半数致死量的测定

1、半数致死量的测定半数致死量的测定预防兽医学 弓建芳1309064006半数致死量LD50是药物、毒物及病原微生物等毒力水平的一个标志。它表示使全部实验对象有一半死亡所需的药物剂量或浓度。测定LD50的方法很多，如目测机率单位法、寇氏法、直线回归法、累计法及序贯法等。一、一、寇氏法寇氏法（Karbers method）寇氏法在实际工作中较常用，计算简便，结果较准确。【条件】 1.剂量必须按等比级数（剂量对数按等级数）分组。 2.各组动物数应相等。 3.“反应”应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率（Pn）应为0%，最大剂量组的死亡率（Pm）应为 100%；如果Pn80%用校正公式计算；如Pn20%

2、或Pm80% 用此法计算结果不太准确。校正公式：lg LD50XKd)43(PnPmP计算步骤计算步骤1、计算lgLD50公式为 lgLD50= （Xi+Xi+1）（Pi+1Pi） i组号；（Xi+Xi+1）相邻两组对数剂量之和（Pi+1Pi）相邻的两组死亡率之差21简化公式简化公式若相邻对数剂量是等差级数即药物剂量是等比级数则公式为lgLD50=Xk d/2（Pi+Pi+1）Xk :最大对数剂量d：相邻两组对数剂量之差，即相邻剂量比值的对数也可以直接按照前面的校正公式计算计算步骤计算步骤 2、求lgLD50的反对数LD503、求lgLD50的标准误SlgLD50 SlgLD50=d4、求lg

3、LD50的95%的置信区间 Ig-1（lgLD50 1.96SlgLD50）niPiPi)1(例题例题 为了研究铵碘消毒剂对建鲤毒力的影响，随机捞取210尾规格基本一致的鲤鱼，放入缸内，每缸30尾，1组对照，6组处理。以等对数间距设置6个剂量水平（单位ml/m3），量取药液并加入缸内，搅拌均匀，96小时后得如下表中结果。试求铵碘对建鲤的半数致死量。不同剂量铵碘对建鲤的致死资料不同剂量铵碘对建鲤的致死资料 组别组别剂量剂量动物数动物数死亡数死亡数死亡率死亡率140.0003000.000247.1563030.100355.59230150.500465.53830200.667577.2623

4、0270.900691.08530301.000解题步骤解题步骤1、计算lgLD50lgLD50=Xk d/2（Pi+Pi+1） =lg91.085 lg =1.76882、LD50=Ig-1（lgLD50）=58.7223、 SlgLD50=0.0714 =0.01054、LD5095%的置信区间 Ig-1（lgLD50 1.96SlgLD50）=Ig-1（1.7688 1.96x0.0105)3001.309 . 01 . 0301021000.40156.47(0+0.1+.+0.9+1)计算结果计算结果铵碘消毒剂对建鲤的半数致死量在95%的置信区间为：56.079ml/m361.572

5、ml/m3。即铵碘消毒剂使一半建鲤死亡的平均剂量最小为56.079ml/m3最大为61.572ml/m3，做出这一推断的置信度为95%。计算结果计算结果LD5099%的置信区间 Ig-1（lgLD50 2.58SlgLD50）=Ig-1（1.7688 2.58x0.0105）铵碘消毒剂对建鲤的半数致死量在99%的置信区间为：55.171ml/m362.501ml/m3。即铵碘消毒剂使一半建鲤死亡的平均剂量最小为55.171ml/m3最大为62.501ml/m3，做出这一推断的置信度为99%。公式推导公式推导o 由图可知：矩形AFEDAFADlg LD501lg LD50=XK-d/2(Pi+P

6、i+1)=XK-d/2 (P1+P2+P2+P3.+Pi+1)=XK-d/2 【2P（P1+Pi+1）】=XK-d（P0.5） 二、序贯法二、序贯法最节省实验动物的方法，又称“上下法”，适于反应快速的药物实验，但不能估计误差，无法进行LD50的显著性检验。方法：1、根据经验选择一个近50%反应率的等比级数剂量组，通常用4-6个剂量组；2、给动物注射，当前一只动物出现阴性反应时，就选用较高一级的剂量给予下一只动物；当出现阳性反应时，就给下一只动物较低一级的剂量，直到实验结束；3、计算各剂量动物总数n与剂量对数x的乘积之和（nx ）；4、计算lgLD50=（nx）/n ；5、取反对数得到LD50

7、。 特别注意特别注意o 后一动物剂量上升或下降由由前一动物的死亡或存活决定，从第一只改变算起到最后一只止，最后的终止号也作为一次实验结果。o 若最后一只动物死亡，下降一格画“x”，以存活计数；若最后用一只动物存活，上升一格画“x”，以死亡计数。例题例题为测定某试剂的安全性，用序贯法测定此试剂小白鼠腹腔注射的LD50（mg/kg）,选用1月龄小白鼠22只，给药的对数剂量应从估计最可能接近LD50的剂量开始，本例从1.85开始，死亡记为“+”号，存活记为“-”号。测定结果测定结果某试剂的某试剂的LD50值测定结果对数剂量对数剂量1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111213141516171819202122231.95+1.90+-+1.85+-+-+1.80-+-+-+1.75-x整理与计算整理与计算 对数剂量对数剂量x死亡死亡存活存活合计合计n1.951011.902131.856281.803581.75