免疫治疗简介

1、LOGO免疫治疗免疫治疗immunotherapy肿瘤治疗肿瘤治疗手术治疗放射治疗化学治疗靶向/基因治疗免疫治疗治疗方法治疗方法Science:2013值得关注的六大科学值得关注的六大科学领域之一领域之一癌症的免疫治疗癌症的免疫治疗定义定义免疫治疗免疫治疗immunotherapy包括免疫包括免疫细胞细胞的治疗和药物的治疗，免疫细胞的的治疗和药物的治疗，免疫细胞的治疗是指把病人的细胞从血里面分离出来，在体外用一些治疗是指把病人的细胞从血里面分离出来，在体外用一些细胞因子细胞因子，使它，使它变成一种变成一种杀伤细胞杀伤细胞，再回输到血液中去，这种杀伤细胞可以识别，再回输到血液中去，这种杀伤细胞可

2、以识别肿瘤细胞肿瘤细胞进行杀伤。还有一种给病人直接用一些免疫制剂，像进行杀伤。还有一种给病人直接用一些免疫制剂，像干扰素干扰素还有白介素还有白介素等等，都叫免疫治疗等等，都叫免疫治疗。分类分类肿瘤的免疫疗法根据是否主动促进机体抗肿瘤免疫应答肿瘤的免疫疗法根据是否主动促进机体抗肿瘤免疫应答分为分为：主动免疫治疗主动免疫治疗，如肿瘤疫苗。肿瘤疫苗包括细胞瘤苗、蛋白多肽瘤苗以及核酸瘤苗等，通过提取肿瘤抗原进行免疫接种，从而促进机体抗肿瘤特异性免疫应答。被动免疫治疗，被动免疫治疗，主要包括抗体、杀伤性细胞和细胞因子（干扰素、白介素、集落刺激因子）等。肿瘤免疫治疗肿瘤免疫治疗特点特点肿瘤肿瘤免疫治疗的优

3、点是免疫治疗的优点是：效果持久，副作用少，并对转移病灶效果持久，副作用少，并对转移病灶有效有效。免疫疗法免疫疗法和其它疗法和其它疗法联合肿瘤治疗方法未来值得期待联合肿瘤治疗方法未来值得期待。目前肿瘤免疫治疗的免疫效率还较低目前肿瘤免疫治疗的免疫效率还较低2011年诺贝尔生理学或医学年诺贝尔生理学或医学奖授予美国洛克菲勒大学奖授予美国洛克菲勒大学教授教授RalphM.steinman，奖励其，奖励其“发现树突状细胞及其在获得性发现树突状细胞及其在获得性免疫中的作用免疫中的作用”的贡献的贡献肿瘤免疫治疗肿瘤免疫治疗肿瘤免疫治疗的临床评价肿瘤免疫治疗的临床评价国外采用：国外采用：酶联免疫斑点法酶联免

4、疫斑点法（enzymelinkedimmunospotassay，ELISPOT）主要组织相容性复合物四聚体检测主要组织相容性复合物四聚体检测细胞因子检测细胞因子检测世界卫生组织（世界卫生组织（WHO）和实体瘤的疗效评价标准（）和实体瘤的疗效评价标准（RECIST）是通过）是通过肿瘤肿瘤的大小的大小及及是否出现新病灶是否出现新病灶来评价细胞毒性药物的疗效来评价细胞毒性药物的疗效这些标准并不适用于免疫治疗：免疫治疗引发的肿瘤缩小多半发生在肿瘤这些标准并不适用于免疫治疗：免疫治疗引发的肿瘤缩小多半发生在肿瘤过性增大后，甚至是出现在新病灶后，其原因可能是肿瘤体内伴有淋巴细过性增大后，甚至是出现在新病

5、灶后，其原因可能是肿瘤体内伴有淋巴细胞侵润。胞侵润。研究较多的肿瘤疫苗研究较多的肿瘤疫苗肽疫苗肽疫苗全全蛋白疫苗蛋白疫苗肿瘤特异性抗原肿瘤特异性抗原病毒载体携带肿瘤抗原病毒载体携带肿瘤抗原多联合使用多联合使用GM-CSF，加强免疫刺激，加强免疫刺激肿瘤细胞疫苗（避免抗原选择），免疫效率低，但免疫概率大；自体肿瘤肿瘤细胞疫苗（避免抗原选择），免疫效率低，但免疫概率大；自体肿瘤细胞疫苗制造成本高，发展异体肿瘤细胞疫苗，三期临床失败，抗原谱不细胞疫苗制造成本高，发展异体肿瘤细胞疫苗，三期临床失败，抗原谱不足足树突树突状细胞疫苗（负载肽、肿瘤裂解物等），学术研究应用较多，商业关状细胞疫苗（负载肽、肿瘤

6、裂解物等），学术研究应用较多，商业关注较少：树突状细胞分离、胞外负载机回输体内等程序繁琐复杂注较少：树突状细胞分离、胞外负载机回输体内等程序繁琐复杂DC：树突状细胞：树突状细胞DCs是是专职专职抗原呈递细胞抗原呈递细胞，诱导诱导原发性免疫反应。包括骨髓细胞来源和淋原发性免疫反应。包括骨髓细胞来源和淋巴细胞来源巴细胞来源DCs发挥作用的步骤：发挥作用的步骤：DC祖细胞（造血干细胞、单核白细胞等）由骨髓迁移至外周组织捕获抗原，由未成熟状态逐渐成熟；同时伴随迁移能力的增强成熟的DCs经淋巴系统将抗原呈递给特异性T细胞特异性T细胞分化为CD4+和/或CD8+T细胞DCs疫苗疫苗研究较多的是骨髓来源的研

7、究较多的是骨髓来源的DCs体外培养，多采用体外培养，多采用GM-CSF和和IL-4诱导诱导DC祖细胞分化为祖细胞分化为DCs抗原的负载抗原的负载抗原的选择是关键：1、自身非突变抗原：存在缺陷，易产生免疫耐受2、突变抗原：免疫能力强，具有个体化效应，全基因组测序使个体化用药成为可能负载方法1、体外负载2、体内负载回回输体内，刺激输体内，刺激T细胞免疫反应细胞免疫反应体外负载体外负载DCs常用的抗原常用的抗原肿瘤特异性多肽肿瘤特异性多肽肿瘤蛋白抗原肿瘤蛋白抗原肿瘤全细胞抗原：肿瘤全细胞抗原：缺点：可能产生针对正常组织细胞成分的T细胞反应；要求有一定量的肿瘤细胞来源负载方法：1）肿瘤细胞裂解液；2）

8、凋亡肿瘤细胞；3）坏死或死亡的肿瘤细胞4）活肿瘤细胞；5）肿瘤细胞-DC融合肿瘤细胞分泌的胞外小体肿瘤细胞分泌的胞外小体肿瘤细胞肿瘤细胞RNA肿瘤细胞肿瘤细胞DNA体内负载体内负载DCs的常用方法的常用方法通过通过嵌合单克隆抗体靶向嵌合单克隆抗体靶向负载负载抗原到抗原到DCs脂质体携带抗原脂质体携带抗原，经皮下途径，到达局部淋巴组织，负载，经皮下途径，到达局部淋巴组织，负载DCs通过转基因使肿瘤细胞大量表达通过转基因使肿瘤细胞大量表达Fas而凋亡。而凋亡。DC在体内通过吞噬凋亡体而在体内通过吞噬凋亡体而负载肿瘤抗原负载肿瘤抗原通过体内联合给予通过体内联合给予LF(Flt3配体配体)、ISS(一

9、种含有一种含有CpG序列的序列的DNA分子分子)及肿及肿瘤抗原，体内活化和抗原负载瘤抗原，体内活化和抗原负载DCGM-CSFGM-CSF，粒细胞，粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子巨噬细胞集落刺激因子作用：作用：刺激DC分化和成熟增加细胞表面MHC细胞的表达增强DC对肿瘤抗原的呈递共刺激细胞因子表达较常用的策略：病毒载体携带较常用的策略：病毒载体携带GM-CSF基因转染基因转染DC细胞细胞案例案例1：基因介导的细胞毒素免疫治疗：基因介导的细胞毒素免疫治疗腺病毒腺病毒疱疹疱疹病毒胸苷激酶基因（病毒胸苷激酶基因（Adv-tk）抗抗疱疹药物前体（疱疹药物前体（HSV-tk的底物）的底物）瘤内瘤内注射注射经

10、经Adv-tk/prodrug处理之后，有丰富的处理之后，有丰富的APCs迁移至肿瘤细胞位点，迁移至肿瘤细胞位点，尤其尤其是坏死的肿瘤细胞位点，表明是坏死的肿瘤细胞位点，表明Adv-tk/prodrug可介导免疫反应可介导免疫反应Adv-tk/prodrug处理肿瘤细胞，肿瘤细胞处理肿瘤细胞，肿瘤细胞hsp70，导致巨噬细胞、，导致巨噬细胞、T细胞细胞和和DC的侵润，增加粘附分子的侵润，增加粘附分子ICAM-1的表达，介导白细胞的趋化和到内皮的表达，介导白细胞的趋化和到内皮细胞的粘附，增加细胞的粘附，增加APCs的的B7-1和和B7-2的表达的表达JournalofCellularBioche

11、mistry112:19691977(2011)案例案例2：神经胶质瘤细胞免疫治疗：神经胶质瘤细胞免疫治疗胞外对肿瘤细胞进行基因修饰，增强其免疫原性，如：体外经紫外照射，胞外对肿瘤细胞进行基因修饰，增强其免疫原性，如：体外经紫外照射，减弱其分裂能力，再回输体内，产生高效的抗肿瘤免疫反应减弱其分裂能力，再回输体内，产生高效的抗肿瘤免疫反应神经胶质瘤细胞分泌转化生长因子神经胶质瘤细胞分泌转化生长因子2（TGF-B2）和前列腺素）和前列腺素E2（PGE2）可抑制淋巴细胞增殖；分泌细胞因子可抑制淋巴细胞增殖；分泌细胞因子IL6可转移可转移Th1免疫反应（对肿瘤细胞免疫反应（对肿瘤细胞作用强）为作用强）

12、为Th2免疫途径；分泌免疫途径；分泌VEGF，促进肿瘤血管生成，通过抑制，促进肿瘤血管生成，通过抑制DC成熟降低抗原呈递产生免疫抑制；成熟降低抗原呈递产生免疫抑制；策略策略1：抑制此类免疫抑制因子的表达，刺激抗肿瘤免疫：抑制此类免疫抑制因子的表达，刺激抗肿瘤免疫策略策略2：免疫刺激因子转导肿瘤细胞，如：免疫刺激因子转导肿瘤细胞，如GM-CSF案例案例2：神经胶质瘤细胞免疫治疗：神经胶质瘤细胞免疫治疗GM-CSFIL-12：激活：激活Th1免疫途径；刺激免疫途径；刺激NK淋巴细胞淋巴细胞B7-2：T细胞共刺激分子，抗原呈递过程需要细胞共刺激分子，抗原呈递过程需要转导转导GM-CSF、GM-CSF

13、&B7-2、GM-CSF&B7-2orIL-12的胶质瘤细胞促的胶质瘤细胞促进自体进自体PBMCs增殖增殖表型改变：表型改变：CD8+、CD16+增多增多与小分子药物联合治疗与小分子药物联合治疗案例：案例：vemurafenib和免疫治疗和免疫治疗Vemurafenib诱导的肿瘤细胞死亡可释放内源性肿瘤抗原，小分子药物与诱导的肿瘤细胞死亡可释放内源性肿瘤抗原，小分子药物与免疫治疗方法可相互协作，促进免疫治疗方法可相互协作，促进T细胞免疫反应细胞免疫反应小分子是否会影响免疫系统反应？小分子是否会影响免疫系统反应？小分子药物可能会抑制小分子药物可能会抑制DCs和和T细胞的功能，通过改变肿瘤细胞的微环境细胞的功能，通过改变肿瘤细胞的微环境而抑制免疫作用而抑制免疫作用肿瘤细胞逃逸肿瘤细胞逃逸肿瘤细胞降低肿瘤细胞降低MHC-1的表达，表达细胞因子的表达，表达细胞因子VEGF、IL-6和和IL-10，抑制，抑制DC的成熟。的成熟。改变血液中细胞因子的水平，增加改变血液中细胞因子的水平，增加Treg（负调控（负调控T细胞）细胞含量，减细胞）细胞含量，减少少DC数量和抑制其功能。数量和抑制其功能。DC可激活可激活CD4+T细胞和细胞