头颈部肿瘤多药耐药机制及逆转剂探究进展

1、头颈部肿瘤多药耐药机制及逆转剂探究进关键词：头颈部肿瘤；抗药性；药物疗法摘要肿瘤细胞对多种化疗药物产生交叉抗药性 是造成肿瘤化疗失败的主要原因，随着化疗药物在头颈部肿 瘤的广泛应用，多药耐药现象在头颈部肿瘤的研究也取得了 一定的进展。本文对近年来头颈部肿瘤多药耐药机制及其逆 转剂研究进展作一综述。毕业论文肿瘤细胞耐药性可分为原药耐药和多药耐药 (multidrug resistance, mdr) o 目前，大多数人认为 mdr 是肿瘤化疗失败的主要原因。mdr是指由一种药物诱发，同 时对其他多种结构和作用机制完全不同的抗癌药产生交叉 耐药1;它往往导致联合化疗的失败。目前，头颈部恶性 肿瘤术

2、前或放疗前多采用诱导性化疗以及术后和放疗后采 用辅助化疗。此外，一些肿瘤也采用联合化疗。但由于mdr 现象的存在，头颈部肿瘤化疗效果不满意。因此，mdr机制 以及其逆转剂(化学增敏剂)的研究对于头颈部肿瘤化疗具 有积极的临床意义。下面仅就近年来对mdr机制和mdr逆转 剂的研究进展作一综述。毕业论文mdr机制研究毕业论文1 p糖蛋白(p-gp)介导的mdr机制mdr相关基因过 度表达p-gp是目前公认的mdr生物学基础。编码p-gp的基 因是mdr基因家族成员中的mdr-1 o p-gp是一种细胞膜蛋白。 目前发现在具有mdr的细胞株中，p-gp的存在与肿瘤耐药程 度和细胞内抗癌药浓度下降有关

3、。结构分析显示p-gp由包 括12个跨膜蛋白片段的2个相似区域和2个核昔酸连接区, 每个相似区域内有6个疏水区2。它是三磷酸腺昔蛋白酶 的一种。p-gp功能的准确机制尚不明确，大多数p-gp模型 表明其功能是通过细胞膜转运药物，即化疗药物通过一个由 p-gp跨膜区域形成的疏水通道泵出，从而出现耐药现象。对 于此现象的解释有2种，一种认为可能由于p-gp药物连接 区包含多个不重叠的药物连接位点，每个位点对于不同种药 或不同类药有不同的亲和力。另一种认为由于每个药物连接 区连接不同药物时均采用一个普通的机制，因此产生mdr现 象。mdr耐药谱包括恵环类、生物碱类、表鬼臼类、放线菌 素及紫杉醇。md

4、r-1基因调节可以发生在各个层次，包括dna 复制、转录和翻译。如一个自发从丝氨酸到颉氨酸的突变可 伴有明显对抗秋水仙碱的耐药现象。通过对p-gp磷酸化水 平的调节也可影响化疗耐药特性。肿瘤细胞本身的分化程度 也可影响人类mdr-1基因表达和功能，用维甲酸诱导神经鞘 瘤细胞分化可提高mdr-1 rna的水平3。毕业论文p-gp与mdr-1在头颈部肿瘤中的表达具有一定的临床 意义。rak in等4发现口腔鳞癌细胞内p-gp表达程度越 低，则病人的生存期越长。此外，分化较好的肿瘤、伴有双 倍体dna的肿瘤以及体积较大的肿瘤,p-gp的表达程度较高。 kelley等5研究结果表明头颈部鳞癌病人经过m

5、dr相关 药物化疗后p-gp在其鳞癌细胞中表达有明显提高。jain等 6对正常、异常及鳞癌不同临床分期的口腔粘膜p-gp表 达水平的研究表明生物学特征越差的肿瘤p-gp表达水平越 高。毕业论文关于恶性淋巴瘤中的mdr-1基因表达情况也有许多报 道。一些研究表明，在未经化疗的肿瘤标本中mdr-1基因阳 性率约为10 %20 % 7,而另一些研究则为50 %左右8, 9o化疗后的肿瘤标本mdr-1基因表达有明显提高7, 8o kang等10报道42 %较顽固恶性淋巴瘤病人化疗后活检 标本mdr-1基因表达比化疗前提高4倍。毕业论文2非p-gp介导的mdr机制 由于p-gp介导的mdr 机制还不能完

6、全解释mdr现象。因此，一些非p-gp介导的 机制也逐渐受到重视。它们主要包括：(1)谷胱昔肽转移酶 介导的mdr； (2)多药耐药相关蛋白介导的mdr； (3)拓扑 异构酶ii介导的mdr。另外，还有许多机制如肺耐蛋白、转 移性抗原肽等具有三磷酸腺昔酶活性的跨膜转运蛋白介导 的mdr,增加二氢叶酸还原酶的产物而导致对抗甲氨蝶吟、 蛋白激酶介导的mdr以及增加dna修补导致的mdr等。毕 业论文谷胱昔肽 s 转移酶(glutathione s-transferases, gst)是一组与细胞解毒有关的酶，分为a、b和“等多种 同工酶。目前，在卵巢肿瘤细胞株研究已经证实细胞内谷胱 昔肽的水平对烷

7、化剂和顺钳的耐药有关11。gst可以通过 催化谷胱昔肽与这些药物结合形成复合物即谷胱昔肽结合 (glutathione s-conjugate),再通过谷胱昔肽结合物输出 载体(glutathione s-conjugate export carrier, gs-x pump) 的泵活性将这些药物泵出细胞外，从而产生耐药性。已有研 究表明gst与头颈部肿瘤mdr有关，尤其是鳞癌。有报道 gst-n已成为头颈部鳞癌原发及继发病灶早期诊断的血清 学诊断依据2。毕业论文多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein, mrp)是一种膜糖蛋白。 mrp

8、与p-gp同属于三磷酸腺昔依赖性跨膜转运蛋白类，它们 在分子结构上具有某种程度上的序列同源性。肿瘤细胞中 mrp的过度表达同样具有泵出胞内药物的能力，产生mdro mrp与p-gp多药耐药谱相似，但也不尽相同。例如，对低水 平的紫杉醇的耐药主要伴随mrp的过度表达。两者通过转运 化疗药物产生mdr的机制也有差别。目前，有人认为mrp并 不能将抗癌药物转运到肿瘤细胞外，而是将抗癌药物转运到 肿瘤细胞内，交给与细胞解毒功能有关的gst,再通过gs-x 泵的作用将抗癌药物转移到细胞外。毕业论文welters等13在对经顺钳治疗的头颈部鳞癌细胞 株前后gst和mrp的水平的观察发现gsh水平与肿瘤细胞

9、对 顺钳敏感性呈反比。此外，细胞内钳的积聚与mrp表达水平 呈正比关系：mrp表达水平与ic50（给予顺钳后72 h,导致 50 %肿瘤细胞抑制的药物浓度）值呈反比。这表明mrp在转 运顺钳进入头颈部鳞癌细胞中起重要作用。muller等14 也证实过度表达mrp基因的肿瘤细胞同时伴有gs-x的活性 增高。因此，很可能gst与mrp共同介导了 mdr。毕业论文 拓扑异构酶（topoisomerase）是dna复制与转录所需 的酶，分i型和ii型。目前研究表明拓扑异构酶ii下降是介 导mdr的机制之一。其确切机制尚不清楚，关于该机制在头 颈部肿瘤的研究尚未见报道。毕业论文mdr逆转剂研究 为克服肿

10、瘤细胞的mdr,人们对其 逆转方式进行了大量的研究，从而发现了一些有效的途径 15,如：（1）运用非p-gp药泵作用底物的化疗药；（2）对 抗癌药物进行化学结构修饰，以克服药物与p-gp的底物作 用特征；（3）通过脂质载体运送抗癌药，改变药物进出细胞 的途径；（4）通过反义寡核昔酸等方法抑制mdr-1基因的表 达；（5）运用一些细胞因子逆转剂等方法。毕业论文自tsuruo等1981年第1次报道维拉帕米能提高mdr 小鼠白血病细胞株细胞内长春新碱浓度，mdr逆转剂已有了 很大的发展。目前的逆转剂主要有钙通道阻滞剂（维拉帕米 等）及其衍生物、钙调蛋白抑制剂（三氟丙嗪等）、环砲菌素 类（环砲素及其衍

11、生物）、抗疟药（奎宁等）、冠状动脉扩张药 （双11 密达莫）、皮质激素和激素类化合物（甲務孕酮等）、蛋白 激酶抑制剂（细菌生物碱等）和表面活性剂（聚山梨醇80等）。 毕业论文逆转剂种类不同，但作用机制相似。目前大多数逆转 剂通过抑制p-gp泵的功能从而对抗mdr,使mdr细胞内化疗 药物浓度升高。大多数逆转剂在结构上有广泛的相似性，一 般均为亲脂的含有杂环的带阳性电荷的化合物。因此，不同 的mdr逆转剂可能有一个或多个特殊的结构单一的连接位 点。毕业论文ki opman等16通过对609种不同的具有抗mdr活 性的化合物进行的分析，发现它们具有一定的结构特点。例 如ch2-ch2-n-ch2-

12、ch2基团可增强大多数化合物抗mdr活 性，若二甲基苯酚基团同时存在此活性则进一步增强。而稳 定的四价鞍盐、竣基、酚或一个苯胺基团，可降低化合物抗 mdr活性。此外还发现逆转剂和分配系数，p-gp之间包括芳 香环-芳香环，氢-芳香环和氨-芳香环连接存在着微电极作 用，在稳定蛋白质和药物与蛋白连接上的起重要作用。毕 业论文目前，对逆转剂的体外筛选重要是通过观察mdr细胞 在有或无候选逆转剂的情况下对化疗药物的反应，以决定该 药物是否可能作为逆转剂。但体外筛选出的逆转剂在临床上 运用往往效果不佳，这是由于体内存在多种因素如药物的分 布、代谢、清除、生物药效率和对宿主的潜在毒性等。此外, mdr可能

13、有多种机制介导，也是原因之一 17。毕业论文目前逆转剂在头颈部肿瘤的mdr研究主要集中在右维 拉帕米(dexverapamil)对恶性淋巴瘤mdr的逆转上。右维拉 帕米对心血管毒性小于维拉帕米，因此它更易被临床接受。 右维拉帕米早已被证明能提高肿瘤细胞中多柔比星 (doxorubicin)的浓度。wilson等18对65位接受了右维 拉帕米与epoch方案(包括依托泊昔、泼尼松、长春新碱、 环磷酰胺、多柔比星)联合化疗的恶性淋巴瘤病人进行了研 究，发现右维拉帕米将多柔比星的浓度提高了近2倍。此外, wilson等19在另外154位恶性淋巴瘤病人的研究中得到 类似的结论。毕业论文总之，经过对md

14、r机制的深入研究，现在已取得 了 一些重要发现，在其临床如何克服mdr方面也取得一定进 展，但其效果不尽人意。而且对于头颈部肿瘤的mdr研究仍 较少，有关逆转剂的报道也不多。因此，对于头颈部mdr逆 转剂的研究是今后我们克服化疗耐药研究的主要方向之一。 毕业论文参考文献毕业论文1 filer js, underhill lh. multipie-drug resistance in human cancer j n engl j med, 1987, 316:1388-1393.毕业论文2 ford jm. modulators of multi drug resistancej . hema

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