酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原研究

1、酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原研究【摘要】目的研究分析酶联免疫技术对乙型肝炎表 面抗原检测的效果。方法选取2012年11月至2013年11月 期间铁法煤业集团总医院接收诊断的乙型肝炎44例患者设 为观察组，与同期就诊的44例健康者进行对比设为对照组。 对全部患者运用酶联免疫技术检测乙型肝炎表面抗原，并具 体分析其检测结果予以评价。结果近似临界值分析物的重复 性情况：+20%浓度时，临界值分析物检测结果阳性率大于等 于95%； -20%浓度时，临界值分析物检测结果阳性率小于等 于5%。灵敏度情况：观察组中43例患者乙型肝炎呈阳性， 灵敏度约为97.73%；对照组中43例乙型肝炎呈阴性，灵敏 度

2、约为97. 73%o结论酶联免疫技术应用于乙型肝炎表面抗原 的检测，其临界值为±20%。在检测浓度范围内能够获得很 高的灵敏度，对临床诊断意义重大。【关键词】酶联免疫技术；乙型肝炎表面抗原；研究分 析所谓乙型肝炎就是乙型病毒性肝炎，是因为机体受到乙 型肝炎病毒（简称hbv）感染造成的一种疾病1。乙型肝炎 病毒主要作用于肝细胞，属于一种嗜肝病毒，能够对肝细胞 造成损伤，从而引起肝细胞炎症、坏死以及纤维化等。乙型 病毒性肝炎有慢性与急性两种。在成年患者中绝大部分急性 乙型肝炎是能够自愈的，但是慢性乙型肝炎表现各异，又可 分成活动性乙型肝炎、乙型肝炎携带者以及乙型肝炎肝硬化 等。现阶段，临

3、床中一般应用的检测方法是酶联免疫技术检 测乙型肝炎五项，即为乙型肝炎两对半：表面抗原（简称 hbsag）,表面抗体（简称抗hbs）、e抗原（简称hbeag） e 抗体（简称抗hbe）、核心抗体（简称hbc）o其中乙型肝炎 表面抗原为一种非乙型肝炎病毒表面外壳蛋白，自身没有传 染性，却可以随着乙型肝炎病毒一同存在，所以其可作为乙 型肝炎病毒被感染的重要标志。现通过本组研究进一步论证 酶联免疫技术检测的灵敏度，总结如下。1资料与方法1. 1 一般资料选取2012年11月至2013年11月期间铁 法煤业集团总医院接收诊断的乙型肝炎44例患者设为观察 组，其中女性患者21例，男性患者23例。年龄均在2

4、3-74 岁之间，平均年龄（41.52±4. 35）岁。另选同期44例健康 者设为对照组，其中女性患者20例，男性患者24例。年龄 均在24-73岁之间，平均年龄（42. 31±3. 79）岁。采集全 部受检者的血液样本，予以检测。1.2试剂、仪器的选择试剂盒选自上海天齐生物技术有 限公司。仪器选用aliisie全自动酶联免疫分析仪。由卫生 部临床检验中心提供质控血清，浓度标准为liu/ml,生产批 号：0806 o1.3方法分别选取两组受检者血液，釆集的血液需经过 0.5小时以上的凝集，再选取上层血清。应用稀释液把酶复 合物稀释以后，加入血清、阳性、阴性、质控品2。静止

5、放置1小时予以孵育，再洗板，将底物加进去，避光反应30 分钟以后，加入终止液（反应部分完成）。将底物溶液滴入, 通过酶的作用，让底物内含有的供氢体从无色还原型转变为 有色氧化型，发生颜色反应。利用底物的颜色反应判断是否 有相应的免疫反应，颜色反应的深浅程度与标本内相应的抗 体，或是抗原量为正比相关。重复性试验：采集观察组患者s/co检测值，即为样本吸光度比临界质控 邙日性对照习惯度值的比值，比值小于1 表示阳性）近似于1的阳性样本，予以一系列的稀释。同时, 重复性检测稀释以后的样本，直至产生阴性、阳性的机率均 是50%的情况，次浓度就是本组检测方法的临界值浓度。通 过以上试验研究得出的临界值，计算得出临界值样品±20% 浓度的稀释倍数，并且对其重复检测20次，将其检测结果 详细做好记录。1.4统计学方法通过统计学软件spss17. 0