邻二氮菲分光光度计法测铁含量文献综述和实验设计

1、可见分光光度法测定铁的条件实验可见分光光度法测定铁的条件实验文献综述和实验设计院系：检验学院班级：12级生物技术班指导老师：杨琴小组成员：沈艳林、田 赋、邓纯纯、郑祥、谭诗航、苏曼、邱丽莎、殷良俊、易 柳目录摘要1弓I言2正文31分光光度技术32分光光度法测定元素铁含量的研究概况 33分光光度法测定铁的6种方法33.1 邻二氮菲分光光度法33.1.1 方法原理33.1.2 化学反应式33.2 BPT-OP分光光度法33.3 硫氟酸盐分光光度法测铁含量33.3.1 方法提要33.3.2 主要反应33.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量33.4.1 方法原理33.5 周相萃取分光光度法测铁含量33.

2、5.1 方法原理43.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量 43.6.1 方法原理44邻二氮菲分光光度法测铁含量44.1 邻二氮菲法简介44.2 邻二氮菲法的优点45邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择 45.1 如何确定适宜的条件 45.2 最适波长的选择45.3 显色剂用量的选择 45.4 显色时间的选择45.5 溶液pH的选择45.6 显色温度的选择 56对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进 5参考文献 6实验设计部分7可见分光光度法测定铁的条件实验摘要本文主要研究用邻二氮菲分光光度法测定新血宝胶囊中总铁含量的分析方法。采用了邻二氮菲作显色剂、盐酸羟胺作还原剂，以工作曲线法测定总铁含

3、量， 对邻二氮菲分光光度法测定铁主要测量条件如测量波长、显色剂用量及显色时间 等进行研究确定，提高分析检测的灵敏度， 且讨论了测定的最佳条件，找出处理 方法的良好条件和良好效果。本法灵敏、可靠，便于推广。【关键词】邻二氮菲；分光光度法；新血宝胶囊；铁含量10引言铁元素为人体重要元素之一，人体缺血容易导致一些贫血症状甚至疾病， 人 体缺血会影响血红蛋白，肌红蛋白的合成，是某些酶的活性降低，引起人体某些 生理上的变化，从而导致免疫力降低，智力降低，机体抵抗力降低而引起一系列 疾病广生。新血宝胶囊为一种胶囊剂，内容物为一种棕黄色的粉末，每粒装 0.25克； 气香，味微苦、甘，有铁腥味。为内科虚证类非

4、处方药药品。功能主治：补血益 气，健脾和胃；用于痔疮出血、月经过多、偏食等原因所致的缺铁性贫血。成分 为鸡血藤，黄黄，大枣，当归，白术，陈皮，硫酸亚铁。测定新血宝胶囊的铁含量对人体健康有重要的意义。 本实验采用邻二氮菲分 光光度法测定新血宝胶囊的铁含量， 该法操作简单，灵敏度较高。但是采用此种 方法将受到很多因素的影响，根据查找的文献可知，目前有硫氟酸盐分光光度法 测铁含量、磺基水杨酸分光光度法测铁含量、固相萃取分光光度法测铁含量、用 火焰原子吸收分光光度法测铁含量、邻二氮菲分光光度法测铁含量这几种方法， 我们选取邻二氮菲分光光度法进行研究。影响的因素有吸收波长，显色剂的用量， 显色的反应时间

5、，溶液的pH,盐酸羟胺的用量，显色温度，溶剂种类的选择等。 本实验主要讨论其中5个条件：最适波长的选择、显色剂用量的选择、显 色时间的选择、溶液pH的选择、显色温度的选择。并在此基础上加以改进， 加入表面活性剂曲拉通X-100,对Fe2+与邻二氮菲的显色反应具有增敏作用。正文1分光光度技术有色溶液对光线有选择性的吸收作用， 不同物质由于其分子结构不同，对不 同波长线的吸收能力也不同，因此，每种物质都具有其特异的吸收光谱。有些无 色溶液，光虽对可见光无吸收作光光度技术吸收用，但所含物质可以吸收特定波 长的紫外线或红外线。分光谱来鉴定物质性质及含量的技术，其理论依据是（分光光度法）主要是指利用物质

6、特有的 Lambert和Beer定律。2分光光度法测定元素铁含量的研究概况微量元素是维持人体新陈代谢的重要元素，人体对微量元素摄入量过低或过 高都不利于健康，严重者甚至会危及生命 。因此，在食品、医药（尤其是中药）、 卫生等方面对微量金属元素的含量测定均有严格要求，对微量金属元素的测定方 法进一步深入研究具有重大意义。目前，测定微量金属元素的方法有原子吸收分 光光度法、ICPAESt、容量法、分光光度法等，其中分光光度测定方法简便、 快速、准确，具有推广和普及的价值。根据近年国内外有关文献的报道，就铁金 属元素的分光光度测定方法的研究现状进行概述。3分光光度法测定铁的6种方法3.1 邻二氮菲分

7、光光度法3.1.1 方法原理：在pH<5.0,以邻二氮菲（phen）作显色剂，与二价铁形成红色二元络合物， 最大吸收波长为510 nm,测定时，在pH=2 0-9. 0的条件下，用盐酸羟胺将 三价铁还原为二价铁,邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物(Fe(phen)3)2+)。此后用分光光度法测定可得到总铁量。3.1.2 化学反应式：2 Fe3+ + 2 NH2OH HCl = 2 Fe2+ + N2 T + 2 H 2O + 4 H+ 2 Cl盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+3.2 BPT-OP分光光度法BPT（4 , 7一二苯基一1, 10一邻二氮菲）是一种与联叱噬、邻二氮菲（又名

8、邻 二氮菲）性质相似，但显色作用更灵敏的显色剂。在HAlNaAc（最彳i pH=4 C5.0）缓冲溶液中加入乳化液 OR Fe3+BPT迅速转变为Fe2+BPT最大吸收波 长位于530 nm处，线性范围是0. 00-0 . 35 mg/L。其灵敏度很高，常用于粮 食、蔬菜等食品中微量铁的测定 。3.3 硫氟酸盐分光光度法测铁含量（铝及铝合金化学分析方法-铁的测定）3.3.1 方法原理：在酸性溶液中，铁与硫氟酸盐形成橙红色硫氟酸铁。3.3.2 主要反应：Fe（ NO 3） 3+3NaSCN=Fe（SC3+）3NaNC）3.4 磺基水杨酸分光光度法测铁含量3.4.1 方法原理：磺基水杨酸是一种光度

9、分析中的常用试剂，在PH=1.8 2.5时与铁生成紫 红色络合物，在PH=4-8时与铁生成红色络合物，在PH=8-11.5时与铁生成黄色 络合物本方法采用黄色络合物进行检测，该络合物的最大吸收波长为420nm3.5 周相萃取分光光度法测铁含量3.5.1 方法原理：用Sep-pak C18柱在采样现场萃取Fe2+与显色剂形成白有色络合物，在实验 室洗脱吸附在Sep-pak C18柱上的有色络合物，用分光光度法测定Fe2+质量浓度 【5o3.6 用火焰原子吸收分光光度法测铁含量3.6.1 方法原理：原子吸收光谱是利用铁元素的基态原子对特征辐射线的吸收程度进行定量分析的方法。试样中铁元素的化合物在高

10、温中被解离成基态原子， 光源发射出 的特征辐射线经过原子蒸汽时，被基态原子吸收。在一定条件下， 被吸收的程度 与基态原子的数目成正比。通过检测器检测特征辐射线被吸收的程度， 就可以测 得试样中被测铁元素的含量 。4邻二氮菲分光光度法测铁含量4.1 邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量 条件，并用于工业盐 酸中铁的测定。4.2 邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高 灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。5邻二氮菲分光光度法测铁含量最适条件的选择5.1 如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂

11、时固定其他因素，显色后测量 相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。5.2 最适波长的选择：准确移取1.5ml 50ug/ml标准铁Fe2+溶液，置于50ml容量瓶中，加入1.0ml 10%fc酸羟胺溶液、10ml乙酸俊缓冲液、加2.0ml 0.1%林菲啰咻溶液，以水稀释 至刻度，摇匀，用分光光度计，在 400至600nm之间，每10nm记录一次吸光度， 如图1所示，其最大吸收波长为510nm.5.3 显色剂用量的选择：准确移取1.5ml 50ug/ml标准铁Fe2+溶液，分别加入8个50ml具塞比色管中， 加入1.0ml 10%盐酸羟胺溶液、10ml乙酸俊缓冲液、加0.3

12、, 0.5, 1.0, 1.25, 1.5, 2.0, 3.0, 4.0ml 0.1%咻菲啰咻溶液，以水稀释至刻度，在波长为510nm处分别测其吸光度A,以咻菲啰咻的体积为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸光 度-试剂用量曲线，从而确定出最佳显色剂用量为2ml最佳。5.4 显色时间的选择：取50ml容量瓶加入2ml铁标准液，1ml盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2min,加 入2ml邻二氮菲溶液，5ml醋酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀，在分光光度计 上，以510nm处，用1cm吸收池，以去离子水为空白溶液做参比溶液，测定吸光 度，以后每隔半小时测定一次。5.5 溶液pH的选择：取6个50ml容量瓶，每个加

13、入2ml铁标准液，1ml盐酸羟胺溶液，摇匀，放 置2min,再加入2ml邻二氮菲溶液，摇匀。分别从滴定管中加入 10ml, 12ml, 16ml, 18ml, 20ml的0.1mol/l的NaOH§液。以去离子水稀释至刻度线，摇匀， 在510nm处，以去离子水为空白，测定各溶液的吸光度。5.6 显色温度的选择：取6个50ml容量瓶，各加铁标准液2ml, 1ml盐酸羟胺溶液，摇匀，分别放入 恒温箱( 5,10,15,20,25,30,35度)，放置2min,同时将2ml邻二氮菲溶液分别放入相应的恒温箱2min,同温度的亚铁离子与邻二氮菲混合，用水稀释至刻度 后，摇匀，放入恒温箱2min

14、,用1cm吸收池，在510nm处，测定吸光度。6对邻二氮菲分光光度法测铁含量实验改进在缓冲溶液(pH=5. 0)存在下，以邻二氮菲(phen)作显色剂，加入表面活性 剂曲拉通X-100,对Fe2+与邻二氮菲的显色反应具有增敏作用，形成的Fe2+ phenTriton三元络合物呈红色，络合物的最大吸收波长为510nm表观摩尔吸光系数为1. 2X105mol/(L/cm),可使灵敏度、选择性大为提高 。参考文献11陈杰，张欣荣，等.微量元素与人体健康关系研究的回顾与展望J .生命科学仪器，2003, 1(1) : 41 44.21吴方琼.BPT-OP分光光度法测定食品中的微量铁期刊论文-西南民族学

15、院 学报(自然科学版)2003(01).3工厂化学检验手册P198页.(国标GB/T 6789.4-2001邻二氮菲分光光4 GB/T11911-1989.水质，铁、钮的测定，火焰原子吸收分光光度法.【5】环境监测管理与技术2007年06期【6】张国文.原子吸收分光光度法测定食品中微量元素J.粮油食品科技，2002,10 (6) :34 .71分析技术与操作(V)-电化学与光谱分析及操作，化学工业出版社； 曾祥燕、丁佐宏主编.【8】梁国柱.表面活性剂增敏光度法测定水样中的微量铁 J .南通职业大学学 报，2005, 19(2) : 2931.设计性实验分光光度法测铁含量条件实验 实验设计一、实

16、验目的1、了解分光光度法测铁的方法2、熟悉显色反应条件与测量条件的选择方法3、熟悉实验设计的基本内容与方法4、掌握分光光度法测定新血宝胶囊中铁的含量二、实验原理亚铁离子在pH=3-9之间的溶液中，与邻二氮菲生成稳定的橙色络合物， 其反应 式为：Fe2+3C2HN2=Fe（Ci2HN） 2+若用还原剂将Fe3+还原为Fe2+,则本法测得为总铁。2 Fe3+ + 2 NH 2OH- HCl = 2 Fe 2+ + N 2 T + 2 H 2O + 4 H + + 2 Cl其摩尔吸光系数为1.1X104,测试波长为510nm.进行分光光度法分析测定时， 其显色反应条件、测量吸光度条件都对准确性有很大

17、的影响。故应作条件选择实 验。三、仪器与试剂仪器：7 2 2型分光光度计，50ml容量瓶，移液管，PH精密试纸试剂：铁标准溶液（100仙g/ml）, 0.15%邻二氮菲水溶液，10%盐酸羟胺水溶液，醋酸缓冲溶液， 0.1mol/L NaOH , 1%曲拉通X-100。四、实验方法配置某一浓度的标准溶液，在分光光度计上，用 1cm吸收池，以去离子水为空 白溶液作参比溶液，在不同的波长下，邻二氮菲的不同用量，酸度不同，不同显 色时间，测定相应的吸光度，研究上述条件对吸光度的影响。 并在最佳条件下测 定新血宝胶囊的铁含量。（一）最适波长的选择在50ml容量瓶中准确加入2ml铁标准溶液，分别加入1ml

18、盐酸羟胺溶液，摇匀 放置2min后，再加入2ml邻二氮菲溶液，5ml醋酸缓冲溶液，加水稀释至刻度， 摇匀。以去离子水为空白溶液作参比溶液，在不同波长下测定一次吸光度，结果 计入表格。波长 (nnj)440450460470480490492494496T (%)吸光度A波长 (nnj)498.0500.0502.0504.0506.0508.0510.0512.0514.0T (%)吸光度A波长 (nmj)516.0518.0520.0530.0540.0550.0560.0T (%)吸光度A（二）显色剂的用量选择取6只50ml容量瓶，分别精密吸取2ml铁标准液，5ml醋酸缓冲溶液，1ml盐

19、酸羟胺，摇匀放置2分钟后，依次加入邻二氮菲水溶液0.1ml, 0.5ml, 1ml, 2ml, 3ml, 4ml,加水稀释至刻度，摇匀，放置 10min,以不加铁标准液，加入 5ml醋酸缓冲溶液，1ml盐酸羟胺，2ml邻二氮菲为空白参比，在最适波长处，测定 吸光度，结果记入表格。显色剂/ ml0.10.51.02.03.04.0T(%)吸光度A（三）显色时间的选择取50ml容量瓶加入2ml铁标准液，1ml盐酸羟胺溶液，摇匀放置2min后，力口入2ml邻二氮菲溶液，5ml醋酸缓冲溶液，加水稀释至刻度，摇匀，在分光光度计 上，以去离子水为空白溶液做参比溶液，在最适波长处，测定吸光度，以后每隔 半小时测定一次，结果记入表格。时间0h0.5h1.0h1.5h2.0h2.5h3.0h3.5h4.0hT(%)吸光度A（四）溶液pH的选择取6个50ml容量瓶，每个加入2ml铁标准液，1ml盐酸羟胺溶液，摇匀放置2min 后，再加入2ml邻二氮菲溶液，摇匀。分别从滴定管中加入 10ml, 12ml, 16ml, 18ml, 20ml的0.1mol/l的N a OH溶液。加水稀释至刻