植物组织培养在生产上利用时应注意的问题

1、植物组织培养在生产上利用时应注意的问题植物组织培养技术已广泛地应用于农业科研和生产， 尤其是离体微繁技术和脱毒技术在很多农作物的生产中发挥了巨大的优势和作用，实现了种苗的产业化，取得了巨大的经济效益和社会效益。但是，植物组培技术由于其特殊的繁殖方式和较高的技术要求， 在生产上应用时仍存在一些不足之处，如植物易发生变异，培养过程中的污染，生产成本较高等问题。因此，在用于生产时，应高度注意以下几个问题：一、遗传稳定性问题遗传稳定性问题， 即保持原良种特性问题。 虽然植物组织培养中可获得大量形态、生理特性不变的植株，但是通过愈伤组织而繁殖出的苗木，有可能出现一些变异，其中少数是有益变异，大多数是不良

2、变异。诸如观花植物不开花、或花小或花色不正。果树植物不结果、或结果小或结品质差的果，或抗性下降以及产量降低等问题，给生产造成损失，为此必须给予高度重视。组织培养中出现变异的频率相当高，且不能逆转，有的变异率高达 40%60%。组织培养中的变异大多不能遗传，其变异多是后成的。（一）影响遗传稳定性的因素1. 基因型：基因型不同，发生变异的频率也不同。据报道，在玉簪中，杂色叶培养的变异频率为 43%，而绿色叶仅为 1.2%。嵌合体植株通过组培，其嵌合性更大，单倍体和多倍体变异大于二倍体。2. 继代次数： 继代培养时间和次数是造成变异的关键因素， 一般植物组织培养随着继代时间的延长和继代次数的增加，

3、染色体变异频率增加， 植株变异的可能就越大。3. 发生方式：一般从茎尖、茎段、体细胞胚发生的植株不变异或变异率极低， 而通过愈伤组织诱导的不定芽和悬浮培养， 再生苗变异率较高，应尽量避免用这两种方式大量去繁殖名贵品种和珍稀植物。（二）提高遗传稳定性，减少变异发生的措施减少继代次数，缩短继代时间；定期检查，剔除形态异常和生理异常苗；使用生长点、胚状体方式扩大繁殖；减少培养基中诱变因素如一些化学物质；尽量促进再生植株开花结实， 以检查其生物学性状和经济性状是否稳定。二、玻璃化问题玻璃化是植物组织培养中一个严重影响繁殖速度和种苗质量的问题。 它是一种生理病害，引起茎叶半透明、淡绿色、水浸状等现象，出

4、现玻璃化的茎叶，叶表完全无蜡质，而酯和极性化合物较高，导致细胞丧失持水能力，细胞内水分大量外渗，增加了植株水分的散失和蒸腾，极易引起植株死亡，且不能移栽成活。在石竹、菊花、满天星等的组织培养中常发生。可采取以下方法解决：增加琼脂浓度，减少水分吸收；增加蔗糖含量及加入渗透剂，较低培养基水势，减少水分吸收；改变培养基中的供氮形态，适当减少铵态氮而提高硝态氮用量；增强容器通风，降低瓶内湿度及乙烯含量；增强光照，适当降低培养室内温度；在培养基中添加其它物质，。在培养基中加入间苯三酚或 ABA或活性炭等均有助于降低玻璃化的发生。三、污染问题污染是指在培养过程中由于真菌、细菌或病毒的浸染，而使培养基和培养

5、材料滋生杂菌，导致培养失败的现象。在植物组织培养过程中，污染是不可避免的，但可以把污染控制在最低限度内。 污染通常是由于环境不洁、培养基和培养材料消毒不彻底、操作过程不慎、操作人员或工具带菌而引起。组培污染既影响了繁殖速度， 又增加了生产成本，严重时可造成培养材料的丢失，给组培繁殖带来较大的损失。为了减少损失，提高工作效率， 必须在每一个操作环节均注意防止污染的发生。在组织培养实验室中，污染的病原分为细菌和真菌两大类， 根据污染的病原和种类，可采取以下措施来预防：保持干净整洁的环境；用洁净的培养容器；培养基的彻底灭菌；严格规范且熟练的无菌操作； 培养材料 （外植体和基础母瓶）的严格筛选和彻底的

6、表面消毒；污染物的正确处理（高压灭菌后再倒弃）能有效防止污染传播蔓延。四、成本控制问题植物组织培养技术是农业高新技术的重要内容， 已从实验室发展到组培苗的商业化生产。 与常规无性繁殖的扦插苗或嫁接苗相比，组培苗虽然在质量、数量上有很大的优越性，但需一定设备，要有一定的专业技术人员和训练有素的操作工人， 消耗一定的能源和药品，因此生产成本较高。事实上，高成本已经成为制约组培快繁技术发展和组培市场开发的限制因素。在生产实践中，对成本控制问题要予以高度重视， 控制成本的有效途径有：节省水电开资，采样自然光培养，降低能耗；提高工作效率，节约人工工资；充分发挥现有设备的生产潜力，减少设备投资，延长使用寿

7、命；降低玻璃器皿损耗，采用廉价的代用品；降低污染率，减少次品，杜绝废品；提高繁殖系数、生根率和移栽成活率；降低培养基成本，利用简化的培养基，用自来水代替蒸馏水，食用白糖代替蔗糖。出师表两汉：诸葛亮先帝创业未半而中道崩殂， 今天下三分， 益州疲弊， 此诚危急存亡之秋也。然侍卫之臣不懈于内，忠志之士忘身于外者，盖追先帝之殊遇，欲报之于陛下也。诚宜开张圣听，以光先帝遗德，恢弘志士之气，不宜妄自菲薄，引喻失义，以塞忠谏之路也。宫中府中，俱为一体；陟罚臧否，不宜异同。若有作奸犯科及为忠善者，宜付有司论其刑赏，以昭陛下平明之理；不宜偏私，使内外异法也。侍中、侍郎郭攸之、费祎、董允等，此皆良实，志虑忠纯，是

8、以先帝简拔以遗陛下：愚以为宫中之事，事无大小，悉以咨之，然后施行，必能裨补阙漏，有所广益。将军向宠，性行淑均，晓畅军事，试用于昔日，先帝称之曰愚以为营中之事，悉以咨之，必能使行阵和睦，优劣得所。“能 ”，是以众议举宠为督：亲贤臣， 远小人， 此先汉所以兴隆也； 亲小人， 远贤臣， 此后汉所以倾颓也。 先帝在时，每与臣论此事， 未尝不叹息痛恨于桓、 灵也。 侍中、尚书、 长史、 参军，此悉贞良死节之臣，愿陛下亲之、信之，则汉室之隆，可计日而待也。臣本布衣，躬耕于南阳，苟全性命于乱世，不求闻达于诸侯。先帝不以臣卑鄙，猥自枉屈，三顾臣于草庐之中，咨臣以当世之事，由是感激，遂许先帝以驱驰。后值倾覆，受任于败军之际，奉命于危难之间，尔来二十有一年矣。先帝知臣谨慎，故临崩寄臣以大事也。受命以来，夙夜忧叹，恐托付不效，以伤先帝之明；故五月渡泸，深入不毛。今南方已定，兵甲已足，当奖率三军，北定中原，庶竭驽钝，攘除奸凶，兴复汉室，还于旧都。此臣所以报先帝而