孕妇中期唐氏筛查联合外周血游离胎儿DNA检测临床意义

1、孕妇中期唐氏筛查联合外周血游离胎儿dna检测临床意义【摘要】目的：探讨孕妇中期唐氏筛查联合外周血 游离胎儿dna检测的临床意义。方法：用时间分辨免疫荧光 法对1520+6周的孕妇进行中期血清学筛查，并对筛查为 高危的孕妇采用大规模平行测序法对母体外周血中游离胎 儿dna进行染色体非整倍体检测。结果：产前血清筛查10 065 例，筛查出髙危孕妇752例，其中678例高危孕妇进行了游 离胎儿dna检测，共检出10例染色体数目异常，结构异常4 例，共14例异常，对14例异常孕妇提供了免费的羊水染色 体核型分析，其余664例回访，其中2例结果不一致；游离 胎儿dna检测总准确率为99.7% (676/

2、678)o结论：唐氏筛 查和外周血游离胎儿dna检测联合检测，可预防和减少唐氏 儿及其他缺陷儿的出生，对提高国民素质十分重要。【关键词】唐氏筛查；游离dna检测；联合筛查中图分类号r715. 5文献标识码b文章编号 1674-6805 (2014) 12-0057-02the clinical significance of combined detection of down，s screening and free fetal dna investigation/sun hong-yue, yuan lu, xu guang-li /chinese and foreign medical

3、research, 2014, 12 (12)： 5758abstract】 objective： to investigate the clinical significance of combined detection of the interim of down，s screening in pregnant women and blood free fetal dna screening method： pregnant women in 15-20+6 weeks were test of down， s syndrome by time resolved immunofluore

4、scence high-risk groups were further tested of free fetal dna from mother， s blood by gene sequencing. result： 10 065 pregnant women received down' s screening, and 752 cases were estimated to be high-risk. at last 678 cases received the fetal dna gene sequencing. 14cases were confirm chromosome

5、abnormalities, including 10 number abnormal and 4 cases of structure abnormalities .the total 14 cases were detected of chromosome analysis from amniotic fluid cells, the other 676 cases were followed up, the resuits showed that two cases were not according with the nda investiation , the total accu

6、racy rate was 99. 7% (676/678)conclusion： combined detection of down" s screening and mother blood free fetal dna test is effective in reducing the birth defects.key words】 down， s screening； free fetal dna screening； combined detectionfirstauthor' s address: zhengzhou maternal andinfant he

7、a1th hospital, zhengzhou 450012, china唐氏综合征又称21-三体综合征或先天愚型，是人类最 常见的一种染色体病，发病率为活婴的1/6001/8001-2。 其主要特征为先天性的智力障碍、特殊面容，常伴有先天畸 形。孕妇游离胎儿dna检测主要被用来进行染色体非整倍体 疾病的产前检测，包括21-三体、18-三体、13-三体。1资料与方法1. 1 一般资料2012年10月-2013年9月来笔者所在医院门诊就诊的 孕妇，孕周1520+6进行母血清生化标志物afp和f-bhcg 测定，共筛查孕妇10 065例。年龄1741岁，平均28. 3 岁，筛查出高危孕妇752例

8、，其中678例高危孕妇在知情同 意情况下进行了游离胎儿dna检测。1.2试剂和仪器中期血清测定仪器为泰莱时间分辨免疫荧光测定仪，试 剂均由广州丰华公司提供。孕妇游离胎儿dna血清由美国 illumina公司大规模平行测序仪进行检测。1. 3方法抽取孕妇静脉血23 ml,室温4 h内务必分离血清， -80 °c冰箱保存待测，采用时间分辨免疫荧光法检测血清中 甲胎蛋白（afp）、游离b-人绒毛膜促性腺激素（f-bhcg）,检查结果用中倍数倍数(mom)表示，同时结合孕妇年龄、 民族、体重、是否患有胰岛素依赖性糖尿病、是否有过21- 三体不良孕史、是否吸烟、是否多胎等因素，采用配套软件 计

9、算唐氏风险率。唐氏高危切割值为1 : 270o对筛查出的高 危孕妇进行遗传咨询，建议进行游离胎儿dna检测或羊水穿 刺，在孕妇签署知情同意书后同意进行游离胎儿dna检测， 抽取其外周血10 ml到专用采血管(cell-free dna bcttm). 混匀后，在4 £条件运送至检测中心(贝瑞和康)检测；对 检测异常孕妇行遗传咨询、随访，建议行羊膜腔穿刺羊水细 胞染色体核型分析确诊，确诊后终止妊娠。1.4随访随访方式主要为电话随访为主，住院分娩病历随访为 辅。2结果唐氏筛查高风险孕妇产前诊断，产前血清筛查10 065 例孕妇中，筛查出高危孕妇752例，筛查阳性率7.47%。在 752例

10、高危孕妇中，678例进行了游离胎儿dna检测，检测 率90. 1%； 57例高危孕妇进行了羊水穿刺，总检测率98%, 而其余15例由于经济和别的原因放弃了下一步检查。在对 678例进行了游离胎儿dna检测时，发现10例染色体数目异 常，结构异常4例，又对14例异常孕妇提供了免费的羊水 染色体核型分析，其余664例随访，其中2例结果不一致；游离胎儿dna检测总准确率为99. 7% (676/678)o3讨论唐氏综合征是5000多种遗传病中发病率最髙者之一， 病因尚不明确，迄今对这种疾病无有效的治疗手段，必要的 产前筛查和精确的产前诊断是避免唐氏综合征的有效手段。 在对678例进行了游离胎儿dna

11、检测时，发现10例染色体 数目异常，结构异常4例，又对14例异常孕妇提供了免费 的羊水染色体核型分析，其余664例随访，其中2例结果不 一致；游离胎儿dna检测总准确率为99. 7% (676/678),与 文献3报道一致。对孕中期女性进行血清学唐氏筛查，是 一种成熟的、有效的、经济的方法，现在世界上已广泛应用4o而孕妇游离胎儿dna检测，是检测可能来源于以下三种途径的dna：即母体血浆中的胎儿有核细胞5；凋亡的胎 儿组织细胞和胎盘滋养细胞6-7 o由于游离胎儿dna约占母体血浆总游离dna的10%以上8,并且半衰期短9、dna 分子长度相对较短10,且在孕5周后随孕周增加，其浓度也不断升高8

12、；故适合大规模平行测序检测，胎儿游离dna 用于无创产前诊断已成为近年来的研究热点，并迅速应用于 临床，并通过1年有效的随访，高危孕妇无创检测率90.1%, 高危孕妇进一步综合检测率高达98%,而和孙宏跃等11做 的回访有了很大的提高。但孕妇游离胎儿dna检测在我国开 展时间尚短，大多孕妇对其不了解，需医务工作者进行进一 步的研究、推广。总之，唐氏筛查和外周血游离胎儿dna检测联合检测， 可预防和减少唐氏儿及其他缺陷儿的出生，对提高国民素质 十分重要，需大力开展。参考文献1 binkert f, mutter m, scbinzela, et al. impact of prenatai di

13、agnosis on the prevalence of live birth with down syndrome in the eastern half of switezerland 1980-1996j. swiss med wkly, 2002, 132 (33/34)： 478.2 朱宝生，焦存仙，朱姝，等.唐氏综合症发生率及其 产前筛查干预的研究j.中华妇幼临床医学杂志，2005, 1(1)： 20.3 verweij e j. van den oever j m, de boer m a, et al. diagnostic accuracy of noninvasive de

14、tection of fetal trisomy 21 in ma/ternal blood : a systematic reviewj. fetal diagn ther, 2012, 31 (2)： 81-864 杜传书，刘祖洞医学遗传学m.第2版北京：人 民卫生出版社，1992： 120.5 sekizawa a, samura 0, zhen d k, et al. apoptosis in fetal nucleated erythrocytes circulating in maternal bloodj. prenat diagn, 2000, 20 (11 )： 886-88

15、9.6 wataganara t, chen a y, leshane e s , etal. cell-flee fetal dna levels in maternal plasma after electivefirst-trimester termination ofpregnancyj. fertil steril, 2004, 81 (3)： 638-644.7 ohashi y, miharu n, honda h, et al. correlation of fetal dna and human chorionic gonadotropin concentrations in

16、 secondtrimester maternral serumj. clin chem, 2002, 48 (2)： 386-388.8 lo y m. recent developments in fetal nucleic acids in maternal plasma： implications to noninvasive prenatal fetal blood group genotypingj transfus clin biol, 2006, 13 (1)： 50-52.9 lo y m, zhang j, leung t n, et al. rapid clearance of fetal dna from maternal plasmajam j hum