第六章黄酮类化合物

1、O12345678ABOO12345678OO12345678一、定义二、生理活性与分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性 色原酮 2-苯基色原酮 （2-phenylchromone)OO12345678OO12345678O12345678C6 - C3 - C6AB黄酮类化合物泛指两个芳环（黄酮类化合物泛指两个芳环（A环与环与B环）经中央三碳原子环）经中央三碳原子（三碳链）相联结而成的一系列化合物，其基本结构为：（三碳链）相联结而成的一系列化合物，其基本结构为： 一、定义二、生理活性与分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、

2、生物活性生理活性生理活性: : 黄酮类化合物分布广，生理活性也较广黄酮类化合物分布广，生理活性也较广 1、降低血管脆性及异常通透性，及扩冠作用（、降低血管脆性及异常通透性，及扩冠作用（Vit p样作样作用）用） 芦丁、橙皮苷、芦丁、橙皮苷、d儿茶素、香叶木苷等（毛细血管儿茶素、香叶木苷等（毛细血管性出血的止血药及治疗高血压、动脉硬化的辅助药）。性出血的止血药及治疗高血压、动脉硬化的辅助药）。 2、抗肝脏毒作用、抗肝脏毒作用 水飞蓟素，异水飞蓟素、及次异水飞蓟水飞蓟素，异水飞蓟素、及次异水飞蓟素等（治疗急、慢性肝炎，肝硬化及多种中毒性肝损伤等素等（治疗急、慢性肝炎，肝硬化及多种中毒性肝损伤等疾病

3、辅助药）疾病辅助药） 3、抗炎作用、抗炎作用 芦丁、羟基芦丁、二氢槲皮素及橙皮苷甲芦丁、羟基芦丁、二氢槲皮素及橙皮苷甲基查儿酮（对佐剂引发的大鼠关节炎有明显抑制作用）。基查儿酮（对佐剂引发的大鼠关节炎有明显抑制作用）。4、雌性激素样作用、雌性激素样作用 染料木素、金雀花异黄素、大豆素等。染料木素、金雀花异黄素、大豆素等。有人认为其与己烯雌酚结构相似，故活性相似。有人认为其与己烯雌酚结构相似，故活性相似。 OMeOOOHOH金雀花异黄素金雀花异黄素OHOH己烯雌酚己烯雌酚 5、抗菌抗病毒作用、抗菌抗病毒作用 黄芩苷，木犀草素，山奈酚等有抗菌或黄芩苷，木犀草素，山奈酚等有抗菌或抗病毒作用。抗病毒作

4、用。6、泻下作用、泻下作用 营实苷营实苷A7、解痉作用、解痉作用 异甘草素，大豆素等（有类似罂粟碱样的解除异甘草素，大豆素等（有类似罂粟碱样的解除平滑肌痉挛的作用，治疗缓解高血压患者的头痛症状）。平滑肌痉挛的作用，治疗缓解高血压患者的头痛症状）。另外还有止咳平喘等作用（杜鹃素）。另外还有止咳平喘等作用（杜鹃素）。结构分类结构分类 根据黄酮类化合物根据黄酮类化合物A环和环和B环间三碳链的结构状态（氧化环间三碳链的结构状态（氧化程度、是否成环），程度、是否成环），B环连接的位置等特点，可将主要的天环连接的位置等特点，可将主要的天然黄酮类化合物分为然黄酮类化合物分为14大类。大类。 1、黄酮类（、黄

5、酮类（flavone） 黄芩苷OOOOHOHOOHOHOHCOOH黄酮(2苯基色原酮)OO1234567823456芹菜素 OOHOOHOHOOOHOHOHOH木犀草素2、黄酮醇（、黄酮醇（flavonol） OOOH3黄酮醇（C3连羟基）OOOHOHOHOH山萘酚OOOHOHOROHOH槲皮素 R=H芦丁 Rrha1 6glcOOOHOHOHOHOHOH杨梅素 3、二氢黄酮（、二氢黄酮（flavanone） 二氢黄酮（C2，C3氢化） OO23甘草素 R=H甘草苷 R=glcOOOROH橙皮素 R=H橙皮苷 R=芸香糖基OOROOHOHOMe4、二氢黄酮醇（、二氢黄酮醇（flavanonol

6、） 二氢黄酮醇（C2，C3氢化C3连羟基）OOOH23二氢槲皮素OOOHOHOHOHOH二氢桑色素OOOHOHOHOHOH水飞蓟素（保肝）OOOHOHOHOOCH2OHOHOMe5、异黄酮（、异黄酮（isoflavone） 异黄酮（B环连C3）OO23大豆素 R1=R2=R3=H 大豆苷 R1=R3=H R2=glc葛根素 R2=R3=H R1=glc 解痉大豆素7，4二葡萄糖苷 R1= H R2=R3= glc葛根素木糖苷 R1= glc R2=xyl R3= H OOR2OOR3R16、二氢异黄酮（、二氢异黄酮（isoflavanone） 鱼藤酮（杀绦虫，毒鱼）鱼藤酮（杀绦虫，毒鱼） OO

7、OOOMeOMeHH 二氢异黄酮二氢异黄酮（C2 , ,C3氢化）氢化） OO32紫檀素紫檀素 R=CH3三叶豆紫檀苷三叶豆紫檀苷 R=glc 抗癌活性抗癌活性高丽槐素高丽槐素 R=H（若（若4羰基与羰基与C6未成环，其编号不变）未成环，其编号不变）OOROOO1782345691010111167、查耳酮（、查耳酮（Chalcone） 2羟基查耳酮（黄色） （吡喃酮开环）OHOOOHOH2345623456+_二氢黄酮（无色）此类可看成此类可看成 缩缩 的产物，同时在酸碱性条件下可与二氢黄酮相互转化，的产物，同时在酸碱性条件下可与二氢黄酮相互转化，因二氢黄酮的因二氢黄酮的 结构可看作是一个插

8、烯内酯，可在碱性条件下开环，酸性环合。结构可看作是一个插烯内酯，可在碱性条件下开环，酸性环合。OOCHOCOCH3红花苷OHOOHOHOHOglc异甘草素OHOOHOH8、二氢查耳酮（、二氢查耳酮（dihydrochalcone） 梨根苷OHOHOOHOglc 二氢查耳酮（吡喃酮开环，-碳氢化）OHO9、花色素类（、花色素类（anthocyanidin） 芍药花苷元芍药花苷元 R1=OCH3 R2=H矢车菊苷元矢车菊苷元 R1= OH R2=H飞燕草苷元飞燕草苷元 R1= R2=OH天竺葵苷元天竺葵苷元 R1= R2=HOOHOHOHOHRR+12O+4 花色素类花色素类（4酮基还原，以烊盐存

9、在）酮基还原，以烊盐存在）10、黄烷、黄烷3，4二醇类（二醇类（flavan3，4diol） 无色矢车菊素无色矢车菊素 R1= OH R2=H无色飞燕草素无色飞燕草素 R1= R2=OH无色天竺葵素无色天竺葵素 R1= R2=H OROHOHOHOHOHR12黄烷黄烷3，4二醇类二醇类（C3 , ,C4氢化并连羟基）氢化并连羟基） OOHOH4311、黄烷、黄烷3醇类（醇类（flavan3ol） 花生仁儿茶素花生仁儿茶素OOHOHOHOHOMe黄烷黄烷3醇类（儿茶素类）醇类（儿茶素类）（C2，C3氢化且氢化且C3连羟基）连羟基） OOH32（+）儿茶素OOHOHOHOHOHHH（）表儿茶素OO

10、HHOHOHOHHOH12、橙酮类（噢、橙酮类（噢 类）（类）（aurone） 金鱼草素OOCHOHOHOHOH橙酮类（噢 类）（C环为含氧五元环）OOCH12345672345613、双苯吡喃酮类（、双苯吡喃酮类（xanthone） 双苯吡喃酮类双苯吡喃酮类（苯环与色原酮（苯环与色原酮2，3位骈合）位骈合） OO12345678龙胆龙胆 酮酮 OOOHOHOMe14、其他类、其他类 （1）双黄酮类）双黄酮类 由二分子黄酮相联而成，由于联结方式不同又可分由二分子黄酮相联而成，由于联结方式不同又可分3种小类：种小类： 3，8双芹菜素型双芹菜素型 OOOOOHOHOHOHMeOOMe38银杏素（解

11、痉，降压，扩冠）银杏素（解痉，降压，扩冠） 8，8双芹菜素型：双芹菜素型： OOOOOHOHOHOHOHOH88柏黄素柏黄素 双苯醚型双苯醚型 OOOHOHOOOOHOHOH46扁柏黄酮扁柏黄酮 （2）高异黄酮（）高异黄酮（homoisoflavone） OO（3）黄酮木脂素类（）黄酮木脂素类（flavonolignan） 基本结构中有苯丙素的碳架基本结构中有苯丙素的碳架 OOOOOHOHOHCH2OHOHOMe水飞蓟素水飞蓟素 （4）生物碱型黄酮）生物碱型黄酮 基本结构中有含氮的部分基本结构中有含氮的部分 OHROHROO12R1 R2 榕 碱 NCH3异 榕 碱 HHNCH3H3一、定义二

12、、生理活性与分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应多为晶性固体，少数为无定形粉末。颜色：与分子中是否存在交叉共轭体系及助色 团的类型、数目及取代位置有关。黄酮、黄酮醇及其苷类灰黄黄色查耳酮黄橙黄色二氢黄酮及醇、异黄酮不显色或微黄色（一）性状（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应 C3-OH在紫外光下有强烈荧光 （亮黄色或亮绿色） C3-OH成苷后荧光减弱。（一）性状（一）性状（二）荧光（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应黄酮苷元黄酮苷元难溶或不溶于H2O 易溶MeOH

13、、EtOH等溶剂 易溶稀碱液 黄酮、黄酮醇、查耳酮难溶于水 （均属平面型分子） 二氢黄酮及醇对水有一定溶解度 （属非平面分子）黄酮苷黄酮苷易溶于水、MeOH、EtOH等溶剂 （苷元引入OH多，则水中溶解度大）（一）性状（一）性状（二）荧光（二）荧光（三）溶解性（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应 分子中多Ar-OH显酸性 （可溶于碱性水溶液、吡啶等溶剂中） 由于Ar-OH数目、位置不同，酸性强弱也不同以黄酮为例： 7,4-二二-OH 7或或4-OH 一般酚一般酚-OH 5-OH（溶NaHCO3）（溶Na2CO3）（溶不同浓度NaOH） （可用于提取、分离及鉴定工作） -吡喃酮环上1-位氧原子

14、，因有未共用电子对显微弱的碱性可与强无机酸（H2SO4、HCl）等生成盐。OOOOHClClHOH2+-所生成的盐极不稳定，加水后即可分解。黄酮盐（呈不同的 可用于鉴别）C-H2SO4颜色（一）性状（一）性状（二）荧光（二）荧光（三）溶解性（三）溶解性（四）酸碱性（四）酸碱性（五）显色反应 1.还原反应 （1）盐酸-镁粉反应（HCl-Mg） （2）四氢硼钠反应（NaBH4） 2.金属盐类试剂的络合反应 （1）铝盐 （4）镁盐 （2）铅盐 （5）氯化锶 （3）锆盐 （6）三氯化铁反应 3.硼酸显色反应 4.碱性试剂显色反应 (1)盐酸镁粉反应（HCl-Mg）样品/EtOHMg粉HCl+浓橙红紫紫

15、红红色色查耳酮橙酮儿茶素大多数异黄酮HCl-Mg不不 呈呈 色色 （2）四氢硼钠反应（NaBH4）二氢黄酮类NaBH4+红红紫紫色色其它黄酮类不呈色 1.还原反应 （1）盐酸-镁粉反应（HCl-Mg） （2）四氢硼钠反应（NaBH4） 2.金属盐类试剂的络合反应金属盐类试剂的络合反应 （1）铝盐）铝盐 （4）镁盐）镁盐 （2）铅盐）铅盐 （5）氯化锶）氯化锶 （3）锆盐）锆盐 （6）三氯化铁反应）三氯化铁反应 3.硼酸显色反应硼酸显色反应 4.碱性试剂显色反应碱性试剂显色反应OOOHOOOHOHOH 常可与金属类试剂反应，生成有色络合物。 （1）铝盐 （2）铅盐 （3）锆盐 （4）镁盐 （5）

16、氯化锶 （6）三氯化铁反应黄酮类化合物分子结构中多具有下列结构：（1）铝盐）铝盐 可用于定性及定量分析样品+ 1% AlCl3或硝酸铝络络合合物物（黄色） max 415 nm（有荧光）样品+ 1 1% % 醋醋酸酸铅铅或碱式醋酸铅/H2O黄黄 红红色色 沉沉淀淀（2）铅盐）铅盐（3）锆盐）锆盐 （ZrOCl2）OOOHOOOHOOOZrClOOOZrClOOH2OOH22%ZrOCl2黄绿色络合物2%枸橼酸2%枸橼酸不变不变褪色褪色（4）镁盐）镁盐样样品品+醋醋酸酸镁镁/ /M Me eO OH H呈呈色色可可滴滴在在滤滤纸纸上上二二氢氢黄黄酮酮二二氢氢黄黄酮酮醇醇天天蓝蓝色色荧荧光光C5-

17、OH色色泽泽更更明明显显黄黄酮酮黄黄酮酮醇醇异异黄黄酮酮黄 橙黄 褐褐色色（5）氯化锶（）氯化锶（SrCl2）（邻二酚羟基）+SrC12氨性 MeOH 液绿绿色色样品棕棕色色黑黑色色沉沉淀淀样品+显显色色Ar-OHFeCl3H2O或醇液（6）三氯化铁反应）三氯化铁反应 1.还原反应 （1）盐酸-镁粉反应（HCl-Mg） （2）四氢硼钠反应（NaBH4） 2.金属盐类试剂的络合反应 （1）铝盐 （4）镁盐 （2）铅盐 （5）氯化锶 （3）锆盐 （6）三氯化铁反应 3.硼酸显色反应硼酸显色反应 4.碱性试剂显色反应碱性试剂显色反应OOOHOHO+硼 酸硼 酸H+亮黄色亮黄色 1.还原反应 （1）盐

18、酸-镁粉反应（HCl-Mg） （2）四氢硼钠反应（NaBH4） 2.金属盐类试剂的络合反应 （1）铝盐 （4）镁盐 （2）铅盐 （5）氯化锶 （3）锆盐 （6）三氯化铁反应 3.硼酸显色反应 4.碱性试剂显色反应碱性试剂显色反应OOOHOHOHOMeOHOOHOHOHOMeOH-H+橙皮素橙皮素开环橙皮橙皮（二氢黄酮）（二氢黄酮）查尔酮查尔酮OH-H+开环二二氢氢黄黄酮酮类类查查尔尔酮酮类类环环合合（ 橙橙 黄黄 色色 ）（一）性状（二）荧光（三）溶解性（四）酸碱性（五）显色反应一、定义二、分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性 根据化合物的性质，采取哪些

19、提取方法呢？ 化合物的极性？ 方法溶剂萃取 化合物的酸性？ 方法碱提酸沉 化合物的解离性？ 方法离子交换（一）提取 1.溶剂萃取法 2.碱提酸沉法 3.离子交换法 4.炭粉吸附法药 材 EtOH提取药 渣 乙醇液回收乙醇浸 膏回收液浸 膏加水水溶液分别用不同极性溶剂萃取石油醚、氯仿、石油醚 氯 仿 乙酸乙酯正丁醇水（极性小）（苷元等） （极性大的苷元）（黄酮苷类）（多糖、蛋白质等）（分步萃取）乙酸乙酯、正丁醇（一）提取 1.溶剂萃取法 2.碱提酸沉法 3.离子交换法 4.炭粉吸附法注意：加入的酸、碱度应尽可能低。例如：芦丁的提取样样品品OH-提提取取液液过过滤滤H+沉沉淀淀（黄黄酮酮类类）槐花

20、米H2O石灰乳调 pH = 89药渣滤液酸调pH = 34沉淀滤液（一）提取 1.溶剂萃取法 2.碱提酸沉法 3.离子交换法 4.炭粉吸附法注意：应用此法主要目的是除杂质。黄酮H2O洗除水溶性杂质液洗出黄酮类化合物水水甲醇甲醇（一）提取 1.溶剂萃取法 2.碱提酸沉法 3.离子交换法 4.炭粉吸附法主要适用于苷类成分的精制。药材甲醇提取物分次加入活性炭，搅拌，静置检查上清液有无黄酮反应，过滤滤液吸苷炭末依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脱沸甲醇沸水 7%酚/水 15%酚/醇浓缩，加乙醚乙醚（除酚）水（黄酮苷） （一）提取 1.溶剂萃取法 2.碱提酸沉法 3.离子交换法 4.炭粉吸附

21、法 （二）分离 根据化合物的性质，采取哪些分离方法呢？ 化合物的极性大小？ 方法吸附、分配色谱 化合物的酸性强弱？ 方法pH梯度萃取 化合物的分子大小？ 方法葡聚糖凝胶 分子中具有特殊结构？ （如：邻二酚羟基） 方法金属盐络合 （二）分离 1.柱色谱法 （硅胶、氧化铝、纤维粉、 聚酰胺、葡聚糖凝胶） 2.pH梯度萃取法 3.铅盐沉淀法 （1）硅胶柱色谱 出柱先后顺序： 若母核结构相同，而-OH取代数目不同，则-OH多的后出柱后出柱 易形成分子内氢键的-OH，其极性变小先出柱先出柱如：邻二-OH 间二-OH （Rf值） 一般出柱顺序：苷元苷元 单糖苷单糖苷 双糖苷双糖苷 多糖多糖苷苷（2）氧化铝

22、柱色谱 通常情况下，要求在分子的结构中 无酸性基团，或Ar-OH被甲基化。 （3）纤维粉柱色谱 其分离原理同纸层色谱。（4）聚酰胺柱色谱 聚酰胺（Polyamide）是由酰胺聚合而成的一类高分子物质。商品名绵纶、尼龙。 原理：氢键吸附学说 聚酰胺分子内有很多酰胺键，可与酚类、酸类、醌类、硝基化合物等形成氢键，因而对这些物质产生了吸附作用。聚酰胺吸附物质的原理如下图：NNOOHHNNOOHHOHOO固定相固定相移动相移动相 吸附强弱取决于 化合物与聚酰胺形成氢键的能力。 聚酰胺对化合物的吸附力在水中有下列规律： 形成氢键的基团越多，则吸附力越强；OHOHOHOHOHOH 易形成分子内氢键，则吸附

23、力减弱；OHOHOHOHOHOHCOOHOOHOH 芳香核、共轭双键多者吸附力大；OHOH 以上介绍了聚酰胺对化合物吸附力的影响因素。 即： 形成氢键的基团越多，则吸附力越强； （Ar-OH、-COOH、醌基、硝基等） 易形成分子内氢键，则吸附力减弱； （邻二-OH、3-OH 4-酮基、5-OH 4-酮基等） 芳香核、共轭双键多者吸附力大； 聚酰胺柱色谱在分离黄酮类化合物时 有下述规律： 不同类型黄酮化合物的出柱先后顺序： 异黄酮 二氢黄酮醇 黄酮 黄酮醇 OOOHOHOHOHOOOHOHOHOOOHOHOHOHOOOHOHOH 苷元相同，出柱先后顺序： 叁糖苷 双糖苷 单糖苷 苷元 查尔酮往

24、往比相应的黄酮类化合物难于洗脱 。OHOOHOHOHOOOHOHOH查尔酮黄酮 在聚酰胺柱上，常用的洗脱溶剂如下： 水 甲醇 丙酮 氢氧化钠/H2O 甲酰胺 二甲基甲酰胺 尿素/H2O （洗脱能力：弱 强） 聚酰胺色谱的应用： 黄酮类、酚类、生物碱类、萜类、甾体、糖类等黄酮类、酚类可逆聚酰胺吸附鞣质不可逆聚酰胺吸附利用此性质，可除提取物中的鞣质葡聚糖凝胶（Sephadex gel） 用于黄酮类化合物的分离，主要有两种型号： Sephadex-G型Sephadex LH-20型（羟丙基葡聚糖凝胶） 作用机理： 分离游离黄酮时吸附作用 （取决于游离Ar-OH的数目， Ar-OH少则先出柱） 分离黄

25、酮苷是分子筛起主导作用 （分子量大的先出柱） 常用洗脱溶剂： 碱性水溶液（0.1mol/L NH4OH） （含盐水溶液0.5mol/L NaCl等） 醇及含水醇 其它溶剂 含水丙酮、甲醇-氯仿等。 （二）分离 1.柱色谱法 （硅胶、氧化铝、纤维粉、 聚酰胺、葡聚糖凝胶） 2.pH梯度萃取法 3.铅盐沉淀法 适用于酸性强弱不同的黄酮苷元的分离。混合物/乙醚5%NaHCO35%NaHCO3萃取乙醚酸化回收EtoAcEtoAc5%NaCO35%NaCO3乙醚0.2%NaOH碱液乙醚（一般Ar-OH）4%NaOH碱液乙醚（ 3，5-OH）（无-OH）（4-7二-OH）（ 4、 7-OH） （二）分离

26、1.柱色谱法 （硅胶、氧化铝、纤维粉、 聚酰胺、葡聚糖凝胶） 2.pH梯度萃取法 3.铅盐沉淀法 根据分子中某些特定官能团进行分离。混合物/乙醇Pb(Ac)2水溶液乙醇沉淀 （具邻二-OH）H2S 过滤通入硫化铅沉淀或丙酮溶液溶30%乙醇中中性性滤液回收邻二酚羟基碱碱式式Pb(OH)Ac滤液沉淀脱铅（单-OH 或C3、C5-OH）（不具邻二-OH）（一）提取 1.溶剂萃取法 2.碱提酸沉法 3.离子交换法 4.炭粉吸附法（二）分离 1.柱色谱法 2.pH梯度萃取法 3.铅盐沉淀法一、纸色谱一、纸色谱( (纤维素色谱纤维素色谱) )PCPC是小量制备性分离黄酮类化合物较为有效的方法。一般用是小量

27、制备性分离黄酮类化合物较为有效的方法。一般用3030张（张（46cm46cm57cm57cm）的滤纸分离后即可得到足够水解和紫外分析）的滤纸分离后即可得到足够水解和紫外分析的样品。的样品。色谱法在黄酮类化合物鉴定中的 应用 色谱法检识除具与对照品或色谱法检识除具与对照品或“参照物参照物”进行可见光、荧进行可见光、荧光及显色剂显色斑点颜色及光及显色剂显色斑点颜色及Rf检识外，还具色谱分离排除检识外，还具色谱分离排除杂质干扰的性质，其检识的专属性和可靠性高于化学检识。杂质干扰的性质，其检识的专属性和可靠性高于化学检识。常用的色谱检识条件有：常用的色谱检识条件有： （1 1）展开方式及条件）展开方式

28、及条件 苷类苷类多用双向展开。多用双向展开。第一向第一向 醇性系统醇性系统: : BAW BAW（4: 1: 54: 1: 5），），TBATBA（3:1:13:1:1），水饱和），水饱和n-BuOHn-BuOH等。等。 展开前展开前, ,滤纸用下层水饱和，此向主要利用混合物的分配滤纸用下层水饱和，此向主要利用混合物的分配系数不同进行系数不同进行正相正相分配色谱分离（移动相醇的亲水性小于固分配色谱分离（移动相醇的亲水性小于固定相）。定相）。第二向第二向 水性系统（多为酸水或电解质）水性系统（多为酸水或电解质）2%2%6%HOAC6%HOAC，HOAC-HOAC-浓浓HCl-HHCl-H2 2O

29、 O（30:3:1030:3:10），），3%NaCl3%NaCl等。等。 主要以主要以反相分配反相分配色谱为主进行分离色谱为主进行分离( (利用化合物极性不利用化合物极性不同进行分离同进行分离) )。 苷元苷元 多用一向多用一向 醇性系统，醇性系统， 或用苯或用苯-HOAC-H-HOAC-H2 2O O（125:72:3125:72:3），）， CHCl CHCl3 3-HOAC-H-HOAC-H2 2O(13:6:1),O(13:6:1), 酚酚- -水（水（4:14:1）, , 或或HOACHOAC浓浓HCl-HHCl-H2 2O O（30:3:330:3:3）。）。 花色素及苷花色素及

30、苷 多用含多用含HClHCl或或HOACHOAC水性系统。水性系统。 （2 2）分子结构与）分子结构与RfRf值的关系值的关系 苷元苷元 水性系统（如水性系统（如3-5%HOAC3-5%HOAC） 平面型苷元（黄酮、黄酮醇、查二酮）亲水性差，共轭程度高，极性强，平面型苷元（黄酮、黄酮醇、查二酮）亲水性差，共轭程度高，极性强， Rf 0.Rf 单糖苷单糖苷 双糖苷双糖苷 三糖苷三糖苷水性展系统（反相分配，羟基越多，亲水性越强，越水性展系统（反相分配，羟基越多，亲水性越强，越 RfRf大）大）苷元苷元 单糖苷单糖苷 双糖苷双糖苷 三糖苷三糖苷 纤维素色谱纤维素色谱CCCC的色谱分离条件可参考的色谱

31、分离条件可参考PCPC的移、固相条件的移、固相条件（滤纸的本质是纤维素），但纤维素质地轻，装柱较难，因此（滤纸的本质是纤维素），但纤维素质地轻，装柱较难，因此用得不多。用得不多。二二. 薄层薄层色谱检识色谱检识 1. 聚酰胺聚酰胺TLC 现多用聚酰胺薄膜进行黄酮苷元及苷的检识，其（国产现多用聚酰胺薄膜进行黄酮苷元及苷的检识，其（国产的聚酰胺薄膜的聚酰胺薄膜 浙江浙江 黄岩）分离效果优于硅胶黄岩）分离效果优于硅胶TLC及及PC。其。其色谱规律与柱色谱相同。色谱规律与柱色谱相同。展开剂展开剂 游离黄酮游离黄酮 多用纯有机溶剂系统多用纯有机溶剂系统氯仿氯仿-甲醇（甲醇（94 6，96 4）氯仿氯仿-

32、甲醇甲醇-丁酮（丁酮（12 2 1）苯苯-甲醇甲醇-丁酮（丁酮（9064，8488，602020）等。）等。 黄酮苷黄酮苷 多用醇多用醇水系统水系统 甲醇甲醇-乙酸乙酸-水（水（90 5 5）甲醇甲醇-水（水（1 1）丙酮丙酮-水（水（1 1）异丙醇异丙醇-水（水（3 2）水水-乙醇乙醇-丁酮丁酮-乙酰丙酮（乙酰丙酮（65 15 15 5）水水-正丁醇正丁醇-丙酮丙酮-乙酸（乙酸（16221）等。）等。 2. 硅胶硅胶TLC 检识游离黄酮多于黄酮苷。检识游离黄酮多于黄酮苷。 展开剂展开剂 游离黄酮游离黄酮 甲苯甲苯-甲酸甲酯甲酸甲酯-甲酸（甲酸（5 4 1 ，甲苯与甲酸的比例可调整），甲苯与甲

33、酸的比例可调整）适合分离二氢黄酮适合分离二氢黄酮二氯甲烷二氯甲烷-乙酸乙酸-水（水（2 1 1）苯苯-乙酸（乙酸（45 4）苯苯-甲醇甲醇-乙酸（乙酸（3555）氯仿氯仿-甲醇（甲醇（8.5 1.5，7 0.5）苯苯-甲醇（甲醇（95 5）黄酮苷黄酮苷 黄酮黄酮O-苷、黄酮苷、黄酮C-苷和黄酮醇苷和黄酮醇O-苷类苷类 正丁醇正丁醇-乙酸乙酸-水（水（3 1 1）二氢黄酮二氢黄酮O-苷类苷类 氯仿氯仿-乙酸（乙酸（1004） 甲酸甲酸-乙酸乙酯乙酸乙酯-水（水（9 1 1）氯仿氯仿-乙酸乙酯乙酸乙酯-丙酮丙酮（5 1 4）氯仿氯仿-甲醇甲醇-水（水（654512）等）等苯苯-乙酸（乙酸（1004

34、） 氯仿氯仿-乙酸乙酸-甲醇（甲醇（9055）等。）等。 一、定义二、分类三、理化性质与颜色反应四、提取与分离五、黄酮类化合物波谱解析六、生物活性 在黄酮类化合物结构分析中的应用 主要有： （一）紫外光谱（UV） （二）核磁共振1H-NMR （三）核磁共振13C-NMR （四）质谱（MS）OOROOR 多数黄酮类化合物在紫外（UV）谱中主要由两个吸收带组成。 苯甲酰基系统 桂皮酰基系统 ( benzoyl) (cinnamoyl) Band II Band I 220280 nm 300400 nmOOR 黄酮类化合物结构中的交叉共轭交叉共轭体系苯甲酰基系统 桂皮酰基系统 ( benzoyl)

35、 (cinnamoyl) Band II Band I 220280 nm 300400 nm黄酮类化合物在MeOH溶液中的 黄酮及黄酮醇类 查尔酮及橙酮类 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类 黄酮及黄酮醇类木犀草素（黄酮类）槲皮素（黄酮醇类）OOR74引入供电基(-OH、-OMe)AB吸收带向红位移BandIBandII 黄酮类在MeOH中B环氧代对Band I的影响OOOHOHOHOOOHOHOHOHOOOHOHOHOHOH3,5,7-3,5,7,4-3,5,7,3,4-三羟基黄酮四羟基黄酮五羟基黄酮高良姜素山奈酚槲皮素359367370红移红移红移红移 黄酮类在MeOH中A环氧代对Band

36、II的影响OOOHOOOHOHOOOHOHOH7-5,7-5,6,7-羟基黄酮二羟基黄酮三羟基黄酮252262274红移红移 利用在MeOH中的UV区别黄酮和黄酮醇类Band I黄酮黄酮醇（3-O被取代）黄酮醇（3-OH游离）328357304350352385黄酮类化合物在MeOH溶液中的 黄酮及黄酮醇类 查尔酮及橙酮类 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类 查耳酮及橙酮类 波谱特征： 带 I 强主峰 带 II 弱次强峰2,3,4-三羟基查耳酮3,4-二羟基橙酮O2345623456查耳酮OCH27O1234561234567橙酮 查耳酮类 Band II220 270 nm Band I 340

37、 390 nm 有时分裂为 Ia（340390） Ib（300320） 环上引入氧取代基（同黄酮及黄酮醇类） 使带 I 红移（ 2-OH影响最大） 2-OH甲基化或苷化使带I紫移1520nm 橙酮类 常出现34个吸收峰 主峰（Band I） 370 430 nm天然来源的橙酮 388 413 nm黄酮类化合物在MeOH溶液中的 黄酮及黄酮醇类 查尔酮及橙酮类 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇7-羟基异黄酮4,7-二羟基二氢黄酮 OOOOOOOH 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇共同特点： 带 I 弱B环不能与吡喃酮环上羰基共轭 带 II 强主

38、峰根据主峰位置区别： 异黄酮245270 nm 二氢黄酮、二氢黄酮醇270295 nm黄酮类化合物在黄酮类化合物在MeOH溶液中的溶液中的 黄酮及黄酮醇类黄酮及黄酮醇类 查尔酮及橙酮类查尔酮及橙酮类 异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇类 加入诊断试剂后引起的位移及其在结构测定中的意义 下面以黄酮及黄酮醇为例进行说明 NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 AlCl3、AlCl3/HCl NaOMe NaOMe是个强碱，在一定程度上可使黄酮及黄酮醇上所有的Ar-OH解离。 因此，将使Band I及II向红位移。1. Band I + 4060 nm 强度不不降有4

39、-OH + 5060 nm 强度下下降无4-OH 有 3-OH NaOMe 2. 立即测试光谱 = 5分钟后测试光谱 （即：Band I 和 Band II 吸收谱不随时间延长而衰退） 说明无 3,4-二-OH结构（free） （即无对碱敏感的取代图式）3. 立即测试光谱 5分钟后测试光谱 说明可能存在 3,4-二-OH结构（free）注：对碱敏感的取代图式 3,4- 3,3,4- 5,6,7- 5,7,8- 3,4,5- 等 NaOMe NaOAc NaOAc/H3BO3 AlCl3、AlCl3/HCl NaOAc NaOAc的碱性 H-6109876543210 ppmTMSH-8 H-6

40、 1. A环质子 2. B环质子 3. C环质子 4. 糖端基碳上的质子 5. 乙酰氧基上的质子 6. 甲氧基上的质子2. B环质子 (1) 4-氧取代黄酮类化合物ORHHHH2356B7.10 8.106.50 7.10环对其的负屏蔽效应4-OR取代基的屏蔽作用COR2356BH-2 H-6H-3 H-5构成 AABB 系统AB偶合系统J 8.5 Hz2. B环质子 (2) 3,4-二氧取代黄酮及黄酮醇类化合物OROR2 5 6 H-5 H-2H-6dd,d,d,J = 8.5 Hz6.70 7.10J = 2.5 HzJ = 8.5 Hz7.20 7.90J = 2.5 Hz7.20 7.

41、90 依据H-2及H-6的化学位移，可以区别黄酮及黄酮醇的3,4-位上是 3-OH, 4-OMe 3-OMe, 4-OH。2. B环质子 (2) 3,4-二氧取代黄酮及黄酮醇类化合物二氧取代黄酮及黄酮醇类化合物 1. A环质子 2. B环质子 3. C环质子 4. 糖端基碳上的质子 5. 乙酰氧基上的质子 6. 甲氧基上的质子孤立芳氢的单峰信号易与之相混孤立芳氢的单峰信号易与之相混注意注意3. C环质子 (1) 黄酮类OOH6.30 ( s )3（尖锐的单峰）OOHORHROOROOHHROROOR3. C环质子 (2) 异黄酮类OOH7.60 7.80 (s)3. C环质子 (3) 二氢黄酮

42、及二氢黄酮醇OOHHHH3H-2H-3J =17.0 Hz偕偶Jtrans= 11.0 HzJcix= 5.0 HzH-3J =17.0 Hz偕偶Jtrans= 11.0 HzJcix= 5.0 Hzdd,5.202.80dd,OOOHHHH3H-2H-3Jtrans= 11.0 HzJtrans= 11.0 Hz d,4.904.30d,3. C环质子 (4) 查耳酮及橙酮类OHH2345623456OCHO1234561234567H H- -H H- -d, J = 17.0 Hz6.70 7.407.30 7.70苄氢S,6.50 6.70 1. A环质子 2. B环质子 3. C环质子 4. 糖端基碳上的质子 5. 乙酰氧基上的质子 6. 甲氧基上的质子黄酮苷类化合物上糖的质子信号（端基质子） 黄酮醇-3-O-葡萄