饲料常规化验

1、第一章化验的基本要求1、严格执行化验标准。2、了解有关原理，熟悉操作的主要步骤及注意事项。并预先写好化 验报告中的部分内容，以便化验时及时、准确地进行记录。3 .使用不熟悉其性能的仪器和试剂之前，应查阅有关书籍或请教他人。4 .保持化验室清洁、安静，使实验台整洁，仪器安置有序，注意节约 和安全。5 .化验完毕后，实事求是地填写化验结果和数据。6 .积极开发新的检测项目和方法。7 .开发新的检测指标进行回收率的验证（样品和标准品对检）。8 .定期开展误差较正（送检、互检、自检）。9 .使用国际制单位。一、制样1、样品的缩分：用四分法分样将样品倒在清洁、光滑、平坦的光面硬纸上，充分混匀后将样品摊成

2、 平面正方形，然后以两条对角线为界分成四个三角形， 取出其中两个 对角三角形的样品，剩下的样品再按上述方法反复缩分， 直到最后剩 下的两个对顶三角形的样品接近 200g为止。2、样品的处理将粒状样品用样品粉碎机粉碎，装入样品袋等待检验。3、样品标不'标示样品名称、日期、批号、采样人等。 二、留样：制备好样品需留样，以备复验。留样时间一般原料30-60天，半成品或成品30天，化验指标有疑问留样60天。饲料水分的测定1、适用范围标准适用于测定配合饲料和单一饲料中水分含量，但用作饲料的奶制品、动物和植物油脂、矿物质除外。2、原理 试样在105 ±寞烘箱内，在大气压下烘干，直至恒 重

3、、散失的重量为水分。4、测定步骤洁净称样皿，在105士左烘箱中烘1h取出，在干燥器中冷却30min,称准至0.0002g,再烘干30min,同样冷却，称重，直至两次重量之差小于0.0005g为恒重(W1)。用已恒重称样皿称取样品2-5g (W),在105±2C烘箱中烘3h (以温度到达105c开始计时)，取出，盖好称样皿盖，在干燥器中冷却30min称重。再同样烘干1h,冷却，称重，直至两次称重之重量差小于0.002g(W2)。5、测定结果的计算5.1计算公式(W1+W)-W2100(水分)=式中W烘干前样品重g;W2105 c烘干后试样及称样皿重g;W1已恒重白称样皿重 g。5.2重

4、复性每个试样，应取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果， 两个平行样测定值相差不得超过 0.2%,否则重做。6、注意事项：6.1 饲料及水份大于4%的原料称样为2g左右，水份小于4%的 样品称样为3-5g。6.2 油脂水份测定可烘2小时取出称量计算水份。6.3 磷酸氢钙采用50c烘干4小时来测定水份含量。6.4 高水份玉米等要少粉碎样快称样减少制样水份遗失。粗灰分的测定1、本标准适用于配合饲料、浓缩料及各种单一饲料中粗灰分的测定。2、原理试料在550 c灼烧后所得残渣，用质量百分率来表示。残渣中主要是氧化物、盐类等矿物质，也包括混入饲料中 的砂石、土等，故称粗灰分。4、试样的选取和制备取具

5、有代表性试样，粉碎至 40目。用四分法缩减至200g,装于密封容器。防止试样的成分变 化或变质。5、测定步骤将干净塔埸放入高温炉，在 550± 20c下灼烧30min。取出，在空气中冷却约1min,放入干燥器冷却30min,称其质量。再重 复灼烧、冷却、称量，直至两次质量之差小于0.0005g为恒质。在已恒质的塔埸中称取2-5g试料（灰分质量0.05g以上），准确至0.0002g,在电炉上小心炭化，在炭化过程中，应将试料在较低温度状态加热灼烧至无烟，尔后升温灼烧至样品无炭粒，再放入高温炉，于550± 20Z下灼烧3h。取出，在空气中冷却1min,放入干燥器中冷却30min,

6、称取质量。再同样灼烧1h,冷却，称量，直至两次质量之差小于 0.001g为恒质。6、分析结果计算计算公式：M2-M0粗灰分（尸X100M1式中：M0为恒重空地垠1质量，g;M1 为灼烧前试样的质量，g;M2为炭化后塔埸加灰分的质量，g。7、允许差粗灰分含量在5%以上，允许相对偏差为1%;粗灰分含量在5%以下，允许相对偏差为5%。8、注意事项：灰份小于3%的试样称样量为4-5g。饲料钙测定方法：EDTA§量法1、适用范围本标准适用于配合饲料和单一饲料。2、原理钙离子在碱性溶液中与 EDTA吉合，置换出钙黄指示剂，而使溶液变成纯蓝色以指示终点。用三乙醇胺和盐酸羟胺消除其他金属离子的干扰，

7、可快速测定钙含量。4、试剂4.1 20%fi氧化钠溶液。4.2 三乙醇胺：分析纯，1:1水溶液。乙二胺：分析纯，1:1水 溶液4.3 钙黄指示剂0.1g钙黄绿素与0.1g甲基麝香草酚兰与0.03g 百里香酚醐与5g氯化钾混匀研细，贮存于磨口瓶中。4.4 盐酸羟胺：分析纯。4.5 孔雀石绿指示剂（指示剂级）：0.1g溶于100ml蒸储水中。4.6 5、测定步骤5.1 测定粗灰分后继续进行，在盛有灰塔埸中加入盐酸溶液（1:3）10ml和浓硝酸数滴，放在电炉上小心煮沸。数分钟将此溶 液转入100ml容量瓶，冷却至室温，用蒸储水稀释至刻度，摇 匀，为试样分解液。5.2 试样的测试准确移取试样5ml,于

8、三角瓶中加蒸储水50ml,10g/l淀粉溶液10ml,三乙醇胺2ml ,乙二胺1ml,每加完一种实际要充分摇 匀，然后加1滴孔雀石绿指示剂，摇匀，滴加氢氧化钠（20%）容 液10ml,加入0.1g盐酸羟胺摇匀溶解后，再加钙黄指示剂少 许显墨绿色，在黑暗背景下，立即用乙二胺四乙酸二钠标准溶液滴定至溶液绿色荧光消失，呈紫红色为滴定终点，同时做试剂空白试验。6、测定结果计算计算公式：（V-V0） XNX V1Ca%=W1X V2X 1000式中：W1样重，g;V滴定试样耗标准液体积，ml; V0空白消耗 EDTAW体积，ml;N EDTA标准液浓度，mol/L ; V1试样分解液总体积，ml ; V

9、2移取试样分解液的体积，ml;7.注意事项：钙粉、石膏粉、贝壳粉可适用此法，称样 0.7-0.8g在100 ml烧杯中，力口 15ml盐酸加热溶解，定容200ml,以下方法相同。饲料中水溶性氯化物的测定方法1、适用范围本标准适用于各种配合饲料，浓缩饲料和单一i饲料。2、方法原理用硝酸银标准溶液滴定，生成沉淀，从而根据消耗硝酸银的体积求出氯化物的含量。稍过量的硝酸银与铭酸根离子生成砖红色沉淀，指示终点到来。3、试剂3.1 硝酸银标准溶液：0.01mol/l,1.75g硝酸银溶于1000亳升水3.2 10%铭酸钾指示剂。4、测定步骤称5克样品，准确到0.001g,准确加蒸储水200ml,搅拌15m

10、in,静置15min,准确移取上层清液10ml于三角瓶中，加蒸储水50ml, 10%铭酸钾指示剂1ml,用0.01M硝酸银标准溶液滴定至呈现砖红色，且1min不褪色为终点。5、测定结果的计算计算公式：(V-V0) x CX 58.45NaCl%=*100W1W1:样重C:滴定溶液标准浓度V:消耗滴定溶液体积V0:空白体积58.45 NaCl的摩尔质量6、注意事项：6.1 本法可测食盐含量，但称样量应不大于0.2g,定容要准确。6.2 本法测定结果稍偏高，终点颜色不能太深。6.3 浓缩料、鱼粉称样2-3g,全价料称样为5g左右。饲料总磷量测定方法方法一：饲料及一般饲料原料中总磷的测定1、适用范围

11、本标准适用于配合饲料和单一饲料。不适用于测定磷酸盐中磷的测定。2、原理先将试样中有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，用钮铝 酸镂处理，生成黄色（NH4）3PO4 NH4VO316M0O3,在波长420nm下进行比色测定。此法测得为总含磷量，包括动物难以吸收的植酸磷。4、试剂4.1 盐酸：化学纯，1:.3水溶液。4.2 硝酸：化学纯。4.3 钮铝酸镂显色试剂。称取偏钮酸镂，分析纯1.25g,加200 ml水，加硝酸250ml。另取铝酸镂25g,加蒸储水400ml溶解之，在冷却条件下将此溶 液倒入上溶液，且加蒸储水调成1000ml。避光保存，如生成沉 淀则不能使用。4.4 磷标准液将磷酸二氢钾

12、在105c干燥1h,在干燥器中冷却后称取 0.2195g 溶解于水，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml,用水稀释径直至刻度，摇匀，即为50mg/ml的磷标准液。5、磷标准曲线绘制与计算公式的推断：5.1 分别移取0, 1.0, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0毫升标准溶液于6 个已加10亳升钮铝酸镂显色剂的50毫升容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，过10分钟在420nm波长下测定吸光度y（以0 亳升标准为空白）。以磷含量为横坐标，吸光值为纵坐标，列出直线回归方程（y= a+bx）。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标。与前面测钙相同，在100ml容量瓶中移取2ml （如果是鱼粉就取

13、 2ml或磷含量高的也取2ml）到50ml容量瓶中加10ml钮J目酸镂, 用蒸储水稀释至刻度，在420nm波长下用分光光度计测定。用磷 计算公式来计算。7、重复性每个试样称取两个平行样进行测定，以其计算均值为结果。含磷量在0.5%以上，允许相对偏差为3%,含磷量在0.5%以下， 允许相对偏差为10%。8、注意事项：8.1 天冷时显色反应慢，应放置温度较高的地方20分钟再比色。8.2 标准曲线随温度有变化，长期使用应作校正。8.3 本法不适于氢钙的磷测定，因浓度大，曲线易变形。8.4 控制吸样体积，使吸光度在 0.3-1.00之间。方法二：磷酸氢钙枸溶磷的测定1、方法原理：用中性柠檬酸镂溶液溶解

14、和提取试样中的磷酸根，然后用重量法测定磷含量，当含量大于9%时，确认该样 品是磷酸氢钙。试齐I：2.1 柠檬酸（GB/T9855）2.2 无水乙醇（GB/T678）2.3 氨水（GB/T631）2.4 唾铝磷酮沉淀剂：溶解70g铝酸钠于150ml水中；溶解60g柠檬酸于150ml （水和85mlHNO3的混合液中）。搅拌下将溶液1倒入2中。加5ml唾咻于35mlHNO3和100ml水的混合液中。将溶液4加入溶液3中摇匀放置24小时过滤、滤液中加入280ml丙酮，用水稀释至1000ml。2.5 、中性柠檬酸镂溶液：溶解 74克柠檬酸于300ml水中，加 69ml氨水，在酸度计上用氨水调节 PH值

15、为7.0,用比重计测 其比重为1.09 （20C）（将溶液贮存于密闭瓶中，如长期使用， 用前校正其酸度）。3、分析步骤：准确称取0.8克试样，置于200ml容量瓶中，加入100ml中性 柠檬酸镂溶液，将容量瓶置于 65c ±1C的水浴中保温1小时, 不时打开瓶塞，每隔15分钟摇动一次，每次摇动约 30秒，取 出容量瓶，冷却至室温，加水至刻度，摇匀，干过滤，弃去初 滤液30ml,吸取20ml滤液于250ml烧杯中，加水70ml,力口 1+1硝酸10ml,在水浴中加热至75 C （烧杯中温度），加唾铝 磷酮沉淀剂50ml,保温30秒后，取出冷却至室温，用180c 恒重的4号莎芯塔埸过滤，

16、并洗涤至中性，将塔埸放在180c烘箱中灼烧45分钟取出冷却后称重。4、计算:W1 - W2X 14枸溶磷P (%)=m式中：W2为沉淀加塔埸重W1为土甘垠j重m样为样品质量附：磷酸氢钙全磷的测定准确称取0.8克试样，置于200ml容量瓶中，加入10m11+1的 盐酸溶液，将样品溶解，用水定容至刻度，摇匀，干过滤，弃 去初滤液30ml,吸取20ml滤液于250ml烧杯中，加水70ml, 力口 1+1硝酸10ml,在水浴中加热至75C,加唾铝磷酮沉淀剂 50ml,保温30秒后，取出冷却至室温，用180c恒重的4号莎 芯塔埸过滤，并洗涤至中性，将塔埸放在180 c烘箱中灼烧45分钟取出冷却后称重。计

17、算：W1 - W2枸溶磷P (%) =X 14m式中：W2为沉淀加塔埸重W1为土甘垠j重m样为样品质量6、注意事项：75 C6.1 沉淀时水浴与烧杯内有温差应量烧杯中水的温度为6.2 四号沙芯塔埸不能用浓碱洗涤，否则孔径变大漏沉淀。6.3 干过滤即用干燥的玻璃器皿、滤纸，弃去最开始过滤那部分初液。饲料中粗蛋白测定方法1、适用范围：本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和单一饲料。2、原理：凯氏法测定试样中的含氮量，即在催化剂作用下， 用硫酸破坏有机物，使含氮物转化成硫酸镂。加入强碱进行蒸 储使氨逸出，用硼酸吸收后，再用酸滴定，测出氮含量，将结 果乘以换算系数6.25,计算出粗蛋白含量。3、试剂3.1

18、硫酸：化学纯含量为98%3.2 催化剂：无水硫酸铜，无水硫酸钾。3.3 氢氧化钠：氢氧化钠溶液20%。3.4 硼酸溶液2%。3.5 混合指示剂：甲基红，0.1%乙醇溶液，澳甲酚绿，0.5%乙 醇溶液，两种溶液等体积混合，在阴凉处保存期为三个月。3.6 盐酸标准溶液：0.1mol/L5、测定步骤5.1 试样的消煮称取试样0.2g,准确至0.0002g,放入消化管中，加催化剂6.4g。 与试样混合均匀，再加浓硫酸10ml,放在电炉上消煮。待样品 焦化，泡沫消失，再加强火力(360-410C),直至溶液澄清后，再加热30min5.2 常量直接蒸储法将试样消煮液冷却，加蒸储水少许，将蒸储装置的冷凝管末

19、端 浸入盛有35ml硼酸吸收液和加2滴混合指示剂的锥形瓶中， 然后小心的向消化管中加入氢氧化钠溶液至溶液颜色变为黑 色，再稍加少许，使溶液混匀后，加热蒸储，直至溜出液体体 积约150ml,降下锥形瓶，使冷凝管末端离开液面，继续蒸储 1-2min,并用水冲洗末端，洗液均需流入锥形瓶内，然后停止 蒸储。5.3 滴定吸收氨后的吸收液立即用盐酸标准溶液滴定，溶液颜色由蓝绿 色变为灰红色为终点。5.4 定结果计算0.014 x (V-V0) x NX 6.25CP%=X 100W1W1:样重N:标准盐酸浓度V:耗用标准盐酸体积V0:空白盐酸体积0.014:氮的毫克当量数6.25:氮换算成蛋白质的平均分数

20、8、注意事项：8.1消煮完全标志，消煮液冷却后上层无色透明，无黄色，要确保消化完全。饲料粗脂肪测定方法1、适用范围本标准适用于各种单一、混合、配合饲料和预混料。2、原理索氏（soxhlet）脂肪提取器中用乙醍提取试样，称提取物的重量，除脂肪外还有有机酸、磷脂、脂溶性维生素叶绿素等，因而测定结果称粗脂肪或乙醍提取物。3、试剂无水乙醍（分析纯）。4、仪器设备4.1 实验室用样品粉碎机。4.2 分样筛：孔径0.45mm。4.3 分析天平：感量：0.0001g。4.4 电热恒温水浴锅：室温-100C。4.5 恒温烘箱：50-200 Co4.6 索氏脂肪提取器（带球形冷凝管）：250或150mm,预先将

21、抽 提瓶烘干至恒重。4.7 滤纸或滤纸筒：中速，脱脂。4.8 干燥器：用氯化钙（干燥吸）或变色硅胶为干燥剂。5、测定步骤索氏提取器应干燥无水。我们一般在测定水分后的干试样。折算成风干样重，再进行测粗脂肪。称取试样1g左右（视油脂含量多少称样），用滤纸包好，然后放入抽提管中，在抽提管中加无水乙醍，使乙醍可全部浸泡滤纸包为准。55c热，使乙醍回流，控制乙醍回流次数为每小时约10次，共回流约50次（含油高的试样约70次）或检查抽提管流出的乙醍挥发后不留下油迹为抽提终点（一般抽提时间为 5-7小时）。取出抽提瓶，洗净外壁，放到105士左烘箱中烘中2h,然后冷却称重。6.1计算公式 W1-W2粗脂肪（A

22、） = X100%M式中W1 为浸提前烘干后的重量。W2浸提后烘干后的重量。M称取试样重量。7、注意事项：7.1 称样时保证试样中油脂含量在 0.2-2.0g。7.2 控制回流速度，过快时可降低水浴温度。7.3 回流后收集的乙醍不可做试剂用于其他试验，只能做下次抽提脂肪使用。月尿酶活性的检测方法一：豆粕蛋白质溶解度（PS）勺测定1、原理采用0.2%白KOH（NaOH格液测定蛋白质溶解度的方法来评价大豆 粕的质量。生豆粕的PS可达100%,但随热处理时间的延长，PS值降低， 即使严重的过热处理，PS值也未接近零，试验表明，CP溶解 度更加确切地反映了过熟处理的大豆粕，大豆饼与鸡的生产性 能的关系

23、，当PS>85%1为过生,PS<70%1则为过熟。2、操作步骤2.1 称取1.5g大豆粕于250ml烧杯中，准确加入 75ml的0.2%NaOH溶液在磁力搅拌器上搅拌 20min。2.2 搅拌后，将50ml流体转移至离心管中，以2700r/min的转 速离心10min。2.3 吸取上层清液15ml用凯氏烧瓶消化定氮，其量相当于 0.3g 的原样品。2.4 豆粕的蛋白质溶解度计算0.3g样品中的粗蛋白质含量PS=x 100原样品的粗蛋白质含量3、注意事项：3.1 PS测定时粉碎粒度（全部过60目）及搅拌时间，搅拌速 度影响较大。3.2 由于PS测定不定因素较多，误差较大，作为豆粕生熟

24、度 判定参考不准，建议用PH值上升法测尿酶活性判断豆粕生熟 程度。方法二：月尿酶活性（PH上升法）的测定方法1、试剂1.1 0.05M磷酸缓冲溶液：取 KH2PO4（J I、S K、9007 特级）3.403g 溶于 100ml 去离子水 中，再取 K2HPO4（J I、S、K、9017特级）4.355g 溶于 100ml 去 离子水中，这两种溶液的混合液共配制 1000ml调节PH至7.0 显中性。该缓冲溶液有效期90天。1.2 尿素缓冲液：取尿素（J、I、S K、特级）15g溶于500ml磷酸缓冲液，为了防 止霉菌发酵，加入5ml甲苯的防腐剂。该溶液 PH值调至7.0。 2、操作方法2.1

25、 将试样粉碎至0.35mm（42筛目）以下；2.2 分别准确称取0.4g（ 土 0.00地）羊于两支试管中分别加入 20ml 磷酸缓冲液（空白）和20ml尿素缓冲溶液放入30c恒温水浴中。2.3 每5分钟摇一次。2.4 待反应30min之后，在5min内测定PH值。3、计算尿素酶活化度=试样PH测定值空白的PH值其值不得超过0.3单位，最小值为0.02。4、注意事项：4.1 尿素缓冲液放置时间过长要校正其 PH值，否则PH值变化 大。4.2 两缓冲液一定要一次配制后分出部分加尿素做为尿素缓冲液。方法三：大豆粕月尿酶定性测定（红点法）1、目的在有指示剂苯酚红存在的条件下，豆饼中的尿素酶活性可按尿

26、素转变为氨的方法定性测定。2、设备和试剂2.1稀硫酸（H2SO4）0.2N或更稀些，带滴管。2.2尿素-酚红试剂：（本试剂的有效期仅约90天）将1.2克酚红溶解于30毫升0.2N的NaOH中；用蒸储水稀释至约300毫升；加入90克尿素并溶解之；用蒸储水稀释至2升；加入14毫升1.0N的H2SO4域70毫升0.2N的H2SO4）;用蒸储水稀释至最后体积3升；溶液应具明亮的琥珀色。3、测定步骤3.1 在一个150毫升的烧杯中倒入少量试剂，注意溶液必须呈 明亮的琥珀色。若溶液已转变为深桔红色，滴入稀硫酸溶液并 搅拌之，直至溶液再度呈琥珀色。3.2 量一汤匙粉碎很好的豆饼粉，放置于卜S替氏（petri

27、）培养皿。3.3 在样品上加入两汤匙试剂，轻轻搅拌，将样品平铺于培养皿中 若仍有干豆饼斑点，则再加入试剂，直至将豆饼浸湿。3.4 放置5分钟后观察：1 .没有任何红点出现：再任其放置 25分钟，若仍无红点出现，说明豆饼过熟。2 .有少数红点：少量尿素酶活性，豆饼可用。3 .放置25分钟，豆饼表面约有25%为红点复盖，少量尿素酶活 性，豆饼可用。4 .放置25分钟；豆饼表面约有50%为红点复盖：尿酶活性强。5.豆饼表面的75-100%为红点复盖：尿素酶活性很高，不应接 受这种原料，因为豆饼过生。油脂酸价的测定1、适用范围此法适用于不干性油、半干性油和干性油的测定。2、原理：油脂中的游离脂肪酸与氢

28、氧化钾产生中和反应，从 氢氧化钾标准溶液消耗量，可计算出游离脂肪酸的量。3、试剂3.1 中性醇醍混合溶液或中性苯醇混合液，取化学纯95%乙醇和乙醍按2:1体积混合或苯和95%乙醇等体积混合，然后加入1%酚醐乙醇指示剂数滴，用0.1mol/L氢氧化钾溶液中和至微红 色。3.2 1%酚醐指示剂溶液。3.3 0.1mol/L氢氧化钾标准溶液。4、操作步骤准确称取试样5.00-10.0g置于烧杯中，加入混合溶液50ml,振摇溶解(必要时可温热)，加入3-4滴1%酚醐乙醇指示剂，用0.1mol/L氢氧化钾标准溶液滴定至淡红色且在1min内不褪色为终点。5、计算CWX 56.11酸价(mgkoH/g)M式中：C氢氧化钾标准溶液的浓度，mol/L ;V-消耗氢氧化钾标准溶液的体积，ml;56.11与1ml0.1mol/L氢氧化钾标准溶液相当的