芳香胺类药物的分析

1、会计学1芳香胺类药物的分析芳香胺类药物的分析第1页/共20页R1HNCOOR21. 芳伯氨基芳伯氨基：重氮化偶合反应；与芳醛缩合成：重氮化偶合反应；与芳醛缩合成SchiffSchiff碱；易氧化变色等碱；易氧化变色等2. 水解水解：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因BABA，其余药物，其余药物PABAOCH2CH2N(C2H5)2NHCH2CH2N(C2H5)2()3. 弱碱性弱碱性：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂滴定：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂滴定4. 溶解性溶解性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸：游离碱，油状液

2、体或低熔点固体难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。化学性质化学性质 ()苯佐卡因苯佐卡因(benzocaine),盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因(procaine hydrochloride),盐酸丁卡因盐酸丁卡因(tetracaine hydrochloride).1. 对氨基苯甲酸酯类对氨基苯甲酸酯类第2页/共20页R3R4R1NHCOR2HONHCOCH3SNHCOCH3OOH3COCHNCH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HCl H2OCH3CH3NHCONC4H9HC

3、lparacetamol acedapsonelidocaine hydrochloride1. 水解水解2. 醋酸醋酸 乙醇乙醇/ /硫酸硫酸 醋酸乙酯醋酸乙酯3. 对乙酰氨基酚三氯化铁对乙酰氨基酚三氯化铁4. 弱碱性：叔胺氮原子生物沉弱碱性：叔胺氮原子生物沉淀剂淀剂沉淀沉淀5. 酰胺氮原子与金属离子络合显色酰胺氮原子与金属离子络合显色bupivacaine hydrochloride结结 构构 ()化学性质化学性质 ()对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚(paracetamol),醋氨苯砜醋氨苯砜(acedapsone),盐酸利多卡因盐酸利多卡因(lidocaine hydrochloride),盐

4、酸布比卡因盐酸布比卡因(bupivacaine hydrochloride).(共性共性)(特性特性)第3页/共20页H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HClH2NCONHCH2CH2N(C2H5)2HClNHCOCH3HOH3COCHNSOONHCOCH3C OO C2H5H2N潜在芳伯氨基潜在芳伯氨基：对乙酰氨基酚、醋氯苯砜：对乙酰氨基酚、醋氯苯砜 盐酸或硫酸加热水解盐酸或硫酸加热水解 NaNO2/HCl 碱性碱性-萘酚萘酚 有色偶氮染料（红色）有色偶氮染料（红色）区别盐酸丁卡因区别盐酸丁卡因：COOCH2CH2N(CH3)2C4H9HNHNO2+COOCH2CH2N(CH3)2C4

5、H9NNO+H2O（乳白色）（乳白色）（一）重氮化偶合反应（一）重氮化偶合反应第4页/共20页3+FeCl3NHCOCH3OHNHCOCH3O3Fe+3HCl（蓝紫色）（蓝紫色）（三）与金属离子反应（三）与金属离子反应1. 与铜和钴离子反应与铜和钴离子反应 （具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因）（具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因） 硫酸铜硫酸铜/碳酸钠试液碳酸钠试液蓝紫色配合物蓝紫色配合物 氯化钴氯化钴/酸性溶液酸性溶液亮绿色细小钴盐沉淀亮绿色细小钴盐沉淀显黄色（溶于氯仿）显黄色（溶于氯仿）2. 羟肟酸铁盐反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因胺）羟肟酸铁盐反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因

6、胺） 浓过氧化氢浓过氧化氢/ /加热至沸加热至沸 羟肟酸羟肟酸 三氯化铁三氯化铁 羟肟酸铁羟肟酸铁（紫红色）（紫红色）3. 与汞离子反应与汞离子反应 芳酰胺类，如盐酸利多卡因芳酰胺类，如盐酸利多卡因 硝酸汞硝酸汞/ /硝酸，煮沸硝酸，煮沸 对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因 硝酸汞硝酸汞/ /硝酸，煮沸硝酸，煮沸黄色黄色红色红色或或橙黄色橙黄色第5页/共20页鉴别试验 (第6页/共20页药物药物溶剂溶剂浓度浓度(g/mL)max(nm)备注备注对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚HCl(10.3g/L)-甲醇甲醇(1:99)0.4%NaOH10249860980BP2003, 825

7、7715Chp2005用于含量测定用于含量测定苯佐卡因苯佐卡因氯仿氯仿278USP24与对照吸收相同，与对照吸收相同，两者之差不超过两者之差不超过3.0%盐酸丁卡因盐酸丁卡因pH6磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液10310同上，两者之差不超过同上，两者之差不超过2.0%盐酸普鲁卡因胺盐酸普鲁卡因胺0.1mol/L NaOH10273580610BP2003水水5280Chp2005，片剂和注射，片剂和注射剂鉴别剂鉴别醋氨苯砜醋氨苯砜无水乙醇无水乙醇5256，284Chp2005%11cmE鉴别试验 (第7页/共20页NH2CO O CH2CH2N(C2H5)2HCl盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因 盐酸普鲁卡

8、因胺盐酸普鲁卡因胺NH2CONHCH2CH2N(C2H5)2HCl 波数波数cm-1 波数波数cm-1 鉴别试验 (酯羰基酯羰基C=O 1692 酯基酯基C-O 1271, 1170, 1115 二乙胺盐二乙胺盐N-H 2585 2645（略向高波数）（略向高波数） 1550（ N-H 酰胺酰胺带）带） 1280（ N-H酰胺酰胺带带 ）第8页/共20页N O2C lN aOH 水 解N O2OHFe, HC lN H2OHC2H5O H, 乙 酰 化（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质工艺：工艺：对乙酰氨基酚对乙酰氨基酚的有色氧化产物的有色氧化产物乙醇溶液的澄清度与颜

9、色乙醇溶液的澄清度与颜色：中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色：中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色。（比浊，比色）或棕色。（比浊，比色）有关物质：有关物质：中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）药典规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，药典规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，TLC限度检查。限度检查。对氨基酚的检查对氨基酚的检查特殊杂质检查 第9页/共20页Na2Fe(N O )(CN )5 +H2O

10、Na2Fe(C N)5H2O +N ONa2Fe(C N)5H2O H2NO H+H2N2(NC)5FeNa2OH +H2O 取本品取本品1.0g，加甲醇溶液（，加甲醇溶液（12）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液氰化钠试液1ml，摇匀，放置，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对加对氨基酚氨基酚50g用同一方法制成的对照液比较，不得更深（用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005%）。）。注：对氨基酚对照溶液不稳定，应临用前新鲜配制。注：对氨基酚对照溶液不稳定，应临用前新鲜配制。特殊杂质检查 Na2Fe(

11、N O)(CN )5 +H2ONa2Fe(C N)5H2O +N ONa2Fe(C N)5H2O H2NO H+第10页/共20页水解产物对氨基苯甲酸，不得超过水解产物对氨基苯甲酸，不得超过1.2%。TLC法，对氨基苯甲酸对照品对照，对二甲氨基苯甲醛法，对氨基苯甲酸对照品对照，对二甲氨基苯甲醛溶液显色。溶液显色。黄色黄色H2NCOOCH2CH2N(C2H5)2HClH2NCOOHH2N-CO2OOO水解特殊杂质检查 第11页/共20页容量分析方法色谱法分光光度法亚硝酸钠滴定法非水溶液滴定法含量测定 第12页/共20页亚硝酸钠滴定法Ar-NHCOR+H2OH+Ar-NH2+RCOOHAr-NH2

12、+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O原理：原理：条件：条件：1、加入适量溴化钾加快反应、加入适量溴化钾加快反应 2、加入过量盐酸、加入过量盐酸1:2.563、室温、室温10 30 4、滴定管尖端插入液面下滴定、滴定管尖端插入液面下滴定终点指示方法：终点指示方法：1、永停法、永停法2、外指示剂法（碘化钾淀粉）、外指示剂法（碘化钾淀粉）第13页/共20页非水溶液滴定法 CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HCl +Hg(Ac)2CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HAc+HgCl222CH3CH3NHCOCH2N(C2H5)2HAc+HAcCH3CH3NHCOC

13、H2N(C2H5)2HClO4+HClO4侧链烃胺的叔胺氮侧链烃胺的叔胺氮侧链哌啶环的叔胺氮侧链哌啶环的叔胺氮弱碱性弱碱性注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰盐酸丁卡因加醋酐以突出终点；盐酸丁卡因加醋酐以突出终点；例例：盐酸利多卡因的非水滴定反应过程：盐酸利多卡因的非水滴定反应过程：指示剂：结晶紫指示剂：结晶紫指示剂：萘酚苯甲醇指示剂：萘酚苯甲醇盐酸布比卡因盐酸布比卡因第14页/共20页%11cmE【含量测定含量测定】 取本品约取本品约40mg，精密称定，置，精密称定，置250ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%氢氢氧化钠溶液氧化钠溶液50ml溶

14、解后，加水至刻度，摇匀，精密量取溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，至，至100ml量瓶中，加量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照紫外可，加水至刻度，摇匀，照紫外可见分光广度法（药典见分光广度法（药典Chp2005版附录版附录A），在），在257nm的波长处测定吸的波长处测定吸光度，按光度，按C8H9NO2的吸收系数（的吸收系数（ ）为）为715计算，即得。计算，即得。%11cmE例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂第15页/共20页快速荧光测定 盐酸普鲁卡因胺结构中的芳伯

15、氨基与荧胺反应，生成荧光物，盐酸普鲁卡因胺结构中的芳伯氨基与荧胺反应，生成荧光物， 可在可在400nm、485nm波长处测定荧光强度波长处测定荧光强度 较重氮化法灵敏、简便，适用于普鲁卡因胺制剂的测定。较重氮化法灵敏、简便，适用于普鲁卡因胺制剂的测定。第16页/共20页测定方法测定方法（供试品溶液、对照品溶液的（供试品溶液、对照品溶液的制备，进样量，计算方法）制备，进样量，计算方法）第17页/共20页色谱条件：色谱条件：Nova-PackC18柱（柱（4m, 150mm3.9mm），），Nova-PackC18预柱预柱柱温：柱温：25，流动相为甲醇水（，流动相为甲醇水（50:50）流速：）流速

16、：0.8ml/min二极管阵列检测器，检测波长二极管阵列检测器，检测波长254nm血浆样品制备：血浆样品制备：取静脉血取静脉血34ml，置含肝素抗凝剂的离心管中，离心分离，置含肝素抗凝剂的离心管中，离心分离5min (3000rpm)，上清液为待测血浆。吸取上述血浆，上清液为待测血浆。吸取上述血浆1ml，加饱和，加饱和硫酸锌溶液硫酸锌溶液1ml，沉淀蛋白后，加入乙醚，沉淀蛋白后，加入乙醚5ml涡旋混合涡旋混合1min，离心，离心20min(3000rpm)。精密吸取乙醚液。精密吸取乙醚液3.0ml于于50 氮气流吹干，冷氮气流吹干，冷至至室温，以蒸馏水室温，以蒸馏水500l溶解残渣，取溶解残渣

17、，取10l进样。进样。对照品溶液的制备：对照品溶液的制备：配制对乙酰氨基酚甲醇溶液（配制对乙酰氨基酚甲醇溶液（10mg/ml），并用甲醇逐），并用甲醇逐级稀释成浓度为级稀释成浓度为0.01mg/ml5mg/ml的对照品溶液，的对照品溶液，4 冰箱存放冰箱存放备用。备用。第18页/共20页3+FeCl3NHCOCH3OHNHCOCH3O3Fe+3HCl（蓝紫色）（蓝紫色）（三）与金属离子反应（三）与金属离子反应1. 与铜和钴离子反应与铜和钴离子反应 （具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因）（具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因） 硫酸铜硫酸铜/碳酸钠试液碳酸钠试液蓝紫色配合物蓝紫色配合物 氯化钴氯化钴/酸性溶液酸性溶液亮绿色细小钴盐沉淀亮绿色细小钴盐沉淀显黄色（溶于氯仿）