杜仲舒筋丸急性毒性实验探究

1、杜仲舒筋丸急性毒性实验探究杜仲舒筋丸是由牛膝、当归、肉桂、马钱子粉、熾自然铜、桂枝、防风、麻黄、陈皮、甘草、杜仲、醋乳香等组成，具有祛风除湿，舒筋活血之功效。临床应用于风寒湿痹，四肢麻木，筋骨疼痛，行步艰难等。为了对本品的安全性做出客观、 科学的评价,进一步指导临床用药，故进行杜仲舒筋丸对小鼠 的急性毒性实验研究o1实验材料 1.1动物:昆明种小鼠，spf级，雌雄各半，体重(20 ±2) g,由黑龙江肿瘤防治研究所提供，饲养温度：(24 ±2) 9,相对湿度:45% -60% ,以颗粒饲料喂养，自由饮水。an1.2药物:杜仲舒筋丸，黑棕色的大蜜丸，味辛，微甜。用前以蒸馆水研

2、磨成混悬液进行口服灌胃。2.试验方法 2.1半数致死量(ld50)预试验:在进行正式试验之前，首先做预试验。以便为正试实验提供依据，将12只小鼠随机分 供灌胃的最大浓度(60% )，小鼠灌胃可承受的最大体积(每 10g体重0.4ml ) 一次灌胃杜肿舒筋丸沉溶液。给药后常规 饲养，观察3d,空白组灌胃等量蒸憎水，方法同给药组，结 果小鼠全部存活。处死后尸检观察各鼠主要脏器（肝、心、脾、 肺、肾）未发现任何异常改变。因此，无法测出本品的半数致 死量（ld50 ），提示该中药复方制剂药是安全的，故进行小鼠 最大耐受量试验。为两组，雌雄各半，灌胃前禁食不禁水16ho给药组：以可22最大耐受量实验预试

3、验时，无法测出ld50，故做最大耐受量试验,以进一步评价其安全性。将40只小鼠随机分为空白组20只，杜仲 舒筋丸组20只，每组雌雄各半。试验前禁食16h ,正常饮 水。药物组每只小鼠按0.4g/10g的剂量灌胃60%浓度的杜 仲舒筋丸溶液（已达最高浓度，最大给药浓度），一日内连 续灌服3次，间隔时间为4小时，空白组灌胃等体积的蒸懾 水，给药后连续观察7日，每天称取其体重并观察动物反应。 给药后常规饲养，室温（20 - 24°c ），湿度50%o试验第8 天称取体重后，处死小鼠，解剖观察其心、肝、脾、肺、肾 等主要器官的组织变化。2.3观察项目（1）给药前和给药后的第1-8天，测量小鼠

4、体 重。（2）观察给药后小鼠的外在表现，反射活动,饮水量，大、小 便,存活情况等。2.4实验结果及统计学处理:实验计量资料以均数士标准差（x ±s）表示，用统计软件spss1410处理，结果见表1、2o2.5毒性反应情况 小鼠每天最大给药量相当于72g/kg 为成人临床推存用量的280倍，小鼠灌胃给药后，即刻出现闭眼、卧伏等现象，自主活动明显减少，食欲有所下降，粪 便呈黑褐色，以上体征均在给药后2h4h内基本恢复正常。 此外，药物组小鼠无叫声异常、震颤、惊厥、运动失调、流 口、流泪、流鼻涕、呼吸困难、心跳过强或过弱、腹泻、便 秘、腹胀气等现象发生；小鼠皮毛光泽；给药8d内小鼠未 出现

5、死亡情况。2.6给药前后体重变化情况空白给与药物给小鼠体重增 长比较无统计学意义（p>0.05 ）,动物均增重。提示杜仲舒 筋丸对小鼠的急性毒性反应不明显。2.7内脏结构观察试验第8天称重后逐只处死并解剖,肉眼观察心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、卵巢、子宫、精囊、前列腺、睾丸、胃、肠及胸腔、腹腔，各器官均无异 常。3讨论 实验表明：（1）从表1可以得出:给药前、给药后的8天内两组小鼠体同时期内比较无显著性差异（p> 0.05），说 明该中药复方制剂对小鼠消化吸收功能影响不大；（2）从表2 可以看出:空白组观察指标均为正常,而给药组小鼠岀现了 24 h内自发活动减少、反应迟钝及48 h内有少数几只大便不成形的现象,说明满负荷灌胃给药对小鼠自主神经系统有一定 的刺激作用，且对消化吸收功能有轻微的不良影响；（3） 般 认为，按体重计算，小鼠1日内最大给药量相当于成人临床日 用量的100倍以上是较为安全的口。通过灌胃给药无法测 出杜仲舒筋丸的ld50，其1日最大给药量相当于72 g/kg