制药用水中总有机碳测定方法确认方案

1、标题：制药用水中总有机碳测定方法确认方案起草：_ 日期： _ 初审：_ 日期：审核：_ 日期：批准：_ 日期：分发部门：生效日期：质量保证部负责人：变更历史记录：文件名称文件编码生效日期变更原因制药用水中总有机碳测定方法确认方案V-MV 0529 00-PN/A 起草目录1背景和目的 . 32人员及职责 . 33定义 . 34验证总则 . 35参考文献 . 56实施方案 . 56.1验证前准备 . 56.2操作 . 67偏差处理 . 87.1偏差记录 . 87.2偏差处理跟踪 . 8附表 1 人员确认 . 9附表 2 文件确认 . 10附表 3 材料检查 . 11附表 4 设备检查 . 12附

2、表 5 实验记录 . 13附表 6 偏差跟踪表 . 17附表 7 偏差记录表 . 181背景和目的本方案是对制药用水中总有机碳检测法标准操作规程（TES ME 063）进行方法的系统适用性、线性、准确度、重复性等参数的确认。通过确认实验以确认该检测方法对总有机碳含量在 0.05 mg/L4.00 mg/L 范围的样品可以进行准确可靠的测定。2人员及职责内 容人员责任验证执行小组负责人负责协调 QC、QA、 生产部参与验证时的工作。验证执行小组成员负责提供收获液负责验证方案的实施负责监督 QC 是否按照验证方案的实施验证方案的起草人负责起草修订验证方案验证方案的审核人负责验证方案审核验证报告的起

3、草人负责起草修订验证报告验证报告的审核人负责验证报告审核验证方案和报告的批准人负责批准验证方案和验证报告3定义3.1 N/A ：不适用3.2 P&ID ：管道仪表图3.3 TOP：供应商移交文件3.4 NPOC：不可吹出有机碳（ Non-Purgeable Organic Carbon ）3.5 TOC：总有机碳（ Total Organic Carbon ）3.6 POC：吹出有机碳（ Purgeable Organic Carbon ）3.7 IC：无机碳4验证总则4.1 测试对象描述4.1.1本方案主要是对总有机碳含量为0.05 mg/L4.00 mg/L 的一系列已知浓度的蔗糖

4、标准溶液按制药用水中总有机碳检测法标准操作规程（TES ME063）进行测量，考察本检测方法的系统适用性、线性、准确度、重复性。4.1.2选择 0.04mg/L、0.05mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00mg/L、4.00 mg/L、5.00 mg/L 七个浓度的蔗糖标准溶液的样品进行实验，考察其线性；4.1.3选择 0.05mg/L、2.00 mg/L、4.00 mg/L 三个浓度的蔗糖标准溶液的样品进行实验考察其准确度及重复性。4.2 执行测试人员测试前需阅读本方案，然后再进行测试，最后填写测试报告，在各项测试表中说明了各项具体验证测试的执行方法。4.3 良好测试规

5、范在进行测试时，所有记录（含偏差记录）和签字应当使用黑色笔。P&ID 等 TOP 文件的检查采用以下要求：使用黄色荧光笔标记检查过的部分，使用红色笔标记产生的偏差位置。不能使用可掩盖原始文字的修正液或其它修改方法。拼写错误和其他变更应参照如下方法修改。测试报告中没有填写的地方应当清楚的表明“N/A （不适用）”。完成验证后，填写验证报告之前应当检查文档是否正确和完整。4.4 如何填写测试报告测试名称测试步骤所需的文件 /设备验收标准1)合格/不合格 +偏差编号2)备注3)测试人、日期 /签名4)证明人、日期 /签名4.4.1此方框中规定了测试验收标准，如需记录数值，相应填写实际数值以及

6、“合格”或“不合格”。4.4.2若满足验收标准的要求，则填写“pass ”。否则填写“ fail”和“偏差编号”，并详细记录偏差。4.4.3备注用于填写描述说明或其它相关信息，如有偏差，应当填写偏差报告。4.4.4进行测试 /检查的日期以及测试者的签名。如：2010 年 01 月 01 日签字，日期4.4.5验证过程中如供应商（第三方）参与，应当在相应处签名。否则填写“N/A（不适用）”。4.5 偏差处理如果测试结果与验收标准不符，应当填写验证测试的偏差记录表（附表：偏差记录表） 。 每次测试可能不止一项偏差记录， 偏差记录编号采用三位数字， 起始号位 001。每项偏差都在附件：偏差跟踪表中进

7、行登记。5参考文献5.1 岛津国际贸易有限公司，制药用水中总有机碳的检测R.2010. 5.2 王军志 .生物技术药物研究开发和质量控制(第二版 )M. 北京：科学出版社， 2007. 5.3 中华人民共和国药典2010版二部 M. 附录 VIII R 制药用水中总有机碳测定法.北京：中国医药科技出版社， 2010. 6实施方案6.1 验证前准备描述在此次确认前应当完成的工作，包括以下内容：6.1.1人员培训记录见附表 1：人员确认6.1.2材料、设备和文件6.1.2.1文件清单（附表2）6.1.2.2材料清单（附表3）6.1.2.3设备清单（附表4）6.1.3文件检查6.1.3.1核对验证过

8、程中使用或引用的文件，逐项确认，结果记录在附表2中；6.1.3.2合格标准：所有文件均生效且是最新版，并归档。6.1.4材料检查6.1.4.1核对材料清单中的材料，逐项确认，结果记录在附表3 中；6.1.4.2合格标准：所有材料均合格，且能追溯。6.1.5验证用设备检查6.1.5.1核对验证用设备情况，逐项确认，结果记录在附表4 中；6.1.5.2合格标准：验证用设备经过校验。且能追溯。6.2 操作6.2.1方法描述6.2.1.1NPOC 指不可吹出有机碳（如蛋白、糖类等），当样品中的可吹出有机碳（如苯、甲苯、环己烷等）含量很低，可以忽略时，TOC 的浓度就近似等于不可吹出有机碳（ NPOC）

9、浓度，因此，只要通过加酸吹扫，去除样品中的 IC 和 POC，测量 NPOC 的含量，就得到了样品中的TOC 含量。一般来说，自然环境水、公共自来水、超纯水、纯化水、注射用水、清洗过程中 TOC 含量较低的清洁验证样品等POC 浓度很低的样品，应使用NPOC方法进行 TOC 分析1。本实验将对 NPOC 法的系统适用性、线性、准确度、重复性进行验证2。6.2.1.2方法参数：按照TOC-Vwp 总有机碳分析仪操作、维护保养标准操作规程（EQM 059 ）进行参数设定。主要参数设定规定如下图所示：6.2.2 前期准备6.2.2.1总有机碳取样瓶：用F1-高浓缩环保型器具清洁剂10%溶液清洗后，然

10、后用去离子水清洗3 次以上，24 小时内使用，使用前使用样品溶液润洗至少1 次。6.2.2.2总有机碳检查用水：取纯化水或超纯水，检测TOC0.10 mg/L，电导率1.0 S/cm（25 ）即得。6.2.2.3蔗糖对照品溶液贮备液： 除另有规定外， 取经 105 干燥至恒重的蔗糖对照品适量，精密称定 12.0 mg， 用 500 mL 总有机碳检查用水溶解并定容 （每升含碳 10 mg）。6.2.2.41,4-对苯醌对照品溶液贮备液：除另有规定外，取1,4-对苯醌对照品适量，精密称定，精密称定 7.5 mg， 用 500 mL 总有机碳检查用水溶解并定容 （每升含碳 10 mg）。6.2.2

11、.5过硫酸钠氧化剂溶液： 用总有机碳检查用水溶解60 g 过硫酸钠和 15 ml 的磷酸（ 85 %），使用总有机碳检查用水稀释成500 ml 的溶液，即得。6.2.2.6磷酸溶液：在总有机碳检查用水中混合100 ml 的磷酸（ 85 %），然后使用总有机碳检查用水稀释为500ml 的溶液，即得。6.2.3 系统适用性实验6.2.3.1TOC 在进行方法验证时， 应首先对方法的系统适用性进行确认。采用中华人民共和国药典 2010 版二部附录的方法3：取总有机碳检查用水，蔗糖对照品溶液和1，4-对苯醌对照品溶液依法制药用水中总有机碳检测标准操作规程（ TES ME 063）检测，记录响应值，按照

12、下式计算：(rssrw)/(rsrw) 100% 注：rw为总有机碳检查用水的响应值；rs为蔗糖对照品溶液的响应值； rss为 1，4-对苯醌对照品溶液的响应值6.2.3.2结果判断标准根据上式计算所得到的1，4-对苯醌对蔗糖的响应效率值应在85%115%的范围内。6.2.4 线性6.2.4.1实验步骤将总有机碳检查用水及浓度分别为0.04mg/L、0.05mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00mg/L、4.00 mg/L、5.00 mg/L 的蔗糖标准溶液，依法制药用水中总有机碳检测标准操作规程（TES ME 063）检测，将检测所得总有机碳值与其对应的浓度采用直线回归进

13、行线性拟合，计算R2值。6.2.4.2结果判定标准R2应0.999 。6.2.5 准确度6.2.5.1实验步骤：将总有机碳检查用水、0.05mg/L、2.00 mg/L、4.00 mg/L 的蔗糖标准溶液，依法制药用水中总有机碳检测标准操作规程（TES ME063）检测，计算各浓度样品的回收率。6.2.5.2回收率 =% 备注： T：标准溶液测量值； K：总有机碳检查用水测量值；B：标准溶液理论值。6.2.5.3结果判定标准各浓度样品的回收率应在85%115%的范围内。6.2.6 重复性6.2.6.1实验步骤将浓度分别为 0.05mg/L、2.00 mg/L、4.00 mg/L 的蔗糖标准溶液

14、， 依法制药用水中总有机碳检测标准操作规程（TES ME 063）检测，每个浓度的样品进样 6 次，考察不同浓度的样品的TOC 检测值，验证重复性。6.2.6.2结果判定标准单个浓度精密度的RSD 应 2.0%。7偏差处理验证实施过程中所发现的偏差情况、采取的措施、处理以及追踪的结果如下：7.1 偏差记录（记录见附件7：偏差记录表）7.1.1偏差描述7.1.2偏差处理7.1.3偏差处理结果7.2 偏差处理跟踪（记录见附表6）附表 1 人员确认序号姓名公司 /部门签字培训结果备注1pass fail2pass fail3pass fail4pass fail5pass fail6pass fai

15、l7pass fail8pass fail9pass fail10pass fail人员培训记录编号：附表 2 文件确认序号文件名称文件编号存放位置检查结果备注1制药用水中总有机碳检测标准操作规程TES ME063pass fail 2TOC-Vwp 总有机碳分析仪操作、维护保养标准操作规程EQM 059pass fail 3制药用水电导率测定法标准操作规程TES ME013pass fail 4pass fail 5pass fail 6pass fail 7pass fail 8pass fail 9pass fail 10pass fail 11pass fail 12pass fail

16、 13pass fail 检查人 /日期复核人 /日期附表 3 材料检查序号品名批号规格供应商检查结果备注1 蔗糖对照品250mg/瓶Sigam passfail2 1，4-对苯醌对照品0.25g/瓶Ehrenstorfer Qality passfail3 过硫酸钠passfail4 磷酸passfail5 passfail6 passfail7 passfail8 passfail9 passfail10 passfail11 passfail12 passfail13 passfail14 passfail15 passfail16 passfailpassfail检查人 /日期复核人

17、/日期附表 4 设备检查序号设备名称设备编号厂家校验证书编号检查结果备注1 总有机碳检测仪岛津pass fail2 电导率仪梅特勒pass failpass failpass failpass failpass failpass fail检查人 /日期复核人 /日期附表 5 实验记录1设备、试剂1.1仪器1.1.1 总有机碳测定仪，型号：；编号：；1.1.2 电导率仪，型号：；编号：；1.2溶液1.2.1 蔗糖对照品溶液： 精密量取放至室温的蔗糖对照品溶液贮备液（ 批号：有效期至）ml，置于ml 量瓶中，用总有机碳检查用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得；1.2.2 1，4-对苯醌对照品溶液：精密

18、量取放至室温的1，4-对苯醌对照品溶液贮备液（批号有效期至）ml，置于ml 量瓶中，用总有机碳检查用水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。2系统适用性试验：2.1总有机碳检查用水测量结果：2.2分别取总有机碳检查用水、蔗糖对照品溶液和1，4-对苯醌对照品溶液，依次进样，进样量l， 记录仪器响应值。 总有机碳检查用水 （rw） ：， 蔗糖对照品溶液 （ rs） ：，1，4-对苯醌对照品溶液（rss）：。响应效率计算：%100r-rr-rwswss= 2.3合格标准：响应效率应为85 %115 % 。2.4标准曲线：取蔗糖对照品溶液和总有机碳检查用水，按仪器规定方法，记录标准曲线的斜率：；2.5结果判定

19、：系统适用性试验是否通过是否；检验人：复核人：3线性总有机碳检查用水1 2 平均值要求是否符合要求电导率（ s/cm）1.0 S/cm（25 ）是否总有机碳（ mg/L）0.10 mg/L 是否3.1实验步骤：将总有机碳检查用水及浓度分别为0.04mg/L、 0.05mg/L、0.50mg/L、 1.00 mg/L、2.00mg/L、4.00 mg/L、5.00 mg/L的蔗糖标准溶液，依法（制药用水中总有机碳检测标准操作规程）（TES ME 063）检测，将检测所得总有机碳值与其对应的浓度采用直线回归进行线性拟合，计算R2值。3.2实验结果：标准溶液测量值（ mg/L）平均值（mg/L） R

20、SD（ %）总有机碳检查用水1、2、0.04mg/L 蔗糖溶液1、2、0.05 mg/L 蔗糖溶液1、2、0.50mg/L 蔗糖溶液1、2、1.00 mg/L 蔗糖溶液1、2、2.00 mg/L 蔗糖溶液1、2、4.00 mg/L 蔗糖溶液1、2、5.00 mg/L蔗糖溶液1、2、3.3结果判断标准：R2应0.9993.4根据以上数据进行线性拟合，计算实验线性相关系数蔗糖溶液R2= (图 1)。图 1 3.5结果判定：检验人：复核人：4准确度7.2.1.1 实验步骤：将总有机碳检查用水、0.05mg/L、2.00 mg/L、4.00 mg/L的蔗糖标准溶液，依法制药用水中总有机碳检测标准操作规程（TES ME 063）检测，计算各浓度样品的回收率。7.2.1.2 回收率 =% T：标准溶液测量值；K：总有机碳检查用水测量值；B：标准溶液理论值。4.1实验结果标准溶液