环境分析化学实验指导

1、实验一水中化学需氧量的测定(4学时)一、实验目的和要求掌握化学需氧量的测定原理及方法。二、实验原理化学需氧量的测定是在强酸性溶液中，用一定量的重銘酸钾氧化水样中还原 性物质，过量的重珞酸钾以试亚铁灵作指示剂，用硫酸亚铁镀溶液回滴。根据硫 酸亚铁钱的用量算出水样中述原性物质消耗氧的量。酸性重銘酸钾氧化性很强，可氧化大部分有机物，加入硫酸银作催化剂时， 直链脂肪族化合物可完全被氧化，而芳香族有机物却不易被氧化，毗噪不被氧化, 挥发性直链脂肪族化合物、苯等有机物存在于蒸气相，不能与氧化剂液体接触, 氧化不明显。氯离子能被重珞酸盐氧化，并h能与硫酸银作用产生沉淀，影响测 定结果，故在回流前向水样中加入

2、硫酸汞，使成为络合物以消除干扰。氯离子含 量高于1000mg/l的样品，应先做定量稀释，使其含量降低至1000mg/l以下再行 测定。用0.25mol/l的重铭酸钾溶液可测定cod值大于50mg/l的水样，未经稀释水 样的测定上限是700mg/l,用浓度0.025 mol/l的重珞酸钾溶液可测550mg/l的 cod值，但cod值低于10mg/l时，测量准确度较差。三、实验内容1. 仪器、试剂主要仪器：(1) 回流装置。带250ml锥形瓶的全玻璃回流装置(如取样量在30ml以上，釆用500ml锥 形瓶的全玻璃冋流装置)。(2) 加热装置：变阻电炉。(3) 50ml酸式滴定管。主要试剂：(1)

3、重珞酸钾标准溶液(l/6k2cr07=0.2500mol/l)。称取预先在120°c烘干2h的基准或优级纯重銘酸钾12.258g溶于水中，移入 loooml容量瓶，稀释至标线，摇匀。(2) 试亚铁灵指不液。称取 1.458g邻菲罗咻(c12h8n2 h2o, 1,10-phenanthroline) 0.695g硫酸亚铁 (feso4 7h2o)溶于水中，稀释至100ml,储于棕色瓶内。(3) 硫酸亚铁鞍标准溶液(nh4)2fc(so4)2-6h2o0.lmol/l o称取39.5g硫酸亚铁鞍溶于水屮，边搅拌边缓慢加入20ml浓硫酸，冷却后移 入loooml容量瓶中，加水稀释至标线，

4、摇匀。临用前，用重钻酸钾标准溶液标 定。标定方法如下：准确吸取lo.ooml重路酸钾标准溶液于500ml锥形瓶中，加水稀释至lloml 左右，缓慢加入30ml浓硫酸，混匀。冷却后，加入3滴试亚铁灵指示液(约0.15ml), 用硫酸亚铁钱溶液滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点。厂 0.2500x10.00c =v式屮，c为硫酸亚铁较标准溶液的浓度，mol/l；v为硫酸亚铁较标准滴定溶液的用量，ml o(4) 硫酸硫酸银溶液。于2500ml浓硫酸中加入25g硫酸银。放置12d,不时摇动使其溶解(如无 2500ml容器，可在500ml浓硫酸中加入5g硫酸银)。(5) 硫酸汞：结晶或粉末。

5、2. 实验步骤(1) 取20.00ml混合均匀的水样(或适量水样稀释至20.00ml)置于250ml磨 口的回流锥形瓶中，准确加入lo.ooml重铮酸钾标准溶液及数粒洗净的玻璃珠或 沸石，连接磨口回流冷凝管，从冷凝管上口慢慢地加入30ml硫酸硫酸银溶液， 轻轻摇动锥形瓶使溶液混匀，加热回流2h(自开始沸腾时计时)。注：对于化学需氧量较高的废水样，可先取上述操作所需体积1/10的废水样和试剂, 于15mmxl50mm硬质玻璃试管屮，摇匀，加热后观察是否变成绿色。如溶液显绿色，再适 当减少废水取样量，直到溶液不变绿色为止，从而确定废水样分析时应取用的体积。稀释时, 所取废水样量不得少于5ml,如果

6、化学需氧量很高，则废水样应多次逐级稀释。废水中氯离子含量超过30mg/l时，应先把0.4g硫酸汞加入回流锥形瓶中，再加 20.00ml废水(或适量废水稀释至20.00ml),摇匀。以下操作同上。(2) 冷却后，用90ml水从上部慢慢冲洗冷凝管壁，取下锥形瓶。溶液总体积 不得少于140ml,否则因酸度太大，滴定终点不明显。(3) 溶液再度冷却后，力口3滴试亚铁灵指示剂，用硫酸亚铁鞍标准溶液滴定, 溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即为终点，记录硫酸亚铁桜标准溶液的用 量。测定水样的同时，以20.00ml重蒸惚水，按同样操作步骤做空白实验。 记录滴定空白时硫酸亚铁鞍标准溶液的用量。四、数据处理厂八小

7、“、(vo-v,)xcx8xlooocodao, mg/厶)=丄p式中，c为硫酸亚镀标准溶液的浓度，mol/l；内为滴定空口时硫酸亚铁钱标准溶液用量，ml； 力为滴定水样时硫酸亚铁镀标准溶液的用量，ml； v为水样的体积，ml；8为氧(1/402)摩尔质量,g/molo五、注意事项1. 使用0.4g硫酸汞络合氯离子的最高量可达40mg,如取用20.00ml水样，即最 高可络合2000mg/l氯离子浓度的水样。若氯离子浓度较低，亦可少加硫酸汞， 保持硫酸汞与氯离子的比为10： 1 o若出现少量氯化汞沉淀，并不影响测定。2. 水样取用体积可在10.0050.00ml范围之间，但试剂用量及浓度需按表

8、1进 行相应调整，也可得到满意的结果。表1水样取用量和试剂用量水样体积，ml0.2500mol/lk2cr2o7溶液，mlh2so4-ag2so4溶液，mlhgsos g(nh4)2fe(so4)2，mol/l滴定前总 体积，ml10.05.0150.20.0507020.010.0300.40.10014030.015.0450.60.15021040.020.0600.80.20028050.025.0751.00.2503503. 对于化学需氧量小于50mg/l的水样，应改用0.0250mol/l重銘酸钾标准溶 液。回滴时用o.olmol/l硫酸亚铁鞍标准溶液。4. 水样加热冋流后，溶液

9、中重銘酸钾剩余量应是加入量的1/54/5为宜。5. 用邻苯二甲酸氢钾标准溶液检查试剂的质量和操作技术时，由于每克邻苯 二甲酸氢钾的理论codc为1 176g,所以溶解0.4251 g邻苯二甲酸氢钾(hoocc6 h4cook)于重蒸馆水中，转入loooml容量瓶，用重蒸馆水稀释至标线，使之成 为500mg/l的codcr标准溶液，用时新配。6. codc的测定结果应保留三位有效数字。7. 每次实验时，应对硫酸亚铁鞍标准溶液进行标定，室温较高时尤其应注意 其浓度的变化。标定方法亦可采用如下操作：于空白实验滴定结束后的溶液中， 准确加入10.00ml0.2500mol/l重銘酸钾溶液，混匀，然后用

10、硫酸亚铁钱标准溶液 进行标定。六、思考题1. 为什么要做空口实验？2. 高猛酸钾指数和化学需氧量有什么区别？实验二水中硫酸根的测定(4学时)、实验目的和要求学习重量法测定硫酸根的基本原理，掌握重量分析的基本操作。二、实验原理硫酸盐在盐酸溶液屮，与加入的氯化顿形成硫酸顿沉淀。在接近沸腾的温度 下进行沉淀，并至少煮沸20minoba2+ + so42' = baso4 | (白)所得沉淀经陈化后，过滤、洗涤至无氯离子、干燥和灼烧，最后以硫酸钞(沉 淀形式称量，求得试样中硫酸根的含量。三、实验内容1. 仪器、试剂主要仪器：(1) 蒸气浴；(2)烘箱；(3)马弗炉；(4)干燥器；(5)分析天平

11、，o.lmg；(6) 滤纸,慢速定量滤纸及中速定量滤纸；(7)滤膜，孔径为0.45pm； (8)瓷圮埸, 30ml； (9)蒸发皿，约50ml； (10)烧杯，500mlo主要试剂：所用试剂除非另有说明，均为符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制 备的去离子水或蒸憾水。实验所用的玻璃器皿需先用洗涤剂洗净，然后用1+1 hnch溶液浸泡24h(不得使用k2cr2o7洗液)，使用前再依次用自来水、去离子水 或蒸憾水洗净。(1) 二水合氯化钞!溶液，100g/l。将100g二水合氯化®(bacl2- 2h2o)溶于约800ml水中，加热有助于溶解， 冷却溶液并稀释至1l,储存在玻璃或聚乙

12、烯瓶中，此溶液能长期保持稳定。注意：氯化顿有毒，谨防入口。(2) 盐酸，1+1。(3) 氨水,l + lo注意：氨水能导致烧伤、剌激眼睛、呼吸系统和皮肤。(4) 甲基红指示剂溶液，1 g/lo将o.lg甲基红钠盐溶解于水中，并稀释到loomlo(5) 硝酸银标准溶液，约0.1 mol/lo称取1.7g硝酸银，溶于80ml蒸馆水中，加0.1 ml浓硝酸，稀释至100ml,置 于棕色瓶屮，避光保存长期稳定。(6) 碳酸钠，无水。2. 干扰及消除水样中若悬浮物、硝酸盐、亚硫酸盐和二氧化硅较多，可使结果偏高。碱金 属硫酸盐，特别是碱金屈硫酸氢盐常使结果偏低。铁和銘等能影响硫酸盐的完全 沉淀，使测定结果

13、偏低。在酸性介质中进行沉淀，可得到较大晶粒的沉淀，利于过滤沉淀；同吋，可 防止碳酸顿和磷酸顿沉淀及共存盐类水解。但是酸度过大，会使硫酸顿沉淀溶解 度增大，而使测定结果偏低。当水样中cro42' 10mg, pojjomg, noflooomg, sio22.5mg, ca2+ 2000mg, fe2+ 5.0mg以下不干扰测定。在分析开始的预处理阶段，在酸性条件下煮沸可以将亚硫酸盐和硫化物分别 以二氧化硫和硫化氢的形式赶走。若在水样中它们的浓度很高，产牛单质硫沉淀 时，应该过滤掉，以免影响测定结果。3. 样品的采集与制备水样采集于干净且化学性质稳定的玻璃瓶或聚乙烯瓶内。为了防止水样屮可

14、 能存在的硫化物或亚硫酸盐被空气氧化，容器必须用水样完全充满。不必加保护 剂，可以冷藏较长时间。试样的制备取决于样品的性质和分析的目的，为了分析可过滤态的硫酸盐， 水样应在采集后立即在现场(或尽可能快的)用0.45 u m的微孔滤膜过滤，滤液留 待分析。需要测定硫酸盐的总量时，应将水样摇匀后取试料，适当处理后进行分 析。4. 实验步骤(1) 预处理 将量取的适量可滤态试料置于500ml烧杯屮，加两滴甲基红指示剂，用 适量的盐酸或氨水调至呈橙黄色，再加2ml盐酸，加水使烧杯中的液体总体积至 200ml,加热煮沸至少5min。 若试料中二氧化硅的浓度超过25mg/l,则应将所取试料置于蒸发皿中，

15、在蒸气浴上蒸发到近干，力ilml盐酸，将皿倾斜并转动使酸和残渣完全接触，继 续蒸发到干，放在180°c的烘箱内完全烘干。如果试料屮含有有机物质，就在燃 烧器的火焰上灰化，然后用2ml盐酸把残渣浸湿，再在蒸气浴上蒸干。加入2ml 盐酸，用热水溶解可溶性残渣后过滤，用少量热水多次反复洗涤不溶解的二氧化 硅，将滤液和洗液合并，按调节酸度。 如果需要测总量而试料中又含有不溶解的硫酸盐，则将试料用中速定量 滤纸过滤，并用少量热水洗涤滤纸，将洗涤液和滤液合并，将滤纸转移到蒸发皿 中，在低温燃烧器上加热灰化滤纸，将4g无水碳酸钠同皿中残渣混合，并在900°c 加热使混合物熔融，放冷，用5

16、0ml水将熔融混合物转移到500ml烧杯中，使其 溶解，并于滤液和洗涤液合并，按调节酸度。2. 沉淀将预处理所得的溶液加热至沸，在不断搅拌下缓慢加入10ml±5ml热氯化 锁溶液，直到不再出现沉淀，然后多加2ml,在809(fc下保持不少于2h,或在 室温下至少放置6h,最好过夜以陈化沉淀。3. 过滤、沉淀烘干用在105°c干燥并已恒重后的熔结玻璃览垠(g4)过滤沉淀，用带橡皮头的 玻璃棒及温水将沉淀定量转移到坦埸屮去，用几份少量的温水反复洗涤沉淀，直 至洗涤液不含氯化物。取下圮埸，并在烘箱内于105±2°c干燥12h,放在干燥器 内冷却，称重，直至干燥

17、至恒重。洗涤过程屮氯化物的检验：在含约5ml硝酸银溶液的小烧杯中收集约5ml的洗涤水，如果没有沉淀生成或者不显浑 浊，即表明沉淀中己不含氯离子。四、数据处理水中硫酸根含量c (mg/l)按下式计算。_ hi x411.6x1000c =v式屮，阳为从试料中沉淀出的硫酸顿的质量，g;v为试料的体积，ml；411.6为硫酸顿的质量换算成硫酸根的因数。五、思考题1. 沉淀硫酸欽时为什么要在稀hc1介质中进行沉淀？ hc1加过量对实验有何影响？2. 为什么沉淀硫酸钦要在热溶液中进行而在冷却后进行过滤，沉淀后为什么 要陈化？实验三 螯合萃取法测定工业废水中的铜（6学时）、实验目的和要求1. 掌握二乙基二

18、硫代氨基甲酸钠法测定工业废水中的铜的原理和方法；2. 练习分光光度计的使用。二、实验原理在氨性溶液中（ph89.5）铜与二乙基二硫代氨基甲酸钠作用生成黄综色络 合物：此络合物可用四氯化碳萃取，在波长440nm处进行测定。,nc 二 'cu； <cn+ 2na+c2h5/s 、sc2h5三、实验内容1. 仪器、试剂主要仪器：（1）分光光度计。（2） 125ml具塞分液漏斗。（3） 50ml具塞比色管。 主要试剂：（1）硝酸（优级纯）。（2）四氯化碳。（3）氨水（1+1）。（4）蒸馆水。（5） 硫酸铜。（6）乙二胺四乙酸二钠盐柠檬酸鞍溶液。称取乙二酸四乙酸二钠盐2.0g,柠檬酸鞍lo

19、.og,溶于水并稀释至100ml, 加4滴甲酚红溶液，用氨水溶液，调至ph=8&5 （溶液由黄色变为浅紫色）；（7）甲酚红指示液：0.4g/l乙醇溶液。（8）二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液：2g/l溶液。称取0.2g二乙基二硫代氨基甲酸钠溶于水，并稀释至looml,用棕色瓶贮 存，放于暗处可用两星期。(9) 氨水氯化镀缓冲溶液(ph9.0)。称取氯化钱70g,溶于适量水屮，加氨水48ml,稀释至looomlo(10) 铜标准储备液：l.ooml含有o.loomg铜。称取硫酸铜0.3930g溶于水中。加硝酸2.0ml,移入loooml容量瓶中，用 水稀释至刻度，摇匀，备用。(11) 铜标准工

20、作液：l.ooml含有0.005mg铜。取铜标准储备液25ml于500ml容量瓶，加硝酸l.oml,用水稀释至刻度, 摇匀，备用。2. 实验步骤(1) 试样的制备取样和保存样品应使用预先洗净的聚乙烯或玻璃细口瓶，采样完毕，即刻 加硝酸于样品屮。每loooml样品加2.0ml硝酸摇匀。(2) 标准曲线分别吸取铜标准工作液0.00、0.20、0.50、1.00、2.00、3.00、5.00ml于分 液漏斗中，加水至50ml,加5.0ml乙二胺四乙酸二钠盐柠檬酸钱溶液，加4 滴甲酚红指示液，用氨水调至溶液由红色经黄色变为浅紫色(ph89.5),加 5.0ml二乙基二硫代氨基甲酸钠溶液摇匀，静置5mi

21、n,加10.0ml四氯化碳用 力振荡2min,静置分层后在lh内进行测定。吸干漏斗颈管内壁的水分后，塞入一小团脱脂棉，弃去最初流出的有机相, 然后将有机相移入10mm的吸收池内，在440nm波长处，以四氯化碳为参比， 测量吸光度。将测得的吸光度减去试剂空白吸光度后，与相对应的铜含量绘制标准曲线。(3) 试样测定i试样预处理a对含悬浮物及有机物极少的试样，可取50.0ml酸化后的试样于高型烧 杯中，加2.0ml硝酸，盖上表而皿。于电炉上加热微沸10min,冷却。b对含悬浮物及有机物较多的试样，可取50.0111l酸化后的试样于高型烧 杯中，加5.0ml硝酸，盖上表面皿。于电炉或电热板上加热消解近

22、干，稍冷， 用水冲洗杯壁及表面皿，继续加热消解，蒸至近干，冷却后，加水约20ml,加 热微沸3min,冷却。ii测定将进行预处理后的试样溶液移入分液漏斗，用水稀释至50ml。以下步骤按(2) 从“加5.0ml乙二胺四乙酸二钠盐"开始，进行操作。以试样的吸光度减去空白试验的吸光度后，从标准曲线查出相应的铜含量。iii空口试验用50.0ml水代替试样，以下步骤按(2)从“加5.0ml乙二胺四乙酸二钠 盐"开始，进行操作。、数据处理以铜离子的质量浓度表示试样屮铜的含量x(mg/l)用下式计算x=x1000v式中：m由标准曲线查出的铜含量，mg；v试样的体积，ml。实验四 水中辂的

23、价态分析(6学时)、实验目的和要求1. 掌握分光光度法的原理和测量方法。2. 掌握水样中总珞、六价珞及三价珞含量的测定方法。二、实验原理水中銘化合物的常见价态有六价和三价两种，测定水体中的銘的化合物必须 进行不同价态珞的含量分析。在酸性介质中，六价珞能与二苯碳酰二月井反应，生 成紫红色络合物，吸收峰在540nm处，可用分光光度法进行六价珞的测定。如将试样中的三价銘先用高镭酸钾氧化成六价銘，过量的高锚酸钾再用亚硝 酸钠分解，最后用尿素再分解过量的亚硝酸钠。经这样处理后的试样，加入二苯 碳酰二月井显色，于540nm处用分光光度法比色测定，即可测得总銘含量。将总銘 含量减去上述所直接测得的六价珞含量

24、，即得三价珞含量。三、实验内容1. 仪器、试剂主要仪器：(1) 一般实验仪器。(2) 分光光度计，配10mm或30mm比色皿。注：所有玻璃器皿内壁要求光洁，防止吸附珞离子。包括采样的在内，均不能用重珞 酸钾洗液洗涤，可用硝酸、硫酸混合液或洗涤剂洗涤，洗涤后要冲洗干净。主要试剂：本实验所用试剂除另有说明外，均应使用符合国家标准的分析纯试剂和蒸馆 水或同等纯度的水，且所有试剂均不含銘。(1) 1 + 1硫酸。将浓硫酸(h2so4, p=1.84g/ml,优级纯)缓缓加入到同体积 的水中混匀。(2) 1+1磷酸。将磷酸(h3po4, p= 1.69g/ml与水等体积混合。(3) 硝酸，p= 1.42

25、g/mlo(4) 高猛酸钾溶液，40g/lo称取4g高镭酸钾(kmnoj,在加热和搅拌下溶 于水，最后稀释至loomlo(5) 尿素溶液，200g/lo称取20g尿素(nh2)2co，溶于水并稀释至loomlo(6) 亚硝酸钠溶液，20g/lo称取2g亚硝酸钠(nano2),溶丁-水并稀释loomlo(7) 氯仿(chcla) o(8) 1+1氢氧化较溶液。将氨水(nh3*h2o, p=0.90g/ml与等体积水混合。(9) 铜铁试剂溶液，50g/lo称取5g铜铁试剂c6h5n(no) onh4,溶于冰水 中并稀释至1 ooml，临用时新配。(10) 氢氧化钠溶液，4g/lo称取lg氢氧化钠(

26、naoh),溶于水并稀释至250mlo(11) 氢氧化锌共沉淀剂© 8% (nw)硫酸锌溶液。称取8g硫酸锌(znso4>7h2o)溶于100ml水中。2% (m/v)氢氧化钠溶液。称取2.4g氢氧化钠，溶于120ml水中。 用时将上述两溶液混合。(12) 锯标准储备溶液,0.1000g/lo称取0.2829g±0. ooolg.于110°c干燥2h的 重路酸钾k2cr2o7,优级纯)，用水溶解后，移入1000ml容量瓶中，用水稀释至 标线，摇匀。此溶液iml含o.lomg钻。(13) 銘标准使用液，1.00mg/l。吸取5.00mu&标准储备液置于

27、500ml容量 瓶中，用水稀释至标线，摇匀。此溶液lml含l.oopg辂，使用当天配制。(14) 锯标准使用液，5.00mg/lo吸取25.00ml铅标准储备液置于500ml容 量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。此此溶液iml含5.00yg辂，使用当天配制。(15) 丙酮(c3h6o)o(16) 显色剂(i), 2g/lo称取二苯碳酰二腓(c13h14n4o) 02g,溶于50ml丙 酮中，加水稀释至100ml,摇匀。置于棕色瓶，置冰箱中。色变深后不能使用。(17) 显色齐ij(ii), 20g/l,称取二苯碳酰二月井(c13h14n4o) 2g,溶于50ml丙 酮中，加水稀释至100ml,摇匀。

28、置于棕色瓶，置冰箱中。色变深后不能使用。2. 实验步骤(1) 样品测定总珞时，实验室样品应该用玻璃瓶釆集。采集时，加入硝酸调节样晶ph 值小于2。在采集后尽快测定，如放置，不得超过24h。测定六价钻时，实验室样品应该用玻璃瓶釆集。采集时，加入氢氧化钠，调 节样品ph值约为8。并在采集后尽快测定，如放置，不要超过24h。（2）样品的预处理总锯的测定样品处理i、一般清洁地而水可直接用高镭酸钾氧化后测定。ii、硝酸硫酸消解。样品屮含有大量的有机物时，需进行消解处理。取50.0ml或适量样品（含洛少于50yg）,置于looml烧杯中，加入5ml硝酸 和3ml浓硫酸，蒸发至冒白烟，如溶液仍有色，再加入5

29、ml硝酸，重复上述操作. 至溶液清澈，冷却。用水稀释至10ml,用氮氧化桜溶液中和至ph值为12,移入50ml容量瓶中, 用水稀释至标线，摇匀，供测定。iii、铜铁试剂氯仿萃取：除去钳、帆、铁、铜。取50.0ml或适量样品（珞含量少于50（ig）,置于looml分液漏斗中，用氢氧化 钱溶液调至中性（加水至50ml）,加入1 + 1硫酸溶液3ml。用冰水冷却后，加入5ml铜铁试剂后振摇lmin,置冰水中冷却2min,每次用 5ml氯仿共萃取3次，弃去氯仿层。将水层移入锥形瓶中，用少量水洗涤分液漏 斗，洗涤水亦并入锥形瓶中。加热煮沸，使水层中氯仿挥发后，按上述步骤进行 消解，再按下述过程进行氧化处

30、理。六价锯的测定样品处理i、对不含悬浮物、低色度的清洁地而水，可直接进行测定。ii、如果水样有色但不深，可进行色度校正。即另取一份试样，加入除显色 剂以外的各种试剂，以2ml丙酮代替显色剂，试样测得的吸光度扣除此色度校正 吸光度后，再行计算。iii、对浑浊、色度较深的水样，应加入氢氧化锌共沉淀剂并进行过滤处理。 取适量样品（含六价銘少于loopg）于150ml烧杯中，加水至50ml。滴加4g/l氢氧 化钠溶液，调节溶液ph值为78。在不断搅拌下，滴加氢氧化锌共沉淀剂至溶液 ph值为89。将此溶液转移至looml容量瓶中，用水稀释至标线。用慢速滤纸干 过滤,弄去1020ml初滤液，取其中50.0

31、ml滤液供测定。iv、水样中存在二价铁、亚硫酸盐、硫代硫酸盐等还原性物质干扰的消除。 取适量样品（含六价钻少于50憾）于50ml比色管屮，用水稀释至标线，加入4ml 显色剂（ii）,混匀，放置5min后，加入1+1硫酸溶液iml摇匀。5lomin后，在 540nm波长处，用10nm或30mm光程的比色皿，以水做参比，测定吸光度。扣除 空白实验测得的吸光度后，从校准曲线查得六价锯含量。用同法做校准曲线。v、水样中存在次氯酸盐等氧化性物质时，干扰测定，可加入尿素和亚硝酸 钠消除。取适量样品（含六价钻少于50囲）于50ml比色管中，用水稀释至标线，加 入1 + 1硫酸溶液0.5ml、1 + 1磷酸溶

32、液0.5ml、尿素溶液l.oml,摇匀。逐滴加 入ln）l亚硝酸钠溶液，边加边摇，以除去由过量的亚硝酸钠与尿素反应牛成的气 泡，待气泡除尽后，以下步骤同六价铮的测定步骤（免去加硫酸溶液和磷酸溶液）。（3）样甜的测定总珞的测定i、高镒酸钾氧化三价銘。取50.0ml或适量住各含量少于50pg）样品或经上述 预处理的试样置于150ml锥形瓶中用氢氧化鞍溶液或1+ 1硫酸溶液调至中性， 加入儿粒玻璃珠，加入0.5ml硫酸溶液和0.5ml磷酸溶液（加水至50ml）,摇匀， 加2滴高镭酸钾溶液，如紫红色消褪则应添加高镭酸钾溶液保持紫红色。加热煮 沸至溶液体积约剩20mlo取下冷却，加入iml尿素溶液，摇匀

33、。用滴管滴加亚硝酸钠溶液，每加一滴 充分摇匀，至高镭酸钾的紫红色刚好褪去。稍停片刻，待溶液内气泡逸出，转移 至50ml比色管中。注：如样品中含有少量fe卄干扰测定，可将氧化过程的加入0.5ml磷酸溶液改为加入 1.5ml磷酸溶液。ii、测定。取50ml或适量（辂含量少于50憾）经氧化步骤处理的试样置50ml 比色管中，用水稀释至刻线，加入2ml显色剂（i ）,摇匀。lomin后，在540nm波 长下用10mm或30mm光程的比色皿，以水做参比，测定吸光度，减去空白实验 吸光度，从校准由线上查得总銘的含量。iii、空白实验。用50ml水代替试样，按与试样完全相同的处理步骤进行空 白实验。iv、校

34、准。向一系列150ml锥形瓶中分别加入oml、0.20ml、0.50ml、l.ooml、 2.00ml、4.00ml、6.00ml、8.00ml和lo.ooml标标准使用液，用水稀释至50ml。 然后按照测定试样的步骤（包括预处理）进行处理。从测得的吸光度减去空白试验 的吸光度后，绘制以含銘量对吸光度的曲线。六价珞的测定i、测定。取适量（含六价铮少于50憾）经处理无色透明试样，置于50ml比色 管中，用水稀释至标线。加入0.5ml硫酸溶液和0.5ml磷酸溶液，摇匀。加入2ml 显色剂（i ）,摇匀。5lomin后，在540nm波长处，用10nm或30nm的比色1111, 以水做参比测定吸光度。

35、扣除空白实验测得的吸光度后，从校准曲线上查得六价 辂含量。ii、空白实验。用50ml水代替试样，按与试样完全相同的处理步骤进行空 白实验。iii、校准。向一系列50ml比色管屮分别加入oml、0.20ml、0.50ml、l.ooml、 2.00ml> 4.00ml> 6.00ml、&00ml和lo.oml珞标准使用液（如经锌盐沉淀分离法 前处理，则应加倍吸取），用水稀释至标线。然后按照测定试样的步骤（包括预处 理）进行处理。从测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，绘制以六价锯的量对 吸光度的曲线。四、数据处理1. 总铅含量3计算式中，加为由校准曲线上查得的试样中的含珞量，|i

36、g;v为试样体积，ml。注：珞含量低于o.lmg/l,结果以三位小数表示；六价珞含量高于o.lmg/l,结果以三位有效数字表示。2.六价銘含量c计算mc =v式屮，加为由校准曲线上查得的试样屮六价钻量，llg;v为试样体积，ml。注：六价钻含量低于o.lmg/l,结果以三位小数表示；六价钻含量高于o.lmg/l,结果以 三位有效数字表示。将总銘含量减去六价銘含量，即得三价銘含量。五、质量控制1. 每批样品应带一个中间校核点，中间校核点测定值与校准曲线相应点浓度 的相对谋差应不超过10%。2. 校准曲线回归方程的相关性系数应大于0. 999o六、思考题1. 在测定六价銘过程中加入硫酸和磷酸的目的

37、各是什么？2. 二苯碳酰二月井为什么要新鲜配制或置于冰箱屮？3. 当水样浑浊并有颜色吋，将如何进行预处理？实验五 气相色谱法测定蔬菜中毒死脾的农药残留（6学时）、实验目的和要求1. 掌握蔬菜中毒死脾农药残留测定的原理与方法；2. 了解气相色谱分析的基木原理、气相色谱仪的操作过程以及色谱定量分析 方法。二、实验原理利用丙酮:乙酸乙酯（1:1）混合液将毒死脾从蔬菜样品中萃取出来，然后进 行气相色谱分析。三、实验内容1. 仪器、试剂主要仪器：离心机、混匀器、50ml pp离心管、气相色谱仪。主要试剂：丙酮、乙酸乙酯、毒死蝉、无水硫酸钠。2. 实验步骤（1）样品处理将蔬菜切碎，称取5g于50mlpp离

38、心管，加入10ml丙酮:乙酸乙酯（1:1）混 合液，旋紧瓶塞，振摇2min,加入无水硫酸钠2g,蒸憾水1 oml,继续振摇 2min,离心2min（1500r/min）,取上清液进样色谱分析。（2）色谱条件db-1701 30mx0.53mmx0.5|im弹性石英毛细管色谱柱，进样口温度230°c, 检测器基座温度250°c,检测池温度180°co柱箱温度:60°c保持lmim第1阶 升温速率30°c/min->160°c,第2阶升温速率10°c/min->270°c o载气流量为 5ml/min；氢气

39、流量：150ml/min；空气流量:200ml/min。（3）线性关系与检出限准确称取毒死脾标样lo.omg,用丙酮溶解，定容，配成浓度为loomg-l-1 的标准溶液，再以此标准溶液依次稀释成20.0, 15.0, 10.0, 5.0, l.omg l-1系 列标准溶液，按上述色谱条件测定。峰而积y对相应质量浓度x（mg l-1）求出回 归方程、相关系数/、最低检出限（以s/n=3计）。（4）方法的回收率及精密度在空白蔬菜样品中，分别添加浓度为0.1、1.0、10mg/kg的毒死蝉标准溶液, 每个浓度做3个重复，按（1）及（2）的方法进行分析。计算回收率、精密度。四、数据处理实验六 固相萃取一高效液相色谱法测定土壤中节喀磺隆的残留量(6学时)一、实验目的和要求1. 掌握固相萃取富集土壤中节n密碱隆的原理与方法。2. 了解液相色谱分析的基本原理、液相色谱仪的操作过程以及色谱定量分析 方法，并定量分析土壤中节卩密磺隆。二、实验原理一定体积的样品溶液通过装有固体吸附剂的小柱，样品屮与吸附剂有强作 用的组分被完全吸附；然后，用强洗脱溶剂将被吸附的组分洗脱出来，定容成 小体积被测样品溶液。使用固相萃取法，可以使样品中的组分得到浓