纤维素酶纯化方法研究及原生质体制备

1、纤维素酶纯化方法研究及原生质体制备以绿色木霉为材料，经固体发酵得纤维索酶，经过!种处理，得到纯度不同的纤维索酶，用于分离番 茄幼嫩叶片的原牛质体，旨在探讨植物细胞脱壁酶的制备方法和应用效果。!材料与方法! ”!材料绿色木霉：沈阳农业大学生物技术学院生物工程教研室保存菌种。超滤装置：中空纤维膜组件，天津膜天膜工程技术有限公司产品。!”#方法!”护洛种酶活力的测定。纤维素酶活力（“#$）:参照%&，（）*+,.，蒋传葵/01法,2, 3%3酶活力：取适当稀释浓度的酶液456 7*,加含4568!3%3、9:值654的柠檬酸缓冲液856 7*, 64”保温;4 7<以下的测定步骤同”#

2、=测定法。38酶活力：取适当稀释浓度的酶液456 7*,加入856 7*, 9:值 654的缓冲液，加脱脂棉64 7>, ?6”保温2?,以下的测定 步骤同“#=测定法。！“侖j萄糖背酶,;.：用456 a水杨背作底 物（配制在9:值?56,浓度4546 7b*cd柠檬酸缓冲液）,64“ 保温;4 7<采用/01法测定还原糖的生成量，酶活单位 同滤纸酶。半纤维索酶活力,?.：取适当稀释浓度的酶液456 7*,加含456!半纤维素的醋酸缓冲液（9:值?5?） , ?4”保 温86 7< e6a乙醇终止反应，采用地衣酚铜法测定戊糖牛成量。在上述条件下，8生成8#7b*木糖所需酶量

3、定义为8个活力单位。果胶酶活力,6.： /01法测半乳糖醛酸的生成 量。8|1|底物产k*s7b*半乳糖醛酸所需的酶量定义为8 个卿活单位。蛋白卿活力：”b*v，f酚显色法,g, 8分解酪蛋白 产生8$7b*酪氨酸的酶量定义为8个酶活单位。核糖核酸 酶活力：取8 7*酶液，加入8 7*浓度45ha核糖核酸，；1“ 保温84 7<味口|卄亠暄篤膺fl閱侏眾魁!（« 早閤煦隸瞿昌畏衽趴闵劃愀怂艮口閑畋绍 ss檢碳芽却p罔靓疋震列漫口證脳怀邯 溼奁e彖昌却 s眸尖刃'豐 jc 蒋缆耕缺鲂觎冊划录刊斂習馥森口機鵝 敛暫色q谢檄二裂us目锲鐸戈姣聚儀乞（黜鵝鬱劈 缠口（10）-颱

4、 洼吞罢右委瓦笏氛谶显遨口纟巢口 鐡 娼暴己磊 徳口争宅別畚 鎚治 那豈箋 釜 '第口 釈 蕙拉鈕 蟻口鹳口丁 皱紗桓變卩非 製 瞿 舗 楼口 咚仝 駡嶋價嘘口总洩尴 赔 柢独 励恢 口独型世繕口s!戡哉 皴斐暦頻到每 濺館 蹩 垓 苜鄕 费圻沈営因鑒 絵口薛讀4邑鲨 理吾 練20日s 編噓潮口 fflm 饱睡 会口椰鋼閱钓 羿场竿瞰巻证猱丑省口另口樸f無迖寇裕銭召 裁晦晦剤庾昊歷 虽理 趣歪" 盘邑田i菁口 侵藥叙诠劉雲琥扌曼厩 榛罟口事倨目 坤 謹睡坤也涇凹彻少粧姻迸口依或 俑绶扌景口总梯ma禺肪号醫瀾鷲熊悬 釵 宅肱 振 口 陝厉 舍鳏旄瞿含借弩爱來型口 邑铸歿 鎳 欄

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8、釵絶雪科口鳍骆嘤 w岂口 略岂市跪老緡燹蟄雍穌喂黒口 岂幅俞渤報宅契却凰姑殷笺莊齋任洸悲韓林 口 侷權页翌帔 痢麦被魁ii炳口鉢 鷄甥口雹口 口 糕口 種涪翌宰瓜琥列宛醋纹已辿鼎紛轅閩旻旨言a妹呂口3|开均呐討畋豎口焙口長土步 鉛塩 剖济驾皱虱槌嶷口 雪戦 爼寶承删口 « 咨笑 用型圻 gaa u© 口口岂 -a 賤纹歼口鐵型膜 罵o匀低 椀冨 倘嬖鹅烦宓垩号 馭萨笞馥溉空渎濒研鵰昱萄®早测昱婉阻滾俳田綸屈嘉§ 3 5!篇 緩匏口*a鮭舉口幼蒯撕a, u© 昜 蔽噸槁赛飭 开轅涣口矣怵倉昱西鹫畛毁舍山就口 淺景口口1羽弓君俐粽詮橄 書堇遠摇歲

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10、口喟炭!ae u© 昌袭度愿也冀昙g 同粮畏契 容覆雪番疯蓋乙亥沏稔将型口 湃口別口 罢猝榇變潯時逾淪韵匕§ 合汙 最乙h癒炎i昜螂歴竿口己昴口型勒昊口 專淞i口 /eu錨&国和 茨錨潔i u©舀舉邑餘口 據爍此 o謐 虫睪渝 灵或翌 si沱刀开开打也湃殖m糜殿紫加绘.胧®wh夷妳s逼 贸爛體i臾 灿糕宅雪口機警痢口睐悬僅口瘻岂祓寻槽口 契口揑翌杆笏口邊複壟隕晟岂凰駅 魚觥契粛棵燙視罐 語 魅鰭缠（） 驾笏 口 佩囱磊忙帔覘躲溫（id 叩 炎文鍰樸j甌雲畝 裂妄决 口 口了口昱驾密赳翻褪恵銘烦得騙甘韓虬昏紐囑 紙 销族辺变駆疋 i啓窪 搏 呛榊逢

11、鴉碧3 漑幸榆擇錢 冼谚嗖躺役喬大 靈尉虫0刮魁口 揪 頤溥鄂®曉口 a wa疼昼役磊 鉴鍬口 黒參咙邑奔扃远屋綜望苕 昌昌樗岐蒼毁陪» 效 离 三吁懺象r梨匀药型媒昭笏却彖登犁觴資亙墨弄口藝麟力n 一 豕強犁殍劄 奁梔汶椅餘荔勅蹿餵碘檣巳昼 爛 宜口囑 書呼口 碩醯 磊犯住即l © ua 茨 鍍昌却叩錮蛊視漆瑣長礫 鋭鉛涂滝寻己爺秤型呻替漓备雪 炎 sw窶攀契d世峭舎竇昙盎 製瘀骤 歪契k 聖劭曼 玄 美巻遇口 決 i馬口 觎疼 釘:麒 昱妄里倨欲伦兒m w 翌瞿這 口 叙尅口 麽篦 型豔诵宰 樓餌 簣威姑蓋髓澳有厢dz膵坷*衿v 口 満翌 拾 曰cje炫嚏昱x男口 烈口 擁 镇老口眾摹 a *聂£謊慕口 s nu宴口9月次至細口 鹤 惦鳩紀 力咗縫 美昊朋'(u“舀岂 祸勿软 卩吟 马0 突d渉卩占口鸣劃哲翌幅口腫鼎;誓統錦刃言郸 莘口 g 迴養r 口二口宅马h h纟腓 開傳.m