姜黄素的提取

1、姜黄中姜黄素的提取姜黄中姜黄素的提取索氏提取法索氏提取法 一、实验目的一、实验目的 1.1.掌握用索氏提取法提取姜黄浸膏的原理及操作。掌握用索氏提取法提取姜黄浸膏的原理及操作。2.2.熟悉重量分析的基本步骤。熟悉重量分析的基本步骤。关键控制点：1.正确的选择溶剂；2.抽提管中样品的装样是否保持虹吸正常；3.抽提的次数与间隔时间会影响提取效果；难点：1.定量检测时原料及成品的干燥称量； 2.溶剂的正确回收；二、实验原理二、实验原理l姜黄素能溶于脂溶性有机溶剂。本实验利用能溶于脂溶性溶剂姜黄素能溶于脂溶性有机溶剂。本实验利用能溶于脂溶性溶剂这一特性，用脂溶性溶剂将姜黄素提取出来，借蒸发除去溶剂这一

2、特性，用脂溶性溶剂将姜黄素提取出来，借蒸发除去溶剂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行，通常使用的脂后称量。整个提取过程均在索氏提取器中进行，通常使用的脂溶性溶剂为乙醚，或沸点为溶性溶剂为乙醚，或沸点为30306060的石油醚、二氯甲烷、的石油醚、二氯甲烷、乙醇等。用此法提取的脂溶性物质除姜黄素外，还有脂肪、游乙醇等。用此法提取的脂溶性物质除姜黄素外，还有脂肪、游离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故称为离脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故称为“浸浸膏膏”。同时，样品中结合状态的脂类（主要是脂蛋白）不能直。同时，样品中结合状态的脂类（主要是脂蛋白）不能直接提取出来，所以该法又

3、称为游离脂类定量测定法。接提取出来，所以该法又称为游离脂类定量测定法。 索氏抽提法测定脂肪最大的不足是索氏抽提法测定脂肪最大的不足是，如能将样品先，如能将样品先回流回流1 12 2次次，然后，然后浸泡在溶剂中浸泡在溶剂中过夜过夜；次日再继续抽提，；次日再继续抽提，则可明显则可明显提高提取率提高提取率。 或改用棉花代替滤纸。用棉花垫底后直接装样虹吸。三、实验器材三、实验器材 l1.1.电子天平。电子天平。l操作指南：调整水平度，插上电源，启动操作指南：调整水平度，插上电源，启动“ON/OFFON/OFF”开关，按一下回零挡开关，按一下回零挡“TARETARE”，使屏，使屏幕上显示幕上显示0.00

4、000.0000。推开玻璃门，轻轻将样品置。推开玻璃门，轻轻将样品置于称量盘上，关上玻璃门，待屏幕上显示的数于称量盘上，关上玻璃门，待屏幕上显示的数字稳定后记录下来，即为样品的重量（字稳定后记录下来，即为样品的重量（g g）。）。注意，每次称量前都必须按一下回零挡注意，每次称量前都必须按一下回零挡“TARETARE”，使屏幕上显示，使屏幕上显示0.00000.0000。称量室内尤。称量室内尤其是称量盘上必须保持清洁、干燥；若有药品其是称量盘上必须保持清洁、干燥；若有药品撒落，立即用软毛刷清理干净撒落，立即用软毛刷清理干净。 2.HH-2型数显恒温水浴锅型数显恒温水浴锅 3.101C-3型电热鼓

5、风干燥箱型电热鼓风干燥箱 l操作指南：插上电源插头，按下绿按钮（电源开关）操作指南：插上电源插头，按下绿按钮（电源开关）和黄按钮（鼓风开关），将和黄按钮（鼓风开关），将“设定设定/ /测量测量”按钮置于按钮置于设定挡，调节设定挡，调节“温度设定温度设定”旋钮，使显示器中的数字旋钮，使显示器中的数字为所需的温度，再将为所需的温度，再将“设定设定/ /测量测量”按钮置于测量挡，按钮置于测量挡，此时显示器中的数字表示烘箱内的实际温度。将加热此时显示器中的数字表示烘箱内的实际温度。将加热旋钮（一共有旋钮（一共有3 3个）打到适当的挡位，烘箱开始加热。个）打到适当的挡位，烘箱开始加热。此时绿灯亮，当温度

6、达到所设定值时，红灯亮，烘箱此时绿灯亮，当温度达到所设定值时，红灯亮，烘箱停止加热。以后烘箱会一直通过不断的加热停止加热。以后烘箱会一直通过不断的加热- -停止过停止过程来保持恒温，红绿灯也会相应地交替闪亮。请注意，程来保持恒温，红绿灯也会相应地交替闪亮。请注意，本实验由于设定温度为本实验由于设定温度为120120，故在取出被烘干物品，故在取出被烘干物品时，请戴上手套时，请戴上手套。 4.索氏提取仪索氏提取仪l由冷凝管、抽提管和由冷凝管、抽提管和平底烧瓶三个部件组平底烧瓶三个部件组成，通过标准磨口相成，通过标准磨口相对接。对接。 l安装装置：用铁架台、只十字夹、只烧瓶安装装置：用铁架台、只十字

7、夹、只烧瓶夹、根乳胶管和套索氏提取仪来安装装置。夹、根乳胶管和套索氏提取仪来安装装置。注意按照注意按照由下而上的顺序来安装由下而上的顺序来安装。固定点分别固定点分别是平底烧瓶的颈部和提取管的颈部是平底烧瓶的颈部和提取管的颈部，索氏提取，索氏提取仪的高度以平底烧瓶的瓶颈略高于恒温水浴锅仪的高度以平底烧瓶的瓶颈略高于恒温水浴锅的液面为宜。注意：用烧瓶夹夹玻璃仪器时，的液面为宜。注意：用烧瓶夹夹玻璃仪器时，要先用手找好感觉，不能太紧（否则会夹破）要先用手找好感觉，不能太紧（否则会夹破）也不能太松（否则会打滑而导致索氏提取仪的也不能太松（否则会打滑而导致索氏提取仪的标准磨口接口漏气）。标准磨口接口漏气

8、）。 5.其它器材：其它器材： l不锈钢镊子、药勺、不锈钢镊子、药勺、滤纸、铁架台、十字滤纸、铁架台、十字夹、烧瓶夹、手套、夹、烧瓶夹、手套、乳胶管。乳胶管。 四、实验试剂四、实验试剂l称取称取10201020克样品。克样品。l将样品在将样品在8080100100电热鼓风干燥箱内电热鼓风干燥箱内烘去水分，一般烘烘去水分，一般烘4h4h，烘干时要避免过，烘干时要避免过热。样品颗粒不宜太大，一般要在研钵热。样品颗粒不宜太大，一般要在研钵中研碎样品。样品若是液体，应将一定中研碎样品。样品若是液体，应将一定体积的样品滴在滤纸上，在体积的样品滴在滤纸上，在60608080电热鼓风干燥箱内烘干后，再进行实

9、验。电热鼓风干燥箱内烘干后，再进行实验。l乙醇乙醇 五、实验操作五、实验操作l准备工作：将恒温水浴锅的水温事先加热（准备工作：将恒温水浴锅的水温事先加热（8080）。务必保证提取管和烧）。务必保证提取管和烧瓶内干燥、洁净；若否，将其洗净并置于干燥箱内瓶内干燥、洁净；若否，将其洗净并置于干燥箱内120120烘干。烘干。 l折滤纸斗：取一张折滤纸斗：取一张11cm11cm的滤纸，折成筒状，再将其一端折起来封死，便的滤纸，折成筒状，再将其一端折起来封死，便做成了滤纸斗。做成了滤纸斗。l称样：取干燥的姜黄粉作为实验样品。将滤纸斗在电子天平上称重，然后称样：取干燥的姜黄粉作为实验样品。将滤纸斗在电子天平

10、上称重，然后用药勺取样品装入滤纸斗中，把滤纸斗的开口处折起来封死；防止样品泄用药勺取样品装入滤纸斗中，把滤纸斗的开口处折起来封死；防止样品泄出滤纸斗。出滤纸斗。调整滤纸斗的高度，使其放在抽提管中时略低于虹吸管的上弯调整滤纸斗的高度，使其放在抽提管中时略低于虹吸管的上弯头处。头处。将装好样品的滤纸斗放在电子天平上称重，两质量之差即为样品的将装好样品的滤纸斗放在电子天平上称重，两质量之差即为样品的质量。质量。 提取：将索氏提取仪从下至上安装。首先安装好烧瓶，并调整提取：将索氏提取仪从下至上安装。首先安装好烧瓶，并调整其高度，使其刚好能浸入水浴锅中的水中。将装置从水浴锅的其高度，使其刚好能浸入水浴锅

11、中的水中。将装置从水浴锅的水中取出，继续安装提取管，把装有样品的滤纸斗放入提取管水中取出，继续安装提取管，把装有样品的滤纸斗放入提取管内，向提取管中缓缓倒入乙醇直至液面达到虹吸管上弯头部，内，向提取管中缓缓倒入乙醇直至液面达到虹吸管上弯头部，正好虹吸一次；再向提取管中倒入乙醇，使其液面达到第一次正好虹吸一次；再向提取管中倒入乙醇，使其液面达到第一次液面的一半。用乳胶管将冷凝管与自来水管相连，将冷凝管安液面的一半。用乳胶管将冷凝管与自来水管相连，将冷凝管安装到提取管上，检查一下，确保所有接口均对接完好（不漏气，装到提取管上，检查一下，确保所有接口均对接完好（不漏气，不打滑）。轻轻打开自来水（冷凝

12、用），将索氏提取仪整个装不打滑）。轻轻打开自来水（冷凝用），将索氏提取仪整个装置放入恒温水浴锅中加热提取（水温置放入恒温水浴锅中加热提取（水温9090左右。提取时间左右。提取时间2 24h4h，约虹吸约虹吸2020次以上，记录每次虹吸所需的时间和虹吸次数。次以上，记录每次虹吸所需的时间和虹吸次数。附注：附注：若要将样品的姜黄素提取完全，提取时间至少为若要将样品的姜黄素提取完全，提取时间至少为12h12h以上。由于以上。由于实验时间的限制，我们的提取率只能达到实验时间的限制，我们的提取率只能达到9090左右。左右。 回收乙醇：提取回收乙醇：提取2h2h后，当乙醇在提取管中的液面后，当乙醇在提取管

13、中的液面即将达到虹吸管的上弯头处时，从水浴锅中取出即将达到虹吸管的上弯头处时，从水浴锅中取出索氏提取仪装置，让乙醇虹吸而流入瓶中，取下索氏提取仪装置，让乙醇虹吸而流入瓶中，取下回流管，取出滤纸桶及姜黄粉，继续放入恒温水回流管，取出滤纸桶及姜黄粉，继续放入恒温水浴锅中加热回收乙醇（取下平底烧瓶，回收提取浴锅中加热回收乙醇（取下平底烧瓶，回收提取管中的乙醇）直至冷凝管下端无乙醇滴下，表明管中的乙醇）直至冷凝管下端无乙醇滴下，表明平底烧瓶中的乙醇已经蒸干。注意：必须蒸干后平底烧瓶中的乙醇已经蒸干。注意：必须蒸干后才能放入干燥箱烘干，否则会引起火灾。才能放入干燥箱烘干，否则会引起火灾。称量粗浸膏质量：

14、将平底烧瓶放入称量粗浸膏质量：将平底烧瓶放入120120的电热的电热鼓风干燥箱中烘鼓风干燥箱中烘15min15min，取出冷却后称重（须戴，取出冷却后称重（须戴手套，以免烫伤）。添加适量乙醇溶解后加入适手套，以免烫伤）。添加适量乙醇溶解后加入适量硅胶粉，将烧瓶放入热水中让乙醇蒸发，到处量硅胶粉，将烧瓶放入热水中让乙醇蒸发，到处干粉。再将平底烧瓶用洗涤剂洗净，于干粉。再将平底烧瓶用洗涤剂洗净，于120120的的电热鼓风干燥箱中烘干（约电热鼓风干燥箱中烘干（约15min15min），取出冷却），取出冷却后称重，两者的质量之差就是粗浸膏的质量。后称重，两者的质量之差就是粗浸膏的质量。 l 清洁清洁

15、从提取管中取出滤纸斗，清洗提从提取管中取出滤纸斗，清洗提取管，整理好桌面上的仪器和试剂，并取管，整理好桌面上的仪器和试剂，并注意清洁自己的操作台，请老师验收注意清洁自己的操作台，请老师验收。 l 计算计算 样品粗浸膏的含量（样品粗浸膏的含量（% %）= =（粗浸（粗浸膏的质量膏的质量/ /样品的质量）样品的质量）* *100% 100% 索氏提取仪示意图索氏提取仪示意图 记录与计算汇总记录与计算汇总 虹吸次数 12345678910虹吸时间滤纸斗质量 （g） 滤纸斗+样品质量（g） 样品质量（g） 烧瓶+粗浸膏质量（g） 烧瓶质量（g） 粗浸膏质量（g） 虹吸时间（min） 提取次数 样品中粗

16、浸膏的含量（%） 计算公式X=(m1-m2)/m100式中：X-样品中粗脂肪的质量分数,%; m-样品的质量,g; m0 -脂肪烧瓶的质量,g;m1 -脂肪和脂肪烧瓶的质量,g.样品的质量m/g脂肪烧瓶的质量m0/g脂肪和脂肪烧瓶的质量m1/g第一次 第二次第 三次恒 重值思考题思考题1.简述索氏抽提器的提取原理及应用范围？2.潮湿的样品可否采用乙醚直接提取？为什么？答：不可以，乙醚会溶解水，把水带入脂层中，会影响乙醚的渗透与提取效果。3.使用乙醚作脂肪提取溶剂时，应注意的事项有哪些？为什么？答：乙醚是易燃，易爆物质，应注意通风并且不能有火源。乙醚若放置时间过长，会产生过氧化物。过氧化物不稳定，当蒸馏或干燥时会发生爆炸，故使用前应严格检查，并除去过氧化物。检查方法：取5mL乙醚于试管中，加KI(100g/L)溶液1mL，充分振摇1min。静置分层。若有过氧化物则放出游离碘，水层是黄色（或加4滴5 g/L淀粉指示剂显蓝色），则该乙醚需处理后使用。去除过氧化物的方法：将乙醚倒入蒸馏瓶中加一段无锈铁丝或铝丝，收集重蒸馏乙醚。4.影响萃取的萃取效率的因素？答：物质的性质、物料与溶剂的比例、时间、温度、浓度、萃取剂与被萃取物的溶解度差值等因素有关。5.为什么包装试样的滤纸的上部不能高