检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质

1、教学目标教学目标 尝试检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质，探讨细胞中主要化合物的种类。 一、实验原理：一、实验原理：淀粉淀粉+碘液碘液 蓝色蓝色 50-65水浴水浴还原糖还原糖+斐林试剂斐林试剂 砖红色沉淀砖红色沉淀 （Cu2O）（还原糖：单糖、麦芽糖、乳糖）（还原糖：单糖、麦芽糖、乳糖）蛋白质蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂 紫色络合物紫色络合物脂肪脂肪+苏丹苏丹（） 橘黄色（红色）橘黄色（红色）还原糖检测还原糖检测实验的实验实验的实验结果结果蛋白质检测蛋白质检测实验的实验实验的实验结果结果脂肪检测脂肪检测实验的实实验的实验结果验结果二、材料二、材料还原糖：应选还原糖：应选含糖高含糖高，颜色为，

2、颜色为白色或近于白色白色或近于白色的的植物组织（植物组织（防止颜色干扰实验现象的观察防止颜色干扰实验现象的观察），），如苹果、梨、葡萄如苹果、梨、葡萄淀粉：马铃薯淀粉：马铃薯脂肪：花生子叶、花生匀浆脂肪：花生子叶、花生匀浆蛋白质：豆浆、鲜肝提取液、鸡蛋清（稀释）蛋白质：豆浆、鲜肝提取液、鸡蛋清（稀释）三、用具三、用具斐林试剂（新制斐林试剂（新制Cu （OH ）2）A液、液、0.1g/ml NaOHB液液 、0.05g/ml CuSO4四、试剂四、试剂先混合，再使用；现配现用先混合，再使用；现配现用等体积混合等体积混合新制新制斐林试剂斐林试剂是是氢氧化铜氢氧化铜，可溶性可溶性还原糖还原糖中含有中

3、含有醛基（醛基（-CHO）或酮基，具有弱）或酮基，具有弱还原性还原性，在水浴，在水浴加热的情况下可以把加热的情况下可以把Cu2+还原成砖红色的还原成砖红色的Cu2O（氧化亚铜氧化亚铜） 双缩脲试剂双缩脲试剂:A液、液、0.1g/ml NaOHB液液 、0.01g/ml CuSO4注意：先加注意：先加A液液1毫升，毫升， 再滴加再滴加B液液34滴滴尿素和合成双缩脲的化学反应式尿素和合成双缩脲的化学反应式 尿素尿素尿素尿素双缩脲双缩脲双缩脲试剂检测蛋白质中的肽键双缩脲试剂检测蛋白质中的肽键在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物，称为双缩脲反应。形成紫色络

4、合物，称为双缩脲反应。 双缩脲试剂检测肽键双缩脲试剂检测肽键苏丹苏丹或苏丹或苏丹染液、染液、体积分数为体积分数为50%的酒精溶液，碘液、的酒精溶液，碘液、 蒸馏水。蒸馏水。还原性糖还原性糖+斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀还原性糖：葡萄糖还原性糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等、果糖、麦芽糖、乳糖等非还原性糖：蔗糖、淀粉等非还原性糖：蔗糖、淀粉等制备苹果的制备苹果的组织样液组织样液（实验员（实验员老师准备）。老师准备）。用量筒去用量筒去2ml组织样液，再用组织样液，再用量筒取量筒取1ml新配制好的斐林试剂。新配制好的斐林试剂。取一只试管，将取一只试管，将2ml苹果组织样液倒苹果组织样液倒1m

5、l斐林试剂混合均匀，此时溶液呈蓝斐林试剂混合均匀，此时溶液呈蓝色。色。水浴加热水浴加热:将试管放入盛将试管放入盛有温水的大烧杯中，用酒精有温水的大烧杯中，用酒精灯加热到灯加热到50-65。(注意注意问题：实验册问题：实验册P7第第10点点)溶液的颜色变化过程：淡蓝溶液的颜色变化过程：淡蓝色色棕色棕色砖红色（沉砖红色（沉淀）。淀）。溶液的颜色从蓝色变成砖红色沉淀。溶液的颜色从蓝色变成砖红色沉淀。苹果中含有还原性的糖。苹果中含有还原性的糖。脂肪脂肪+苏丹苏丹橘黄色橘黄色脂肪脂肪+苏丹苏丹红色红色方法一：取少量脂肪样液，方法一：取少量脂肪样液，加入加入3滴苏丹滴苏丹，震荡，震荡，可看到溶液呈了橘黄色

6、可看到溶液呈了橘黄色实验材料要求实验材料要求种子颗粒较大，便于切片种子颗粒较大，便于切片制作制作：不能用：不能用芝麻芝麻脂肪含量高：不能用脂肪含量高：不能用玉米玉米花生是比较理花生是比较理想的实验材料想的实验材料显微镜、镊子、毛显微镜、镊子、毛笔、吸水纸、刀片、笔、吸水纸、刀片、载玻片、盖玻片、载玻片、盖玻片、培养皿培养皿50% %的酒精的酒精、苏丹、苏丹、清水清水取一粒浸泡过取一粒浸泡过3-4小时的花生种子，去小时的花生种子，去皮，分开两片子叶，将子叶切成薄片，然皮，分开两片子叶，将子叶切成薄片，然后用毛笔将花生薄皮放入盛有清水的培养后用毛笔将花生薄皮放入盛有清水的培养皿中。皿中。取一片载玻

7、片，用纱布擦净，用取一片载玻片，用纱布擦净，用毛笔取一片最薄的材料，放在载玻毛笔取一片最薄的材料，放在载玻片中央。片中央。用滴管在花生种子薄片上滴几滴用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹苏丹染液染液，染色，染色3分钟，用吸水纸吸去花分钟，用吸水纸吸去花生种子薄片周围的染液。生种子薄片周围的染液。在薄片上滴在薄片上滴1至至2滴体积分数为滴体积分数为50%的酒精的酒精，洗去浮色洗去浮色，用吸水，用吸水纸洗去花生子叶周围的酒精。纸洗去花生子叶周围的酒精。切片切片纸片纸片观察观察在薄片上滴一滴清水，盖在薄片上滴一滴清水，盖上盖玻片，制成临时装片。上盖玻片，制成临时装片。在低倍镜下寻找花生种子在低倍镜下寻找

8、花生种子薄片的最薄处，将这部分移薄片的最薄处，将这部分移至视野中央。至视野中央。用高倍显微镜观察花用高倍显微镜观察花生种子薄片。生种子薄片。低倍镜下观察低倍镜下观察高倍镜下观察高倍镜下观察显微镜下观察到橘黄色（显微镜下观察到橘黄色（或红色或红色）的）的颗粒。颗粒。花生种子细胞中含有脂肪。花生种子细胞中含有脂肪。蛋白质蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂紫色络合物紫色络合物豆浆、蛋清、牛奶都是很豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。好的实验材料。在用蛋清做实验材料时，在用蛋清做实验材料时，要注意将要注意将蛋清稀释蛋清稀释，如果，如果稀释不够，反应后的产物稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使会粘固在

9、试管内壁上，使反应不容易彻底。反应不容易彻底。试管架、试管、吸管试管架、试管、吸管蛋清稀释液蛋清稀释液双缩脲试剂双缩脲试剂A液、液、双缩脲试剂双缩脲试剂B液、液、量筒量筒用量筒量取用量筒量取2ml的蛋清稀释的蛋清稀释液。再用量筒取液。再用量筒取1ml双缩脲双缩脲尿试剂尿试剂A液液将量取的蛋清液和双缩脲试剂将量取的蛋清液和双缩脲试剂A液分别倒入到试管中，震荡液分别倒入到试管中，震荡均匀，此时可见试管内仍然是均匀，此时可见试管内仍然是透明的。透明的。再向试管中加入再向试管中加入3至至4滴双滴双缩脲试剂缩脲试剂B液。液。震荡均匀，此时可见试管内震荡均匀，此时可见试管内溶液呈紫色溶液呈紫色蛋清液呈紫色

10、。蛋清液呈紫色。蛋清液中含有蛋白质。蛋清液中含有蛋白质。注意事项：注意事项： 先加先加 ，再加，再加 鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比A液液1mlB液液4滴滴斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂双缩脲试剂甲液乙液A液B液成分0.1g/ml NaOH0.05g/mlCuSO40.1g/ml NaOH0.01g/mlCuSO4鉴定物质还原糖蛋白质添加顺序甲、乙两液等量混匀、现配现用先加入A液1ml，摇匀；再加入B液34滴，摇匀反应条件5065温水浴加热不需加热，摇匀即可（4）淀粉的检测和观察）淀粉的检测和观察颜色变化：颜色变化：变蓝变蓝1、在做生物组织中还原性

11、糖、蛋白质、脂、在做生物组织中还原性糖、蛋白质、脂肪的鉴定，对实验材料肪的鉴定，对实验材料的选择，叙述错误的是（的选择，叙述错误的是（ ）A.甘蔗的薄壁组织、甜菜的块根等，都含甘蔗的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于有较多的糖且近于白色，白色， 因此可以用于进因此可以用于进行还原糖的鉴定。行还原糖的鉴定。B.花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料脂肪鉴定的理想材料C.大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料。鉴定的理想植物组织材料。D.鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定鸡蛋清含蛋白质多，

12、是进行蛋白质鉴定的动物材料。的动物材料。A. .下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是 （ ） A A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定可直接用于蛋白质的鉴定 B B、脂肪的鉴定需要显微镜才能看到被染成橘黄色的、脂肪的鉴定需要显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴脂肪滴 C C鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加乙液后，再加乙液 D D用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A A液与液与B B液要混合均液要混合均匀后

13、，再加入含样品的试管中，且必须现用现配匀后，再加入含样品的试管中，且必须现用现配3 3下列各项可作为鉴定生物组织中还原性糖的理想材料下列各项可作为鉴定生物组织中还原性糖的理想材料是是（ ） A A韭菜韭菜 B B鸢尾鸢尾 C C菠菜菠菜 D D梨梨B BD D实战演练实战演练1(2012高考广东卷高考广东卷)分析下表，可推测分析下表，可推测()注：注：“”显色，显色，“”显色更深；显色更深；“”不显色。不显色。A甲溶液含有淀粉甲溶液含有淀粉B乙溶液含有还原糖乙溶液含有还原糖C混合溶液不含淀粉混合溶液不含淀粉 D混合溶液含有淀粉酶混合溶液含有淀粉酶溶液溶液双缩脲试剂双缩脲试剂碘液碘液斐林试剂斐林

14、试剂甲甲乙乙甲、乙混合甲、乙混合D2根据检测根据检测“生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”实验，回答问题：实验，回答问题：(1)检测成熟苹果果肉中存在还原糖所用的试剂是检测成熟苹果果肉中存在还原糖所用的试剂是_该试剂与细胞内还原糖发生作用，形成该试剂与细胞内还原糖发生作用，形成_沉淀。沉淀。 (2)在检测花生子叶中的脂肪的实验中，能将脂肪染成橘黄色的染在检测花生子叶中的脂肪的实验中，能将脂肪染成橘黄色的染液是液是_，用其染色时，冲洗浮色要用酒精，这是因为酒精，用其染色时，冲洗浮色要用酒精，这是因为酒精_。(3)检测黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双缩脲试剂检测黄

15、豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂摇匀。其中双缩脲试剂B的量的量只有只有34滴，而不能过量，为什么？滴，而不能过量，为什么？_斐林试剂斐林试剂砖红色砖红色苏丹苏丹能溶解苏丹能溶解苏丹过量的双缩脲试剂过量的双缩脲试剂B会与试剂会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色(4)本实验注意事项：本实验注意事项：斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需_，使用时再临时混合均匀用于实验。，使用时再临时混合均匀用于实验。双缩脲试剂的使用，应先加试剂双

16、缩脲试剂的使用，应先加试剂_，造成碱性环境，再加试剂造成碱性环境，再加试剂_。在可溶性还原糖的检测中，对试管中溶液加热时，试管底部不在可溶性还原糖的检测中，对试管中溶液加热时，试管底部不要触及要触及_；试管口不要朝向；试管口不要朝向_，以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。分别配制、储存分别配制、储存A液液(0.1 g/mL NaOH溶液溶液)B液液(0.01 g/mL CuSO4溶液溶液)烧杯底部烧杯底部实验者或其他人实验者或其他人(1) 图中图中A是是 ，B是是 。（2）图中）图中X是是 ，常用，常用 试剂检测，试剂检测，在小麦种子在小麦种子中主要是指中主要是指

17、。（3）图中）图中Y是是 ，其中含有糖是，其中含有糖是 。（4）图中）图中Z的种类有的种类有 种。种。（5）列举出）列举出的常见功的常见功能能 。（6）从）从P的角度分析的角度分析具有多样性的原具有多样性的原因因 。（7）HIV含有含有、中的中的 。课后习题课后习题 一、基础题1.(1) (2)2.苏丹染液 豆浆 砖红色沉淀 斐林试剂 马铃薯 橘黄色 双缩脲试剂 葡萄汁 蓝色 碘液 花生子叶 紫色3. B课后习题课后习题 二、拓展题1.提示：细胞是有生命的，它可以主动地从环境中获取生命活动需要的元素。这是生物与非生物的区别之一。不能。因为最基本的生命系统是细胞，将细胞内含有的各种物质放在试管中

18、，它们不能构成细胞这种结构。2.教学参考教学参考组成细胞化学元素的作用组成细胞化学元素的作用 1组成各种化合物 化学元素主要以化合物的形式参与细胞的组成和细胞的代谢活动，这些化合物是生物体进行各项生命活动的基础：如N：是核酸、蛋白质、NADP+、ATP、固醇、叶绿素、生长素、甲状腺激素等的重要组成成分；P是磷脂、NADP+、ATP等的重要组成成分等。2影响生物体的生命活动 如B可促进花粉的萌发和花粉管的伸长按元素的生物学功能，大致可分为下列类型。（1）、构成原生质的基本元素：如C、H、O、N、P是构成核酸的主要元素；C、H、O、N是构成蛋白质的主要元素等。（2）、调节机体活动的元素：如离子态的

19、Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、H+及其他离子OH-、HCO3-、SO42-、HPO42-等。（3）、与蛋白质结合的元素：如 Fe（血红蛋白、细胞色素、固氨酶等），Cu（血蓝素、细胞色素、氧化酶等），Mg（固氮酶），Co（构成维生素B12，在天然存在的形式中，维生素B12可能是与肽或蛋白质结合的），Zn（DNA聚合酶、 RNA聚合酶）， I（甲状腺蛋白质。这是一种含碘蛋白质，是人体内的碘库）Mn（精氨酸酶等多种酶）（4）微量调节元素：如B、Cr、Se、As、Ni等。这些元素是不可缺的，又是不可替代的。教学参考教学参考 关于细胞中各化合物含量的问题关于细胞中各化合物含量的问题 1. 组

20、织细胞中含量最多的化合物是水，可以说不论是哪种细胞（脂肪细胞一般除外），该细胞是处于什么季节，什么什么地方，在什么时期，细胞中水的含量都是最多，有机化物蛋白质的含量仅于第二。2.在细胞中各化合物的含量变化以核酸最为稳定，其变化范围较小且有规律性，而水的含量变化范围为最大。同时，各化合物在细胞中的含量也不能低于最低值，否则将影响细胞的生命。多细胞生物体内，由许多相似的细胞和细胞间质有机结合而成的结构，有一定的形态、结构和生理功能。 教学参考教学参考 三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1实验关键：（1）还原糖的鉴定a.材料应含糖量高且无色；b.斐林试剂的甲液和

21、乙液现配现用，混合均匀。（2）脂肪的鉴定子叶应切成薄片（3）蛋白质的鉴定实验关键：a.先加双缩脲试剂A，再加双缩脲试剂Bb.鸡蛋蛋白液必须稀释(10倍)教学参考教学参考 三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质2实验材料的准备(1)鉴定还原糖的实验材料准备：植物组织是常用的实验材料，但必须加以选择。在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉，暂时储藏在叶子内，因此最好不用双子叶植物的叶子做实验材料。有些单子叶植物，如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶内含有大量的还原单糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着

22、掩盖作用，导致实验现象不明显，因此，也不宜用单子叶植物的叶子做实验材料。本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅.或近于白色的.如苹果和梨的果实，经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。(2)鉴定脂肪的实验材料准备：实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子(取其子叶)。供实验用的花生种子，必须提前浸泡34h。浸泡时间短了，不容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。 教学参考教学参考 三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(3)鉴定蛋白质的实验材料准备：实验材料最好选用富含蛋白质的

23、生物组织(或器官)，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋(卵白)。如用大豆，必须提前浸泡12h，这样容易研磨成浆。有条件的学校，可以直接采用现成的大豆磨成的豆浆，豆浆可以购买，也可用小型的榨汁机制取。如果用稀释的卵白做实验材料，实验效果会更好。3实验的注意事项实验的注意事项(1)斐林试剂与双缩脲试剂的不同点斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但二者有如下3点不同：a.溶液浓度不同、斐林试剂中NaOH的浓度为0.1gmL，CuSO4的浓度为0.05gmL；双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1gmL，CuSO4的浓度为0.01gmL。b.使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。c.使用方法不同。斐林试剂使用时，先把NaOH溶液