色谱法学时PPT课件

1、4.1.1 色谱法的产生和发展4.1.2 什么是色谱法4.1.3 色谱法分类色谱分析法简介色谱分析法简介第1页/共84页1.色谱法的产生 色谱法是一种分离技术 俄国植物学家茨维特1906年创立4.1.1 色谱法的产生和发展色谱法的产生和发展第2页/共84页分离植物叶子中的色素时，将叶片的石油醚（饱和烃混合物）提取液倒入玻璃管中，柱中填充CaCO3粉末（有吸附能力)，用纯石油醚洗脱（淋洗）。色素受两种作用力影响一种是CaCO3 吸附，使色素在柱中停滞下来一种是被石油醚溶解，使色素向下移动各种色素结构不同，受两种作用力大小不同，经一段时间洗脱后，色素在柱子上分开，形成了各种颜色的谱带，这种分离方法

2、称为色谱法。第3页/共84页Tsweet的实验第4页/共84页第5页/共84页2. 色谱法的发展 1930年代初：R.Kuhn把M.Tswett的方法用于类胡萝卜素的 分离，从此色谱法得以广泛应用。 1935年：Adams和Holmes第一次用苯酚和甲醛合成了人工有机离子交换剂，能交换阳离子和有机氢离子。后来又合成了阴离子交换剂，既可用于离子交换，又用于色谱分离即现时流行的离子交换色谱法。至1950年此方法已成型。4.1.1 色谱法的产生和发展色谱法的产生和发展第6页/共84页 1938年：Izmailov等人将糊状Al2O3浆液在玻璃板上铺成均匀薄层，用于分离植物中的药用成分，即今日用的薄层

3、色谱。（用于薄层的材料已发展至多种：如硅酸、聚酰胺等）。 1941年：Martin和Synge设计了两套萃取仪器，将蛋白质水解产物的乙酰化氨基酸由水溶液中提取到有机相而进行色谱分离。不久又研究了颗粒硅胶柱中三种衍生化氨基酸混合物在水相和有机相(氯仿)之间的不等分配，获得成功，使三个组分得到良好的分离,为液液分配色谱奠定了基础。第7页/共84页 1944年：Consden，Gordon和Martin将纤维（滤纸）作固定载体，以水吸附在滤纸上作溶剂，根据组分在两相中溶解度不同，即渗透率（速率）不同而使各组分彼此分离，称之为纸色谱法。 1952年：Martin和Synge又研究成功了在惰性载体表面涂

4、渍一层均匀的有机化合物膜作为固定相，并以气体为流动相，用来分离脂肪酸混合物即今日的气液色谱。 1954年：Ray提出以热导池作为气相色谱的检测器，使气相色谱应用更加广泛。第8页/共84页 1957年：Golay首先应用小口径毛细管柱进行色谱分离实验，结果证明了它具有高分辨率和高效能 即为今日的高效气相色谱法。 1959年：Porath和Flodin提出了使用具有化学惰性的多孔凝胶作固定相的空间排阻色谱法，根据固定相孔隙尺寸不同而具有不同的选择性渗透能力，从而对分子量分布不同的样品实现了分离。可用于测定聚合物的相对分子质量的的分布。第9页/共84页 我国情况 我国在色谱分析领域的研究起于1954

5、年 中国科学院大连化学物理研究所首先开发 经过几十年的努力，我国色谱基础理论研究和应用技术研究方面具有特色，居世界领先行列。第10页/共84页 随着被分离样品种类的增多，该方法广泛地用于无色物质的分离，“色谱”名称中的“色”失去了原有的意义，但“色谱”这一名称沿用至今。第11页/共84页1. 色谱法 混合物在流动相的携带下通过色谱柱分离出几种组分的方法。4.1.2 什么是色谱法什么是色谱法第12页/共84页2. 色谱法中共使用两相固定相固定不动的相 （如： CaCO3 ） 固体吸附剂：CaCO3、Al 2O3等 液体固定相（载体+固定液高沸点有机化合物，涂在载体上）流动相推动混合物流动的相 （

6、如：石油醚） 气体 1952年产生GC，是色谱法一项革命性进展 液体 流的速度慢，加压，使其流快，1969年HPLC4.1.2 什么是色谱法什么是色谱法第13页/共84页3. 色谱分离法特征n一定是先分离、后分析n一定具有两相：固定相和流动相n分离：利用组分在两相中分配系数或吸附能力的差异进行分离4.1.2 什么是色谱法什么是色谱法第14页/共84页4. 色谱法特点：（1）分离效能高（2）灵敏度高（3）分析速度快（4）应用范围广4.1.2 什么是色谱法什么是色谱法第15页/共84页1、按两相状态分类2、按操作形式分类3、按分离原理分类4.1.3 色谱法分类色谱法分类（1 1）气相色谱）气相色谱

7、（2 2）液相色谱）液相色谱（3 3）超临界液体色谱）超临界液体色谱（1 1）柱色）柱色（2 2）纸色谱）纸色谱（3 3）薄层色谱）薄层色谱（1 1）吸附色谱）吸附色谱（2 2）分配色谱）分配色谱（3 3）离子交换色谱）离子交换色谱（4 4）凝胶色谱）凝胶色谱第16页/共84页第四章 色谱法 4.1 色谱分析法简介 4.2 色谱图及色谱常用术语 4.3 色谱法的基本理论 4.4 色谱定性和定量分析 4.5 气相色谱法 4.6 高效液相色谱法第17页/共84页4.2.1 色谱图4.2.2 色谱常用术语4.2.3 根据色谱图可得到的重要信息第18页/共84页4.2.1 色谱图n混合物样品（A+B）

8、色谱柱中分离检测器记录下来。组分从色谱柱流出时，各个组分在检测器上所产生的信号随时间变化，所形成的曲线叫色谱图。n记录了各个组分流出色谱柱的情况，又叫色谱流出曲线第19页/共84页1. 基线在实验操作条件下，色谱柱后没有组分流出的曲线叫基线。稳定情况下是一条直线基线上下波动称为噪音4.2.1 色谱常用术语第20页/共84页2. 色谱峰的高度（峰高，h ）色谱峰最高点与基线之间的距离可用mm、mV、 mA表示峰高低与组分浓度有关，峰越高越窄越好 h第21页/共84页3. 色谱峰的宽度(区域宽度)q标准偏差 峰高0.607倍处的色谱峰宽的一半。q峰底宽Wb色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离 Wb

9、 =4 q半峰宽W1/2峰高一半处色谱峰的宽度 W1 / 2 =2 . 3 5 4 Wb = 4 W1 / 2 =0.589Wb WbW1/2第22页/共84页 4. 色谱峰面积（A） n色谱峰与峰底所围的面积。n对于对称的色谱峰 A=1.065h W1/2n对于非对称的色谱峰 A=1.065h(W 0.15+W 0.85)/2 第23页/共84页5. 死时间t0不被固定相吸附或溶解的组分流经色谱柱所需时间从进样开始到柱后出现峰最大值所需时间气相色谱惰性气体（空气、甲烷等）流出色谱柱所需时间t0第24页/共84页6. 保留时间tR 组分流经色谱柱时所需时间。进样开始到柱后出现最大值时所需的时间

10、操作条件不变时，一种组分有一个tR定值定性参数第25页/共84页7. 调整保留时间tR扣除了死时间的保留时间，又称校正保留时间，实际保留时间。tR=tR-t0体现的是组分在柱中被吸附或溶解的时间。 tR第26页/共84页8. 死体积V0不被固定相滞留的组分流经色谱柱所消耗的流动相体积称死体积，色谱柱中载气所占的体积。 V0=t 0F0 F0 -柱后出口处流动相的体积流速mL/min 9. 保留体积VR 组分从进样开始到色谱柱后出现最大值时所需流动相体积，组分通过色谱柱时所需流动相体积VR =t RF 010. 调整保留体积VR扣除了死体积的保留体积，真实的将待测组分从固定相中携带出柱子所需的流

11、动相体积。VR= tRF 0第27页/共84页11. 相对保留值i ,s 在相同操作条件下，组分i对参比组分s调整保留值之比第28页/共84页色谱保留值定性的依据6. 保留时间tR 7. 调整保留时间tR 9. 保留体积VR 10. 调整保留体积VR 11. 相对保留值i ,s组分在色谱柱中停留的数值，可用时间t 和所消耗流动相的体积来表示。组分在固定相中溶解性能越好，或固定相的吸附性越强，在柱中滞留的时间越长，消耗的流动相体积越大固定相、流动相固定，条件一定时，组分的保留值是个定值。 V0、t0与被测组分无关，因而VR . tR更合理地反映了物质在柱中的保留情况。第29页/共84页4.2.3

12、 根据色谱图可得到的重要信息（1）色谱峰个数判断样品中所含组分的最少个数（2）色谱峰的位置即保留值进行定性分析（3）色谱峰的h 、A 进行定量分析（4）色谱峰的位置及峰的宽度可评价色谱柱效（分离效能）（5）色谱峰两峰间的距离可评价固定相或流动相选择是否合适第30页/共84页第四章 色谱法 4.1 色谱分析法简介 4.2 色谱图及色谱常用术语 4.3 色谱法的基本理论 4.4 色谱定性和定量分析 4.5 气相色谱法 4.6 高效液相色谱法第31页/共84页 色谱分析目的 是将样品中各组分彼此分离 对样品中的组分进行定性、定量分析 组分达到完全分离，两峰间的距离须足够远 两峰间的距离是由组分在两相

13、间的分配系数K决定，即与色谱过程的热力学性质有关。 两峰间虽有一定距离，但若每个峰都很宽，彼此重叠，则峰不能分开 峰的宽或窄是由组分在色谱柱中传质和扩散行为决定，即与色谱过程的动力学性质有关第32页/共84页4.3.1 分配系数和分配比4.3.2 塔板理论4.3.3 速率理论范第姆特方程4.3.4 分离度4.3.5 基本色谱分离方程第33页/共84页 在一定温度下，组分在流动相和固定相之间所达到的平衡叫分配平衡，组分在两相中的分配行为常采用分配系数K和分配比k来表示。 4.3.1 分配系数和分配比第34页/共84页K仅与两个变量相关：固定相、温度TK与两相体积、管柱特性、使用仪器无关=c cs

14、/c cm组分在固定相中的浓度组分在流动相中的浓度K=1 1. .分配系数 K (K (浓度分配系数) )4.3.1 分配系数和分配比C Cs和c cm-组分在固定相和流动相中的浓度第35页/共84页2. 分配比分配比 k (容量因子，容量比容量因子，容量比) 组分在固定相中的质量 组分在流动相中的质量 = K Vs/Vm k = =ms/ mm k随T、固定相、流动相的体积变化而变化k越大，组分在固定相中质量越多， tR越长K、k越大，组分在固定相中tR就越长4.3.1 分配系数和分配比分配系数和分配比ms 和和 mm -组分在固定相和流动相中的质量组分在固定相和流动相中的质量Vs 和和 V

15、m -柱中固定相和流动相中的体积柱中固定相和流动相中的体积第36页/共84页3. k与tR之间的关系k = tR / t0 = (tR-t0) / t0 k = VR / V0 = (VR-V0) / V04.3.1 分配系数和分配比分配系数和分配比第37页/共84页4. K及及k与选择因子之间的关系4.3.1 分配系数和分配比分配系数和分配比实际意义： =1K（B）=K（A）, tR(B)= tR(A)A、B两组分色谱峰重合K或k相差越大，分离越好，色谱分离先决条件：两组分具有不同的K或k 1 （1或 1）)()(AtBtRR)()()()(AKBKAkBk第38页/共84页在在50年代，色

16、谱技术发展的年代，色谱技术发展的初期，初期，Martin等人把色谱分等人把色谱分离过程比作分馏过程，并把离过程比作分馏过程，并把分馏中的半经验理论塔板分馏中的半经验理论塔板理论用于色谱分析法理论用于色谱分析法用精馏塔中塔板的概念来描用精馏塔中塔板的概念来描述组分在两相间的分配行为述组分在两相间的分配行为理论塔板数作为衡量柱效率理论塔板数作为衡量柱效率的指标的指标4.3.2 塔板理论第39页/共84页（1）在柱内一小段长度）在柱内一小段长度H内，组分可在两相间迅内，组分可在两相间迅速达到平衡，速达到平衡，H称为理论塔板高度，称为理论塔板高度， n =L/H （2）以）以GC为例，载气进入色谱柱不

17、是连续进行为例，载气进入色谱柱不是连续进行而是脉动式，每次进气为一个塔板体积而是脉动式，每次进气为一个塔板体积V。（3）所有组分开始时存在于第）所有组分开始时存在于第0号塔板上，而且号塔板上，而且试样沿轴（纵）向扩散可忽略。试样沿轴（纵）向扩散可忽略。（4）K在所有塔板上是常数，与组分在某一塔板在所有塔板上是常数，与组分在某一塔板上的量无关。上的量无关。1. 基本假设4.3.2 塔板理论塔板理论第40页/共84页（1）流出曲线及其方程设n=5, k=1, m=1（=ms+mm）2.塔板理论方程式4.3.2 塔板理论塔板理论第41页/共84页第42页/共84页（2） 柱效评价 （H, n）n与W

18、b ， W 1/2 的关系n =L/H 或 H=L/n L-色谱柱长度 H-塔板高度 n-塔板数目 H有效n 有效 H理n 理L固定， H越小，n越大，分离效果越好 H、n 评价柱效 2.塔板理论方程式4.3.2 塔板理论塔板理论n 有效= 5.54 (tR /W 1/2)2 =16 (tR/Wb )2 n理 = 5.54 (tR /W 1/2)2 =16 (tR/Wb )2 第43页/共84页塔板理论的优势塔板理论的优势用热力学观点形象地描述了溶质在色谱柱中的分用热力学观点形象地描述了溶质在色谱柱中的分配平衡和分离过程，导出流出曲线的数学模型，并配平衡和分离过程，导出流出曲线的数学模型，并成

19、功解释了流出曲线的形状及浓度极大值的位置成功解释了流出曲线的形状及浓度极大值的位置提出了计算理论塔板高度、塔板数的公式及评价提出了计算理论塔板高度、塔板数的公式及评价柱效的方法，具有开创性柱效的方法，具有开创性塔板理论的缺点塔板理论的缺点基本假设不完全符合柱内实际发生的分离过程，基本假设不完全符合柱内实际发生的分离过程，未考虑各种动力学因素对色谱柱内传质过程的影响未考虑各种动力学因素对色谱柱内传质过程的影响同一试样进入同一色谱柱，当流动相速度变化时，同一试样进入同一色谱柱，当流动相速度变化时，得到不同色谱图；测得的得到不同色谱图；测得的 n 和和 H 也不同。也不同。第44页/共84页 195

20、6年，荷兰学者范第姆特(VanDeomter)提出 吸收了塔板理论中的H概念。并充分考虑了组分在两相同的扩散和传质过程，从而在动力学基础上较好地解释了影响H的各种因素方程:u为流动相线速度cm.s-1，线速度=L(柱长)/t01. 理论模型-范第姆特方程 4.3.3 速率理论n提出了影响的三项因素提出了影响的三项因素l涡流扩散项涡流扩散项A, 分子扩散项分子扩散项B/u, 传质阻力项传质阻力项Cun流动相流速一定，流动相流速一定，l当、最小时，小，当、最小时，小，n 最高，柱效高最高，柱效高l当、最大时，大，当、最大时，大，n 最小，柱效低最小，柱效低第45页/共84页气相色谱 uDskkdD

21、dkkuDdHfgpgp)1(32)1(01. 02222222+gl 液相色谱 uDfduDpduDdpHsmm2222gl+第46页/共84页HuGC（a）LC（b）GC（a）u有一最低点u最佳；u小或u大，H都大LC（b）u没有最低点； u大，H增大不多，因此可用较高的流速，提高分析速度（4）流动相线速度）流动相线速度u对对H的影的影响响第47页/共84页可测三种流速对应的板高H，解三元一次方程，求出A、B、C即可求出u最佳和H最小。实际工作中，为缩小分析时间，可选略高u最佳的流速，常用u最佳。BCACBCCBBAC u最佳u最佳BAH2/+最小CBu最佳GC中最佳流速可通过实验和计算方

22、法求得第48页/共84页1.为什么提出分离度概念？为什么提出分离度概念？ 柱效能 色谱柱在分离过程中的分离效能，常用n，来描述, 对单个组分, n 越大，越小，柱效越高 对多个组分，n 大，小，几个峰未必分开 选择性 描述两个相邻组分在同一固定相中热力学分布行为 用r2,1相对保留值表示. r2,1越大，保留时间相差大，分离越好（但未考虑峰宽因素）121 , 2RRttr4.3.4 分离度分离度第49页/共84页4.3.4 分离度R1.为什么提出分离度概念？ 两峰距离近，峰形宽，严重重叠两峰距离近，峰形宽，严重重叠表示选择性和柱效都很差表示选择性和柱效都很差两峰距离拉开，但峰形宽两峰距离拉开，

23、但峰形宽表示选择性好，但柱效低表示选择性好，但柱效低两峰距离拉开，且峰形窄而对称两峰距离拉开，且峰形窄而对称表示选择性好且柱效高表示选择性好且柱效高单独用选择性或柱效不能真实反映组分在单独用选择性或柱效不能真实反映组分在色谱柱中分离情况，需引入一个色谱柱中分离情况，需引入一个综合性指综合性指标，其既能反映选择性又能反映柱效标，其既能反映选择性又能反映柱效第50页/共84页4.3.4 分离度R2.分离度（R）定义相邻两个峰的保留值之差与两峰宽度平均值之比色谱柱的总分离效能指标2/ )(1212bbRRWWttR+v分子反映溶质在两相中分配行为对分离的影响分子反映溶质在两相中分配行为对分离的影响v

24、 是色谱分离的是色谱分离的热力学因素热力学因素。v分母反映动态过程溶质区带的扩宽对分离的影响分母反映动态过程溶质区带的扩宽对分离的影响v是色谱分离的是色谱分离的动力学因素动力学因素。v两溶质保留时间相差越大，色谱峰越窄，分离越好两溶质保留时间相差越大，色谱峰越窄，分离越好第51页/共84页.0 两峰有部分重叠.0 分离程度达98%，能满足分析要求.5 两个组分能完全分开2/ )(1212bbRRWWttR+第52页/共84页1. 基本色谱分离方程基本色谱分离方程4.3.5 基本色谱分离方程基本色谱分离方程1141 , 21 , 2+kkrrnR1141 , 21 , 2+kkrrnR121 ,

25、2RRttr22/1)(54. 5WtnR2/ )(1212bbRRWWttR+)()(AtBtRR)()()()(AKBKAkBk1 , 21 , 214rrnR有效第53页/共84页2.分离度与柱效能的关系分离度与柱效能的关系 4.3.5 基本色谱分离方程基本色谱分离方程1141 , 21 , 2+kkrrnR 柱效项塔板数决定，n 越大，柱效越高分离越好221 , 21 , 22)1()1(16kkrrRn+21 , 21 , 22)1(16rrRn有效1 , 21 , 214rrnR有效第54页/共84页、分离度与选择性的关系、分离度与选择性的关系 1141 , 21 , 2+kkrr

26、nR选择性项选择性项r2,1越大，越大，tR与与tR1 相差越大，分的越好相差越大，分的越好4.3.5 基本色谱分离方程基本色谱分离方程第55页/共84页3.3.分离度与柱容量的关系分离度与柱容量的关系 1141 , 21 , 2+kkrrnR柱容量项柱容量项k大一些对分析有利大一些对分析有利太大，太大，tR长长柱容量合适，分的才好柱容量合适，分的才好, 一般一般1k 104.3.5 基本色谱分离方程基本色谱分离方程第56页/共84页例题：在一定条件下，两个组分的调整保留时间分例题：在一定条件下，两个组分的调整保留时间分别为别为85s和和100s，要达到完全分离，即要达到完全分离，即R=1.5

27、。计算计算需要多少块有效塔板。若填充柱的塔板高度为需要多少块有效塔板。若填充柱的塔板高度为0.1 cm，柱长是多少？柱长是多少？解解： r2,1= 100 / 85 = 1.18 n有效 = 16R2 r2,1 / (r2,1 1) 2 = 161.52 (1.18 / 0.18 ) 2 = 1547（块） L有效 = n有效H有效 = 15470.1 = 155 cm 即柱长为即柱长为1.55米时，米时，两组分可以得到完全分离两组分可以得到完全分离第57页/共84页第四章 色谱法 4.1 色谱分析法简介 4.2 色谱图及色谱常用术语 4.3 色谱法的基本理论 4.4 色谱定性和定量分析 4.

28、5 气相色谱法 4.6 高效液相色谱法第58页/共84页4.4.1 定性分析4.4.2 定量分析第59页/共84页1.定性分析的任务 确定色谱图上各个峰代表什么物质 4.4.1 定性分析定性分析第60页/共84页2.如何定性？（1）利用保留值与已知物对照定性 I. 利用纯物质或已知物质保留时间定性 II. 利用峰高增量定性 III.利用双色谱系统定性（2）与其它分析仪器联用进行定性4.4.1 定性分析定性分析第61页/共84页2.如何定性？（1）利用保留值与已知物对照定性 I. 利用纯物质或已知 物质保留时间定性4.4.1 定性分析定性分析在相同色谱条件下，将标准物和样品分别进样，两者保留值相

29、同，可能为同一物质此方法要求操作条件稳定、一致，必须严格控制操作条件，尤其是流速第62页/共84页2.如何定性？（1）利用保留值与已知物对照定性 II.利用峰高增量定性 若样品复杂，流出峰距离太近，或操作条件不易控制，可将已知物加到样品中，混合进样，若被测组分峰高增加了，则可能含该已知物。4.4.1 定性分析定性分析第63页/共84页2.2.如何定性？如何定性？(2)(2)与其它分析仪器联用的定性方法与其它分析仪器联用的定性方法小型化的台式色质谱联用仪（小型化的台式色质谱联用仪（GC-MSGC-MS；LC-MSLC-MS）色谱色谱- -红外光谱仪联用仪；红外光谱仪联用仪；组分的结构鉴定组分的结

30、构鉴定4.4.1 定性分析定性分析第64页/共84页 1. 定量分析的依据 气相色谱定量分析是根据检测器对溶质产生的响应信号与溶质的量成正比的原理，通过色谱图上的峰面积或峰高，计算样品中溶质的含量。 mi=fi Ai mi=fihi mi -被测组分被测组分i的质量的质量， fi -比例系数比例系数 Ai、hi -被测组分的峰面积及峰高被测组分的峰面积及峰高4.4.2 定量分析定量分析第65页/共84页 2. 峰面积测量方法 mi=fi Ai mi=fi hi 对称色谱峰A=1. 065hW12 不对称色谱峰A=1.065h （W0.15W0.85）/24.4.2 定量分析定量分析第66页/共

31、84页3. 定量校正因子mi=fi Ai mi=fi hi 色谱定量分析是基于峰面积与组分的量成正比关系色谱定量分析是基于峰面积与组分的量成正比关系但同一检测器对不同物质具有不同的响应值，即不同物质检测器的灵敏度不同，但同一检测器对不同物质具有不同的响应值，即不同物质检测器的灵敏度不同，相同的峰面积并不意味着有相等的量。相同的峰面积并不意味着有相等的量。定量校正因子：单位峰面积对应组分的质量。定量校正因子：单位峰面积对应组分的质量。 绝对定量校正因子绝对定量校正因子fi=mi/Ai受操作条件影响较大，要严格控制色谱条件，不易准确测定，没有统一受操作条件影响较大，要严格控制色谱条件，不易准确测定

32、，没有统一标准，无法直接引用。标准，无法直接引用。相对定量校正因子相对定量校正因子fi 样品中各组分的定量校正因子与标准物的定量校正因子之比。样品中各组分的定量校正因子与标准物的定量校正因子之比。 用一个标准，把所有组分的用一个标准，把所有组分的A较正到标准物的较正到标准物的A上，在同一标准上进行比上，在同一标准上进行比较计算，热导检测器常用苯作标准较计算，热导检测器常用苯作标准4.4.2 定量分析定量分析第67页/共84页相对定量校正因子fi相对质量校正因子相对摩尔校正因子fi(M)isiisisissssiiisiiMMmfMmAMmAAMmAMmMfMfMf)(/)()()(n 凡文献查

33、得的校正因子都是指相对校正因子凡文献查得的校正因子都是指相对校正因子n 可用可用fM,fm分别表示摩尔和质量校正因子分别表示摩尔和质量校正因子siisssiisiimAmAAmAmmfmfmf/)()()(第68页/共84页4、定量方法 （1）归一化法 （2）内标法（3）外标法4.4.2 定量分析定量分析第69页/共84页4.4.2 定量分析定量分析4、定量方法、定量方法（1）归一化法）归一化法把所有出峰组分的含量之和当作把所有出峰组分的含量之和当作100%的定量分析方法称为归一化法的定量分析方法称为归一化法前提：试样各组分都出峰前提：试样各组分都出峰若样品中有几个组分，每个组分的量分解为若样

34、品中有几个组分，每个组分的量分解为m1 m2mn 各组分含量总和为各组分含量总和为m，则组分的质量分数则组分的质量分数Wi为为 %1002211+nniiifAfAfAfAw优点：简便、准确、不需标准物，不必准确称量和准确进样，操作条件稍有变化对结果影响较少。缺点：所有组分都出峰，并测所有组分的A A和f fi i第70页/共84页4.定量分析定量分析（2）内标法）内标法准称样品m（含mi被测组分）+准称纯物质作内标物ms混合物进样siisssiisiimAmAAmAmmfmfmf/)()()(sssssAmAfmssiiiAmAfm被测组分标样(内标物)4.4.2 定量分析定量分析mAfmAfmmwsssiiiissiisiAfAfmm 第71页/共84页对内标物的要求：1）内标物应是样品中不存在的纯物质。2）内标物与被测物的峰尽量靠近，但又能完全分开，tR相差少。为简便起见，求定量校正因子时，常以内标物本身作标准。 fs =1.0内标法优点定量准确，操作条件不必严格控制，与进样量无关，被测组分和内标物出峰即可，适用于微量组分的测定，应用广泛。内标法缺点每次测定都要准确称量样品和内标物（2）内标法 第72页/共84页4.定量分析定量分析（3）外标法）外标法标准曲线法标准曲线法适用于：样品中各组分不能完全流出，又没有合适内标时。4.4.2 定量分析定量分析将