2022年分子生物学考场绝对压轴题

1、精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载20xx年分子生物学考场肯定压轴题1. 人类基因组方案（human genome project、 hgp ）的精髓？22. 如何应用人类基因组基础讨论帮助临床医学？23. 什么为基因表达？试述基因表达的特点及其调控对生物体的重要性？24. 真核生物中,基因表达受不同水平的调控,请列举三种；25. 为什么说转录的调控为基因表达调控的中心环节？36. 举例说明 dna甲基化与肿瘤的关系37. 如何动物建模来评判促创伤愈合的新药作用成效？38. 对于新型促愈合药物可能的作用机制的讨论思路？39. 试述外源基因在原核体系中的表达需要具备的条件,及影响

2、外源基因表达的因素；.310. 蛋白质的分别纯化技术依据蛋白质的性质分为哪几大类,请例举其中一类,谈谈它的原理及应用；311. 以 2gm csf为例,写出获得该基因工程重组蛋白纯品的流程； 312. 干细胞应具备哪些生物学特点？413. 何为干细胞不对称分裂？414. 什么为细胞分化？为什么说细胞分化为基因挑选性表达的结果？415. 何为细胞全能性？如何证明分化成熟细胞的全能性？416. 什么为表观遗传学？它主要讨论什么内容？517. 什么为甲基化,在调控基因表达过程中起什么作用？518. 什么为基因印记？它的主要特点为什么？519. 请表达肝细胞对胰高血糖素或肾上腺素的反应过程；520.

3、细胞膜在信号转导的过程中起到怎样的作用？621. 简述 crispr/cas-9 的基本原理及优点（与传统的基于同源重组的胚胎干细胞基因敲除相比较）；622 .为何在挑选靶基因敲除的胚胎干细胞时仍需经受阴性挑选过程？简述更昔洛韦（ganciclovir）在胚胎干细胞阴性挑选中的作用机制；623. 基本概念sirna mirna； dicer protein； risc；ptgs624. 请说明 rnai 的作用机制；725. 请分析说明su guo 的试验结果；726. 什么为细胞凋亡（cell apoptosis）？727. 细胞凋亡有哪两条主要的途径？728. bcl2 家族的分类和结构特

4、点？729. p53 基因在细胞dna损耗中的作用？830. 转录组及蛋白组的概念分别为什么？其讨论内容分别包括哪些方面？831. 如何利用转录组学及蛋白组学的方法挑选相关基因？（写出主要的检测指标及其试验方法名称）832. 线粒体遗传有哪些特点？833. 讨论动物毒素对治疗人类疾病和药物开发有哪些启示？可详细举两个例子进行阐述. 834. 讨论动物毒素的方法有哪些,所面临的问题有哪些？935. 如何看待基因治疗的安全性及社会伦理问题；936. 疾病讨论的相关基因功能讨论的方法及策略937. 结合你的专业,论述线粒体与医学的关系；9精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载

5、分子生物学1.人类基因组方案（ human genome project、 hgp）的精髓？人类基因组方案的精髓 为人类基因组图谱,包括遗传图谱. 物理图谱. 序列图谱. 转录图谱；遗传图谱： 又称连锁图谱,为以具有遗传多态性的遗传标记为“路标”,以遗传学距离为图距的基因组图；遗传图谱的建立为基因识别和完成基因定位制造了条件；物理图谱： 指有关构成基因组的全部基因的排列和间距的信息；绘制物理图谱的目的为把有关基因的遗传信息及其在每条染色体上的相对位置线性而系统地排列出来；序列图谱： 指测定每条染色体的dna序列, 通过 dna序列可以直接推出基因结构.定位已知基因.讨论基因起源；转录图谱： 指

6、在识别基因组所包含的蛋白质编码序列的基础上绘制的结合有关基因序列.位置及表达模式等信息的图谱；通过这张图可以明白某一基因在不同时间不同组织.不同水平的表达； 也可以明白一种组织中不同时间.不同基因中不同水平的表达,仍可以明白某一特定时间.不同组织中的不同基因不同水平的表达； 2.如何应用人类基因组基础讨论帮助临床医学？人类疾病相关的基因为人类基因组中结构和功能完整性至关重要的信息；人类基因组基础研究主要通过 基因诊断. 基因治疗和基于基因组学问的治疗.基于基因组信息的疾病预防.疾病易感基因的识别.风险人群生活方式.环境因子的干预等方式帮助临床医学；详细的方式如下：1）基因工程药物：分泌蛋白（多

7、肽激素,生长因子,趋化因子,凝血和抗凝血因子等）及其受体；2）诊断和讨论试剂产业：基因和抗体试剂盒.诊断和讨论用生物芯片.疾病和筛药模型；3）对细胞.胚胎.组织工程的推动：胚胎和成年期干细胞.克隆技术.器官再造；4）制药工业：挑选药物的靶点：与组合化学和自然化合物分别技术结合,建立高通量的受体.酶结合试验以学问为基础的药物设计：基因蛋白产物的高级结构分 析.猜测.模拟药物作用“口袋”；个体化的药物治疗：药物基因组学；5）基础生物学：基因功能的定位；6）交叉学科的兴起；如：基因组学和生物信息学等；3.什么为基因表达？试述基因表达的特点及其调控对生物体的重要性？1）基因表达从 dna到蛋白质的过程

8、（为指原核生物和真核生物基因组中特定的结构基因 所携带的遗传信息,经过转录. 翻译等一系列过程,合成具有特定的生物学功能的各种蛋白质,表现出特定的生物学效应的全过程）但并非全部的基因表达都过程都产生蛋白质,rrnatrna 编码基因转录产生rna的过程也属于基因表达；2）特点 组织特异性不同组织细胞中不仅表达的基因数量不同,而且基因表达的强度和种类也不相同； 阶段特异性细胞分化发育的不同时期,基因表达的情形不相同；与环境相适应当四周的养分.温度.湿度.酸度及各条件变化时,生物体就要转变自身的基因 表达状况, 以调整体内执行和相应功能的蛋白质的种类.数量, 从而转变自身的代谢活动度 以来适应环境

9、；（3）对生物体的重要性1.适应环境.维护生长和繁衍；2.维护个体发育和分化；4.真核生物中,基因表达受不同水平的调控,请列举三种；a. 转录前调控基因丢失； （原生动物.线虫.昆虫和甲壳类动物）转录前调控,非洲蛙蟾的卵母细胞中原有的 rrna 基因约 500bp,卵裂期和胚胎期需要大量的 rrna,基因会大量复制 rrna、 使拷贝数达到 200 万倍,扩增约 4000 倍；基因扩增（ gene amplification ）；基因重排（ gene rearrangement ）；dna的甲基化（ dnamethylation ）组蛋白修饰（ histone modification ） /

10、 及组蛋白的修饰；b. 转录水平的调控转录调控为通过各种调控元件相互作用来实现的,调控元件主要包括顺式作用元件和反式作用因子；c.转录后调控hnrna的挑选性加工运输；mrna前体的挑选性剪接；rna编辑； rnai；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载d.翻译调控 翻译因子的磷酸化调控；mrna稳固性调控；e. 翻译后调控 - 蛋白质修饰；5.为什么说转录的调控为基因表达调控的中心环节？答基因调控主要发生在转录阶段,特别起始阶段, 由于这些为表达的起始阶段,可以防止那些不需要的转录所造成的资源铺张；转录调控为通过各种调控元件相互作用来实现的,调控元件主要包括顺式作用

11、元件和反式作用因子；而且转录起始为基因表达的基本调控点,涉及 dna序列调控蛋白及这些因素对rna聚合酶活性的影响, 顺式作用元件和反式作用因子之 间相互作用, 均在转录起始来表达,而转录后的加工修饰为rna以及翻译及翻译后的蛋白质 修饰都为以转录水平为基础的；6.举例说明 dna甲基化与肿瘤的关系答 dna甲基化为基因表达修饰方式之一,与基因表达调控亲密相关,它能关闭一些基因的活性,而去甲基化能诱导基因的重新活化及表达；dna甲基化修饰通过转变基因的表达,参与了细胞的生长.发育过程及x染色体失活等的调控；dna甲基化能引起染色质结构.dna构象. dna的稳固性. dna与蛋白质相互作用方面

12、的转变,从而掌握基因表达；加方案的状态的转变为引起肿瘤的一个重要因素；这种变化包括（1）整体甲基化水平降低；（ 2）正常非甲基化cpg岛的高甲基化；（3）维护甲基化模式酶的调剂失控；从而导致基因组的不稳固（如染色体的不稳固,可移动遗传因子的激活,原癌基因的表达）和抑癌基因的不表达；列如对家族性和散发型乳腺癌和结肠癌的讨论中发觉,家族性肿瘤中序列无突变的10 个抑癌基因启动子区域甲基化常见,但在突变的抑癌基因中没有发觉甲基化的现象；由此可见 dna甲基化模式的转变和肿瘤的发生.进展亲密相关；7.如何动物建模来评判促创伤愈合的新药作用成效？8.对于新型促愈合药物可能的作用机制的讨论思路？9.试述外

13、源基因在原核体系中的表达需要具备的条件,及影响外源基因表达的因素；外源基因表达所要具备的条件 （1）编码区不含插入序列（ mrna-cdn）a ;2位于启动子下游,方向一样,原有的读码框不变；（3）含起始密码子（ aug）、 终止密码（ taa）;4转录的必需有sd序列,调剂sd序列与第一个aug间的距离；（ 5）挑选系统编号的简并密码；（6）增强产物的稳固（如融合蛋白,信号肽）；影响因素 （ 1）启动子的强弱（主要因素）；（2）基因的剂量；（3） rna转录效率（ sd互补, augsd距离及序列,aug前后核苷酸序列的相宜性）；（4）密码子；（ 5）表达产物的大小；（ 6）产物的稳固性；1

14、0.蛋白质的分别纯化技术依据蛋白质的性质分为哪几大类,请例举其中一类, 谈谈它的原理及应用；答蛋白质的分别纯化可分为依据溶解度差别,如硫酸铵分别法； 依据分子大小不同透析.超过滤.离心法.凝胶过滤层析.凝胶电泳；依据蛋白质分子带点性质不同电泳.离子交换层析；依据蛋白质吸附性质不同吸附柱层析.吸附薄层层析；利用蛋白质的特异性配体亲和层析；举例电泳；其原理在肯定ph值下,细胞表面带有净的正 或负电荷, 能在外加电场的作用下发生泳动,向正极或负极移动；各种细胞或处于不同生理状态的同种蛋白质所带电荷的电量不同,故在肯定的电场中的泳动速度也不同；（影响颗粒电泳迁移率的因素缓冲液,电场,支持介质）类型sd

15、s聚丙烯酰胺凝胶电泳.等电点聚 焦电泳.毛细管电泳；应用电泳的类型很多,应用范畴也很广,如sds-page,常用于蛋白质分子量的测定目前,双向凝胶电泳已成为蛋白质组学讨论的重要技术；11.以 2gmcsf为例,写出获得该基因工程重组蛋白纯品的流程；答：1.gm csf全基因及可溶性sgmcsf基因 pcr扩增；2.含肠激酶位点的pth10hisa ·sgm精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载csf表达载体的构建 （纯化后的gmcsf,sgm csf及质检） ；3.诱导表达pth10hisa ·sgmcsf在大肠杆菌bl21 中诱导表达；4. sgm

16、 csf融合蛋白的制备<1 度工程菌的培育2 度超声破坏菌体； 5.sgm csf融合蛋白的纯化<1 度融合表达载体pthhisa在硫氧仍蛋白融合段有组氨酸标签,用m2+固相化的chelatingsepharosefast flow填材料进行亲和,层析 2 度将可溶性表达产物（超声波, 噬菌体的离心上清）与亲和柱结合,用2 信柱床体积以上的 a 液过柱至基线平稳,用b液（ a 液加入朱唑至浓度为50mmol/l 梯度习脱5 10 个柱体体积,用akataexplore进行检测,收集各洗脱液）；6.sgmcsf融合蛋白的肠激酶切割及纯化； 7.sgmcsf融合蛋白及非融合蛋白的wes

17、tern blot检测；12.干细胞应具备哪些生物学特点？答: 干细胞为人体最原始的细胞,具有很强的再生才能,在干细胞因子和多种白细胞介素的联合作用下, 可诱导分化出各种类型的细胞；干细胞为自我更新才能,高度增殖和多向分化潜能的细胞；a：自我更新才能：干细胞可不对称分裂为1 个子代干细胞和1 个功能细胞,从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平稳,但干细胞的分裂实际为不对称的,干细胞在其发育期间也能够对称性地分裂以扩增它们的数量； b：高度增殖才能：因干细胞数量不多,所以其高度增殖的生物学特性有其重要意义：体内：如造血干细胞通过高度扩增,可补充由于细胞正常衰老死亡而丢失的血细胞；体外： 体外扩增

18、干细胞为干细胞讨论和应用的前提和关键；因此,高度扩增的生物学特点不但对干细胞的讨论和应用有着重要作用,而且对机体正常功能的维护也起着重要作用；c.多功能性或全能性一分化干细胞具有分化为多种细胞类型的潜能,但不同干细胞的分化潜能有所不同；胚胎干细胞：全能性神经干细胞：多功能性；13.何为干细胞不对称分裂？答：干细胞不对称分裂为1 个子代干细胞和1 个功能细胞, 从而使组织和器官保持生长和衰退的动态平稳；例如：皮肤更新,干细胞分裂后,其中一个成为干细胞,另一个就分化为上皮细胞或基底细胞等等；14.什么为细胞分化？为什么说细胞分化为基因挑选性表达的结果？答：（ 1）细胞分化（ cell differ

19、entiation）：指个体发育过程中,细胞后代之间在形状结构.生化组成和功能上向专一性和特异性方向进展,逐步产生稳固性差异的过程；（2） 缘由 : 细胞分化的主要特点为新的.特异性蛋白质的合成,随后细胞在生化.结构.功能上发生变化, 细胞表型显现差异,从分子层次上看,这为由于基因挑选性表达的结果,即浪费基因表达使细胞合成特异蛋白；由于基因的挑选性表达而合成分化细胞的某些特异性蛋白,执行特别功能, 因此细胞分化的本质就为基因表达调控的问题；在细胞内与分化有关的基因 按其功能分为两类：一类为管家基因,表达的产物用以维护细胞自身的正常的新陈代谢；另一类为浪费基因, 表达形成细胞功能的多样性；细胞分

20、化正为浪费基因的挑选性表达的结果； 因此细胞分化的实质就为基因的挑选性表达的结果；15.何为细胞全能性？如何证明分化成熟细胞的全能性？答: （ 1）细胞全能性（totipotency）：单个细胞在肯定条件下可分化发育为完整个体的分 化潜能称为全能性；（2）证明分化成熟体细胞的全能性：由于dna的半保留复制和细胞的有丝分裂, 从而使生物体的任何体细胞都具有了与原初的受精卵（有性生殖过程中）或起始细胞（无性生殖过程） 相同的一整套基因；依旧受精卵或起始细胞可以发育成为一个新整体, 那么受精卵或起始细胞复制而来的与受精卵或起始细胞具有相同的一整套基因的体细胞依然应当能发育成为一个完整的个体,即分化成

21、熟的体细胞也为全能的；体细胞的核移植到受精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载精卵的胞质中时, 这个具有新核的细胞可以发育为一个新的个体；这说明分化成熟的体细胞核仍旧保持完整的,在肯定条件下的细胞全能性；如克隆羊； 16.什么为表观遗传学？它主要讨论什么内容？答（ 1）基因的dna序列不发上转变的情形下,基因的表达水平与功能发生转变,并产生可遗传的表型；不依靠于dna序列的遗传现象；（2） dna甲基化修饰基因挑选性转录 表达的调控, 主要表现为基因组dna上的胞嘧啶第5 位碳原子和甲基间的共价结合,胞嘧啶由此被修饰为5- 甲基胞嘧啶； 非编码rna的调控作用 mirn

22、a调剂大约30%的人类基因表 达； mirna可以通过靶向dna或组蛋白修饰酶等表观遗传复合物而实现调剂作用；sirna 通过诱导染色质的形成来实现对基因表达的调控；pirna 主要表现为在配子形成过程中对转座 子元件的缄默作用,为生殖细胞发育所必需的；组蛋白修饰构成核小体的组蛋白,氨基端可以被多种酶进行各种修饰,如磷酸化,乙酰化,甲基化和泛素化,组蛋白的这类修饰可 以转变 dna-组蛋白的相互作用,为染色质的构型发生转变,称为染色质构型重塑；17.什么为甲基化,在调控基因表达过程中起什么作用？答：（ 1）从活性甲基化合物（如s-腺苷基甲硫氨酸）上催化其甲基转移到其他化合物的过程；可形成各种甲

23、基化合物,或者为对某些蛋白质或核酸等进行化学修饰形成甲基化产物；其中 dna甲基化为指在甲基化酶的作用下将一个甲基添加在dna分子的碱基上, dna甲基化修饰打算基因表达的模式,即打算从亲代到子代可遗传的基因表达状态；（2）甲基化为蛋白质和核酸的一种重要的修饰,调剂基因的表达和关闭,与癌症. 衰老. 老年痴呆等很多疾病亲密相关, 为表观遗传学的重要讨论内容之一；最常见的甲基化修饰有dna甲基化和组蛋白甲基化； dna甲基化能关闭某些基因的活性,去甲基化就又到了基因的重新活化和表达；dna甲基化能引起染色质结构.dna构象. dna稳固性及dna与蛋白质相互作用方式的转变, 从而掌握基因表达；讨

24、论证明,cpg二核苷酸中胞嘧啶的甲基化导致了人体1/3 以上由于碱基转换而引起的遗传病；dna甲基化主要形成5- 甲基胞嘧啶（ 5-mc）和少量的n6- 甲基腺嘌呤n6-ma 及 7- 甲基鸟嘌呤（7-mg）；在真核生物中,5- 甲基胞嘧啶主要显现在cpg序列.cpxpg.cca/tgg和 gatc中； dna甲基化为指生物体在dna甲基转移酶（ dna methyltransferase, dmt）的催化下,以s- 腺苷甲硫氨酸（sam）为甲基供体,将甲基转移 到特定的碱基上的过程；dna甲基化可以发生在腺嘌呤的n-6 位.胞嘧啶的n-4 位.鸟嘌呤的 n-7 位或胞嘧啶的c-5 位等；但在

25、哺乳动物中dna甲基化主要发生在5 -cpg-3的 c 上生成 5- 甲基胞嘧啶（ 5mc）；18.什么为基因印记？它的主要特点为什么？答：基因印迹, 为表观遗传调剂的一种形式,为指两个亲本等位基因的差异性甲基化造成了一个亲本等位基因的缄默,另一个亲本等位基因保持单等位基因活性； 2. 特点； a 每一个印记基因簇由一个印记掌握元件（ imprint control element , ice）所掌握； b 也称为印记掌握区域（ imprint control region, icr）或者印记中心（ imprint centre ,ic ） c 绝大多数都有 cpgislands ,能够发生

26、dna 甲基化； d 在 cpgislands ,内或邻近常有成簇的.有向的重复片段 ；19.请表达肝细胞对胰高血糖素或肾上腺素的反应过程；简洁答案： 肾上腺素能受体激活与 gi 偶联 ac活性下降 camp活性下降平滑肌舒张；胰高血糖素能受体激活 gs.增加 ac活性 camp pka（增加肝糖原分解）表达答案： 肾上腺素和胰高血糖素中的任何一种激素同肝细胞膜上相应受体结合后激化g 蛋白, g蛋白化 a 亚基, a 亚基激化腺苷酸环化酶ac , ac催化小分子信使camp的产生, camp结合 pka,通过变构调剂作用激化pka,pka通过磷酸化作用激化或抑制各种效应蛋白, 连续传递信号,

27、pka激活磷酸化酶b 激酶,促进糖原的分解代谢,糖原分解成1- 磷酸葡萄糖,精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载然后进一步分解为6- 磷酸葡萄糖随后进入血液；激活的 pka计入细胞核使camp反应元件结 合蛋白 creb）磷酸化；磷酸化的creb结合于 camp反应元件（ cre）,并与 creb结合蛋白（cbp）结合；与creb结合后的cbp作用于通用转录因子（包括tfiib ） 、 促进 cfiib 等通用转录因子与启动子结合激活基因的表达； 20.细胞膜在信号转导的过程中起到怎样的作用？答案 1： 屏障作用,位于细胞膜的某些能特异性地与外源性物质结婚,并诱发细胞

28、产生某些特定的生理生化反应,并最终产生生物学效应的物质；答案 2：每个细胞在机体内并非孤立地存在,而为不断受到其生活环境中各种理化因素的影响；各种信号,如化学.机械.电刺激信号,一般第一作用于细胞膜,膜上某些特异性蛋白质能挑选性地接受某种特定信号,引起细胞膜两侧电位变化或细胞内发生某些功能转变；细胞膜的这种作用称为跨膜信号转导功能；细胞通过位于胞膜或胞内的受体感受胞外信息分子的刺激, 经复杂的细胞内信号转导系统的转换而影响其生物学功能, 这一过程称为细胞信号转导, 这为细胞对外界刺激做出应答反应的基本生物学方式； 其中, 水溶性信息分子如肽类激素. 生长因子及某些脂溶性信息分子 如前列腺素 等

29、,不能穿过细胞膜, 需通过与膜表面的特别受体相结合才能激活细胞内信息分子, 经信号转导的级联反应将细胞外信息传递至胞浆或核内,调剂靶细胞功能,这一过程称为跨膜信号转导；其过程包括： 胞外信号被质膜上的特异性受体蛋白识别,受体被活化；通过胞内信号转导物 蛋白激酶,其次信使等的相互作用传递信号；信号导致效 应物蛋白的活化,引发细胞应答 如激活核内转录因子,调剂基因表达 ；脂溶性信息分子如类固醇激素和甲状腺素等能穿过细胞膜,与位于胞浆或核内的受体结合,激活的受体作为转录因子,转变靶基因的转录活性,从而诱发细胞特定的应答反应； 21.简述 crispr/cas-9的基本原理及优点（与传统的基于同源重组

30、的胚胎干细胞基因敲除相比较）；答： crispr/cas-9 此系统的工作原理为 crrna（ crispr-derived rna ）通过碱基配对与 tracrrna （trans-activating rna）结合形成tracrrna/crrna复合物,此复合物引导核酸 酶 cas9 蛋白在与crrna 配对的序列靶位点剪切双连dna；而通过人工设计这两种rna,可以改造形成具有引导作用的sgdna（ short guide rna）,足以引导case9 对 dna的定点切割；作为一种rna导向的 dsdna结合蛋白, cas9 效应物核酸酶为已知的第一个统一因子（unifyingfact

31、or）,能够共定位rna.dna和蛋白,从而拥有庞大的改造潜力；将蛋白与无核酸酶的case9（cas9 nuclease-null融合,并表达适当的sgdna,可靶定任何dsdna 序列, 而 sgdna的末端可连接到目标,不影响的结合；因此,能在 任何 dna序列处带来任何融合蛋白及rna,这为生物体的讨论和改造带来庞大潜力；优点： 1.靶向精确性更高；rna靶向序列和基因组序必需完全匹配cas9 才会对 dna进行剪切； 2.可实现对靶基因多个位点同时敲出；3.试验周期短,最快仅需2 个月,节约大量时间和成本； 4.无物种限制；22.为何在挑选靶基因敲除的胚胎干细胞时仍需经受阴性挑选过程？

32、简述更昔洛韦（ ganciclovir）在胚胎干细胞阴性挑选中的作用机制；p24、26 题23.基本概念 sirnamirna； dicer protein；risc；ptgssirna：为一种小rna分子 21-25核苷酸 ,由 dicerrnaase家族中对双链rna具有特异性的酶 加工而成； sirna 为 sirisc 的主要成员,激发与之互补的目标mrna的缄默；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载mirna：为在真核生物中发觉的一类内源性的具有调控功能的非编码rna,其大小长约2025个核苷酸；成熟的mirnas为由较长的初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加

33、工而产生的,随后组装进rna诱导的缄默复合体,通过碱基互补配对的方式识别靶mrn,a 并依据互补程度的不同指导缄默复合体降解靶mrna或者阻遏靶mrna的翻译；dicer protein：一种核糖核酸内切酶,属于rnaseiii家族中特异识别双链rna的一员,它能以一种atp依靠的方式逐步切割由外源导入或者由转基因,病毒感染等各种方式引入的双链 rna,切割将rna降解为 19-21bp 的双链 rnasdsrnas,每个片段的3' 端都有 2 个碱基突出；risc：rna-induced silencingcomplex risc ：一种 rna-蛋白质复合物,通过与目标mrna完全

34、或者部分的互补配对来实施切割或者翻译抑制功能；sirna组装 sirisc , mirna组装mirisc；riscs（无论 sirisc 仍为 mirisc）包括两种类型：切割型和不切割型；现在的研 究说明, risc当中的 ago蛋白质打算了risc 为切割型的仍为不切割型的； ptgs：转录后基因缄默：在基因转录后的水平上通过对靶rna进行特异性降解而使其失活；24.请说明 rnai的作用机制；答： dsrna进入细胞内,被一种具有类似rnasetli活性的核酸内切酶dicer结合,并被酶切成 19 23nt 的小干扰rnasmall interference rna,sirna ,在

35、atp的作用下, sirna与由多种蛋白质结合形成且具有活性的rna缄默复合物 rna in duced silencing co1tipiex , risc 结合, risc具有解螺旋酶的功能,使与其结合的sirna 双链解螺旋成单链,释放正义链,保留反义链,随后识别并结合细胞内与其反义链相互补的mrna链； risc将 mrna剪切成 sirna 双链,降解mrm,a 使靶基因表达缄默；20xx 年 p11 页 7 题；25.请分析说明 suguo 的试验结果；答：suguo 的试验证明白导入一个目的基因的正义与反义rna可以达到敲除某个基因的效 果；由于该基因的野生型与突变型在胚芽时有对

36、称与不对称的差异,所以她想从rna共抑制现象（以前的讨论结果）的基础上实现产生变异的成效,但为由于当时仍没有讨论清晰究竟 为哪种 rna起到了抑制的作用,所以她同时导入了正义与反义rna,她当时的分析为反义的rna可以特异性的与mrna结合,从而阻挡rna的翻译以及以后的步骤,当然最终她胜利了, 用现在的科学成果进行分析和说明,由于她导入了正义与反义rna,使得正义与反义rna在细胞内特异性的互补形成了dsrna,然后在被dicer酶切割为干扰dsrna,然后随着risc形成并识别降解mrn；a26.什么为细胞凋亡（ cell apoptosis）？答：细胞凋亡为指为维护内环境稳固,由基因掌握

37、的细胞自主的有序死亡；27.细胞凋亡有哪两条主要的途径？答：细胞凋亡信号转导的两大途径a: 由死亡受体（fas.tnfr）介导的外源途径；在这条途径中,启动capase-8第一被激活；b：线粒体介导的内源途径；在这条途径中,启动caspase 9 第一被激活；28.bcl2 家族的分类和结构特点？答： bcl-2家族成员分为两类a：抗细胞凋亡,如bcl-2 .bcl-xl.a1.bcl-w .mcl-1.在这类分子中,都有bcl-2同源区1-4 的结构； b：促进细胞凋亡；在这类分子中, 又分为 两个亚族 ：bax 亚族, 如 bax.bak；bok,有 bh1.bh2和 bh3的结构；bh-

38、only 亚族, 如 bik、bad、bid.bim,只有 bh3的结构；1988,vaux 等在依靠il-3的 b 淋巴细胞中发觉, 转染 bcl-2基因能够阻挡剥夺了il-3的 b细胞的凋亡；因而,bcl-2为第一个被发觉的靠阻挡细胞死亡而非促进细胞增殖起作用的癌精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载基因；bcl-2 抗凋亡作用的机制 : 通过与促凋亡蛋白相互作用而抑制细胞凋亡； bax 为细胞凋亡促进因子； bax 自身可以组成同二聚体,也可以与 bcl-2 构成异二聚体； bcl-2 与 bax 蛋白量的比率打算异二聚体与同二聚体的比值； 这对打算细胞凋亡的易感

39、性起关键作用； 假如bcl-2的过度表达,与bax 形成异二聚体中的bax,使 bax 游离而促进细胞凋亡；bad 为细胞凋亡促进因子； bad 可以置换bcl-2/bax异二聚体中的bax,使 bax 游离而促进细胞凋亡；bad 缺乏典型的c 端跨膜结构,说明它并非一完整膜蛋白；29.p53 基因在细胞 dna损耗中的作用？答： p53并非为全部细胞的凋亡过程所必需,但对dna损耗而诱发的细胞凋亡却为必不行少的；p53 的两大功能： a; 使细胞在 g1 期停滞； 当 dna损耗后, p53 第一诱导细胞进入g1期,抑制细胞增殖,直至损耗的dna修复； b：一旦 dna不能被修复,p53 就

40、会活化那些诱导细 胞凋亡的基因转录,使细胞发生凋亡；30.转录组及蛋白组的概念分别为什么？其讨论内容分别包括哪些方面？答：转录组指生命单元（通常为一种细胞）所能转录出来的可直接参与蛋白质翻译的mrna总和,而其他全部非编码rna 均可归为rna 组；讨论内容：目前,转录组学讨论的侧重点涉及基因转录的区域.转录因子结合位点.染色质修饰.dna 甲基化位点等；蛋白组： 细胞. 组织或机体在特定时间和空间上表达的全部蛋白质；蛋白质组学的讨论主要涉及两个方面：一为蛋白质组表达模式的讨论,即结构蛋白质组学,二为蛋白质组功能模式的讨论,即功能蛋白质组学；（一）蛋白质鉴定为蛋白质组学的基本任务（二）翻译后修

41、饰的鉴定有助于蛋白质功能的阐明（三）蛋白质功能确定为蛋白质组学的根本目的31.如何利用转录组学及蛋白组学的方法挑选相关基因？（写出主要的检测指标及其试验方法名称）答：转录组的讨论方法:cdna 芯片.基因芯片的探针；基因表达系列分析技术（ sage）：获得能代表某一转录体特异性信息的标签tag约为 9 14bp; 连接标签组成的dna 片段 、即形成串联体concatemer、进行扩增后测序分析、得到代表转录体信息的标签序列 ;同一标签的重复次数代表该转录体的表达水平大规模平行信号测序系统（mpss）其基本方法为从生物样品中提取mrna,将 mrna分子转换成cdna ,通过固相克隆将该 cd

42、na 匀称地加载到特制的小分子载体表面,然后在小分子载体上进行大量的pcr 扩增；将全部cdna 游离的一端进行精确测序产生16 至 20 个碱基；每一特定序列在整个生 物样品中所占的比例,就代表了含有该cdna 基因在样品中的相对表达水平；基因表达聚类分析；蛋白组讨论方法：蛋白质分别技术：凝胶双向电泳.hplc蛋白质鉴定技术：edman测序.质谱技术图像分析与生物信息：图像分析软件,数据库相互作用讨论技术：酵母双杂交技术.免疫共沉淀.蛋白质芯片等；32.线粒体遗传有哪些特点？答： p25 页, 35 题33.讨论动物毒素对治疗人类疾病和药物开发有哪些启示？可详细举两个例子进行阐述；答：揭示人

43、类自身的生理病理机制：运用动物毒素作为分子探针去解析人类生理性蛋白多肽的功能和分子机制,最终阐明疾病的发生进展机制；测定动物毒素分子的药理学和毒理学作用（体内）（人类被有毒动物损害后的症状可作为很好的参考）精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载学习必备欢迎下载确定动物毒素与非膜蛋白分子靶点,细胞膜通道及受体的相互作用机制动物毒素的作用靶标多为细胞膜通道及受体,而膜通道及受体的变异与功能调制失常就为导致很多人类疾病的根源；动物毒素具有三个显著特点：1高活力和高专一性；(2) 在协同进化促使下,动物毒素出现丰富的多样性；(3) 差异的生态环境使不同地域动物毒素具有功能和结构的特别性； 在地

44、域宽阔和生态复杂的我国,动物毒素的上述特点使其在竞争猛烈的新药研发中成为不行替代的自然药物资源；水蛭素：性质：从水蛭唾液腺中分别的多肽,含有65aa,mw约为 7 kda；n端结合凝血酶的催化位点,c 端结合 exosite-i（凝血酶的底物识别部位、富含碱性aa）, 可高度特异性的抑制凝血酶,阻碍凝血酶的蛋白水解功能；用途： 用于治疗静脉血栓和充满 性血管凝血；衍生药物：重组水蛭素；聚乙二醇偶联的水蛭素；白蛋白与水蛭素的融合体等；34.讨论动物毒素的方法有哪些,所面临的问题有哪些？答：讨论手段和方法：生物化学与分子生物学.生物信息学技术结构测定. 蛋白质组学和转录组学技术.电生理技术. 细胞

45、生物学. 药效学 / 药动学 / 药剂学.动物行为学和模式动物模型；面临的问题： 运用传统生物化学方法纯化得到的动物毒素的数量有限,稍微的污染将会得出错误的结论 依据基因组学和转录组学讨论,可以化学合成以及重组表达动物毒素,从而保证数量和质量 ；动物毒素分子与目标蛋白分子的相互作用通常用体外的方法检测,不能照实反映其与目标分子在体内正确的相互作用；加强有毒动物资源的爱护以及建立和完善动物毒素资源库 毒素基因文库, 多肽毒素组学库,有毒动物种质资源库等 ；加强不同领域讨论人员的紧密合作,促进毒素讨论的进展；35.如何看待基因治疗的安全性及社会伦理问题；20xx 级 16 页 20 题,或者 20

46、xx 级 10 页 40 题36.疾病讨论的相关基因功能讨论的方法及策略开放性题,可能为最终一道题 （大家都想想完了再整理一下； ；）37.结合你的专业,论述线粒体与医学的关系；答：线粒体的主要功能为进行氧化磷酸化,合成atp,为细胞生命活动供应能量；线粒体为糖类.脂肪和氨基酸等物质最终氧化释能的场所；糖类和脂肪等养分物质在细胞质中经过降解作用产生丙酮酸和脂肪酸,这些物质进入线粒体基质中,再经过一系列分解代谢形成乙酰辅酶 a,即可进一步参与三羧酸循环；三羧酸循环中脱下的氢,经线粒体内膜上的电子传递链 呼吸链 ,最终传递给氧,生成水；线粒体与帕金森氏症parkinson s disease；pd

47、帕金森病为一种慢性神经系统退行性疾病,为由中脑黑质致密部多巴胺神经元挑选性变性死亡.纹状体多巴胺削减所致,其发病机制目前并不很清线粒体呼吸链为体内氧自由基产生的主要部位,呼吸链中任何部位受到抑制都会使自由基产生增多； pd患者黑质中线粒体酶复合体i 缺陷会导致自由基产生增多,atp合成削减； 能量的削减会造成细胞内离子失衡,膜电位下降,导致一些电压依靠的ca2+通道的连续开放, 造成 ca2+急剧内流,细胞内ca2+增多,耗竭细胞内atp,同时通过活化蛋白酶.脂肪酶. 核酸内切酶,介导了兴奋毒性的细胞损耗,造成神经元死亡；近年来仍发觉,线粒体掌握核 的程序化死亡 apoptosis,体外试验说明低浓度的mpp+对酶复合体i 的抑制可以造成培育的多巴胺能神经元的程序化死亡,而高浓度主要引起细胞的坏死旧j；mo chizuki等发觉精品学习资料精选学习资料