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文档简介
1、会计学1CLBIII四通道残留农药测定仪使用说明四通道残留农药测定仪使用说明 有机磷和氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂的特点。两类农药的作用机理均为抑制动物体内乙酰胆碱酯酶的活性,破坏神经传导,引起一系列的神经中毒症状,直至死亡。二者的主要区别在于:有机磷类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是不可逆的,而氨基甲酸酯类杀虫、杀螨剂对乙酰胆碱酯酶的抑制是可逆的 。第1页/共45页 酶抑制率法和酶系酶源:国家标准GB/T 5009.199-2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测推荐的酶抑制率法能方便、快速、准确、成本低廉检测出农产品中的农药残留,也同时肯定了乙酰胆碱酯酶酶系作为快速检测推荐试剂
2、的活性量和具体要求。近年来,我们通过对动物源和植物源的多种丁酰胆碱酯酶、乙酰胆碱酯酶进行检测实验和比较研究,发现乙酰胆碱酯酶对农药的检测敏感度和综合指标优于丁酰胆碱酯酶;确定了有机磷和氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酸有较专一性的抑制作用;分析出在抑制率70%以下,大多数农药浓度和乙酰胆碱酯酶抑制率呈较好的线性关系,并能实现对单种农药的定量分析;解决了酶的活性和稳定性控制等技术 第2页/共45页 什么是间接比色法:由于只有当底物与产物之间,在光学性质或其它理化性质有显著差异时,才可能直接用分光光度计法测定,因此对酶活性浓度的监测大多是采用间接监测法。如对胆碱酯酶的测定:底物(硫代乙酰胆碱)及酶水解产
3、物(硫代胆碱和乙酸)并不具有颜色,不能用分光光度计法测定。所以必须设法在原来反应体系中添加一些试剂,这些试剂必须不与酶作用也不影响酶活性,同时又能与酶反应物迅速作用,产生可以被直接测定的物质。这就产生了Ellman的胆碱酯酶测定法即间接连续监测法。目前国内大多厂家生产的快速农药测定仪都采用了 Ellman的胆碱酯酶测定法即间接比色法。该方法通过监测底物(硫代乙酰胆碱),酶水解产物硫代胆碱与添加的二硫代硝基苯甲酸(DTNB)作用立刻生成黄色化合物的反应速度来测定酶活性变化。第3页/共45页 什么是固定时间法:早期这类方法常被命名为“终点法”、“二点法”、“固定时间法”和“取样法”。该方法先选择一
4、段固定的时间(固定为3分钟),先让酶与底物在一定温度下进行一段固定的时间(固定为3分钟)的化学反应,并根据呈色测出底物和产物的变化用比色法对反应结果进行评定。由于“二点法”容易受到干扰,并产生误差,使检测稳定性较低。 第4页/共45页 什么是连续监测法:50年代,Warburg首先用分光光度计测定酶的活性。该方法不需停止酶反应就可测定反应物的变化,容易观察到反应的整个过程和干扰情况(通过绘制反应曲线)。因此逐步取代了固定时间法成为目前测酶活性的主要方法。该方法是利用连续对反应过程进行高灵敏度检测,并通过绘制整个酶反应曲线避开延滞期和非线性反应期,只在线性反应期测定最大反应初速度。由于仪器的高精
5、密度,连续监测法能在很短时间,甚至在1分钟反应时间内就能准确测定出活性的抑制率。 第5页/共45页CL-BIII四通道残留农药测定仪的技术指标:四通道残留农药测定仪的技术指标: 测量波长:410nm 通道数:4 检测用样品器皿:10mm比色皿 光电流漂移:1% (3min) 暗电流漂移:1% (3min) 抑制率显示范围:0-100% 抑制率测量范围:10-100% 农药检测:(用甲胺磷农药标样测试) 抑制率示值误差:10 % 抑制率重复性误差: 5 % 第6页/共45页目目 录录第7页/共45页第8页/共45页酶试剂酶试剂ml提取液,加入酶试剂瓶中。显色剂显色剂:用移液枪取20ml提取液,加
6、入显色剂瓶,溶 解后倒入棕色瓶中。底底 物物ml蒸馏水,加入底物瓶中。第9页/共45页返回目录第10页/共45页第11页/共45页第12页/共45页第13页/共45页第14页/共45页第15页/共45页安装完成桌面上出现的图标第16页/共45页检测软件登陆第17页/共45页调0、调100空白对照样品分析第18页/共45页注:以上是一个检测窗注:以上是一个检测窗口的步骤,其他三个窗口的步骤,其他三个窗口都是如此。口都是如此。 等待10-15秒 按“确定” 放入黑块 等待10-15秒 按“确定” 拿出黑块 按“ ”键按“ ”键按“ ”键 按“ ”键第19页/共45页用小移液枪取用小移液枪取0.1m
7、l酶试剂加入试管中酶试剂加入试管中 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中显色剂加入试管中 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml底物加入试管中底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池放入比色池 按按“开始对照分析开始对照分析”键键 等待对照结束等待对照结束 ml提取液放入试管中提取液放入试管中第20页/共45页按“装入对照分析”键选择所需对照选择需要装入对照的通道号(在通道号码前) 按“读取”键完成装入工作 注:对照结束后,对照曲线会自动注:对照结束后,对照曲线会自动保存保存. . (标准对照库中已有(标准对照库中已有3030种蔬种蔬菜的对照,在做这菜的对
8、照,在做这3030种蔬菜时,请种蔬菜时,请参照这些对照。)参照这些对照。) 第21页/共45页按“装入对照分析”键选择所需的空白对照和相应的样品修正值选择需要装入对照的通道号(在通道号码前) 按“读取”键完成装入工作 第22页/共45页用天平称取1克果蔬剪成2cm见方 放入烧杯中,用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置15分钟(或震荡1分钟) 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中静置15分钟 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“开始样品分析”键 等待检测结
9、果 第23页/共45页第24页/共45页样品结束后,系统自动弹出“检测结果”对话框 选择该通道所测蔬菜名 填写(选择)检测单位 按“退出”键 填写(选择)被检单位和生产单位 按“保存”键,保存检测结果 第25页/共45页返回目录第26页/共45页第27页/共45页第28页/共45页第29页/共45页通道选择日期设置第30页/共45页第31页/共45页调0、调100空白对照样品分析第32页/共45页第33页/共45页用小移液枪取用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中酶试剂加入试管中 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中显色剂加入试管中 用小移液枪取用小移液枪取0.1ml底物加入试管
10、中底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿迅速摇匀并倒入比色皿 放入第一通道的比色池放入第一通道的比色池 按按“对照对照”键,并选择键,并选择“新建新建” 等待对照结束等待对照结束 ml提取液放入试管中提取液放入试管中第34页/共45页用天平称取1克果蔬剪成2cm见方 放入烧杯中,用大移液枪抽取5ml提取液加入到烧杯中 静置15分钟 用大移液枪从烧杯中抽取2.5ml浸泡液移至空试管中 用小移液枪取0.1ml酶试剂加入试管中 用小移液枪取0.1ml显色剂加入试管中静置15分钟 用小移液枪取0.1ml底物加入试管中 迅速摇匀并倒入比色皿 放入比色池 按“样品”键 等待检测结果 注:按“样品”键后,四个
11、通道同时进行检测。 第35页/共45页第36页/共45页返回目录按按“打印打印”键键 按按“确定确定”键键 用用/键选择检测数据的编号键选择检测数据的编号 按按“打印打印”键进行打印键进行打印 按按“确定确定”键退出打印状态键退出打印状态 第37页/共45页第38页/共45页1.仪器联机操作的情况下,在检测过程中或者开始检测时,电脑出现“没有检测到指定的设备”,是怎么回事? 一般来说出现这种提示说明您的检测仪与电脑硬件连接出现问题,检查的步骤如下: 第一步、确定检测软件的设备设置中相关设置与硬件连接相匹配; 第二步、电脑串口通讯故障,检测方法:重新启动电脑,确认是否故障依然存在,如果故障依然存
12、在,检查下一步; 第三步、更换一下电脑串口,并在检测软件的设备设置中进行相应的改动,或者换一台电脑,确认故障是否存在,如果故障解决,则表明是电脑本身的问题,否则可进行下一步检查; 第四步、更换RS232485转换器,确认问题是否存在,如果故障解决,则表明为RS232485转换器连接不通。第39页/共45页2.仪器联机操作的情况下,调100时看不到红线是怎么回事? 首先我们要学会看图谱,图谱的横坐标为时间,纵坐标为投射比,我们所所的调100准确的所是指将投射比值调整为100。 图谱在没有拖拉的情况下,最高只能显示到100,如果在调100的过程中,其投射比值大于100,那样就看不到红线了,但图谱右
13、边的小白框中有数字显示,你只要正常的调0/100就可以了。 另外,对于小白框内数字,显示的是当前的投射比值。在做对照或调0/100时,小白框内的数字前有一短红线,在做样品时则为短绿线。大家不要把这个短线认为是负号大家不要把这个短线认为是负号。第40页/共45页3.如何检测仪器的重现性? 做一空白对照后,做一个双倍量的样品,然后一分为二做一个双倍量的样品,然后一分为二,先后或同时做检测,即:取2克样品,加10ml提取液浸泡,然后取5mlmlmlml底物做检测,则是检查同一通道的重现性。4.如何添加品种名称? 一般来说有两种添加方法: A.可以在基础数据维护中进行添加。 B.在检测结果弹出是,通过 进行添加。另外,在添加时一定要按“增加”键,填好相关信息后按“保存”完成。 第41页/共45页5.如何升级检测软件? 对于检测软件的升级有两种方法: A.在线升级:打开检测软件并连接因特网,然后在帮助中选择在线升级。 B.本地升级:执行新版检测软件的安装程序,选择“修复或升级”项,然后按照提示完成安装即可。6.如何上传数据? 上传数据有三个步骤: 1)打开“设备”菜单中的“系统选项”,并将注册ID号和ID密码填写好; 2)打开“统计汇总”菜单中的“农残检测数据查询统计”,通过查询项将需要上传的数据查询出来; 3)按“上传”键完成上传数据的操作。第42页/共45页返回目录7
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