结核分枝杆菌耐药检测技术选择——分子线形探针方法

1、结核分枝杆菌耐药检测技术选择结核分枝杆菌耐药检测技术选择分子线形探针方法分子线形探针方法 2 结核病患者感染的结核分枝杆菌体外被证实至少对异烟肼/利福平耐药MDR-TB 耐药型TB的特殊形式，由于结核分枝杆菌对异烟肼、利福平、任何氟喹诺酮类，以及可注射的抗TB药物卡那霉素、卷曲霉素、阿米卡星、链霉素中的至少1种有耐药性XDR-TB3耐药结核分枝杆菌机制耐药结核分枝杆菌机制基因突变结核分枝杆菌产生耐药性的主要原因药物外排泵的影响结核分枝杆菌细胞壁结构的改变4耐药产生的主要原因耐药产生的主要原因微生物上，耐药性是基因突变引起药物对突变株的效力降低造成的。临床及管理上，不足够的或不恰当的治疗导致结核

2、病患者体内的耐药突变株变成优势株。520122012年年TBTB流行情况流行情况 全球（Global Tuberculosis Report 2013） TB约有860万 MDR-TB：45万 3.6%新发结核病，20%复治结核病患者 XDR-TB：约有9.6%MDR-TB 中国（Tuberculosis profile in China, 2013） TB：90万 MDR-TB：6万620122012中国中国MDR-TBMDR-TB流行情况流行情况Tuberculosis Profile in China, 2012/sree/Reports?o

3、p=Replet&name=%2FWHO_HQ_Reports%2FG2%2FPROD%2FEXT%2FTBCountryProfile&ISO2=CN&LAN=EN&outtype=pdf7中国耐药流行情况中国耐药流行情况 中国，异烟肼耐药率位居第一。中国，异烟肼耐药率位居第一。全国第五次结核病流行病学抽样调查资料汇编8中国耐药流行情况中国耐药流行情况中国单耐药中，单耐异烟肼的患者最多中国单耐药中，单耐异烟肼的患者最多910中国卫生部中国卫生部1. 2009年，中国卫生部疾病预防控制局和梅里埃基金会在京联合举办了“耐多药结核病诊断技术研讨会” (主要邀请各地疾

4、病预防控制中心)2.2. 分别于分别于20072007年和年和20122012年年与卫生部签署了结核病防控项目11中盖项目中盖项目12耐多药结核鉴定药敏分子检测系统的选择耐多药结核鉴定药敏分子检测系统的选择利福平检测不能替代MDR检测中国是TB和MDR-TB高负担国家；异烟肼耐药率居首耐多药快速诊断需要同时对异烟肼和利福平进行耐药检测WHO 政策声明政策声明有充分的总括性证据证明关于在国家特定情况下快速有充分的总括性证据证明关于在国家特定情况下快速筛查筛查MDR-TB使用线性探针方法的建议的合理性。使用线性探针方法的建议的合理性。“14耐多药结核分枝杆菌快速药敏检测耐多药结核分枝杆菌快速药敏检

5、测HAINHAIN GenoTypeGenoType MTBDR MTBDRplusplusGenoType MTBDRplus：一种基于：一种基于DNA STRIP 技术的线性探针方法。技术的线性探针方法。WHO推荐：参比级和地方级选择线性探针方推荐：参比级和地方级选择线性探针方法应用于较高级别的专业实验室。法应用于较高级别的专业实验室。2021-12-11151617LPA基本原理基本原理 预先标记的扩增产物被固定在硝化纤维试纸条上的DNA探针所捕获，并使用比色法检测后，结果以线性条带形式显现18耐多药结核分枝杆菌快速药敏检测耐多药结核分枝杆菌快速药敏检测GenoGenoType MTBD

6、R MTBDRplusplus 基于线形探针技术 （2008年WHO认可） 简便快捷，6小时得到结果 样本要求: 固体或液体培养物; 临床痰标本 与传统药敏检测结果相比，符合率较高2021-12-1119GenoType MTBDRplus 检测结果检测结果 快速检测结核分枝杆菌复合群（MTBC） 检测利福平和/或异烟肼的耐药性（单耐或MDR） 检测异质性耐药20 HAIN 试剂盒试剂盒21GenoType - DNA STRIP 技术技术2021-12-112122 杂交仪（手工杂交仪（手工,12条）条）TwinCubator TwinCubator （可做（可做1212个条）个条）23 杂

7、交仪（全自动杂交仪（全自动,48条）条）24GenoType 系列产品可在同一平台（基于同一种技术DNASTRIP 技术）完成：6种MTBC和30种NTM鉴定，MDR-TB和XDR-TB药敏检测。GenoType MTBDRplus是Genotype系列产品之一，是一种可同时鉴定MTBC和检测RFP和/或INH耐药情况的分子遗传学方法。2021-12-112425 世界卫生组织在南非、印度及俄罗斯这些结核病高发区，对比评估分子线性探针与传统方法 结果显示分子线性探针对涂阳标本的灵敏度和特异性高于97%和98%，肯定了快速检测对控制耐多药结核传播的价值。 分子线性探针虽然未能完全取代传统培养，特

8、别涂阴标本必须做培养，但这种新技术大缩短等候的时间、省略繁琐的操作流程，并提高了检测中的生物安全性。26快速检测方法与传统方法对比快速检测方法与传统方法对比传统法快速法实验方法PNB/TCH鉴别比例法/绝对浓度法药敏实验GenoType MTBDRplus样本要求固体培养物固体培养物涂阳标本或培养物（固体/液体）功 能鉴别MTB、M.bovis和NTM一二线药物耐药情况同时鉴定MTBC和利福平和/或异烟肼耐药情况，可确定是否为单耐或MDR时 间4-8周4-8周6小时工作强度较大大，一般8种药物最多可以完成30个样本/人/天小，Twincubator是12份样本规格，全自动GT Blot48是48跟样品规格结果判读BSL3/2，肉眼读取菌落数BSL3/2，肉