胃癌诊断立项调研

1、PGI、PGII酶免检测试剂盒立项调研报告 一、立项意义据世界卫生组织报告，1990年全球癌症新发病例为807万，到1996年上升为1000多万，增加了24。每年全球癌症死亡人数约700万，。癌症居全球人类主要死因的第三位。20世纪后期近20年间，全世界的癌症发病数一直呈逐年上升之势，上升了近一倍。今后的20年中，可能还将上升一倍。世界卫生组织预测，在世界范围内，到2025年肿瘤仍将继续增多，将有3亿人患癌症，并有2亿人因此而死亡。但主要在发展中国家，发达国家增加相对较慢。这一流行趋势说明，21世纪上半叶，癌症仍将是对人类生命健康危害最大的重要疾病之一，是新世纪最大的公共卫生问题之一。我国近期

2、的调查表明，我国现患病人数在300万以上。每年癌症发病人数大约160200万，约占全球20。每年癌症死亡人数为130万，约占人口总死亡的18。癌症居我国城市和农村居民死因的第一、二位。目前，北京市和上海市每4位死亡者中，就有一位是死于癌症。在3559岁最佳工作年龄段的人群中，癌症长期居各类死因之首。目前，胃、肝、肺、食管、结直肠、口咽肿瘤一直位居我国多发肿瘤排位的前六位。胃癌新病例数基本上保持在世界胃癌发病总数的13以上。而肝癌、食管癌的新病例占全球发病总数的一半左右。据1973-1975年全国恶性肿瘤死亡调查及1990-1992年全国恶性肿瘤死亡抽样调查资料显示：1990-1992胃癌粗死亡

3、率为25.16/10万，胃癌死亡占全部癌死亡的23.24%。胃癌、肝癌、结直肠癌合计死亡占到全部癌死亡的50%。1990年我国男性胃癌新病例数与1975年相比增加了2259；结直肠癌增加了585。在北京召开的“21世纪癌症控制学术论坛”上，肿瘤专家预测：如果粮食污染、食品卫生和饮食结构等诸多问题不能从根本上改变，我国消化系统肿瘤可能在相当长一段时期内保持高发势头。人类与癌症斗争的目标是攻克癌症，其科学含义实为控制癌症。按照世界卫生组织（W HO）的提法，就是使13的恶性肿瘤得以预防；13恶性肿瘤通过早诊、早治能够治愈；13的恶性肿瘤患者通过合理有效的姑息治疗，生活质量得以改善。 W HO提出，

4、以改善生活环境、戒烟、不酗酒重视处理癌前病变和定期检查等预防措施来控制肿瘤。中国工程院院士孙燕教授也指出，有些癌症通过早期诊断和治疗是可以治愈的。因此，大力发展经济、实用的早期肿瘤鉴别诊断技术、加强癌症预防是我国癌症控制最经济有效的途径1。二、国内外研究现状国外胃癌筛查的研究以日本，美国水平最高。日本依靠X线双重对比造影技术实施集团筛查已30年，每年筛查450万高危人群，灵敏度为84%，特异度为86.5%，早癌发现率40%-50%。但该法对早癌及癌前病变的发现率受方法本身的限制难以进一步提高，筛查成本很高，每发现1例胃癌约需7000美元，再加上没采用随机对照试验，无法对其效果做出确切的科学结论

5、，至今WHO及国际抗癌联盟尚未向其他国家推荐该方法。美国则应用血清胃蛋白酶原(pepsinogen，PG)I，II及其比值做为胃癌筛查工具，对胃癌的癌前疾病（萎缩性胃炎）有明确筛查效果，但对癌前病变及胃癌尚缺乏特异性。芬兰应用类硫糖蛋白血清检测做为筛查工具实施集团筛查有一定的效果，正在进行远期效果评价2。我国胃癌诊断主要依靠胃镜及病理活检，目前缺乏有效的实验室诊断方法。对各医院的资料分析显示，胃镜检查的指征及早期胃癌的识别能力上均存在较大的差距，一般的综合性医院由于对胃镜检查的指征掌握过严，早期胃癌的识别能力也有待提高，以致胃镜胃癌的检出率为8.89%，而早期胃癌的比例仅占1.2%-2.7%。

6、此外内窥镜检查不但费用高、病人痛苦大，且镜头无法高温高压，增加了乙肝、丙肝甚至艾滋病医源性传播的可能。因此，目前国内实验室均在积极研究可用于胃癌血清学诊断的肿瘤标志物。概括起来包括各种酶，如-葡萄糖醛酸酶、乳糖脱氢酶及其同工酶，胃蛋白酶原I，II等；来源于胚胎的标志物：如胎儿硫糖蛋白FSA、癌胚抗原（CEA）、甲胚蛋白（AFP）等；胃癌单克隆抗体；肿瘤相关抗原如CA72-4，CA19-9，铁蛋白、血清脂质结合唾液酸（LSA）等。上述各种标志物单独使用对胃癌诊断阳性率约为20%70%，对早期胃癌敏感性为15-30%。几种标志物的联合应用，如CEA、CA72-4、CA19-9等，可望提高对胃癌诊断

7、的特异性和敏感性3。见表14，表25表1 PGI、PGII用于胃癌诊断的灵敏度和特异性检测指标（ug/L）灵敏度（%） 特异性（%）PGI<35ng/L 54.9 89.3PGI/PGII<1.5 61.8 83.9PGI<35ng/L且PGI/PGII<1.5 28.4 96.4PGI<35ng/L或PGI/PGII<1.5 71.6 83.0表2 CA72-4、CA19-9、CEA测定及不同组合诊断胃癌的敏感度、特异性检测指标（ug/L）灵敏度（%） 特异性（%）CA72-4 39.7 98.6CA19-9 30.9 82.2CEA 14.7 98.6C

8、A72-4/CA19-9 54.4 80.8CA72-4/CEA 44.1 97.3CA19-9/CEA 36.0 80.8CA72-4/CA19-9/CEA 55.9 79.5三、立项依据（一）应用前景胃粘膜分泌的胃蛋白酶原依其抗原性不同分为两个亚群，即pepsinogen(PGI)和PePsinogenII (PGII)。胃底腺粘膜的主细胞和颈细胞主要分泌PGI，也有少量PGII，PG II主要由贲门腺、幽门腺及十二指肠腺产生。这些胃蛋白酶原大多进入胃腔，在血液和尿中也少量存在7。很多组织化学研究表明胃癌细胞可分泌胃蛋白酶原，但由于一般情况下血液中来源于胃粘膜的胃蛋白酶原含量较高，很难检测

9、出胃癌细胞产生的胃蛋白酶原引起的含量变化。血清胃蛋白酶原含量实际反映了胃粘膜的分泌功能。活动期十二指肠溃疡或胃溃疡病人血清PG和PG含量均显著升高，胰腺癌、肝胆疾病、萎缩性胃炎及胃癌病人则明显下降。早期胃癌患者的血清PGI含量即有显著下降，晚期患者下降更明显。肠型胃癌患者PG明显低下，PG升高，故PG/的比值明显下降。胃型胃癌及混合型胃癌病人的血清PG虽不减少，但PG增高，故PG/比值亦下降8。当胃全切后，血液或尿液中的胃蛋白酶原下降至很低的水平，这种情况下可能检测到胃癌细胞分泌的少量胃蛋白酶原9。综上所述PG、及其比值测定，可用于：胃癌特别是癌前疾病（萎缩性胃炎）的早期诊断和胃癌分型（PGI

10、下降或PGI/PGII比值下降）胃全切手术后监测胃癌复发（PGI、PGII先降后升）活动期十二指肠溃疡或胃溃疡诊断（PGI、PGII均增高）（二）国内专利保护或新药保护情况经网上检索国家知识产权局专利数据库、SDA新药数据库（1999/4-2003/3）、临床研究新药数据库（1999/4-2003/3），并经华科医药信息咨询中心以“试剂盒”为关键词进行检索（1990-2001），未发现有PG，酶联免疫检测试剂盒在国内获得专利或新药批准。（三）我公司工作基础 研发部已具备酶免诊断试剂研发基本实验条件 购置了大部分诊断试剂生产所需设备，已建成的诊断试剂生产车间有望于今年通过GMP认证，届时至少10

11、0万人份/年的生产能力可能大大超过PSA试剂盒的市场需求，需2-3个新项目进行充实 通过PSA项目申报生产文号的过程初步熟悉了诊断试剂生产申报程序并培训了人员（四）合作方工作基础据范教授介绍该所利用进口抗体组装的PGI、PGII试剂盒技术上已成熟，少量试剂盒在九华山庄保健室、浙江医科大学附属医院进行了临床试用，结果显示检测质量与日本已上市同类产品相近。如合作方提供资料完整可靠，可视为已完成临床前研究，尚需进行临床研究以申报新诊断试剂。（五）市场前景据WHO报告，我国每年新发病癌症病人200万。其中消化道肿瘤患者至少50%（100万），若以适用指标严格，筛查阳性率极高的胃镜检查为例计算，阳性率约

12、为8%2，意即这100万患者，是对至少1250万高危人群检查获得的。我国还有约150万消化道肿瘤现症患者1，合计每年至少1400万人接受消化道肿瘤的检查。以每个96人份的试剂盒可检测40人计算（双份病人血清+标准品+对照），每年就需35万个试剂盒。目前临床多趋向于2-3种肿瘤标志物联合检测以提高诊断准确率（如PGI+PGII），而确诊的病人在治疗中、手术后还需定期复查以观察疗效、监测肿瘤复发或转移，因此实际需要量估计大于100万个/年。酶联免疫实验技术易于掌握，对设备投入要求不高，病人检测痛苦小，价格适中（20-40元/人次），在国内二级以上医院均有条件开展。肿瘤诊断试剂盒以常见的AFP、CE

13、A试剂盒为例，国产盒（96人份）零售价约500-1000元/个，进口试剂盒视需要量不同在1500-3000元/个之间。国内未见有国产PG、PG试剂盒获批上市，据范教授介绍，国内无生产PG、PG试剂盒厂家，也无进口试剂盒在国内注册。因此市场前景较为乐观。五、预计项目进度（均以最长工作日计算）（1）检定标准建立及样品质量鉴定：我司需抽取合作方的3-4个试剂盒样品、收集20-30份病人血清并购买1-2个进口同类试剂盒在实验室进行质量检定；其检定方法、标准可由合作方提供也可自拟，但不应低于国家对其它酶免检测试剂盒的检定要求（详见中国生物制品规程2000）。（20-30日）。（2）核查合作方的临床前研究

14、资料是否完整。（5日）（3）在我公司车间试制至少三批产品（1万人份/批）。（30-40日）（4）自检或委托中检所对三批产品抽样检定。（30-40日）（5）与至少三家省级医院签定临床研究协议，使用检定合格的三批产品进行临床研究（不少于1000例），最后提供1份总结性报告。（100-150日）（6）收集、整理相关资料报北京市药监局形式审查。（15日）（7）北京市药监局应在收到申请后5-30个工作日之内完成现场考察、抽取样品、通知中检所进行样品检定并将审查意见、考察报告和我司报送的其它资料一并报国家药监局。（8）中检所应在40个工作日内完成样品检验及诊断试剂标准品复核并出具检验报告书。（9）国家药监

15、局应在收到北京市药监局报送的资料后5日内决定是否受理，对新诊断试剂的技术审评应在90日内完成（如需补充资料，申请人需在4个月内一次性补齐，逾期退审）。完成技术审评后国家药监局应在40日内完成审批。（10）国家药典委员会应当在100日内完成相应诊断试剂国家标准的制定。因第（8）、第（10）项可能在第（9）项工作进行中同时进行，实际得到批号所需工作日为445日，约20个月。如中途补充资料，再增加6个月。六、可能出现的困难或问题（1） 上述项目进度及申报程序均参照体外诊断试剂注册管理办法（征求意见稿）拟订，据悉国家将在今年4-5月颁布最终定稿。根据国家对诊断试剂日趋加强规范化管理的大趋势，合作方按以往标准检定合格的试剂盒有可能因达不到新标准而需技术改进；或因国家增加对申报资料的要求而需继续进行临床前研究等。以上情况均将增大我司在资金、时间上的投入。（2） 国家要求临床研究病例不少于1000例，非常见病可酌减，但根据以往经验阳性病例一般不少于100例（胃癌、萎缩性胃炎、胃溃疡各100例，同时应有胃镜和或病理切片诊断书），正常人不少于200例以确定正常值范围。收集病例的时间受各医院规模、门诊特