盾叶薯蓣中甾体皂苷及其体外血小板活性研究

1、盾叶薯蓣中留体皂苷及其体外血小板活性研宄摘要利用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱、 ods柱色谱及制备液相等方法，从盾叶薯蕷dioscorea zingiberensis 70%乙醇提取物中分离得到10个化合物， 并通过核磁和质谱等波谱学方法分别鉴定它们的结构 为胡芦巴皂苷xllla (1)、小花盾叶薯蓣皂苷(2)、胡 芦巴皂苷iva (3)、三角薯蕷皂苷(4)、protobioside (5)、lilioglycoside k (6)、盾叶新苷(7)、三角叶皂 苷(8)、薯蓣次苷a (9)、延龄草皂苷(10)。其中， 化合物1，3, 5, 6均为首次从该植物中分离得到。化 合物110的体外血小

2、板活性筛选表明，化合物7和 8能够诱导血小板聚集，而化合物9具有显著抑制血 小板聚集的作用。关键词盾叶薯蕷；留体皂苷；分离鉴定；血小 板聚集盾叶薯蕷 dioscorea zingiberensis c.h. wright，又称黄姜，为薯蓣科薯蓣属多年生草本攀援植物，广泛 分布在河南、四川、湖北和陕西南部。盾叶薯蓣为我 国特有薯蓣属植物，资源丰富，是生产激素类药物合 成前体皂素(薯蓣皂苷元)的主要生产原料之一。盾 叶薯蓣作为中药，具有清肺止咳、利尿通淋、通经止 痛、解毒消肿等功效1，也被用于中药新药的研究开 发。目前，上市药物盾叶冠心宁片就是由盾叶薯蓣根 茎提取物生产而成的中成药，可用于治疗高血

3、脂、心 绞痛和冠心病等症。留体皂苷是盾叶薯蓣中的主要化 学成分，前人已经从盾叶薯蓣中分离得到一系列的甾 体皂苷类成分2-5。早期的研究多集中在皂苷元，近 年报道的成分包括螺留皂苷及呋留皂苷，但研宄的系 统性不足，特别是对其中微量成分的分离鉴定研宄较 少。本文以盾叶薯蓣为研究对象，利用多种分离手段 从其70%乙醇提取物中共分离得到10个单体化合物， 并鉴定它们的结构分别为胡芦巴皂苷xllla (1， trigoneoside xllla)、小花盾叶薯賴皂昔(2, parvifloside)、 胡芦巴皂苷iva (3，trigoneoside iva)、三角薯蕷皂苷 (4, deltoside)、

4、protobioside(5)> lilioglycoside k(6)、盾叶新苷(7，zingiberensis newsaponin l)> 三角叶皂 苷(8，deltonin)、薯蕷次苷 a (9, prosapogenin a of dioscin)、延龄草皂苷(10, thllin)。其中化合物1，3，5, 6为首次从该植物中分离得到。基于盾叶冠心宁片 的临床应用和已报道的盾叶薯蓣留体皂苷的心血管活 性，对得到的各单体化合物进行了体外血小板聚集活 性的筛选，初步探讨其构效关系。1材料waters synapt 质谱仪（waters，美国）；varian unity i n

5、ova 600超导核磁共振谱仪（palo alto,美国） 和jnm-eca-400超导核磁共振谱仪（日本电子，日本）; waters 2695型高效液相色谱仪，venusil xbp c18色谱 （4.6 mmx250 mm, 5 u m,艾杰尔，天津），pl-els 2100型蒸发光检测器（漂移管温度70°c，雾化温度 50 °c，气流量 1.6 l?min-1，polymer，英国）;primeline solvent delivery module （asb美国）制备型高效液相 色谱仪，shodex rid 102型示差检测器（showa denko, 日本），ve

6、nusil xbp c18 色谱柱（10.0 mm x 250 mm, 5 um,艾杰尔，天津）。sp825型大孔吸附树脂（三 菱，日本）；ods-a （120，50 um； ymc,日本）; 柱色谱硅胶用硅胶h （青岛海洋化工厂），薄层色谱硅 胶板（青岛海洋化工厂）。monobloc ab104-s型1/1万 天平（mettle-toledo,美国）；re-2000型旋转蒸发仪（亚荣，上海）;shz-iii型循环水真空泵（亚荣，上海） christ alpha 1-2ld 型冷冻干燥机（marin christ，德 国）；560ca型血小板聚集仪（chronolog,美国）， centra

7、mp4r型离心机（iec,美国），15 ml硅化离心 管（金麦克，中国）；mek-2-7226血细胞计数仪（chronolog,美国）。分析纯试剂甲醇、乙醇、乙腈、氯仿等有机溶剂（北京化学试剂厂）；所用色谱纯试剂 甲醇（安徽时联特种溶剂股份有限公司）、乙腈（美国 fisher公司）;肝素钠（merck,德国）；戊巴比妥钠 （merck,德国）。wistar雄性大鼠200 g （军事医学科 学院动物中心）。盾叶薯蕷根茎采购自陕西安康，由天津中医药大 学张丽娟教授鉴定为盾叶薯蕷d. zingiberensis,标本 （hj1004）保存于北京军事医学科学院放射与辐射医 学研究所生物技术研究室中药化

8、学组。2提取与分离盾叶薯蓣药材5.5 kg，切片，70%乙醇回流提取（2 次，每次lh），过滤，合并滤液，减压浓缩至无醇味， 离心。上清液经sp825型大孔吸附树脂柱色谱，依次 用10%，50%, 95%乙醇梯度洗脱。收集50%，95%乙 醇洗脱部分，浓缩后冷冻干燥分别得fr. a （90 g）和 fr. b （45 g）。fr. a进行加压硅胶柱色谱，氯仿-甲醇- 水（65 : 20 : 365 : 35 : 10）梯度洗脱，得到4个 组分（fr. a1a4）。fr. a2进行开放c18柱色谱，25% 乙腈洗脱，分份收集，其中1058流分进行半制备液 相制备（28%乙腈-水为流动相，流速4.

9、5 ml?min-l）得 化合物6 （12.4 mg, tr28.2 min）, 6062份进行半 制备液相制备（28%乙腈-水为流动相，流速4.5ml?min-l)得化合物 5 (130.4 mg, tr 32.5 min)0将fr. a3进行半制备液相制备分离，27%乙腈为流动相(流速 4.0 ml?min-l)，得化合物 4 (160 mg，tr 25.4min), 3 (3.3 mg, tr 24.2 min)。将 fr. a4 进行开放c18柱色谱，22%乙腈洗脱，分份收集，合并5065 流分得到化合物2 (309 mg), 7484份再经制备液相 (27%乙腈-水为流动相，流速4.

10、5ml?min-l)制备 得化合物1 (10.2 mg，tr 18.8 min)。fr. b进行加压 硅胶柱色谱，氯仿-甲醇-水梯度(9:1: 065 : 35 : 10下层)洗脱，分份收集，1014流分重结晶得到 化合物10 (11.5 mg)，5259流分重结晶得到化合物 9 (103 mg), 78102流分重结晶得到化合物8 (740 mg), 126140流分重结晶得到化合物7 (1.5 g)。3结构鉴定化合物1白色无定形粉末。esi-ms m/z 1 225.6m-h-。1h-nmr (c5d5n，600 mhz) 5： 0.88(3h，s，h-18)，1.05 (3h，s，h-1

11、9)，1.31 (3h，d，j=6.6hz, h-21)，1.02 (3h，d，j=6.6 hz, h-27)，4.91(1h, j=7.2, glcl-h-1)，6.22 (1h，brs，rha-h-1)，5.07 (1h，d，j=7.8 hz, glc2-h-1)，5.28 (1h，d, j=7.8hz, glc3-h-1)，4.81 (1h，d，j=7.8 hz, glc4-h-1)， 4.06 (1h，m，h-26a)，3.48 (1h，dd，j:9.0, 6.0 hz，h-26b)； 13c-nmr(c5d5n, 150 mhz) 5 : 37.5(01),30.2 (c-2)，78

12、3 (c-3)，39.0 (c-4)，140.9 (c-5)，121.9 (c-6)，32.4 (c-7)，31.7 (c-8)，50.4 (c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c-ll), 40.0 (012)，40.8 (c-13)，56.6 (c-14), 32.5 (c-15)，81.1 (c-16)，63.8 (c-17)，16.5 (c-18)，19.4 (c-19)，40.7 (c-20)，16.5 (c-21)， 110.7(022)，37.2 (c-23)，28.3(024)，34.5(025 )，75.6 (c-26)，17.4 (c-27)，100.0 (glc

13、l-c-1)，77.3(glcl-c-2), 76.2 (glcl-c-3)，81.5 (glcl-c-4)，77.6 (glcl-c-5)，61.8 (glcl-c-6)，101.8 (rha-c-1)，72.4 (rha-c-2), 72.8 (rha-c-3)，74.2 (rha-c-4)，69.5 (rha-c-5)，18.7 (rha-c-6)，104.6 (glc2-c-1)，73.7 (glc2-c-2)，88.3 (glc2-c-3)，69.5 (glc2-c-4)，78.3 (glc2-c-5), 61.8 (glc2-c-6), 106.0 (glc3-c-1), 75.4

14、 (glc3-c-2)，78.2 (glc3-c-3)，71.7 (glc3-c-4)，78.6 (glc3-c-5)，62.6 (glc3-c-6)，105.2 (glc4-c-1)，75.3 (glc4-c-2)，78.7 (glc4-c-3)，71.6 (glc4-c-4)，78.5 (glc4-c-5), 62.9 (glc4-c-6)。以上数据与文献6报道的trigoneoside xllla的数据一致，故鉴定化合物1 结构为 trigoneoside xllla (胡芦巴皂苷 xllla)。化合物2白色无定形粉末。esi-ms m/z 1225.6m-h-。1h-nmr (c5d5

15、n, 600 mhz) 8： 0.90(3h，s，h-18)，1.04 (3h，s，h-19)，1.33 (3h，d，j=6.6 hz, h-21)，0.98 (3h，d，j=6.6 hz, h-27)，4.90(1h，d，7.2，glcl-h-1)，6.22 (1h，s，rha-h-1)，5.08 (1h，d，j=7.8 hz, glc2-h-1)，5.28 (1h，d，j=7.8hz, glc3-h-1)，4.81 (1h，d，j=7.8 hz，glc4-h-1),3.93 (1h，m，h-26a)，3.61 (1h，dd，j=9.0, 6.0hz，h-26b)0 13c-nmr (c5d

16、5n，150 mhz) 5 : 37.5 (c-l),30.2 (c-2)，78.2 (c-3), 39.0 (c-4)，140.8 (c-5)，121.9 (c-6)，32.4 (c-7)，31.7 (c-8)，50.4 (c-9)，37.2 (c-10), 21.1 (c-ll)，40.0 (c-12)，40.5 (c-13)，56.6 (c-14), 32.4 (c-15)，81.5 (c-16)，63.9 (c-17)，16.5 (c-18)，19.4 (c-19)，40.8 (c-20)，16.3 (c-21)， 110.7(022)，37.2(023)，28.4(024)，34.3

17、(025)，75.2 (c-26), 17.5 (c-27)，100.0 (glcl-c-1)，77.3 (glcl-c-2)，76.3 (glcl-c-3)，81.3 (glcl-c-4), 77.7 (glcl-c-5)，61.5 (glcl-c-6)，101.8 (rha-c-1)，72.5 (rha-c-2), 72.8 (rha-c-3)，74.2 (rha-c-4)，693 (rha-c-5), 18.7 (rha-c-6), 104.6 (glc2-c-1)，73.7 (glc2-c-2), 88.4 (glc2-c-3)，69.3 (glc2-c-4)，78.3 (glc2-c

18、-5)，61.8 (glc2-c-6)，105.9 (glc3-c-1)，75.6 (glc3-c-2)，78.3 (glc3-c-3)，71.6 (glc3-c-4)，78.7 (glc3-c-5), 62.5 (glc3-c-6)，105.0 (glc4-c-1)，75.2(glc4-c-2)，78.5 (glc4-c-3)，71.6 (glc4-c-4)，78.5(glc4-c-5), 62.9 (glc4-c-6)。以上数据与文献7-8报道的parvifloside的数据一致，故鉴定化合物2结构 为parvifloside (小花盾叶薯蕷苷)。化合物3白色无定形粉末。esi-ms m/

19、z 1 063.5m-h-。1h-nmr (c5d5n，600 mhz) 5： 0.88(3h, s, h-18)，1.04 (3h, s，h-19), 1.30 (3h，d，j=6.6hz, h-21)，1.01 (3h，d, j=6.6 hz, h-27), 4.93(1h, j=7.2, glcl-h-1)，6.24 (1h，brs，rha-h-1)，5.12 (1h，d，j=7.2 hz, glc2-h-1)，4.81 (1h，d, j=7.8hz, glc3-h-1)，4.07 (1h，m，h-26a)，3.47 (1h， dd,j=9.0,6.0 hz,h-26b)ol3c-nmr

20、(c5d5n, 150 mhz)5 : 37.5 (c-l), 30.2 (c-2)，78.3 (c-3), 39.0 (c-4)，140.9 (c-5)，121.9 (c-6)，32.4 (c-7)，31.7 (c-8)，50.4 (c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c-ll)，40.0 (012)，40.8 (c-13)，56.6 (c-14)，32.5 (c-15)，81.1 (c-16)，63.8 (c-17)，16.5 (c-18)，19.4 (c-19)，40.7 (c-20)， 16.5(021), 110.7(022)，37.2 (c-23)，28.4(024)，

21、34.5(025)，75.4(026)，17.5(027)，loo.o(glcl-c-l)，77.3 (glcl-c-2)，76.2 (glcl-c-3)，82.1 (glcl-c-4),77.8 (glcl-c-5)，62.1 (glcl-c-6)，101.8 (rha-c-1)，72.5 (rha-c-2)，72.8 (rha-c-3)，74.2 (rha-c-4)，69.5(rha-c-5)，18.7 (rha-c-6)，105.3 (glc2-c-1)，75.0 (glc2-c-2)，78.4 (glc2-c-3)，71.2 (glc2-c-4)，78.3 (glc2-c-5)，61.

22、8 (glc2-c-6)，105.2 (glc3-c-1)，75.2 (glc3-c-2)，78.6 (glc3-c-3)，71.7 (glc3-c-4)，78.5 (glc3-c-5)，62.9 (glc3-c-6)。以上数据与文献9报道的trigoneoside iva的数据一致，故鉴定化合物3结 构为trigoneoside iva (胡芦巴皂苷iva)。 化合物 4 白色无定形粉末。esi-ms m/z 1 063.5m-h-olh-nmr(c5d5n，600 mhz) 5： 0.88 (3h，s，h-18)，1.04 (3h，s, h-19)，1.30 (3h, d, j=6.6 h

23、z，h-21)，1.01 (3h，d，j=6.6 hz, h-27)，4.93 (1h，j=7.2, glcl-h-1),6.24 (1h，brs，rha-h-1)，5.12 (1h，d, j二7.2 hz， glc2-h-1)，4.81 (1h，d, j=7.8 hz, glc2-h-1)，3.96(1h，m，h-26a), 3.6o(1h，dd，j=9.0, 6.0 hz，h-26b)。 13c-nmr (c5d5n, 150 mhz) 8： 37.5 (c-l)，30.2(c-2)，78.2 (c-3)，39.0 (04)，140.8 (c-5)，121.9 (c-6)，32.4 (c-

24、7)，31.7 (c-8)，50.4 (c-9)，37.2 (c-10), 21.1 (c-ll)，40.0 (c-12)，40.8 (c-13)，56.6 (c-14)，32.5 (c-15)，81.1 (c-16)，63.9 (c-17)，16.5 (c-18)，19.4 (c-19)，40.7 (c-20)，16.5 (c-21)， 110.7(022)，37.2(023)，28.3(024)，34.4(025)，75.4 (c-26)，17.5 (c-27), 100.1 (glcl-c-1), 77.3(glcl-c-2)，76.2 (glcl-c-3)，82.1 (glcl-c-4

25、)，77.8(glcl-c-5), 62.1 (glcl-c-6), 101.8 (rha-c-1)，72.5(rha-c-2)，72.7 (rha-c-3)，74.2 (rha-c-4)，69.5(rha-c-5)，18.7 (rha-c-6)，105.3 (glc2-c-1)，75.0(glc2-c-2)，78.4 (glc2-c-3)，71.2 (glc2-c-4)，78.3(glc2-c-5)，61.8 (glc2-c-6)，105.2 (glc3-c-1)，75.2(glc3-c-2)，78.6 (glc3-c-3)，71.7 (glc3-c-4)，78.5(glc3-c-5), 6

26、2.9 (glc3-c-6)。以上数据与文献7-8 报道的deltoside 一致，故确定化合物4的结构为 deltoside (三角薯蕷皂苷)。化合物5白色无定形粉末。esi-ms m/z 901.5 m-h-。1h-nmr (c5d5n, 400 mhz) 8： 0.89 (3h， s，h-18)，1.05 (3h，s，h-19)，1.30 (3h，d，j=6.6 hz, h-21)，1.01 (3h，d，j=6.6 hz, h-27)，5.02 (1h， j=7.4hz, glcl-h-1)，6.38 (1h, brs，rha-h-1)，4.81(1h，d，j=7.8 hz, glc2-

27、h-1)，3.93 (1h, m，h-26a)， 3.62(1h，dd，j=9.0, 6.0 hz，h-26b)。13c-nmr(c5d5n, 100 mhz) 5： 37.6 (c-l)，30.2 (c-2)，78.3 (c-3)， 39.0 (c-4)，140.9 (05)，121.9 (c-6), 32.4 (c-7)，31.7 (c-8), 50.4 (c-9), 37.2 (c-10)，21.1 (c-ll)， 40.0 (c-12)，40.8 (c-13)，56.6 (c-14)，32.5 (c-15)， 81.1(016) , 63.9(017)，16.5(018)，19.4(0

28、19)， 40.7(020)，16.5(021)，110.7(022)，37.1(023)，28.4 (c-24), 34.5 (c-25), 75.3 (026)，17.5 (c-27)，100.4 (glcl-c-1)，79.7 (glcl-c-2)，78.0 (glcl-c-3)，71.9 (glcl-c-4)，78.5 (glcl-c-5)，62.9 (glcl-c-6),102.1 (rha-c-1)，72.6 (rha-c-2), 72.9 (rha-c-3)， 74.2 (rha-c-4)，69.5 (rha-c-5), 18.7 (rha-c-6)，105.0(glc2-c-1

29、)，75.2 (glc2-c-2)，78.6 (glc2-c-3)，71.7(glc2-c-4)，77.8 (glc2-c-5)，62.7 (glc2-c-6)。以上 数据与文献7中的protobioside 一致，确定化合物5 的结构为 protobioside。化合物6白色无定形粉末。esi-ms m/z 755.4 m-h-。1h-nmr (c5d5n, 600 mhz) 8： 0.88 (3h， s，h-18)，1.04 (3h，s，h-19)，1.30 (3h，d，j=6.6 hz, h-21)和 1.01 (3h, d, j=6.6 hz, h-27)，4.93(1h，d，j=7.

30、2hz，h-17 )，4.81 (1h，d，j=7.8 hz, h-l7 z )，3.96(1h，m，h-26a)，3.6o(1h，dd，j=9.0, 6.0 hz，h-26b)o 13c-nmr (c5d5n, 150mhz) 6 :37.5 (c-l)，30.3 (c-2)，78.2 (c-3)，39.0 (c-4)，140.9(c-5)，121.8 (c-6), 32.3 (c-7)，31.7 (c-8)，50.4(c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c-ll), 40.0 (c-12), 40.8(c-13)，56.6 (c-14)，32.5 (015)，81.1 (c-16

31、)，62.9 (c-17), 16.5 (c-18), 19.4 (019)，40.7 (c-20)， 16.5(021)，110.9(022), 37.2 (023)，28.3(024)， 34.3(025)，75.4(026)，17.5(027)，102.6(glcl-c-l),75.3 (glcl-c-2)，78.2 (glcl-c-3)，71.8 (glcl-c-4)，78.2 (glcl-c-5)，62.9 (glcl-c-6), 105.0 (glc2-c-1)，75.2 (glc2-c-2)，78.6 (glc2-c-3)，71.8 (glc2-c-4),78.5 (glc2-c

32、-5)，62.9 (glc2-c-6)。以上数据与文献7 中的lilioglycoside k 一致，确定化合物6的结构为 lilioglycoside k。 化合物7白色无定形粉末。 esi-ms m/z 1 045.5 m-h-。13c-nmr(c5d5n，100 hz)8 : 37.5 (c-l)，30.6 (c-2)，78.5 (c-3)，38.9 (c-4)，140.7 (c-5)，121.8 (c-6)，32.2 (c-7)，31.8 (c-8)，50.2 (c-9), 37.1 (c-10), 21.1 (c-ll), 39.8 (c-12),40.4 (c-13)，56.6 (

33、c-14)，32.3 (c-15), 81.1 (c-16)，62.8 (c-17)，16.3 (c-18), 19.4 (c-19), 41.9 (c-20), 15.0(021)，109.2(022)，31.6(023)，29.3(024)， 30.6(025)，66.8(026)，17.3(027)，99.9(glcl-c-l),77.2 (glcl-c-2), 76.3 (glcl-c-3), 81.5 (glcl-c-4),77.6 (glcl-c-5)，61.4 (glcl-c-6), 101.8 (rha-c-1)，72.5 (rha-c-2)，72.8 (rha-c-3)，74

34、.1 (rha-c-4)，69.5 (rha-c-5)，18.7 (rha-c-6), 104.6 (glc2-c-1), 73.7 (glc2-c-2)，88.3 (glc2-c-3)，69.3 (glc2-c-4)，78.3 (glc2-c-5), 61.7 (glc2-c-6)，105.9 (glc3-c-1)，75.6(glc3-c-2)，78.0 (glc3-c-3)，71.5 (glc3-c-4)，78.7(glc3-c-5), 62.5 (glc3-c-6)。以上数据与文献10 中的zingiberensis saponin i 一致，故确定化合物7结 构为 zingiberen

35、sis saponin i (盾叶亲斤苷)。化合物8白色无定形粉末。esi-ms m/z 883.5 m-h-。13c-nmr(c5d5n，100 mhz) 8 : 37.4(01)，30.1 (c-2)，78.5 (c-3)，38.9 (c-4)，140.7 (c-5)，121.8 (c-6)，32.2 (c-7)，31.8 (c-8)，50.2 (c-9)，37.1 (c-10)，21.1 (c-ll), 39.8 (012)，40.4 (c-13)，56.6 (c-14)，32.3 (c-15)，81.1 (c-16)，62.8 (c-17)， 16.3(018)，19.4(019)，4

36、1.9(020)，15.0(021)， 109.2(022)，31.6 (c-23)，29.2(024)，30.6(025)，66.8 (c-26)，17.3 (c-27)，99.9 (glcl-c-1)，77.2(glcl-c-2), 76.2 (glcl-c-3)，82.0 (glcl-c-4)，77.7(glcl-c-5)，62.0 (glcl-c-6)，101.8 (rha-c-1)，72.5(rha-c-2), 72.8 (rha-c-3)，74.1 (rha-c-4)，69.5(rha-c-5)，18.7 (rha-c-6), 105.3 (glc2-c-1)，74.9(glc2-

37、c-2)，71.2 (glc2-c-3)，78.3 (glc2-c-4)，78.0(glc2-c-5), 61.9 (glc2-c-6)o 以上数据与文献7中 的deltonin 一致，故确定化合物8结构为deltonin (三角叶皂苷)。化合物 9 白色粉末。esi-ms m/z 721.4 m-h-。13c-nmr (c5d5n，150 mhz) 5： 37.5 (c-l)，30.2 (c-2)，78.3 (c-3)，39.0 (c-4)，140.9 (c-5)，121.8 (c-6)，32.2 (c-7)，31.7 (c-8)，50.3 (c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c

38、-ll), 39.9 (c-12)，40.5 (c-13)，56.7 (c-14)，32.3 (c-15)，81.1 (c-16)，62.9 (c-17)， 16.3(018)，19.4(019)，42.0(020)，15.0(021)， 109.3(022)，31.8 (c-23)，29.3(024)，30.6(025)， 66.9(026)，17.3(027)，100.4(glc-c-1)，79.7(glc-c-2),77.9 (glc-c-3)，71.8 (glc-c-4)，78.0 (glc-c-5)，62.7 (glc-c-6), 102.1 (rha-c-1), 72.6 (rha

39、-c-2)，72.9 (rha-c-3), 74.2 (rha-c-4)，69.5 (rha-c-5)，18.7 (rha-c-6)。以上数据与文献7中的 prosapogenin a of dioscin 一致，故确定化合物9结构为prosapogenin a of dioscin (薯蕷次苷 a)。化合物 10 白色粉末。esi-ms m/z 575.4m-h-o13c-nmr (c5d5n，150 mhz) 5： 37.5 (c-l)，30.4 (c-2)，78.2 (c-3)，39.0 (c-4)，140.8 (c-5)，121.8 (c-6)，32.3 (c-7)，31.7 (c-8

40、)，50.3 (c-9)，37.2 (c-10)，21.1 (c-ll), 39.9 (c-12)，40.5 (c-13)，56.7 (c-14)，32.2 (c-15)，81.1 (c-16)，62.9 (c-17)， 16.3(018)，19.4(019)，42.0(020)，15.0(021)， 109.3(022)，30.6 (c-23)，29.3(024)，30.6(025 )，66.9cc-26), 17.3(c-27), 102.5(glc-c-l), 75.5(glc-c-2)，78.2 (glc-c-3), 71.8 (glc-c-4), 78.2 (glc-c-5), 62

41、.7 (glc-c-6)。以上数据与文献11-12中的trillin 一致， 确定化合物10的结构为trillin (延龄草皂苷)。4体外血小板活性的筛选wistar雄性大鼠以戊巴比妥钠(4060 mg?kg-l)腹腔注射麻醉，预先用肝素润湿的注射器心脏取血， 200u?ml-l肝素抗凝混匀装入15 ml硅化离心管。抗 凝血在室温下以800 r?min-l离心约1 min，取富血小 板血浆(prp)，其余部分室温以3 000r?min-l继续离 心lomin，取贫血小板血浆(ppp)o用血细胞计数仪 以ppp调prp浓度为3.0x1011?l-l。以ppp做空白对 照，调节透光率到100%。取

42、495 ulprp于37 °(2预 温3min，放入检测仪后分别加入单体化合物，37 °c 孵育3 min,检测无诱导活性后加入5 u l u46619 (终 ?农度0.5 u mol?l-l)诱导血小板聚集，记录5 min内 的图形变化，读取相应数值，实验结果见表1。由实 验结果可知在终浓度为100 umol?l-l时化合物7，8 具有诱导血小板聚集的作用，诱导率分别为70%，64%； 化合物9有较强抑制血小板聚集的作用，抑制率为 100%。5结果与讨论盾叶薯蓣是我国特有的薯蓣属植物，留体皂苷是 其中的主要活性成分。从作者分离鉴定化合物的结构 可知其留体皂苷主要包括含有2

43、个糖链的水溶性呋甾 皂苷（化合物16）和含有1个糖链的螺留皂苷（化 合物710），他们对应的皂苷元主要为薯蓣皂苷元 （diosgenin）,另有少量的其c-25 s构型的异构体，即 约莫皂苷元（yamogenin）。体外血小板聚集实验结果 显示，呋留皂苷均不具有直接诱导或抑制血小板聚集 的活性，而对应的螺留皂苷则显示一定的诱导或抑制 血小板聚集活性。在100 umol?l-l浓度时，含有3 个和4个糖基的化合物7, 8显示诱导血小板聚集的活 性，而相同皂苷元、仅含2个糖基的化合物9则显示 抑制血小板聚集活性，可见其糖基不仅影响活性的强 弱，还决定活性的性质。张楠、吕浩等报道了盾叶冠心宁片治疗高

44、脂血症、 心绞痛及冠心病的临床研宄12-15，黄文等16-17进 行了盾叶薯蓣总皂苷及其单体化合物的体内外抗血栓 作用研宄。留体皂苷口服或灌胃后，往往被肠道菌群 或体内酶代谢，生成一系列次生苷及苷元（主要为糖 基水解产物），要想真正阐明其体内药效物质基础（吸 收进入体内发挥药理作用的分子结构）及作用机制， 是一项十分复杂而艰难的工作。本文分离鉴定了盾叶薯蓣中一系列留体皂苷单体化合物，并对其体外血小 板活性进行了筛选，为日后阐明盾叶薯蓣治疗心血管 疾病的药效物质基础及作用机制靶点、开发新的药物 奠定了基础。参考文献1 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编.上 册m.北京：人民卫生出版社，1996

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46、at prod, 2009，2：123.5 zheng l， zhou y, zhang j y, et al. two newsteroidal saponins from the rhizomes of dioscorea zingiberensi j. chin j nat med, 2014，12 (2):142.6 murakami t, kishi a， matsuda h， et al. medicinal food stuffs. xvii. fenugreek seed. (3):structures of new furostanol type steroidal sapo

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