沙眼衣原体感染的实验室诊断

1、沙眼衣原体感染的实验室诊断赵琪林(四川省遂宁市中心医院检验科629000)【中图分类号】r777.32【文献标识码a文章编号】1672-5085 (2013 ) 15-0168-02【摘要】目的 探讨不同检测方法对生殖道衣原体感染的诊断意义。方法对 2009年12月2010年12月在木院进行治疗86的生殖道炎症患者的尿道(男性) 或宫颈分泌物(女性)，采用聚合酶链反应(pcr)、酶联免疫反应(elisa)及细 胞培养法(cc)进行检测，并进行比较。结果pcr、elisa及cc三种方法的阳 性检出率分别为 25.58% (22/86)> 8.14% (7/86)及 19.76% (19/8

2、6),三种检测 方法间差异具有统计学意义(p<0.05)；以细胞培养法为标准，pcr法的特异 性为98.6%,灵敏度为100%； elisa法的特异性为91.2%,灵敏度为88.6%,三 种方法的差异不具有统计学意义(p&gt；0.05)o结论pcr、elisa及cc三种方 法对于支原体感染的诊断价值较好，均可以用于对支原体感染的实验室诊断。【关键词】pcr elisa cc沙眼衣原体诊断沙眼衣原体是一种在细胞内进行专性寄牛的微牛物，其感染后可以引起 多种系统的疾病，包括有沙眼、生殖系统感染等，由于沙眼衣原体引起的泌尿牛 殖系统感染己经成为最常见的性传播疾病1,而其发病时

3、临床症状并不明显从 而导致患者就诊不及时，耽误治疗，因此，寻找高灵敏度、高特异性的诊断方法 具有重要的意义，木文主要探讨pcr、elisa及cc三种方法对生殖道衣原体感染 的诊断价值。1材料和方法1.1 一般资料木次研究对象主要为于2009年12月-2010年12月在木院进行治疗86 的生殖道炎症患者，其中男性有37例，女性有49例，年龄在18-68岁，平均年 龄为38.4岁；所有患者排除了淋球菌感染。1.2方法1.2.1样本的采集:对于女性患者:首先用棉签将宫颈口的分泌物擦去， 用无菌棉拭子在宫颈内进行刮取分泌物，将拭子进行旋转，尽量将上皮细胞都刮 取下来；对于男性患者：将无菌棉拭子插入尿道

4、3cm左右，将尿道分泌物刮取 下来；将上述拭子放入运输液中(lml,蔗糖磷酸盐缓冲液)对拭子进行挤压， 尽量使其中的细胞都进入到运输液中，将拭子舍弃。将上述标本保存于-20°co1.2.2细胞法检测：将样本进行漩涡震荡，取上清，接种到mccoy细胞 中，进行离心(3000r/min, lh), 72h后进行固定(无水甲醇)，碘染色，在显 微镜下进行观察，若有包涵体，则为阳性。1.2.3pcr 法：去标本，离心(1500r/min, lomin),加 50μl 的裂解 液a,进行煮沸lomin,待冷却后，加入10μl的裂解液b,进行混匀，再次 离心(1500

5、r/min, 5min),取上清即为模板，保存于4°c。去待测样品10&mu;l, 加入20&mu;l的反应液，离心后加入石蜡油100&mu;l,最后进行扩增(全自动 扩增仪)1.2.4 elisa法:按照试剂盒上的说明进行操作，将样本进行漩涡震荡15s, 煮沸15min,待冷却后再次进行震荡15s,加入转移液50ul,孵育90min,再用 pbs洗涤5次，力口扩增液30min后加入终止液，若为阳性可变为红色。1.3统计学处理本研究对于三种检测方法的阳性率进行比较,采用卡方检验，当p<0.05 为差异有统计学意义，统计软件应用spss13.0进行统计学分

6、析。2结果2.1三种方法阳性率比较：pcr、elisa及cc三种方法的阳性检出率分 别为25.58%、8.14%及19.76%, pcr和cc两种方法的阳性率高于elisa,差异具 有统计学意义(p&lt;0.05),具体结果见表1。表1三种方法阳性率比较检测方法例数阳性例数阳性率()ppcr862225.58&lt;0.05cc861919.76elisa8678.142.2三种方法诊断特异性、灵敏度比较：以细胞培养法为标准，pcr 法的特异性为98.6%,灵敏度为100%； elisa法的特异性为91.2%,灵敏度为88.6%, 三种方法的差异不具有统计学意义(p&

7、gt；0.05)o3讨论目前，随着生物技术的不断发展，临床上对沙眼衣原体进行检测的手段 也越来越多，沙眼衣原体是一种胞内寄生的微生物，细胞培养法是金标准，但是 此方法对仪器设备要求较高，同时影响因素也多，对于结果的准确性造成影响; pcr法是聚合酶链反应，其检测的灵敏度及特异性较好，其对于一些不规范的样 本其检测也有较高的稳定性，但是由于pcr技术本身的问题，使其检测结果的假 阳性概率提高；elisa法器阳性率较低但是操作简单，能够同吋在短吋间内 进行高通量的检测，大大提高了工作效率2,临床上可以根据需要选择合适的 检测方法。本文主要对于86例样本进行了检测，结果显示pcr、elisa及cc三种 方法的阳性检出率分别为25.58%、8.14%及19.76%；以细胞培养法为标准，pcr 法的特异性为98.6%,灵敏度为100%； elisa法的特异性为91.2%,灵敏度为88.6%, 综上所述，pcr、elisa及cc三种方法