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文档简介
1、传统ES打靶基因敲除/敲入小鼠技术 技术原理 传统的基因打靶技术制备基因敲除( KO ) /敲入(KI)基因打靶技术是建立在 DNA 同 源重组与胚胎干细胞等技术基础上的分子生物学技术。 同源重组是指当外源 DNA 片段与宿主基因组片段同源性高时,同源 DNA 区部分可与 宿主 DNA 的相应片段发生交换(即同源重组) 。 基因打靶就是通过同源重组技术将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位 点,以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的。 基因打靶技术目前已被广泛认为是一种 理想的特定修饰与改造生物体遗传物质的最佳方法。 尤其是条件性和诱导性基因打靶系统的 建立,使得对基因在时间和空间上
2、的靶位修饰更加明确、效果更加精确可靠, 该技术的发 展已经为发育生物学、 分子遗传学、免疫学及医学等学科提供了一个全新的、 强有力的研究 和治疗手段,并已显示出巨大的应用前景及商业价值。 Homologous Recombination 服务流程和周期 小鼠品系 ES 细胞品系:129 (agouti )、C57BL/6N (black)、C57BL/6 (agouti )。 基因打靶常用小鼠模型 (1) 完全性基因敲除小鼠( Conventional Knockout , KO) 完全性基因敲除是通过基因敲除技术, 把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的 外显子或者功能区域敲除掉,获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。 应用:用于研究某个基因(要求该基因非胚胎致死性基因)对全身生理病理的功能。VbettM Translar vector mlo mbfyortoc
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