EMEA人用药品委员会(CHMP)《遗传毒性杂质限度指导原则》中文译稿

1、1 emea人用药品委员会(chmp)遗传毒性杂质限度指导原 则原文：european medicines agency: guideline on the limits of genotoxic impurities.cpmp/swp/5199/02。emea/chmp/qwp/251344/2006。london, 28 june 2006关键词：朵质；遗传毒性；毒理学担忧阈值(ttc)；构效关系(sar)摘要遗传毒性杂质的毒理学评佔和药物原料屮此类杂质的可接受限度确定是难 题，现冇ichq3x指南中未充分说明。常用遗传毒性杂质数据库差异很大，而 数据库是决定(dictates)pt接受限

2、度评估所用方法的主要因素。当运用已建立风险 评估方法所需资料缺乏时，包括致癌性长期试验资料或提供遗传毒性阈值机制证 据的资料等，建议采用毒理学担忧阈值(ttc)所定义的普遍适用方法。对大部分 药物(pharmaceuticals),认为ttc值为遗传毒性杂质摄入量l5(lig/天时相关的风 险可接受(一生屮额外的癌症风险1/100000)o根据该阈值，药物原料屮允许水平 可根据预计每曰剂量计算得到。短期暴露等特定情况下可能有理由提高限度。1.1前言在原料药(q3a,新药物原料中的杂质)和药物制剂(q3b,新药物制剂中 的杂质)的指导原则中描述了杂质限度确定的一般概念，将限度确定定义为确定 在特

3、定水平下单个朵质或给定朵质谱的生物学安全性的资料的获得和评价过程。 对于有遗传毒性潜力的杂质，确定可接受剂量水平通常被认为是特别重要的问题, 现冇指导原则尚未专门涵盖。木指导原则阐述了如何处理新药物原料中遗传毒性朵质的一般框架和实践 方法。若新申请的己有药物原料经合成路线、过程控制和杂质谱评估未提供合理 保证，证明与eu已批准的含相同药物原料的药品相比，未引入新的或更高水平 的遗传毒性杂质，本指导原则也适用于已有约物原料的新中请。同样也适用于现 已冇上市许可与合成相关的变更。不过，除罪冇特殊原因需关注，本指导原则无 需追溯已批准药品。木文屮，将化合物(杂质)归类为遗传毒性物质，一般指在主要着重

4、于检测有 直接损伤dna潜力的dna反应物质的既定(established)体外或体内遗传毒性试 验中冇阳性结果。单个体外结果可在充分的后续试验中评估体内相关性。缺乏此 类信息的体外遗传毒性物质通常被认为是可能的体内致突变物和致癌物。1.3法律基础阅读本指导原则应结合指令2001/83/ec(修订)和所有相关chmp指南文件, 尤其着重于：杂质检测指导原则：新药物原料屮的杂质。impurities testing guideline: impurities in new drug substances (cpmp/ich/2737/99, ichq3a(r)新药物制剂中的杂质指南注释(note

5、)o note for guidance on impurities in new drug products (cpmp/ich/2738/99, ichq3b (r)杂质指南注释：残留溶剂。note for guidance on impurities: residual solvents (cpmp/ich/283/95)遗传毒性指南注释：药物遗传毒性试验管理的特殊方而指南。note for guidance on genotoxicity: guidance on specific aspects of regulatory genotoxicity tests for pharmac

6、euticals (cpmp/ich/141/95, ichs2a)1遗传毒性指南注释：药物遗传毒性试验标准组合。note for guidance ongenotoxicity: a standard battery for genotoxicity testing of pharmaceuticals (cpmp/ich/174/95, ichs2b)1.4毒理学背景按口前的管理实践，认为具有（体内）遗传毒性的化合物在任何暴露水平下 都有可能对dna产生损伤，而这种损伤可能导致/促进肿瘤发生。因此，对于遗 传毒性致癌物，应谨慎认为，不存在可识别的阈值，任何暴露水平都存在风险。不过，人们逐渐

7、认识到存在产生生物学意义阈值效应的机理，包括遗传毒性 事件。对于与非dna靶标相互作用的化合物和在与关键靶标得以接触之前就快 速解毒的潜在致突变剂，更是如此。这些化合物的管理方法可依据确定关键的未 观察到效应水平（noel）和采用不确定因子。即使对于能与dna分子反应的化合物，由于低剂量下多种保护机制冇效运 作，将高剂量试验的效应线性外推至极低水平（人类）暴露时也可能不合理。不过, 目前极难用实验证明给定致突变剂的遗传毒性存在阈值。因而，缺乏支持遗传毒 性化合物存在阈值的适当证据，使得难以确定安全剂量，故有必要采用可接受风 险相应暴露水平的概念。1.5建议如q3a指导原则所述，应根据对合成中涉

8、及的化学反应、可能影响新药物 原料杂质谱的起始原料相关杂质、可能降解产物的完整科学评估，鉴别在新约物 原料合成、纯化和贮存期间最可能出现的实际和可能杂质。此种讨论可限于那些 根据涉及的化学反应和条件的信息可合理预计的朵质。应依据已有遗传毒性数据 或是否存在结构警示来鉴别潜在遗传毒性杂质。当一个潜在杂质含有结构警示时, 应考虑进行附加的杂质遗传毒性试验，尤其是细菌回复突变试验（dobo et al. 2006, muller et al. 2006）。尽管按q3a指导原则，此类试验通常可用含所需控制杂质的 药物原料实施，但是用丁此h的，采用分离的朵质进行试验合适得多，因而被高 度推荐。对于确定遗

9、传毒性致癌物的口j接受暴霜水平，口j能的作用机制和剂量效应 关系的考量是重要环节。根据以上考量，遗传毒性杂质可分为以卜两类：-冇阈值-相关机尙0的充分证据的遗传毒性化合物-无阈值相关机制的充分证据的遗传毒性化合物1.5.1有阈值相关机制充分证据的遗传毒性化合物可能证明导致非线性或有阈值的剂量效应关系的遗传毒性机制包括与细胞 分裂纺锤体相互作用导致非整倍体、拓扑异构酶抑制、dna合成抑制、防御机 制过度、代谢过度及生理性干扰（如，诱导红细胞生成、高或低体温）。对于有遗传毒性阈值的明确证据的化合物（类别），可按照q3c“朵质指南注 释：残留溶剂”屮对二类溶剂描述的方法确定无可察觉的遗传毒性风险的暴

10、露水 平。该方法在大部分相关（动物）实验屮采用“不确定因子"uf）计算由noel或观 察到效应最低水平（loel）导岀的“允许每r暴露”（pde）。1.5.2 无阈值相关机制充分证据的遗传毒性化合物未鉴别到阈值机制的遗传毒性杂质的可接受性评估应包扌舌药学和毒理学评 价。一般，不可能避免朵质时，药学衡量应遵照控制至“合理可行尽可能低（as low as reasonably practicable广（alarp原则）水平策略。药学评估后认为符合alarp 原则的水平应从毒理学角度评估可接受性（见决策树和下文）。1.5.2.1药学方面评估申请中应作为对杂质全面讨论（见q3a（r）的一部分

11、提供对潜在遗传毒性杂 质的专门讨论。应根据现冇制剂选择和技术提供拟用制剂/生产策略的原理。申请者应在化 学过程和药物原料的杂质谱中突出用作试剂或以中间体或副产物存在的所有已 知冇遗传毒性和/或致癌性的化学物质（如烷化剂）。更广泛地，应考虑显示药物原 料不具有的遗传毒性“警示结构''的反应物质和物质（见如dobo等，2006）。若存 在不会导致终产品中遗传毒性残留的可能替代物，则应采用。需要提供不存在可行替代的说明，包括合成或制剂的替代路线、不同起始原 料。这可能包括导致遗传毒性和/或致癌性潜力的结构与化学合成中所需结构相 同等情况（如烷化反应）。若认为药物原料中遗传毒性杂质不可

12、避免，应采取技术手段（如纯化步骤）降 低终产品屮遗传毒性残留物的含量，使z符合安全性要求或至合理可行尽可能低 的水平（见妥全性评估）。应在该评估中包含反应中间体、试剂和其他组分的化学 稳定性资料。这些残留物的检测和/或定量应采用最if （state-of-the-art）分析技术。1.5.2.2毒理学评估鉴于无阈值的遗传毒性致癌物不可能确定安全暴露水平（零风险概念），而且 通常无法完全去除药物原料屮的遗传毒性杂质，需要施行“可接受风险水平"的概 念，即每日人体暴露估计值，在该值或低于该值时对人体健康的风险可忽略。在 q3c“杂质指南注释：一类残留溶剂"中考虑了可接受风险水平

13、的导出规程。不过, 这些方法要求有足够长期致癌性试验资料。遗传毒性杂质毒理学评估多数情况下仅冇杂质的体外试验资料（如，ames试 验，染色体畸变试验），因而无法采用既定（established）方法确定可接受摄入水平。 认为由体外数据（如ames试验）的“安全倍数十算论证可接受限度不恰当。而且 由于检测方法缺乏敏感性，用含低ppm水平杂质的药物原料得到的致癌性和遗 传毒性阴性数据不能提供设定杂质可接受限度的足够保证。当作为药物原料的组 分检测时，即在极低暴露水平下，即使是强致突变剂和致癌剂也很可能检测不到。 因而需要一种实用的方法，识别存在与不可接受风险不相关的遗传毒性杂质极低 水平。1.5.

14、2.3毒理学担忧阈值（ttc）应用已开发了毒理学担忧阈值（ttc）来确定任何未研究化合物不引起显著致癌或 其他毒性作用风险的通常暴露水平（munro等1999, kroes和kozianowski 2002）。 该ttc值估计为1.5曲/人/天。该ttc最初在fda开发用作食品接触材料的“管 理阈值"（rulis 1989, fda 1995）, ttc值的确定是基于对致癌性强度数据库屮 343种致癌物的分析（gold等1984）,并经反复评估确证，将数据库扩展至700余 种致癌物（munro 1990, cheeseman等1999, kroes等2004）。致癌性强度的概率 分布

15、用于推导大部分致癌物的每日暴露水平（pg/人）的估计值，该暴露水平下导致 一生屮增加的致癌风险上限低于1/1 000 000（"实际安全剂量”）。进一步分析高强 度致癌物子集，对于存在增加潜在遗传毒性担忧的结构警示的化合物，形成低 10倍的ttc（0.15pg/天）的建议（kroes等2004）。不过，在药物原料的遗传毒性 杂质可接受限度评佔中采用ttc值1.5曲/天，和当于一生致癌风险增加10-5是 合理的，因为药物存在获益。应认识到，本文屮ttc值基于的方法通常被认为 是非常保守的，因为是由肿瘤发生率50%的剂量（td50）简单线性外推至发生率 1/106, a采用最敏感种屈和最

16、敏感部位的td50数据（多沖泯差条件”假 设）（munro 等 1999）。确定了某些结构基团强度高至即便低于ttc摄入也会引起较高概率的显著 致癌性风险（cheeseman等1999, kroes等2004）。ttc法需除外此类高强度遗传 毒性致癌物，包括类黄曲霉毒索、n亚硝基类和氧化偶氮基类化合物。此类化合 物的风险评估需要化合物特异性毒性数据。根据遗传毒性结果，可能冇背离ttc值的理由。体外试验阳性，若根据证 据权重法有力证明结果缺乏体内相关性，仅允许免除朵质限度定在ttc水平（见 ich s2指导原则）。该方法一般会需要杂质的一些附加体外和/或适当体内检测的 阴性结果。特定条件下，ttc值高于1.5pg/h也可以接受，如短期暴露、用于治疗威胁 生命的疾病、预计生存期短丁 5年，或杂质为已知物质而rtl其他来源（如食物）的 人体暴露多得多。也是重要代谢产物的遗传毒性杂质可根据代谢产物的可接受性 评估。由ttc推算的药物原料中遗传毒性杂质的浓度限度（ppm）可根据患者每口预 期剂量用下式计算：浓度限度二剂量（g/doy）ttc概念不应该用于有足够毒性资料（长期试验）而能作化合物特异性风险 评估的致癌物。应强调，ttc是一个采用概率方法学的实用风险管理工具，也就是，若未 知致癌性潜力/强度的遗传毒