SSAO、VAP-1简介

1、SSAO/VAP-1小结SSAO-氨基脲敏感性胺氧化酶存在形式：组织型（存在于细胞质膜上，也有少量在细胞微粒体中）、血浆型（可能由组织型胞外区域断裂而来）；结构：具有同源二聚体结构，含一个Cu2+，以TPQ为辅酶，组织型结构上含有较大的细胞外域且催化位点存在于此；组织分布：组织型主要存在于血管平滑肌；特点：被氨基脲和氨基胍等灭活而对其他胺氧化酶抑制剂有拮抗作用；SSAO的内源性底物及其产物的细胞毒性SSAO催化的氧化脱氨反应：SSAO内源性底物：甲胺氨基丙酮.SSAO甲醛丙酮醛+H2O2+NH3SSAO其他底物：包括脂肪胺和芳香胺等。其中苄胺为最佳的非内源性底物。SSAO的内源性底物及其产物的

2、细胞毒性SSAO产物的细胞毒性:e.g.甲醛则引发内皮细胞损伤，导致动脉粥样硬化； 丙酮醛会导致生成晚期糖基化终产物； H2O2会导致氧化应激或作为信号分子，调节葡萄糖转运以及脂肪分解；并在很多种细胞内促进趋化因子和粘附因子的表达。 SSAO的生理功能生理功能及病理学意义：尚不明确。有文献报道，可能与发育、代谢及免疫调节等有关。*不同物种、同一物种不同组织的SSAO活性、底物专一性以及对抑制剂的敏感性差异大。 白细胞粘附； 清除生物胺； 调节葡萄糖运输；SSAO的抑制剂主要分为两类：共价/不可逆结合抑制剂:如丙酰胺类、肼类非共价/可逆结合抑制剂SSAO与动脉粥样硬化（AS）SSAO内皮损伤及血

3、管壁蚀斑的形成，最终导致AS。H2O2诱导粘附因子、趋化因子及炎性因子，还可通过氧化应激促进低密度脂蛋白（LDL）氧化从而破坏血管内皮系统，导致动脉管壁的僵化，并损害其调节血压的能力；过量的醛类物质生成可促进内皮细胞的损伤及血管内皮层的蚀斑形成，甲醛还可通过渐进性糖基化破坏血管内蛋白质的交联作用；SSAO与糖尿病SSAO 底物与钒酸盐结合被认为具有“胰岛素样作用”。 这是由于在 SSAO 催化产物 H2O2存在的情况下，该结合物可激活葡萄糖载体 GLUT4 并阻止脂肪分解，从而起到降低血糖的作用。现有研究表明，尤其对于胰岛素抵抗的糖尿病人群，将 SSAO 底物-钒酸盐结合物作为降血糖药物可能具

4、有广泛的运用前景。然而，过度持久的SSAO 活化反应能导致许多不良反应。SSAO活性与糖尿病心血管并发症的程度正相关。 SSAO毒性产物的积聚促进AGEs的产生，并导致更多炎性细胞粘附并渗出血管内皮，引起心血管疾病。糖尿病视网膜并发症及心脏瓣膜钙化狭窄的发生与加剧也与此相关。SSAO与慢性阻塞性肺病（COPD）COPD：诱因-吸烟、雾霾、烟尘等； 病理学特征-肺部炎症及其纤维化； 参与炎症细胞-中性粒细胞； 治疗-无广泛、有效的治疗方法；SSAO在COPD中的作用：中性粒细胞的迁移受SSAO粘附作用及酶活性的双重调节； 中性粒细胞表面的赖氨酸残基与SSAO作用，帮助其在内皮细胞表面的tethe

5、r和rolling，引发炎症，炎症导致气管壁的损伤，进而引起气管结构重塑、胶原含量增加及瘢痕形成； 生成过氧化氢及甲醛等。SSAO小分子抑制剂：PXS-4728A 抑制SSAO的酶活性以及其对白细胞的转移、粘附。降低中性粒细胞及巨噬细胞等炎症细胞的浸润，同时减少甲醛及过氧化氢的生成。SSAO与慢性阻塞性肺病（COPD）动物模型：A model of COPD induced by CS （Female wild-type C57BL/6 mice）实验方案： SSAO fluorometric enzyme activity assay； 支气管肺泡灌洗液中总白细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、巨噬

6、细胞数量及形态，评估细胞因子和趋化因子水平； Small airway-associated fibrosis（通过对胶原进行染色计算胶原沉积来判断纤维化）； Soluble lung collagen 与Total lung collagen； 肺气肿（评估小鼠的肺泡大小和肺气肿）； 肺功能评价（评估静态肺顺应性）SSAO与慢性阻塞性肺病（COPD）实验方案： SSAO fluorometric enzyme activity assay-IC50 Other fluorometric enzyme activity assays-判断化合物选择性 Off-target activity 药

7、代动及药效学参数-判断药物的代谢状况及给药剂量 Induction of cremaster inflammation-可视化判断小分子抑制剂对白细胞滚动及粘附的抑制作用 脂多糖(LPS)气道炎症/ Carrageenan Air Pouch Model -判断抑制剂对内毒素感染中性粒细胞滚动/粘附的抑制作用 Klebsiella infection-判断抑制剂对细菌感染中性粒细胞滚动/粘附的抑制作用，及在肺炎治疗上的潜力 CLP House dust mite/Rhinovirus（RV）model-判断抑制剂对病毒感染中性粒细胞滚动/粘附的抑制作用，SSAO与炎症VAP-1-血管黏附蛋白1

8、 内皮黏附分子，也是氨基脲敏感单胺脱氧酶。 基因：在人体内由定位于17号染色体的AOC3基因编码。 分布：心血管、肺、肝、肾、肠等多种器官、组织的内皮细胞上，脂肪细胞、平滑肌细胞中也有丰富的表达。 结构：同源二聚体唾液酸糖蛋白，由763个氨基酸组成，分子量170kDa；含有跨膜区和胞外扩展区；N糖基化位点具有酶活VAP-1VAP-1具有粘附结构域和胺氧化酶结构域。其粘附功能和酶的功能可存在于淋巴细胞的两个独立分子；如果粘附反受体包含氨基的底物的话，则淋巴细胞的同一个分子同时参与两个步骤。 存在形式：可以溶质的形式存在于血浆中，也可以膜结合形式存在于内皮细胞、脂肪细胞及平滑肌细胞等的表面。VAP

9、-1功能： VAP-1具有双重功能，一方面是淋巴细胞的黏附分子，可促进淋巴细胞黏附于血管内皮，还可以通过调节转录因子、趋化因子和其他粘附分子来调节炎症微环境；另一方面VAP-1还具有酶的功效，催化伯胺为相应的醛、氨和过氧化氢。VAP-1参与白细胞外渗过程VAP-1参与白细胞外渗过程VAP-1静息状态下存在于细胞内的囊泡中，在炎症时，迅速从细胞内贮存颗粒内转移到细胞膜表面，参与白细胞在内皮的滚动、粘附和迁移环节等入侵级联调节中发挥重要作用，协助白细胞从血液进入组织。VAP-1 过量的表达使得白细胞不恰当的大量外渗，则会造成靶器官炎症的病理损伤。 临床研究中，多种炎症性疾病均与VAP-1相关，包括自身免疫性疾病疾病、多发性硬化症、类风湿性关节炎、动脉粥样硬化、缺血再灌注损伤、糖尿病及阿兹海默氏症等。VAP-1目前，以VAP-1作为靶点开发的药物主要包括2类：一类为化学药物，主要涉及唑类、