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文档简介
1、绞股蓝中有效成分皂苷的提取工艺研究综述一、 绞股蓝皂苷提取工艺1、水提醇沉法:将绞股蓝全草切细 ,用水浸过料面 ,加热提取三次 ,合并提取 液,浓缩成流浸膏状 , 冷却后加入乙醇 , 至不再产生沉淀 , 再经过滤、浓缩、干燥 , 即得到粗制绞股蓝总皂苷2、溶剂提取法:绞股蓝全草的粗粉 , 用乙醇或甲醇提取 ,回收乙醇或甲醇后 用正丁醇萃取 , 回收正丁醇干燥得总绞股蓝总皂苷3、丙酮沉淀法:绞股蓝粗粉用乙醇回流提取, 减压回收醇后的浓缩液 , 加入丙酮, 析出大量的沉淀 ,收集沉淀物再真空干燥即得绞股蓝总皂苷4、酶法:酶法提取工艺主要是利用纤维素酶及果胶酶对纤维素、果胶进行 处理,从而提高绞股蓝
2、皂苷的提取效率5、微波提取法:微波辅助提取技术是天然产物提取的一种非常有发展潜力 的新型技术, 该技术可以加快反应速度, 提高植物细胞破碎力度, 从而提高皂苷 提取率6、超声波辅助提取:超声波提取原理为 : 利用超声波破碎细胞 (空化) 和强化 传质( 机械作用 ) ,使溶剂分子渗透到组织细胞中,能更好地与溶质分子接触, 使细胞中可溶成分更好地释放出来。7、大孔树脂法:将绞股蓝加入水煮沸提取 ,过滤提取液 , 澄清, 将上清液通入 大孔树脂吸附 , 用碱液冲洗柱子至流出液无色 , 再用水冲洗至中性 , 然后用原料 5 一 8 倍量 50%一 95%乙醇洗脱 , 脱除乙醇经干燥处理得股蓝总皂苷制
3、品8超临界流体萃取技术(SFE):超临界流体是指超过临界温度(TC)和临界压 力(PC)的非凝缩性的高密度流体,可作为SF的物质很多,有二氧化碳、三氟甲烷 等, 其中二氧化碳临界温度接近室温且无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、 价廉!易制成高纯气体,因而成为应用最广泛的 SF。因为处于临界压力以上状态 时, 会使液体和气体成为均相的流体 , 它们的粘度 ! 密度和扩散系数均界于气体和 液体之间 , 尤其是与溶解能力有密切关系的密度比气体数大百倍。利用这些性质 进行超临界流体萃取(SFE)比溶液萃取的效果要优越,特别在中药材及其制剂中 更显示出独特的优点 , 主要是提取简便 ! 快速,可直接进
4、样分析 ;提取具有一定的 选择性 , 提取的杂质较少9、膜分离技术:膜分离技术是利用具有选择通透性的薄膜 , 以外界能量或化 学位差为推动力 , 对多组分体系进行分离、分级、提纯的一门技术。该技术具有 分离效率高、无相变、能耗低、操作简便、对环境无污染等优点。 二、绞股蓝提取工艺流程1. 水浴法提取精确称取 10.009 粉碎后的绞股蓝叶粉 , 置于三角烧瓶中 , 根据试验设计加入 一定量水 ,在恒温水浴锅中按照不同的提取时间和提取温度进行提取 , 将提取液 先用筛网粗滤 ,然后用定性滤纸过滤 , 再干燥至恒重后称重 ,得到水浸出物质量 , 计算提取得率"提取得率=提取物质量十10x
5、100%"2. 微波辅助提取精确称取 10.00g 摊过 20 目筛的绞股蓝叶粉 , 置于三角烧瓶中 , 根据试验设计 加入一定量水 , 按照不同的加热时间 ! 微波功率以及不同的料液比进行微波处理 , 然后进行水浴恒温提取 ,提取结束后 ,将提取液先用筛网粗滤 ,再用定性滤纸过滤 干燥至恒重后称重 ,得到水浸出物质量 ,计算提取得率(同上)3. 超声波提取精确称取10.00g过20目筛的绞股蓝叶粉,置于三角烧瓶中,根据试验设计加 入一定量水 , 按照不同的提取时间 ! 超声波功率 !提取温度以及不同的料液比进行 超声波提取 , 提取结束后 , 将提取液先用筛网粗滤 , 再用定性滤纸
6、过滤 , 干燥至恒 重后称重 , 得到水浸出物质量 , 计算提取得率 ( 同上)三含量测定的方法1.5%香草醛冰醋酸的配备称取1.66g香草醛置于100mL的三角瓶中,用移液管移取 30mL的冰醋酸, 摇匀并使香草醛完全溶于冰醋酸中,现配现用。2.标准曲线的绘制精密称取人参皂苷Rb1标准品4.5 mg,溶解于4.5 mL甲醇中,配成浓度为1.00 mg/mL的标准液,分别取 20卩L、40卩L、60卩L、80卩L、100卩1置于10 mL 试管中,于80 C条件下烘干甲醇后各加入新配制的5炳草醛-冰醋酸溶液0.2mL和高氯酸0.8mL,摇匀。置60 C恒温水浴中加热显色15 min,取出, 于
7、冰 水中冷却5 min后,各加冰醋酸5 mL,混匀,随行试剂做空白,于 550 nm处测 定其吸光值A,以人参皂苷Rb1的量(mg为横坐标和吸光值A为纵坐标,绘制 人参皂苷Rb1的标准曲线,得出回归方程。以吸收值 A与皂苷含量C (mg)做回 归处理,得标准曲线,结果求出回归方程为: A=3.8433C-0.0270 (R2= 0.9997)。 表明绞股蓝总皂甙含量在0.020到0.100mg之间有良好的线性关系。3.绞股蓝皂苷含量、提取率测定的计算公式绞股蓝总皂苷含量的测定:分别吸取 100卩L V1)样液置于10 mL试管 中,按上述方法测其吸光值A,代入回归方程可得所测样液绞股蓝总皂苷的
8、含量C。再根据下列公式计算各部分样液的绞股蓝总皂苷含量M1M1C V2V1其中:M总样液中绞股蓝总皂苷含量;C 100 uL羊液的皂苷含量,mgV1取样体积,卩L;V2样液总体积,mL。计算皂苷提取率n:M1 n100%M2式中:n皂苷提取率,%M2绞股蓝干叶质量,g四.提取工艺的比较通过常规水提法、纤维素酶提取法、超声波法,超声波协同酶法及醇提法等试验结果的比较可知:(1) 常规水提法因其对植物细胞的侵蚀力度不大,又因大多数绞股蓝皂苷 属于弱极性的物质,在水中溶解性较小,所以提取率较低。(2) 纤维素酶可以分解植物纤维组织,松化植物细胞组织,从而促进活性 物质的释放, 故而提取率比水提法高,
9、 但是因为提取条件较为温和, 提取率也较 有限。(3) 超声波对植物组织细胞有较强的破坏力,能使细胞壁产生破洞,促进 细胞内活性物质的溶出和扩散, 所以超声波协同酶法能显著提高绞股蓝总皂苷的 提取率,尤其是先酶法后超声的方法, 提取率更高。 而且提取过程中无需有机溶 剂的辅助,操作简便,生产成本低,适宜工业上的规模生产。(4) 由于大多数的绞股蓝皂苷属于弱极性的三萜类皂苷,根据相似相容原 理,绞股蓝皂苷易溶于乙醇、甲醇等有机溶剂,尤其是热乙醇。且75%乙醇提取绞股蓝皂苷,液料比为25 : 1,水浴温度为80 C,水浴反应时间120min为最 佳工艺条件。由于乙醇提取的绞股蓝皂苷得率高,且乙醇无
10、毒,无腐蚀性,且可 经过减压回收,可多次利用,因此适宜作为工业上绞股蓝总皂苷的提取溶剂。参考文献1. 史琳,赵红,张璐雅,等.绞股蓝药理作用的研究进展J.药物评价研究,2011,34(2):125-129.2. 陈武,邹盛勤,吴晓春,等.绞股蓝无糖口含片的制备工艺研究J.食品科学,2008,29(3):245-248.3. 张晓喻,黎艳,雍彬等.复方绞股蓝皂甙改善小鼠学习记忆的研究J.食品科 学,2007,28(3):330-333.4. 周建华,张兴亚.绞股蓝开发研究新进展及应用J.食品科技,2010,35(2):74-77.5. 王睿.绞股蓝皂苷提取工艺研究进展J.广西轻工业,2010(07):16-17.6. 田耀平.绞股蓝药材的品种来源及资源分布J.铜仁职业技术学院学报(自然科学 版),2008,6(6):15-16.7. 吴宗群,王艳.绞股蓝的化学成份和药理作用研究现状J.中华全科医学2011,9(1):116-117.8. 史先振,周建检.绞股蓝的研究进展J.研究与开发,2003,24(5):38-39.9. 杨
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