微生物的实验室培养经典练习

1、微生物的试验室培育班级姓名1以下有关微生物试验室培育的表达, 正确选项（） a在熔化琼脂时, 需要掌握火力并不断搅拌, 以免发生焦糊 b灼烧、高压蒸汽灭菌、紫外线照耀等都属于无菌技术 c样品中活菌数量统计时, 接种方法应采纳划线法 d用平板培育基培育微生物时, 应将平板倒过来放置2一位同学要探究土壤微生物能否分解农药，并尽快得出试验结论，用“敌草隆” （一种除草剂）进行试验：取等量砂土分装于相同的两个容器中， a 组高压灭菌， b 组不灭菌；以下有关事项的表达中正确选项（ ）a向 a、b 中喷入等量的“敌草隆”，再置于同一恒温箱中培育相同时间 b检测“敌草隆”的消逝情形，估计a 的“敌草隆”全

2、部消逝，b 的基本不变 c只用砂土试验成效比用几种典型土壤混合后的好d再增加c 组作为对比，不喷入“敌草隆”，其他处理与a、b 组相同 3做“微生物的分别与培育”试验时, 以下表达正确选项（） a高压灭菌加热终止时, 立刻开启锅盖，拿出培育基和工具待用 b倒平板时 , 应将打开的皿盖放到一边, 以免培育基溅到皿盖上 c为了防止污染, 接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 d用记号笔标记培育皿中菌落时, 应 标记在皿底上4甲、乙、丙是三种微生物，下表i 、是用来培育微生物的三种培育基；甲、乙、丙都能在中正常生长繁衍；甲能在i 中正常生长繁衍，而乙和丙都不能；乙能在 中正常生长繁衍，甲、丙都不能；

3、以下说法正确选项（）i粉状硫10g+k2hpo44g+fes040 5g+蔗糖10g+（ nh4）2soh200 4g100ml-+mgs049 25g+cacl 20 5g+-+a甲、乙、丙都是异养微生物 b甲、乙都是自养微生物、丙是异养微生物 c甲是异养微生物、乙是固氮微生物、丙是自养微生物d甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物5培育基、培育皿、接种环、试验操作者的双手、空气、牛奶所采纳的灭菌、消毒方试卷第 1 页，总 6 页法依次是（）化学消毒灼烧灭菌干热灭菌紫外线灭菌高压蒸汽灭菌巴氏消毒法a b c d6细菌培育基的配制过程中，以下操作不正确选项 a在培育基分装完毕后把ph

4、调剂到 5.4 6.0 为宜 b培育基中的牛肉膏可以为细菌供应碳源、氮源、磷酸盐和维生素c培育基配置的步骤是运算、称量、溶化、灭菌、倒平板 d琼脂是一种从红藻中提取的多糖，常作为凝固剂7 ms培育基和培育微生物所配制的培育基的主要区分为（）a ms培育基一般含植物激素，微生物培育基不含植物激素b ms培育基不需要氨基酸，微生物培育基含各种氨基酸c ms培育基不需要碳源，微生物培育基含碳源d ms培育基含维生素b1 和维生素b6，微生物培育基不含有 8不同微生物对养分物质的需要各不相同；以下有关一种以co2 为唯独碳源的自养微生物养分的描述中不正确选项（）a氮源物质为该微生物供应必要的氮素 b该

5、碳源物质也是该微生物的能源物质 c无机盐是该微生物不行缺少的养分物质 d水是该微生物的养分要素之一 9以下有关平板划线接种法的操作错误选项（） a将接种环放在火焰上灼烧 b将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环液 c蘸取菌液和划线要在火焰旁进行 d划线时要将最终一区的划线与第一区的划线相连10稀释涂布平板法是微生物培育中的一种常用的接种方法；以下相关表达错误选项a操作中需要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释 b需将不同稀释浓度的菌液分别涂布到固体培育基表面 c不同浓度的菌液均可在培育基表面形成单个的菌落 d操作过程中对培育基和涂布器等均需进行严格灭菌处理试卷第 2 页，总 6 页11用平板划线法或稀释

6、涂布平板法纯化大肠杆菌时都需要用固体培育基都需要使用接种针进行接种都需要在火焰旁进行接种都可以用菌落数来计数活菌abcd12培育甲型h1n1病毒时，应选用 a无菌的牛肉汤b含多种无机盐的培育液c固体培育基d相宜温度和湿度条件下的活鸡胚13如图是微生物平板划线示意图；划线的次序为12345；以下操作方法正确选项（）a操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌b划线操作应在火焰上进行c在 5 区域中才可以得到所需菌落d在 12345 区域中划线前后都要对接种环灭菌14关于制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的表达错误选项（） a操作次序为运算、称量、溶化、倒平板、灭菌 b将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯c等培育

7、基冷却至50 左右时进行倒平板d待平板冷却凝固5 10 min 后将平板倒过来放置15由于酵母菌直接利用淀粉的才能很弱，有人将地衣芽孢杆菌的- 淀粉酶基因转入酵母菌中经选择得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）；试卷第 3 页，总 6 页（ 1）图甲中， 过程需要的酶有 ；为达到选择目的，平板内的固体培育基应以 作为唯独碳源；、过程需要重复几次，目的是 ；（ 2）某同学尝试过程的操作，其中一个平板经培育后的菌落分布如图乙所示；该同学的接种方法是 ；估计该同学接种时可能的操作失误是；该操作过程中需要对哪些试验器材进行灭菌（） a、玻璃刮铲b、接种针 c、培育基 d、工程酵母菌种e

8、、酒精灯（ 3）对于试验结果分析正确选项：（） a在培育基中添加碘液进行染色，菌落四周会显现透亮圈，颜色较浅；b可选择透亮圈较大的工程菌进行培育； c在密闭和不密闭的情形下培育，酵母菌显现的透亮圈大小不同； d在试验条件相宜时，酵母菌进行孢子生殖，繁衍快速；（ 4）以淀粉为原料，用工程酵母菌在相宜条件下密闭发酵，隔一段时间需要进行排气，其缘由是；16请回答以下有关微生物培育和分别的问题；（ 1）选择石油分解菌一般要经过如下的步骤：海水取样 梯度稀释将样品涂布到培育基上选择菌落，其中其次步的目的是 ；（ 2）培育微生物时，获得纯洁培育物的关键是 ；为防止四周环境中微生物的污染，试验操作应在 邻近

9、进行；采纳固体平板培育细菌时，为防止冷凝水影 响细菌的生长，需将培育皿 培育；（ 3）在菌种保藏时，对于我们频繁使用的菌种一般采纳暂时保藏的方法，但这种方法有两个缺点： ； ；（ 4）做完试验将培育基倒掉之前，肯定要进行 处理；（ 5）现有5 种酵母菌的养分缺陷型菌株1、2、 3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质 g，已知 a、b、c、d、e 都是合成g物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的次序，于是在培育基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种养分缺陷型菌株生长的影响结果如下表所示；试卷第 4 页，总 6 页依据以上结果，估计这几种物质的合成次序应是 ；17生物柴油是一种可再生的

10、清洁能源，其应用在肯定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗， 科学家发觉， 在微生物 m产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油（如下图）（ 1）用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用 、 方法从油料作物中提取；（ 2）选择产脂肪酶的微生物m 时，选择培育基中添加的植物油为微生物生长供应 ，培育基灭菌采纳的最适方法是 法；（ 3）测定培育液中微生物数量，可选用 法直接计数；从微生物m分别提取的脂肪酶通常需要检测 ，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用 技术使脂肪酶能够重复使用；（ 4）如需克隆脂肪酶基因，可应用耐热dna聚合酶催化的 技术；18（ 10 分）从自然菌样中

11、选择较抱负生产菌种的一般步骤是：采集菌样富集培育纯种分别性能测定；请回答选择过程中的问题；（ 1）不同微生物的生存环境不同，获得抱负微生物的第一步是从合适的环境采集菌样， 然 后再按肯定的方法分别、纯化；培育噬盐菌的菌样应从的环境采集，培育厌氧菌的菌样应从的环境采集；（ 2）富集培育是指创设仅适应当条件的微生物旺盛生长的特定的环境条件，使待分别微生物在群落中的数量大大增加，从而实现从自然界中分别出所需的特定微生物的培养方法； 对 固氮菌富集培育的培育基应是培育基； 对耐高温淀粉酶菌的富集培育应选择的培育基，并在条件下培育；（ 3）试验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到杀菌的成效；高温灭菌的原

12、理是高试卷第 5 页，总 6 页温使微生物的等物质发生；在微生物讨论和教学中应用最广、成效最好的湿热灭菌法是灭菌法；（ 4）下图中a 、b 是采纳纯化微生物培育、用两种接种方法接种产生的成效图解，请分析接种的详细方法：ab 获得图 a成效的接种方法是；获得图b成效的接种方法是；试卷第 6 页，总 6 页本卷由系统自动生成，请认真校对后使用，答案仅供参考；参考答案1 abd【解析】试题分析：琼脂属于多糖，在熔化琼脂时要掌握火力并不断搅拌, 以免发生焦糊，a 项正确；灭菌和消毒都属于无菌技术，常用的灭菌方法主要有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌，试验室可以用紫外线照耀或化学药物进行消毒， b 项正

13、确；样品中活菌数量统计时 , 应用稀释涂布平板法进行接种 , 而不是用划线法， c 项错误； 用平板培育基培育微生物时 , 为防止冷凝水滴在培育基造成污染，需要将平板倒过来放置， d 项正确；考点：此题考查微生物试验室培育的相关学问，意在考查同学能懂得所学学问的要点，把握学问间的内在联系，形成学问网络结构的才能；2 a【解析】本实 验 的 自 变 量 的 有 无 土 壤 微 生 物 ， 而 敌 草 隆 的 使 用 量 和 培 养 条 件 是 无关 变 量 ， 无 关 变 量 应 保 持 一 致 且 适 宜 ， 所 以 应 向 a 、 b 中 喷 入 等 量 敌 草 隆 ， 再 置于 同 一 温

14、 箱 中 培 养 相 同 时 间 ， a 正 确 ； b、a 组 土 壤 经 过 高 压 灭 菌 ，不 含 微 生 物 ，不 能 将“ 敌 草 隆 ”分 解 ，预 计 a 的“ 敌草 隆 ”基 本 不 变 ， b 组 不 灭 菌 ，存 在 土 壤 微 生 物 ，可 能 将“ 敌 草 隆 ”分 解 ，预 计b 的 “ 敌 草 隆 ” 含 量 减 少 ， 但 不 会 全 部 消 失 ， b 错 误 ； 不 同 的 土 壤 微 生 物 的 种 类和 数 量 不 同 ，只 用 砂 土 实 验 效 果 不 如 几 种 典 型 土 壤 混 合 后 的 好 ， c 错 误 ；本 实 验是 验 证 土 壤 中

15、 的 微 生 物 能 对 农 药“ 敌 草 隆 ”具 有 分 解 作 用 ，如 不 喷 入“ 敌 草 隆 ”，就 不 能 证 明 土 壤 中 的 微 生 物 的 此 种 作 用 ， d 错 误 ；【考点定位】培养 基 对 微 生 物 的 选 择 作 用【名师点睛】解题思路：1 、 生 物 实 验 中 的 变 量 ： 实 验 过 程 中 可 以 变 化 的 因 素 称 为变 量 ； 自 变 量 ： 想 研 究 且 可 人 为 改 变 的 变 量 称 为 自 变 量 ；因 变 量 ： 随 着 自 变 量的 变 化 而 变 化 的 变 量 称 为 因 变 量 ；无 关 变 量 ：在 实 验 中 ，除

16、 了 自 变 量 外 ，实 验 过程 中 存 在 一 些 可 变 因 素 ， 能 对 实 验 结 果 造 成 影 响 ， 这 些 变 量 称 为 无 关 变 量 ； 2、分 析 题 干 可 知 ， 本 题 是 通 过 实 验 探 究 土 壤 微 生 物 能 否 分 解 农 药 ， a 组 高 压 灭 菌 ， 没 有 微 生 物 ， b 组 不 灭 菌 ，存 在 土 壤 微 生 物 ，所 以 a 组 为 实 验 组 ， b 组 为 对 照 组 ；3 d【解析】高压 灭 菌 加 热 结 束 ， 等 待 压 力 表 指 针 回 到 零 后 ， 才 能 开 启 锅 盖 ， 不 能 打开 放 气 阀 使

17、 压 力 表 指 针 回 到 零 ， a 错 误 ； 倒 平 板 过 程 中 不 能 打 开 培 养 皿 的 皿 盖 ，答案第 1 页，总 7 页本卷由系统自动生成，请认真校对后使用，答案仅供参考；b 错 误 ； 接 种 环 火 焰 上 灼 烧 后 ， 待 冷 却 后 才 可 以 快 速 挑 取 菌 落 ， c 错 误 ； 用 记 号笔 标 记 培 养 皿 中 菌 落 时 ， 应 标 记 在 皿 底 上 ， d 正 确 ；【考点定位】微生 物 的 分 离 和 培 养【名师点睛】 1 、无 菌 操 作 ，包 括 灭 菌 和 消 毒 两 种 方 式 ，消 毒 的 方 法 有 巴 氏 消 毒 法 、

18、酒 精 消 毒 、煮 沸 消 毒 法 ；灭 菌 的 方 法 有 干 热 灭 菌 、灼 烧 灭 菌 和 高 压 蒸 汽 灭 菌 ； 2 、微 生 物 的 接 种 ：微 生 物 接 种 的 方 法 很 多 ，最 常 用 的 是 平 板 划 线 法 和 稀 释 涂 布 平 板法 ， 常 用 来 统 计 样 品 活 菌 数 目 的 方 法 是 稀 释 涂 布 平 板 法 ； 3 、 平 板 划 线 法 ： 通 过接 种 环 在 琼 脂 固 体 培 养 基 表 面 连 续 划 线 的 操 作 ，将 聚 集 的 菌 种 逐 步 稀 释 分 散 到 培育 基 表 面 ；4 d【解析】从表中所列的三种培育基成

19、分着手，培育基i中缺少氮源，培育基中缺少有机 碳，培育基中养分成分最全由题意中所给的情形分析，只有甲能在培育基i中生长，而乙、丙不能说明甲能自行固氮；乙能在中生长，说明乙可自行合成有机碳，是一种自养微生物；而丙只能在中生长，说明它既不能固氮也不能自行合成有机物由此可知甲是固氮微生物、乙是自养微生物、丙是异养微生物；答案是d；【考点定位】微生物的培育5 a【解析】试题分析：培 养 基 用 高 压 蒸 汽 灭 菌 ； 培 养 皿 能 耐 高 温 ， 需 用 干 热 灭 菌 ； 接 种 环 可用 灼 烧 灭 菌 达 到 迅 速 彻 底 的 灭 菌 效 果 ； 实 验 操 作 者 的 双 手 可 用

20、化 学 药 剂 进 行 消毒 ，如 用 酒 精 擦 拭 双 手 ；空 气 可 用 紫 外 线 消 毒 ；为 不 破 坏 其 营 养 成 分 ，对 牛 奶 可采 用 巴 氏 消 毒 法 ， 故 选 ： a；考点：本 题 主 要 考 查 灭 菌 与 消 毒 的 区 别 于 联 系 ，关 键 是 熟 记 各 自 的 方 法 与 适 用 范畴 ；6 a【解析】试题分析：在培育基分装前，先ph 调剂到 5.4 6.0 ，在来分装， a 错误；培育基中的牛肉 膏可以为细菌供应碳源、氮源、 磷酸盐和维生素，b 正确； 培育基配置的步骤一般是：运算、称量、溶化、灭菌、倒平板，c 正确；琼脂是一种从红藻中提取的

21、多糖，常作为凝固剂，d 正确；答案第 2 页，总 7 页本卷由系统自动生成，请认真校对后使用，答案仅供参考；考点：此题主要考查微生物培育的相关学问，意在考查考生能懂得所学学问的要点，把握学问间的内在联系的才能；7 a【解析】试题分析：植物组织培育所用的ms培育基和微生物培育所用的培育基的主要区分是ms培育基一般含植物激素，微生物培育基不含植物激素a 正确， bcd错误，应选：a；考点：此题主要考查组织培育常用的ms培育基和培育微生物所配制的培育基的主要区分相关学问，意在考查考生能懂得所学学问的要点，把握学问间的内在联系的才能；8 b【解析】试题分析： 氮源物质为该微生物供应必要的氮素 a 正确

22、； 该碳源是二氧化碳， 属于无机物，不能作为微生物的能源物质， b 错误；无机盐是该微生物不行缺少的养分物质， c 正确；水是该微生物的养分要素之一， d 正确；考点：此题主要考查微生物的分别和培育相关学问，意在考查考生能懂得所学学问的要点，把握学问间的内在联系的才能；9 d【解析】要将接种环在火焰上灼烧灭菌，a 正确；应将冷却的接种环伸入菌液蘸取，温度高 会杀死菌种，b 正确；蘸取菌液和划线都要在火焰旁进行，防止杂菌的污染，c 正确；划线时最终一区的划线与第一区划线不能相连，d 错误；答案是d；【考点定位】接种方法10 c【解析】稀释涂布平板法，包括系列稀释和涂布平板两个过程，涂布平板之前需

23、要将菌液进行一系列的浓度梯度稀释，a 正确涂布平板时，需要将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培育基表面， b 正确；只有稀释度足够大的菌液才能在培育基表面形成单个的菌落， c 错误；操作过程中对培育基和涂布器等均需进行严格灭菌处理，以防止杂菌污染， d 正确；答案是 c；【考点定位】微生物的分别和培育【名师点睛】技巧点拨：阅读题干可知，此题是考查稀释涂布平板法的详细过程，先梳理稀释涂布平板法的详细操作，然后依据选项描述分析判定；11 b答案第 3 页，总 7 页本卷由系统自动生成，请认真校对后使用，答案仅供参考；【解析】试题分析：正确，固体培育基上面可以获得大肠杆菌的单菌落；错误，分别纯化大肠杆

24、菌可使用接种环或涂布器进行划线法或涂布平板法接种；正确，在火焰旁会形成一个相对无菌区来进行接种，可以防止杂菌感染；错误，平板划线法只能用来分别纯化获得单菌落，而不能用来计数；故答案选 b；考点：此题考查微生物培育的相关学问，意在考查考生能懂得所学学问的要点，把握学问间的内在联系，形成学问网络的才能；12 d【解析】试题分析：病毒必需寄生在活细胞中才能生存，a、b、c 都是一般的培育基，故错误；活鸡胚是细胞，故d 正确；考点：此题考查病毒相关学问，意在考察考生对学问点的懂得把握程度；13 d【解析】试题分析：进行微生物平板划线操作之前，要将接种环放在酒精灯火焰上灼烧灭菌，直到接种环烧红，a 项错

25、误；划线操作应在火焰旁进行，不能在火焰上进行，b 项错误；平板划线分别微生物的原理就是通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐步削减，以便得到单个菌落；5 区域是最终一个区域，因此，有可能在5 区域得到所需菌落，但在4 区域也有可能得到所需菌落，c 项错误； 操作的第一步灼烧接种环是为了防止接种环上可能存在的微生物污染培育物，每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线终止后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，因此，在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌，d 项正确；考点：此题考查平板划线操作的相关学问，意在考查考生懂得所学学问的要点，把握学问间的内

26、在联系的才能；14 a【解析】试题分析：制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的操作次序为运算、称量、溶化、灭菌、倒平板， a 项错误； 第一将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，加热， b 项正确；高压蒸汽灭菌后，等培育基冷却至50 左右时， 在酒精灯火焰邻近进行倒平板，c 项正确；待平板冷却凝固5 10 min 后将平板倒过来放置，使皿盖在下、皿底在上，d 项正确；答案第 4 页，总 7 页本卷由系统自动生成，请认真校对后使用，答案仅供参考；考点：此题考查制备牛肉膏蛋白胨固体培育基的相关学问，意在考查考生懂得所学学问的要点，把握学问间的内在联系的才能；15（ 1）限制性核酸内切酶（限制酶

27、）、dna连接酶淀粉进一步选择纯化获得分解淀粉才能强的酵母菌（ 2）稀释涂布平板法涂布不匀称ac（ 3） ac（ 4）酒精发酵产生co2 需要排出，否就压力过大【解析】（ 1 ）图 甲 过 程 表 示 基 因 表 达 载 体 的 构 建 ， 该 过 程 先 要 用 同 种 限 制 性 核酸 内 切 酶 切 割 含 有 目 的 基 因 的 外 源 dna 分 子 和 质 粒 ，再 用 dna 连 接 酶 将 目 的 基 因和 载 体 连 接 起 来 形 成 重 组 质 粒 普 通 酵 母 菌 直 接 利 用 淀 粉 的 能 力 很 弱 ，而 工 程 酵母 菌 可 以 高 效 利 用 淀 粉 ，所

28、 以 用 以 淀 粉 为 唯 一 碳 源 的 选 择 培 养 基 可 以 选 出 工 程 酵母 菌 、 过 程 重 复 几 次 的 目 的 是 纯 化 获 得 分 解 淀 粉 能 力 强 的 酵 母 菌 ；（ 2） 由 图 乙 可 知 ， 该 同 学 采 用 的 是 稀 释 涂 布 平 板 法 ， 但 菌 落 比 较 集 中 ， 没 有 很好 的 分 散 开 来 ，可 能 是 涂 布 不 均 匀 导 致 的 ；玻璃刮铲和培育基要严格灭菌，否就会有杂菌；（ 3）培育基中添加碘液进行染色，先用颜色反应，后面淀粉被分解后，会显现菌落四周会显现透亮圈，颜色较浅；在密闭和不密闭的情形下培育，酵母菌进行的

29、呼吸方式不同，数量也不同，淀粉分解的程度不同，酵母菌显现的透亮圈大小也不同；（ 4） 普 通 酵 母 菌 直 接 利 用 淀 粉 的 能 力 很 弱 ， 而 工 程 酵 母 菌 可 以 高 效 利 用 淀 粉 ，即 将 淀 粉 分 解 产 生 葡 萄 糖 的 能 力 强 ，导 致 酒 精 发 酵 速 率 快 ，产 生 二 氧 化 碳 的 速 率更 快 ， 所 以 接 种 工 程 酵 母 菌 的 发 酵 罐 要 先 排 气 ；【考点定位】因工 程 的 原 理 及 技 术 ； 微 生 物 的 分 离 和 培 养16（ 1）选择培育增加石油分解菌浓度（ 2）无菌操作（防止杂菌污染）酒精灯火焰倒置（

30、3）储存的时间不长菌种易被污染或产生变异（ 4）灭菌（ 5） eacbdg【解析】（ 1）在试验室选择所要的特定菌种一般步骤为海水取样选择培育梯度稀释将样品涂布到培育基上选择菌落，其中选择培育就是利用制成的富含石油选择培育基来培育细菌，以增加石油分解菌浓度；答案第 5 页，总 7 页本卷由系统自动生成，请认真校对后使用，答案仅供参考；（ 2）要从海水中选择出石油分解菌，需要配置选择培育基，并且这种选择培育基只能是以石油为唯独碳源，使得其他微生物由于无法利用石油，而缺少碳源无法生存，在这个过程 中必需严格依据微生物试验室培育的原就，在接种细菌前，培育基要用高压蒸汽进行灭菌，分别和纯化石油分解菌时最常用的接种方法是稀释涂布平板法；（ 3）菌种储存的时候，一般长期储存使用甘油管藏，在零下20；（ 4）做完试验将培育基倒掉之前，肯