抗体的细胞群，D项正确。 ? 【答案】 D ? 单克隆抗体制备中的两次筛选 ? 1.第一次筛选是将未融合的B淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合的细胞、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B瘤融合的细胞。 ? 2.第二次筛选是将能产生特定抗体的B瘤融合的细胞通过细胞培养、用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内获取的免疫过的B淋巴细胞有很多种，形成的杂交瘤细胞就有很多种，所以需筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 基因工程基因工程 考点频度 3年18考 考查特点 10选择题8非选择题 (双选双选)(2013江苏高考江苏高考)小鼠杂交瘤细胞表达的小鼠杂交瘤细胞表达

25、的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因(目的基因目的基因)后再重后再重组表达。下列相关叙述正确的是组表达。下列相关叙述正确的是( ) A设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序设计扩增目的基因的引物时不必考虑表达载体的序列列 B用用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列列 ? CPCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶 ? D一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞 ? 【解析】 设计引物

26、时应当考虑需扩增的目的基因与载体两端的序列进行互补配对， A项错误；利用PCR技术扩增目的基因只需要知道基因两端的序列，据此设计合适的引物即可，不必知道基因的全部序列，B项正确；PCR体系中应该用耐高温的DNA聚合酶，而不是从受体细胞中提取的普通DNA聚合酶，C项错误；需根据目的基因的编码产物的特性来选择合适的受体细胞，如果是分泌蛋白，则最好选用真核细胞作为受体细胞，D项正确。 ? 【答案】 BD 角度 基因工程的原理 备考看点 基因工程与其他技术手段的综合 1.加强有关基因工程中生物学术语的识记如“显微注射”、“基因表达载体的构建”、“抗原抗体杂交”等。2.目的基因的获取方法及导入方法。3.

27、基因工程的“四步曲” 1.转基因技术与植物细胞工程的综合。2.转基因动物与体细胞核移植结合克隆动物。3.转基因生物的安全性。4.基因工程与胚胎工程中胚胎移植的综合考查 ? 1(2013惠州二模)下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。 ? 资料1 巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达【5AOX1和3AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子】。 ? 资料2 巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与

28、目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。 ? (1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上_、_限制酶识别序列，这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。 ? (2)酶切获取HBsAg基因后，需用_将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取_。 ? (3)步骤3中应选用限制酶_来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。 ? (4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，

29、可以用_方法进行检测。 ? (5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入_以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。 ? (6)与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行_并分泌到细胞外，便于提取。 ? 【解析】 (1)重组质粒上的目的基因若要表达，需要目的基因的首尾含有启动子和终止子。而SnaB 、Avr 识别的序列在启动子与终止子之间，只要在目的基因两侧的A和B位置分别接上这两种序列，并用SnaB 、Avr 这两种限制酶对质粒和目的基因同时进行切割，便会各自出现相同的黏性末端，便于重组与表达，同时可防止自身环化

30、，因此在HBsAg基因两侧的A和B位置应接上SnaB 和Avr 限制酶的识别序列。 ? (2)用DNA连接酶可将切割后的 HBsAg基因和pPIC9K质粒连接成重组质粒； 将重组质粒导入大肠杆菌体内，目的是利用大肠杆菌的无性繁殖，短时间内获取大量的重组质粒。 (3)重组DNA的两侧分别是启动子和终止子，除 Bgl 外，其他限制酶均会破坏含有启动子、终止子的目的基因。(4)可用DNA分子杂交技术检测巴斯德毕赤酵母菌内是否导入了目的基因。 (5)资料1显示，甲醇为该酵母菌的唯一碳源，同时可诱导 HBsAg基因表达。(6)酵母菌为真核生物，细胞内具有能对分泌蛋白进行加工的内质网和高尔基体等细胞器，细菌等原核生物不具有内质网和高尔基体等细胞器。 ? 【答案】 (1)SnaB Avr (2)DNA连接酶 大量重组质粒 (3)Bgl (4)DNA分子杂交 (5)甲醇 (6)加工(修饰) 细胞工程细胞工程 考点频度 3年12考 考查特点 9选择题3非选择题 (2012广东高考广东高考)培育草莓脱毒苗所采用的主要培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是技术是( ) A组织培养组