性激素结合球蛋白检测作业指导书医学检验

1、0KINGMED广州金域医学检验中心Guangzhou Kingmed Center for Clinical LaboratoryKM-SOP0300317Edition 3.0STANDARD OPERATION PROCEDUREPAGE1/9性激素结合球蛋口检测作业指导荷 200&03J3 丿文件己阅声明表Procedure circulation form文件名称：性激素结合球蛋白检测作业指导书表号：KM-MP03 02 02已阅声明：本人承诺已了解此文件中的相关内容，今后的工作中将严格按照此文件执行， 不随意对外传阅此文件,如有因与文件不相符的操作，责任由本人承担。（Iha

2、ve understoodtherelevant contentof the document I willkeep thedocumentsecretand be responsible to properly perform procedure）阅读人签名表姓名（NAME）职务(POSITION)签名(SIGNATURE)签名日期（DATE）0KINGMED广州金域医学检验中心Guangzhou Kingmed Center for Clinical LaboratoryKM-SOP0300317Edition 3.0STANDARD OPERATION PROCEDUREPAGE2/9性

3、激素结合球蛋口检测作业指导荷 200&03J3 丿文件修改记录页Procedure amendment form表号：KM-MP03 02 03序号N0.页码(Page)内容更改说明(Description ofModified contents)审批人(Approvedby )批准生效日期(Approved date)1换版0KINGMED广州金域医学检验中心Guangzhou Kingmed Center for Clinical LaboratoryKM-SOP0300317Edition 3.0STANDARD OPERATION PROCEDUREPAGE3/9性激素结合球蛋

4、口检测作业指导荷 200&03J3 丿文件信息表Procedure information form表号：KH-MP03 02 04文件名TitleofDOC. (Doc. Code)性激素结合球蛋白检测作业指导书(KM-S0P0300. 317)版本号(Edition No.)Edition 3.0生 效1：1期(Operative 2008-03-13 date)文控部门(Doc Control Dept )实验室文控室回顾日期/签名(Reviewdate /signature )回顾日期(Reviewdate)回顾人员签名(Signature )替代文件(Replaces)性激素

5、结合球蛋白检测作业指导书(KM-SOP0300. 317)Edition 2. 0存放地点(Location)/持 有人(Holder)No.Location (Holder)No.Location (Holder)1诊断部文控室(陈彬)2发光室(段学成)作者签名/日期(Authorsignature/date)陈鲜美审 批 人 签 名 / 日 期(Authorizedby:Signature/Date)陈建波接收人签名/日期(Receiptor/Date)副本数(Copy No.)本文件是第个文件拷贝/共发放2个文件拷贝。性激素结合球蛋白检测作业指导书(Analysis of SHBG by

6、 IMMULITE 1000)1.原理(Test principle):0KINGMED广州金域医学检验中心Guangzhou Kingmed Center for Clinical LaboratoryKM-SOP0300-317Edition 3.0STANDARD OPERATION PROCEDUREPAGE4/9性激素结合球蛋白检测作业指导书(200&03-13)固相、学发光免疫量度检测法(a solid-phase, chemiluminescent immunometric assay):包括免疫反应和化学反应,利用在化学反应中释放大量自由能产生激发态中 间体，当其回到稳

7、定的基态时，同时也发射出光子，利用发光信号测量仪对所发出的光 量子进行定量测量。2.样本收集和储存(Specimen Collection and Storage):标本收集(specimen collection):血清(serum);单次用量(volume)200 M 1,仪器加 样量(samplingvolume)50 u 1 (样本杯中加样量至少要超过检测总用量 100 M 1) 拒收标本(Specimenrejection ):严重脂血(lipoprotein)样本应拒收。脂血(lipoprotein)可能会干扰检测,推荐使用超速离心清除脂血(lipoprotein)样本。溶血(he

8、molysis)样本提示样本在送达实验室之前处理不当，因此检测结果将受到 影响，应予以注意。血清(serum)样本在未充分凝集前离心将导致纤维蛋口的存在。 为避免纤维蛋口对结果的影响必须确保离心处理前样本已经完全充分凝集。对于正在 接受抗凝剂治疗的病人样本，需要延长凝集时间。源于不同生产商的血样收集试管， 山于原材料和添加剂不同，包括凝胶或物理涂层、促凝剂和/或抗凝剂，可能导致得 到不同的结果。本试剂盒没有对所有可能应用的收集管类型进行测试。推荐使用超速离心法清除脂血样本溶血样(hemolyzed sample)提示样本在送达实验室 之前处理不当，因此检测结果将受到影响，应予以注意。为避免纤维

9、蛋白对结果的影 响，必须确定离心处理前样本已经完全充分凝集。对于正在接受抗凝剂治疗的病人样 本，需要延长凝集时间。标本储存条件(specimen storage conditions): (room temperature) 24 小时，2-8C 7天；-20C2个月；十天后处理标本。3.试剂(Reagent):3. 1美国 DPC IMMULITE 原装试剂。3. 1. 1 试剂内组份(Components):试剂盒组分必须成套使用，内包装盒上的条码标签为实验必需。检测单位(SBG)每个带有条码的检测单位内有一个包被珠，包被有高纯度人 anti-SHBGo 2、8C 可稳定至失效期。0KIN

10、GMED广州金域医学检验中心Guangzhou Kingmed Center for Clinical LaboratoryKM-SOP0300-317Edition 3.0STANDARD OPERATION PROCEDUREPAGE5/9性激素结合球蛋白检测作业指导书(200&03-13)LKSH1： 100 个，LKSH5： 500 个打开包装之前应恢复至室温，从包装顶部剪开，完整保留拉链隆起缘。使用后 将拉链重新封好，避免潮湿。SHBGSAb 试剂楔(LSH2) 试剂楔带有条码。7. 5mL 碱性磷酸酶标记的 anti-SHBG 基质.封盖低温保存：28C可稳定至失效期，建议

11、打开包装后在得示保存条件下 30天内用完。LKSH1： 1 套LKSH5： 5 套使用前将试剂楔顶部穿孔部位的胶条撕开，注意不要损坏条码。揭掉试剂楔顶部的铝 箔封条，将试剂楔滑盖的顶部搭扣在下方的斜坡上。校正(LSHL, LSHH)两瓶(低、高)冻干的含 SHBG 自身抗体的人血清/缓冲液基质。使用前至少提前 30min 复溶，复溶每瓶加 3.0mL蒸镭水或去离子水。轻轻翻转混匀，直至冻干粉完全溶解(不 需要进一步稀释)。分装并冷冻于密封塑料容器中。避免反复冻融。复溶后 28C 可 稳定保存 30天，-20C 可以保存(分装)6 个月。LKSH1： 1 套LKSH5： 2 套LSHC1-2：

12、SHBG 质控每瓶加 2.0 mL 蒸僻水或去离子水复溶后 28C 可稳定保存 30天，-20可以保存(分 装)6个月。SHBG 稀释液(LSHZ4)用于人工稀释病人样本。1： 20 倍稀释。3. 1. 2未随试剂盒提供的组分L1KSHW1, 5L1KSHW1:2 套L1KSHW5:10 套LSUBX：化学发光底物LPWS2：探针清洗液0KINGMED广州金域医学检验中心Guangzhou Kingmed Center for Clinical LaboratoryKM-SOP0300317Edition 3.0STANDARD OPERATION PROCEDUREPAGE6/9性激素结合球

13、蛋口检测作业指导荷 200&03J3 丿LKPM：探针清洗试剂盒LCHX-Y:样本怀架(带条码)LSCP:样本怀(一次性)LSCC:样本怀盖(可选)DCHS：样品稀释管盖其它必需：样本加样吸管、蒸溜水或去离子水、质控。3. 2试剂准备(Reagent preparation):将试剂从冰箱中取出并平衡至室温;不同批 号的试剂不能混用；新试剂与前一批号试剂不同，则需做样本结果的比对，并记录， 差异在允许范围内方可使用。Put reagent from refrigeratory to room temperature for proper time; New reagent lotsmu

14、st be tested in parallel with old lots before or concurrently with being placed in service to ensurethat the calibration of the new lot of reagent has maintained consistent results for patient specimensRecord the resuIts.4 仪器(Instrument)：美国 DPC IMMULITE 1000.4. 1仪器准备(Prepareapparatus)： 使用前将仪器的液体与固体垃

15、圾清空； 加入足 够的蒸係水，清冼液，底物及样本杯。然后运行仪器操作软件。而后排水及底物，防 止内有残留气柱。将仪器的试剂盘中加入所需的试剂。5. 安全防范(Safety Precautions)：操作时必须穿戴手套和工作服；工作后的台面应消毒擦洗；用过的加样枪头等耗 材应作为医用垃圾处理；为了避免形成气溶胶，所有样品尽可能不要在空气当中暴露 太长时间；遇到样本洒出，被污染的区域应立即用次氯酸钠溶液清洗，擦拭用的物品 应丢弃在标有生物污染的垃圾筒中。6校准(Calibration):6. 1 校准品储存和使用(Calibration material storage and usage):美国

16、 DPCIMMl-LITE1000 原装校准品。 要求在有效期内使用， 过期的校准液应停止使用， 保存 于 2-8C可稳定到有效期。Stop using overdue calibration material, use it within expiration date,storage in28C复溶(Cdl 让 ration material resolved)：用复溶专用加样枪准确吸取 3mL 去离子水 于瓶中，溶0KINGMED广州金域医学检验中心Guangzhou Kingmed Center for Clinical LaboratoryKM-SOP0300-317Edition

17、3.0STANDARD OPERATION PROCEDUREPAGE7/9性激素结合球蛋白检测作业指导书(200&03-13)解静置 1 小时，混匀并用有盖小子弹头分装 600 u L/个，标明配制日期， 校准品批号，配制人以及有效日期，于一 20 C 冻存备用。Label confecting date ,calibration lot, person whoconfected, expiration date. then 复溶后校准品成分的稳定性：保存于 1525C,可稳定 8小时保存于 28C,可稳定 2 天保存于(-15)(-25) C,可稳定 1个月(不可反复 冻融)。6.

18、 2 校准周期(Recommended Adjustment Interval): 2 周(2 weeks) o6. 3当下列任何一种情况出现时，请重新校准：(If one of the two happens, recalibration )试剂批号改变(Reagent lot changes)根据质控需要进行校准(Recal 让 ration based on quality control problem) 厂商建议校准周期：2 周(2 weeks)6.4 步骤：在计算机屏幕上选择 Kit Entry项，用扫码器扫描药盒上的条码，选择 Patient Entry项，输入 SHBG 校正信

19、息.然后将两个样本杯中分别加入至少 600ul 的 A, B 校准品，放在加样履带上。点击 G0。仪器自动识别校准是否通过，但是每次做 校准后，必须跟做所有浓度的质控，如质控在控则校准通过。7操作过程：(Procedural Steps)7. 1将从标本组取回的带有编号的血清标本，并按相应顺序将待测血清加入相应的样 本管。7. 2样本需稀释，稀释材料(Dilution material) :SHBG diluents稀释倍数(Dilution times) ： 1 ：20(lOul sample： 200ul diluents)取出空样本杯架，将已稀释好血清的并按相应顺序将待测血清加入相应的样

20、本管， 再将样品怀管放入对应的样本杯架中。7 3 将样品杯放到进样链条的箭头处，其后放入 SHBG 反应杯。在 Worklist Enter 中 输入样品杯中样品相对应的实验号。结果出来后，打印机自动打印出结果，作为原始 记录加以保留，并且操作者要签上名字及操作日期。7. 4数据联机入系统(Send data to LIS )数据审核(Data check up):联机是否正确？审查结果是否正确？实验号与样本架号的 对应，0KINGMED广州金域医学检验中心Guangzhou Kingmed Center for Clinical LaboratoryKM-SOP0300317Edition

21、3.0STANDARD OPERATION PROCEDUREPAGE8/9性激素结合球蛋口检测作业指导荷 200&03J3 丿原始导出结果与系统结果是否对应等。8质量控制(Quality control):使用 C0N6 质控品做质控，每工作日至少做两个浓度的值，二个浓度其靶值和 SD 参阅质控图。 暂未找到资料说明该项 LI的最大允许误差， 根据厂家建议暂时使用13S/(4IS)N=2的质控规则，失控后应采取的措施参照室内质量控制程序.9稀释(Dilution)：当结果超过 AMR 时，需要稀释，如果需要手工稀释，按以下标准稀释材料(dilution material) : SBG

22、 diluents最大稀释倍数(dilution times) : 1 ：9(20ul sample： 180ul diluents),没有包括样 品本来需要稀释 21 倍.10参考范围(Expected values): 95%范围，单位(nmol/L)成年男性：13-71nmol/L健康成年女性：18-114nmol/L11方法的局限性(Method Limitations)： 精密度(Precision)：批间精密度低值髙值算术平均值(Mean)1271标准差(SD)1. 15.3变异系数(CV)9. 2%7. 5%批内精密度:算数平均值(Mean) =33标准差(SD)二 2. 0变异系数(CV)二 6. 1 灵敬度(Sensitivity)： 0.2nmol/L特异性(Specificity)： N/A分析测试范围(AMR)： N/A-18