KJ食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌检验

1、1会计学KJ食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌食品卫生微生物学检验副溶血性弧菌检验检验21、概述2、范围3、生物学特性（菌体形态学特征、培养特性、抵抗力）4、检验程序5、培养基和试剂31、概述 副溶血性弧菌（ Vibrio parahaemolyticus ）是分布极广的，为引起食物中毒重要的病原细菌之一，尤其是在的，经常发生由于食用带有大量副溶血性弧菌的海产食品，引起爆发性食物中毒。 历史：副溶血性弧菌食物中毒于1950年在日本首发，副溶血性弧菌（V. parahemolyticus）于我国大陆沿海地区食物中毒中最常见的一种病原菌。 中毒原因:烹调时未烧熟、煮、透,或熟制品污染后未再彻 底加热

2、。 中毒食品:副溶血性弧菌食物中毒多发生在海产品大量上 市时。中毒食品主要是海产品,其次为咸菜、 熟肉类、禽肉、禽蛋类,约有半数为腌制品。 452 2、范围、范围 本标准规定了副溶血性弧菌检验方法。 本标准适用于动物性水产干制品、腌醉制生食动物性水 产品、即食藻类食品、鱼糜制品等水产食品和水产调味 品以及食物中毒样品中副溶血性弧菌的检验。63 3、生物学特性、生物学特性 1 1）菌体形态学特征）菌体形态学特征 2 2）培养特性）培养特性 3 3）抵抗力）抵抗力 4 4）致病性）致病性1 1）菌体形态学特征）菌体形态学特征 本菌为本菌为G-G-，可两端浓染可两端浓染 ，多形态，无芽孢，单端单鞭毛

3、，有嗜盐特性，在多形态，无芽孢，单端单鞭毛，有嗜盐特性，在30-3730-37最适温度时增长较快，一般冬季不易检出。最适温度时增长较快，一般冬季不易检出。多形态多形态： 弧状、逗点状弧状、逗点状 球状、丝状、球状、丝状、 杆状、棒状等。杆状、棒状等。7 2 2）培养特性）培养特性嗜盐嗜盐VP VP 在含氯化钠在含氯化钠5 (20-305 (20-30最适最适) g) gL L的培养基的培养基 上生长，无盐和上生长，无盐和110110g g L L以上不生长。以上不生长。 生长温度：生长温度：最适为最适为3737，4 4 不生长不生长 pH:pH: 最适最适pHpH为为7.4-8.07.4-8.

4、0 需氧性需氧性: :需氧性很强，需氧性很强， 厌氧条件下生长缓慢厌氧条件下生长缓慢 8 3 3）抵抗力）抵抗力 敏感：敏感：淡水等无盐环境淡水等无盐环境 不耐热不耐热 对酸敏感，在对酸敏感，在2 2冰醋酸或食醋中立即死亡，冰醋酸或食醋中立即死亡， 对氯、碳酸、来苏水等一般化学消毒剂敏感：对氯、碳酸、来苏水等一般化学消毒剂敏感： 对磺胺噻唑、氯霉素、合霉素敏感。对磺胺噻唑、氯霉素、合霉素敏感。 耐受：耐受：耐高浓度耐高浓度NaClNaCl海水，盐渍酱菜中存活时间较长；海水，盐渍酱菜中存活时间较长； 耐低温的抵抗力较强耐低温的抵抗力较强 耐青霉素、磺胺嘧啶耐青霉素、磺胺嘧啶。94、检验程序 25

5、g样品样品+3%氯化钠氯化钠碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水TCBS平板平板36 1 18h 1、镜、镜 检检 3、三糖铁试验、三糖铁试验2、氧化酶试验、氧化酶试验 4、嗜盐试验、嗜盐试验 报告结果报告结果 36 1 24h 36 1 24h 36 1 6h 科玛嘉弧菌平板科玛嘉弧菌平板 生化实验生化实验 API 20 E API 20 E105 5、培养基和试剂、培养基和试剂5 5.1 .1 3%3%氯化钠碱性蛋白胨水：氯化钠碱性蛋白胨水： 增菌用，高盐增菌用，高盐5 5.2 .2 TCBSTCBS琼脂：琼脂：5 5.3 .3 科玛嘉琼脂：科玛嘉琼脂： 分离培养用分离培养用11TCBSTCBS上的副

6、溶血弧菌菌上的副溶血弧菌菌科玛嘉上的副溶血弧菌菌落科玛嘉上的副溶血弧菌菌落125.4 ：初步鉴定：初步鉴定 u3.5氯化钠三糖铁琼脂：底层氯化钠三糖铁琼脂：底层 变黄，斜面不变色，有动力，变黄，斜面不变色，有动力， 不产生硫化氢不产生硫化氢.u镜检形态：本菌为镜检形态：本菌为G-，可两端可两端 浓染浓染 ，多形态，无芽孢。多形态，无芽孢。u氧化酶试验：氧化酶试验：VP为氧化酶阳性。为氧化酶阳性。u嗜盐性试验：嗜盐性试验：0%不生长不生长 7%旺盛生长旺盛生长 10%不生长不生长135.5 ONPG试验：5.6 甘露醇试验：5.7 赖氨酸试验：5.8 MR-VP试验：生化试验14结果结果 样品经

7、过增菌培养、样品经过增菌培养、分离培养后，根据形分离培养后，根据形态观察、生化试验的态观察、生化试验的结果判断是否发现副结果判断是否发现副溶血性弧菌并报告溶血性弧菌并报告。 25g样品样品+7.5%氯化钠肉汤或氯化钠肉汤或10%氯化钠胰酪胨大豆肉汤氯化钠胰酪胨大豆肉汤血平板血平板36 1 24h 镜镜 检检 营养肉汤营养肉汤血浆凝固酶血浆凝固酶实验实验 报告结果报告结果 36 1 24h 36 1 24h 36 1 6h BP平板平板血浆凝固酶311、概述2、范围3、生物学特性（菌体形态学特征、培养特性、抵抗力）4、检验程序5、培养基和试剂322 2、范围、范围 本标准规定了副溶血性弧菌检验方法。 本标准适用于动物性水产干制品、腌醉制生食动物性水 产品、即食藻类食品、鱼糜制品等水产食品和水产调味 品以及食物中毒样品中副溶血性弧菌的检验。25g样品样品+7.5%氯化钠肉汤