白细胞介素―17与原发性肾病综合征相关性实验研究

1、白细胞介素一17与原发性肾病综合征相关性实验研究【摘要】目的探讨白细胞介素-17 (tl-17)与原发性肾病综合征(pns)的相关性。方法 采用酶联免疫吸附试验(elisa)检测35例pns 患者(肾病综合征组)和36例健康体检者(对照组)外周静脉血il-17 水平，比较两组il-17水平均数，再对肾病综合征组外周静脉血il-17 与其尿蛋白水平进行直线相关分析。结果肾病综合征组外周静脉血il-17 高于对照组(50. 77±7. 16) ng/l vs (33. 83±6. 23) ng/l, 差异有 统计学意义(t=10. 52,p<0.01)；肾病综合征组外周静

2、脉血il-17与其尿蛋白水平呈直线正相关(-0.72,p<0.01)o结论 原发性肾病综合征的发病可能与体内il-17水平的异常存在相关性。【关键词】原发性肾病综合征；白细胞介素-17；尿蛋白d0i： 10. 14163/j. cnki. 11-5547/r. 2015. 19. 002experimental research of correlation between interleukin-17 and primary nephrotic syndrome zhou hong-bin, pan yan-dong, zhang hong-yu. general department

3、 , guangzhou city baiyun district people' s hospital, guangzhou 510500, china【abstract objective to investigate correlation between interleukin-17 (il-17) and primary nephrotic syndrome (pns).methods enzyme-linked immuno sorbent assay (elisa) was appliedfor detecting il-17 levels in peripheral v

4、enous blood of 35 pns patients (nephrotic syndrome group) and 36 healthy people (control group) il-17 meal levels were compared between the two groups. linear correlation analysis was made on il-17 1evel in peripheral venous blood of nephrotic syndrome patients and their urinary protein level result

5、s the nephrotic syndrome group had much higher il-17 level in peripheral venous blood than the control group (50. 77±7. 16) ng/l vs (33. 83±6. 23) ng/l, and their difference had statistical significance (t=10. 52,p001) il一17 level inperipheral venous blood of nephrotic syndrome patients ha

6、d positive linear correlation with their urinary protein level (r=0. 72, p0.01) . conclusion morbidity of primary nephrotic syndrome may have correlation with abnormal il-17 leve1.key words primarynephrotic syndfome； tnterleukin-17； urine protein类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis , ra)是一种以关节慢性 炎症和骨质破坏为主的自

7、身免疫性疾病，其特征是手、足小关节的多关 节、对称性、侵袭性关节炎症，经常伴冇关节外器官受累及血清类风湿 因子阳性，可以导致关节畸形其至功能丧失。一般认为，该病成因可能 与遗传、感染、性激素等有关，也有研究认为口身免疫功能失调及细胞 因子表达过度在ra发病中也占有重要地位。有证据表明：一种t细胞的 新亚型（thl7细胞）分泌的il-17、il-6、il-23等多种细胞因子，可 能参与了多种自身免疫疾病发生过程1-4 o本研究旨在分析ra患者体内 thl7细胞分泌的多种细胞因子的表达水平，以期对临床防控该病带来帮 助。1资料与方法1. 1 一般资料 所有ra病例均来自佛山市第五人民医院2013年

8、112月住院患者及门诊患者，ra病例根据das28评分(28 joint disease activity score, das28)分为活动组和缓解组，同时从体检中心选取 年龄、性别匹配人群作为对照组。活动组：35例，其中男6例，女29例, 平均年龄(49.6土 15.2)岁,das28>5. 1分；缓解组：35例，其中男 8例，女27例，平均年龄(462±134)岁，das28<2. 6分；对照组: 30例，其中男7例，女23例，平均年龄(47.5±11.2)岁。诊断均 符合1987年美国风湿病协会ra分类诊断标准。1. 2排除标准近期感染、肿瘤、血液系统疾

9、病和其他自身免疫性疾 病患者为木研究排除标准。1. 3实验仪器及耗材为保证条件的一致性及可比性，要求所有实 验对象均在入院后治疗前早晨空腹坐姿抽取静脉血作检测标本，送检血 样必须在2 h内分离血清待检，不能立即检测者，标本应置于-40°c冰 箱待测并注意不得反复冻融；实验仪器采用郑州安图全自动酶标分析仪， 对应耗材为厂家原厂配套试剂，测试过程中同时选择高低两个质控品以 保证检验结果的准确性。1. 4指标测定 血清il-17、il-6、il-23水平均采用elisa试剂盒(上海雅吉生物科技有限公司)进行测定，操 作过程严格按试剂盒说明书进行。其他实验室常规的指标rf、esr及crp 均

10、由佛山市第五人民医院检验科完成。所有实验方法、目的及临床价值均 告知患者并签订知情同意书，经本院伦理道德委员会讨论认为符合伦理 道德标准要求。1. 5统计学方法 采用spss13.0统计学软件对每组数据进行计算分 析。计量资料用均数土标准差（x-±s）表示，釆用t检验；计数资料 用率（）表示，采用x 2检验；相关性分析采用pearson相关分析o p<0. 05 表示差异有统计学意义。2结果2. 1 ra患者血清thl7细胞相关细胞因子水平ra患者（活动组+缓 解组）和对照组血清il-17、il-6、il-23水平差异有统计学意义（p0. 05）。 见表1。2. 2 ra患者血

11、清thl7细胞相关细胞因子与各指标的相关分析ra患 者（活动组+缓解组）血清il-23水平与das28评分和esr具有一定相关 性（p0. 05）； ra患者血清11厂6水平与das28评分、rf、crp和esr均具 有一定相关性（p0. 05）o见表2。2. 3 ra患者血清thl7细胞相关细胞因子之间的相关分析ra患者外 周血il-23与il-17和il-6水平均呈显著正相关关系（r值分别为0.929 和0. 950, p均为0. 000）,il-17和il-6水平之间也呈明显正相关关系（r 值为 0. 969, p 为 0. 000）o 见图 1。il-17 il-23 il-6il-1

12、7 pearson correlation 1 929 969sig. (2-tailed) .000 .000n 70 70 70il-23 pearson correlation . 929 1 . 950sig. (2-tailed) .000 .000n 70 70 70il-6 pearson correlation 969 950 1sig. (2-tailed) .000 .000n 70 70 70图1 ra患者血清thl7细胞相关细胞因子之间的相关分析3讨论ra是一种慢性系统性自身免疫性疾病，其主要临床表现为周围关节 滑膜炎，有持续及反复发作的特点，在我国的流行病学调查中显示

13、，ra 的患病率约为0.32%0.36%,严重影响患者工作能力和生活质量。人们 认为ra发病可能与遗传、感染、坏境以及免疫因素冇关，但是其确切发 病机制还不清楚。多种炎症介质和细胞因子的异常表达在ra的发病过程 中可能发挥重要作用，致炎细胞因子和抗炎细胞因子z间失衡的程度也 决定了炎症严重性和范围5。近年研究发现：thl7细胞越來越被认为是 众多自身免疫炎症性疾病发病机制中的关键因素，其分泌的细胞因子在 活动期及缓解期患者屮均冇不同程度的表达，结论与文献报道相近6。thl7细胞可以产生多种细胞因子参与ra的发生、发展过程，如ti-17是 thl7细胞主要分泌的细胞因子，不但能诱导滑膜细胞产生金

14、属蛋白酶， 抑制软骨基质的形成，而口能促进滑膜血管的增生，形成血管翳，加 重关节的破坏4； il-23能作用于thl7细胞，促进细胞的分化、扩增以 及相关细胞因子的分泌，il-23/thl7轴在自身免疫性疾病中发挥着重要 的作用5； il-6能有效的启动thl7细胞的分化和增殖6。大量研究都 集屮在ra患者关节液屮thl7细胞及其相关因子的探讨7,关于ra患 者外周血中thl7细胞相关细胞因子的临床意义和应用则研究较少。本研究对thl7细胞相关的重要细胞因子il-17、il-6及il-23在ra 患者和止常对照患者中进行检测并分析。结果显示：ra患者组（活动组和 缓解组）较正常对照组血清il-

15、17、il-6及il-23水平均显著增高，这 与其他学者的研究结果类似8-10,提示 儿-6、1l-23可能参与了 ra 的疾病发生发展及炎症反应过程。相关分析显示：ra患者血清il-6水平与das28评分、rf、crp和esr 均具有一定相关性；ra患者血清il-17水平与das28评分、crp和esr均 具有一定相关性，说明il-6和il-17与病情活动有关，可能作为ra 病情程度检测的指标，这与国外相关研究结论是一致的。值得一提的是: 木研究结果显示血清ti-23水平与das28评分和esr具有一定相关性，而 与rf和crp无关，说明il-23细胞因子水平的升高在一定程度上可以 反映疾病

16、活动状态，这与潘禹铮11研究ra患者的il-23与esr、crp 及das28评分等均无明显相关关系的结果不同，这也可能是因为病例数 不同、患者所处活动期不同所致，还需要进一步研究证实。ra患者外周血il-23水平、tl-17水平、ti-6水平之间互为明显正 相关关系，表明三项指标的增高可能有一定的因果关系，提不在ra病 情的发生发展过程中，三项指标与ra患者的病情密切相关，提示临床 医生在诊疗该类患者时，参考上述细胞因子水平，有助于ra患者病情1 furuzawa-carballeda j, vargas-rojas mi , cabral ar. autoimmune inflammati

17、on from the thl7 perspective. autoinimun rev, 2007, 6 (3)： 169-175.2 mcgeachy mj, bak-jensen ks, chen y, et a.l. tgf-beta and il-6 drive the production of il-17 and il-10 by t cells and restrain t (h) -17 features of human thl7 cells exp med, 2007, 204 (8)： 1849-1861.3 komatsu n, okam ot ok, sawa s,

18、 et al. pathogenic co nversi on of foxp3+ t cells into th17 cells in autoimmune arthritis nat med, 2014, 20 (1)： 62-68.4 benedetti g, miossec p. interleukin 17 contributes to the chronicity of inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis eur j immunol, 2014, 44 (2)： 339-3475 li j, yang p, wu q

19、, et al. death receptor 5-targeted depletion of interleukin-23-producing macrophages, thl7, and thl/17 associated with defective tyrosine phosphatase in mice and patients with rheumatoid arthritis arthritis rheum, 2013, 65(10)： 2594-26056 yoshida y, tanaka t interleukin 6 and rheumatoid arthritis. biomed res int, 2014： 69.7 azizi g, jadidi-niaragh f, mirshafiey a. thl7 cells inimmuno-pathogenesis and treatment of rheumatoid