再造烟叶萃取液与浓缩液固形物含量的测定气相色谱法和折光

1、ICS 65.160X85备案号：××××YC中华人民共和国烟草行业标准YC/T ××××××××再造烟叶萃取液与浓缩液固形物含量的测定气相色谱法和折光法Determination of solids content in tobacco water extracts and concentratedextract liquor for reconstituted tobacco-gas chromatographic method andrefractometive met

2、hod（征求意见稿）（在提交反馈意见时，请将您知道的相关专利连同支持性文件一并附上）×××× -×× -××发布×××× -×× -××实施国家烟草专卖局发 布YC/T ×××× ××××前言本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会卷烟分技术委员会（SAC/TC144/SC1 ）归口

3、。本标准起草单位：本标准主要起草人：YC/T ×××× ××××再造烟叶萃取液与浓缩液固形物含量的测定气相色谱法和折光法1 范围本标准规定了再造烟叶萃取液与浓缩液中固形物 （包括总固形物、 可溶性固形物和不溶性固形物）含量的测定方法。其中，标准正文规定了总固形物含量、可溶性固形物含量和不溶性固形物含量的气相色谱测定方法，附录A 规定了可溶性固形物含量的折光测定方法。本标准适用于再造烟叶萃取液与浓缩液中固形物（总固形物、可溶性固形物、不溶性固形物）含量的测定。其中，气相色谱法适用于再造烟叶萃取液与浓缩液中固形物（总固

4、形物、可溶性固形物、不溶性固形物）含量的确证测定，折光法适用于再造烟叶萃取液与浓缩液中可溶性固形物含量的常规测定。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682分析实验室用水规格和试验方法GBT 14454.4-2008香料折光指数的测定NY/T 2637-2014水果和蔬菜可溶性固形物含量的测定折射仪法3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1总固形物 total solids在常温常压下，再造烟叶烟草原料萃取液与浓缩液中除去水分后剩余的物质

5、。3.2 可溶性固形物soluble solids在常温常压下，再造烟叶烟草原料萃取液与浓缩液中可溶解于水的物质。3.3 不溶性固形物insoluble solids在常温常压下，再造烟叶烟草原料萃取液与浓缩液中不溶于水的物质。4 原理4.1总固形物含量测定原理YC/T ×××× ××××在常温常压条件下，将一定量的再造烟叶烟草原料萃取液或浓缩液溶解于含有内标物(异丙醇 )的萃取剂中，用配有热导检测器(TCD) 的气相色谱进行样品的水分含量测定，扣除样品水分含量即为总固形物含量。4.2可溶性固形物含量测定原理在常温

6、常压条件下，再造烟叶烟草原料萃取液或浓缩液经离心处理后，取一定量离心后的溶液溶解于含有内标物 (异丙醇 )的萃取剂中， 用配有热导检测器 (TCD) 的气相色谱测定萃取液的水分含量， 扣除水分含量即为可溶性固形物含量。4.3 不溶性固形物含量测定原理在常温常压条件下，同一再造烟叶烟草原料萃取液与浓缩液样品中总固形物含量与可溶性固形物含量的差值即为不溶性固形物含量。5 试剂5.1水， GB/T 6682 ，一级。5.2乙醇，水分含量应低于 1.0 mg/mL ，色谱纯。5.3内标物，异丙醇，纯度不低于99 %，色谱纯。5.4萃取剂，含内标物 (5.3)的乙醇溶液，浓度为 12.5 mL/L 。5

7、.5标准工作溶液加入一定量水于萃取剂 (5.4)中，混合均匀， 制备至少 5级标准工作溶液， 其浓度应覆盖预计样品溶液中检测到的水分浓度 (一般最高浓度为 16 mg/mL) ，其中一个标准工作溶液中不加水。注：适宜的标准工作溶液制备方法为称取0 mg、50 mg、100 mg、200 mg、400 mg、600 mg、800 mg水，精确至 0.1mg，分别加入50 mL 萃取剂 (5.4)，混合均匀。标准工作溶液浓度( 单位体积萃取液中的水分含量)分别为 0 mg/mL 、 1mg/mL 、2 mg/mL 、4 mg/mL 、 8 mg/mL 、12 mg/mL 、16 mg/mL 。为了

8、防止吸水，盛放溶剂的容器应配备去水装置，且所有溶液均应密封。萃取剂在使用前应持续摇动，使水分均匀。标准工作溶液制备所用萃取剂应与测试样品所用萃取剂为同一批。标准工作溶液转移到色谱进样瓶后，应立刻加盖密封。标准工作溶液有效期为一周。6 仪器设备及材料常用实验仪器设备及下述各项。6.1 气相色谱仪，配有热导池检测器、记录仪和积分仪或其他合适的数据处理设备。色谱柱可根据所使用设备情况，于 6.2与 6.3中任选其一。6.2填充色谱柱，内径2 mm4 mm ，最佳长度 1.5 m2 m 。固定相为 100目 80目的乙基乙烯苯和二乙烯苯共聚物。色谱柱宜使用去活的不锈钢柱，其他材料如玻璃或镍色谱柱亦可使

9、用。6.3毛细管色谱柱，规格为 30 m（长度）×0.53 mm（内径）× 40.0 m （膜厚） ，固定相为键合聚苯乙烯 -二乙烯基苯6.4具塞锥形瓶， 100 mL ，使用前应在 105 ±5 下加热至少 1 h，并在放有干燥剂的干燥器中冷却后备用。6.5振荡器，往复式或回旋式。YC/T ×××× ××××6.6离心机，最大使用转速不小于8000 r/min 。6.7注射器， 10 mL ，贮存于干燥器中直至使用。6.8离心管， 10 mL ，贮存于干燥器中直至使用。6.9电子天平

10、，感量为 0.0001 g。6.10加液器，配备干燥管，可移取50 mL 液体。加液器在加液前应使用50 mL萃取剂冲洗，贮存于干燥器中直至使用。6.11有机滤膜， 0.45 m，贮存于干燥器中直至使用。6.12载气，氦气或氮气。6.13干燥剂，活性硅胶。7 取样取再造烟叶生产过程中的烟草原料萃取液和浓缩液，取样后立即存放在适当体积的密闭容器中，若样品需要在冷藏、冷冻条件下存放，应在测定前同密闭容器一起平衡至室温。称取样品前应将样品摇晃均匀后再称取，以免溶液底部有沉淀，混合不均匀。8分析步骤8.1总固形物含量测定试样制备准确称取 0.5 g摇匀后的样品，精确至0.0001 g，置于 100 m

11、L 具塞锥形瓶（6.4）中。准确移取50 mL萃取剂 (5.4) 于该锥形瓶中，立刻上盖密封。在振荡器(6.5)上于室温下振荡20 min，使用注射器(6.7) 移取约 5 mL 萃取液，在注射器上装孔径0.45 m的有机滤膜 (6.11)，先放出部分 (约 3 mL) 萃取液以冲洗滤膜，然后将后续过滤的萃取液转移至色谱瓶中，上盖密封，以作分析用。同一样品最少制备两个测试样品。处理后的试样建议在30 h内完成气相色谱分析。8.2可溶性固形物含量测定试样制备取约 10 mL 摇匀后的样品，置于10 mL 离心管 (6.8)中，在室温下，于8000 r/min 条件下离心 15 min ，准确称取

12、离心后上层清液0.5 g，精确至 0.0001 g ，置于 100 mL 具塞锥形瓶（6.4）中。同一样品最少制备两个测试样品。准确移取 50 mL 萃取剂 (5.4)于该锥形瓶中，立刻上盖密封。在振荡器(6.5)上于室温下振荡20 min ，使用注射器 (6.7)移取约 5 mL 萃取液，在注射器上装孔径 0.45 m的有机滤膜 (6.11)，先放出部分 (约 3 mL) 萃取液以冲洗滤膜，然后将后续过滤的萃取液转移至色谱瓶中，上盖密封，以作分析用。处理后的试样建议在30 h内完成气相色谱分析。8.3空白实验不加样品，重复步骤8.1、 8.2，进行气相色谱分析。8.4 色谱分析条件以下分析条

13、件可供参考，采用其它条件应验证其适用性。YC/T ×××× ××××8.4.1填充色谱柱分析条件填充色谱柱推荐分析条件如下： 柱箱温度： 170 (等温线 )； 进样口温度： 250 ； 检测器温度： 250 ； 载气：氦气，流量30mL/min ； 进样体积： 1 L8.4.2毛细管色谱柱操作条件毛细管色谱柱推荐操作条件如下： 柱箱温度： 170 (等温线 )； 进样口温度： 150 ； 检测器温度： 250 ，参比流量 20mL/min ； 载气：氦气，流量5mL/min ； 进样体积： 1 L； 分流比： 2

14、0:1。注：若检测器灵敏度足够高，亦可使用氮气。采用不分流进样口时，进样体积为0.5 L 。8.5 标准工作曲线制作按照气相色谱分析条件对系列标准工作溶液（5.5）进行气相色谱测定，保留时间定性，内标法定量。记录水分和内标物的峰面积(或峰高 )。计算标准溶液中水分与内标物的峰面积比(或峰高比 )，以峰面积比 (或峰高比 )为纵坐标，水分浓度为横坐标，建立标准工作曲线。由于萃取剂含有水分，回归曲线应不过原点。若标准曲线的相关系数R2低于 0.99，则应重新制作标准曲线。若标准溶液拟合浓度值偏离实际浓度10 % 以上，则该标准溶液点应从标准曲线上去除。每检验批进行一次标准曲线的制作，另外，每20个

15、样品测定后应注入一中等浓度标准溶液。若所得结果与原浓度相差超过3%，则应重新制作标准工作曲线。若使用新配制萃取剂，应重新制作标准工作曲线，标准工作曲线萃取剂与样品萃取剂必须是同一批次。若萃取剂水分含量超过1.0 mg/mL ，则不应使用该批萃取剂。8.6 样品测定按照色谱分析条件(8.4)对样品萃取溶液(8.1)(8.2) 进行气相色谱分析，每个样品平行测定两次，根据水和内标物的峰面积比(或峰高比 )，使用标准曲线或回归方程计算试样中水分含量。由于萃取剂会吸收水分， 每批样品至少做一组平行空白测试。 空白样品 (8.3)色谱分析条件 (8.4)和样品萃取溶液相同。9 结果计算与表述9.1水分含

16、量的计算YC/T ×××× ××××试样中水分含量由式（1）计算得出：ctcbVt100% （ 1）Xm01000式中：X 试样中水分含量，单位以百分比（%）表示；ct 试样中水分浓度测定值，单位为毫克每毫升（mg/mL ）；cb 空白试样中水分浓度测定值，单位为毫克每毫升（mg/mL ）；Vt 萃取剂体积，单位为毫升（mL ）；m0 称取试样质量，单位为克（g）。取两次平行测定结果的算术平均值为样品测试结果，精确至0.01%。两次平行测定结果的相对平均偏差应小于3%。9.2总固形物含量的计算试样中总固形物含量由式

17、（2）计算得出：W1=100% -X 1 （2）式中：W1 试样中总固形物的含量，单位以百分比（%）表示；X1 试样中水分含量，单位以百分比（%）表示。取两次平行测定结果的算术平均值为样品测试结果，精确至0.01%。萃取液样品两次平行测定结果的相对平均偏差应小于5%；浓缩液样品两次平行测定结果的相对平均偏差应小于 3%。9.3可溶性固形物含量的计算试样中可溶性固形物含量由式（3）计算得出：W2=100%- X2 （3）式中：W2 试样中可溶性固形物的含量，单位以百分比（X2 试样 (离心处理后 )中水分含量，单位以百分比（%）表示；%）表示；取两次平行测定结果的算术平均值为样品测试结果，精确至

18、萃取液样品两次平行测定结果的相对平均偏差应小于对平均偏差应小于3%。0.01%。5%；浓缩液样品两次平行测定结果的相9.4 不溶性固形物含量的计算试样中不溶性固形物含量由式(4) 计算得出：W3=W 1 -W2 （4）式中：W3 试样中不溶性固形物的含量，单位以百分比（%）表示；W1 试样中总固形物的含量，单位以百分比（W2 试样中可溶性固形物的含量，单位以百分比（%）表示；%）表示。YC/T ×××× ××××取两次平行测定结果的算术平均值为样品测试结果，精确至0.01%。10 回收率、检出限和定量限本方法水分含

19、量测定的回收率、检出限和定量限结果见表1。表 1方法回收率、检出限和定量限结果色谱柱类型回收率检出限定量限%填充色谱柱96.73101.790.461.55毛细管色谱柱95.62102.020.943.1211 试验报告试验报告应说明： 识别被测试样需要的所有信息； 参照本标准所使用的试验方法； 测定结果，包括各单次测定结果及其平均值； 与本标准规定的分析步骤的差异； 在试验中观察到的异常现象； 试验日期； 测定人员。YC/T ×××× ××××附录 A（规范性附录）折光法A.1原理按所用仪器的类型，直接测量折射角或者观察全反射的临界线。A.2仪器及设备A.2.1折光仪，有温度补偿功能，糖度（Brix ）精度为 0.01%。光源为钠光。A.2.2天平，感量为 0.01g。A.3 试剂A.3.1水， GB/T 6682 ，三级， 20时的折光指数为1.3330。A.3.2对异丙基甲苯，20时的折光指数为1.4906。A.3.3苯甲酸苄酯，20时的折光指数为1.5685。A.3.41-溴萘， 20时的折光指数为1.6585。A.4