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文档简介
1、酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原研究【摘要】目的研究分析酶联免疫技术对乙型肝炎表 面抗原检测的效果。方法选取2012年11月至2013年11月 期间铁法煤业集团总医院接收诊断的乙型肝炎44例患者设 为观察组,与同期就诊的44例健康者进行对比设为对照组。 对全部患者运用酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原,并具 体分析其检测结果予以评价。结果近似临界值分析物的重复 性情况:+20%浓度时,临界值分析物检测结果阳性率大于等 于95%; -20%浓度时,临界值分析物检测结果阳性率小于等 于5%。灵敏度情况:观察组中43例患者乙型肝炎呈阳性, 灵敏度约为97.73%;对照组中43例乙型肝炎呈阴性,灵敏 度
2、约为97. 73%o结论酶联免疫技术应用于乙型肝炎表面抗原 的检测,其临界值为±20%。在检测浓度范围内能够获得很 高的灵敏度,对临床诊断意义重大。【关键词】酶联免疫技术;乙型肝炎表面抗原;研究分 析所谓乙型肝炎就是乙型病毒性肝炎,是因为机体受到乙 型肝炎病毒(简称hbv)感染造成的一种疾病1。乙型肝炎 病毒主要作用于肝细胞,属于一种嗜肝病毒,能够对肝细胞 造成损伤,从而引起肝细胞炎症、坏死以及纤维化等。乙型 病毒性肝炎有慢性与急性两种。在成年患者中绝大部分急性 乙型肝炎是能够自愈的,但是慢性乙型肝炎表现各异,又可 分成活动性乙型肝炎、乙型肝炎携带者以及乙型肝炎肝硬化 等。现阶段,临
3、床中一般应用的检测方法是酶联免疫技术检 测乙型肝炎五项,即为乙型肝炎两对半:表面抗原(简称 hbsag),表面抗体(简称抗hbs)、e抗原(简称hbeag) e 抗体(简称抗hbe)、核心抗体(简称hbc)o其中乙型肝炎 表面抗原为一种非乙型肝炎病毒表面外壳蛋白,自身没有传 染性,却可以随着乙型肝炎病毒一同存在,所以其可作为乙 型肝炎病毒被感染的重要标志。现通过本组研究进一步论证 酶联免疫技术检测的灵敏度,总结如下。1资料与方法1. 1 一般资料选取2012年11月至2013年11月期间铁 法煤业集团总医院接收诊断的乙型肝炎44例患者设为观察 组,其中女性患者21例,男性患者23例。年龄均在2
4、3-74 岁之间,平均年龄(41.52±4. 35)岁。另选同期44例健康 者设为对照组,其中女性患者20例,男性患者24例。年龄 均在24-73岁之间,平均年龄(42. 31±3. 79)岁。采集全 部受检者的血液样本,予以检测。1.2试剂、仪器的选择试剂盒选自上海天齐生物技术有 限公司。仪器选用aliisie全自动酶联免疫分析仪。由卫生 部临床检验中心提供质控血清,浓度标准为liu/ml,生产批 号:0806 o1.3方法分别选取两组受检者血液,釆集的血液需经过 0.5小时以上的凝集,再选取上层血清。应用稀释液把酶复 合物稀释以后,加入血清、阳性、阴性、质控品2。静止
5、放置1小时予以孵育,再洗板,将底物加进去,避光反应30 分钟以后,加入终止液(反应部分完成)。将底物溶液滴入, 通过酶的作用,让底物内含有的供氢体从无色还原型转变为 有色氧化型,发生颜色反应。利用底物的颜色反应判断是否 有相应的免疫反应,颜色反应的深浅程度与标本内相应的抗 体,或是抗原量为正比相关。重复性试验:采集观察组患者s/co检测值,即为样本吸光度比临界质控 邙日性对照习惯度值的比值,比值小于1 表示阳性)近似于1的阳性样本,予以一系列的稀释。同时, 重复性检测稀释以后的样本,直至产生阴性、阳性的机率均 是50%的情况,次浓度就是本组检测方法的临界值浓度。通 过以上试验研究得出的临界值,计算得出临界值样品±20% 浓度的稀释倍数,并且对其重复检测20次,将其检测结果 详细做好记录。1.4统计学方法通过统计学软件spss17. 0
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