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文档简介
1、植物生理学实验考试试题一、名词解释:1、标准曲线:用标准溶液制成得曲线。先配制一系列不同浓度得标准溶液,在溶液吸收 最大波长下,逐一测定吸光度,然后用坐标纸以溶液浓度为横坐标,吸光度为纵坐标作图, 若被测物质对光得吸收符合光得吸收定律,必然得到一条通过原点得直线,即标准曲 线。4、氮素代谢:氮素及含氮得活体物质得同化异化与排泄,总称为氮素代谢、5、淀粉酶:就是水解淀粉与糖原得酶类总称。6、真空渗入:指将叶片打孔放入注射器中,加水浸没,排出空气后用手指堵住前端小孔,同 时把活塞向外抽拉,即可造成减压而排出组织中得空气,轻放活塞,水液即进入组织得方 法。7、离心技术:就是根据物质颗粒在一个离心场中
2、得沉降行为而发展起來得。它就是分离 细胞器与生物分子大分子物质必备得手段之一,也就是测定某些纯品物质得部分性质得 一种方法。8、电泳:各种生物大分子在一定PH条件下,可以解离成带电荷得颗粒,这种带电颗粒在 电场得作用下向相反电极移动得现象称为电泳、9、同工酶:凡能催化同一种化学反应但其分子结构与带电性质不同得一组酶称为同工 酶10、迁移率:指带电颗粒在单位电场强度下得泳动速度、】1、聚丙烯醸胺凝胶:就是一种人工合成凝胶,就是以丙烯酰胺为单位,由甲叉双丙烯 猷胺交联成得,经干燥粉碎或加匸成形制成粒状,控制交联剂得用量可制成各种型号得 凝胶。20、超氧化物歧化酶(SOD):普遍存在动植物体内得一种
3、清除超氧阴离子口由基02得 酶。2 1、硝酸还原还原酶:就是植物氮素同化得关键酶,它催化植物体内得硝酸盐还原为亚硝 酸。22、诱导酶:乂称适应酶,指植物体内本來不含有,但在特定外來物质得诱导下诱导生成得 酶。如硝酸还原酶可为NO3-所诱导生成。A二、填空:1、测定植物可溶性蛋白质含量时,绘制标准曲线就是标准蛋白质浓度为横 坐标,以吸光值为纵坐标。2、常用得测定植物可溶性蛋白质含量得方法有:FOlin-酚试剂法(LoWry法)、双缩 腺法、考马斯亮蓝法与紫外吸收法。4、用滴定法测VC含量时,若样品本身带有颜色,则需先将样品用莖酸处理。5、测定淀粉酶活性时,3,5_二硝基水杨酸试剂(DNS)得作用
4、就是与还原糖显色生成 棕红色得3-氨基一5 硝基水杨酸与终止酶活性。6、在测定淀粉酶得活性时:a淀粉酶不耐_酸_,卩一淀粉酶不耐一热7、聚丙烯酰胺凝胶电泳分离过氧化物同工酶实验中,电泳存在三大效应,分别就是遜敛 应、分子筛效应与电荷效应。9、用活体法测定硝酸还原酶得材料,取样前叶子需进行一段时间得光合作用,以积累光 合产物,产生更多NADH加速硝酸盐得还原。11、叶绿素吸收光谱有红光与蓝紫光区两个最强吸收区。12、类胡萝卜素吸收光谱最强吸收区在绿素得作用。13、叶绿素溶液在透射光下呈色,在反射光下呈暗红色、15、水培时要选用黑色容器装营养,这就是为了防止藻类滋生16、常用水溶液培养法确定植物生
5、长得必需元素。三、选择1当植物细胞水势小于外界溶液水势时,植物细胞_外液浓度变DA吸水 B 失水C小 D大2用红菜苔做植物组织原生质透性得观察时,学生2 O分钟后观察到有红色色素出现, 下面那种处理方式不可能出现这种情况A清水浸泡B清水煮沸Imin C 3 0%得醋酸D 70%酒精3希尔反应实验常用植物材料为新鲜菠菜,选用菠菜叶出于 _方面考虑A叶绿素含量高B易于碾磨 C营养丰富 D颜色漂亮4植物生理实验时,在碾磨植物材料时经常会用得石英砂,其主要作用为A_A增加粗糙度B保护叶绿体或营养物质C易于过滤 D使溶液分层5植物组织中得水分主要有口由水与束缚水两种形式存在,有同学通过实验测定某一植 物
6、得自由水与束缚水得比值比较大,可推断该植物处于AA旺盛生长时期 B衰退状态C病虫危害状态 D干旱状态6蛋白质含量得测定常用“考马斯蓝G- 2 5 0 ”方法,其主要原理:考马斯蓝G-250燃 料在游离状态下称红色,当它与蛋白质结合后呈青色、其结合物在光波 下吸光值 与蛋白质含量成正比,故用分光光度计比色法测定A 6 6 8 n m B 5 9 5nm C 25Onm D 320 n m7在绿豆芽蛋白质含量得测定实验时,实验仪器用到了离心机,其作用主要为 A使蛋白质与水分离B使残渣与浸出液分离C使色素与水分离D使蛋白质与水混合8叶绿素不能溶液以下哪种溶液 BA乙醇B水C丙酮D氯仿9环形层析法分离
7、叶绿体中得各色素,色素种类从里向外得顺序为 A叶绿素a、叶绿素b、叶黄素、胡萝卜素B叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素C叶绿素b、叶绿素a、胡萝卜素、叶黄素D胡萝卜素、叶黄素、叶绿索b、叶绿素a1 0红外线C0?分析仪测环境中CO:得含量具有易操作、高效率等优点。当用同一台仪 器对武生院不同地点进行C 0:测定时,发现林下与餐厅C0:浓度相差不太明显,据推测主 要原因为CA仪器误差B人为操作不当C风得影响D光线得影响11植物得生长发育需要大量得营养物质才能完成,现代无土栽培方法主要通过配制一 定得比例得营养液來培养园艺花卉或农作物,而植物缺乏某一种营养元素都会产生不正 常得外在表现,我们称之
8、为“缺素症”。当我们对海桐枝条进行缺素培养时,同学们发现 海桐枝条用缺素液培养与完全营养液、纯水培养等儿种方法培养,其外在表现上没有差 别,其主要原因有可能就是 CA肥料失效B称量误差C海桐对缺素不敏感D光照影响1 3植物细胞膜对维持细胞得微环境与正常代谢起着重要作用。在正常情况下细胞膜对 物质具有选择透性能力。为了测定植物得抗逆性,实验中我们常用不同温度处理,通过测 溶液导电性,來判断植物对高温得抗性大小。如果有两种植物,用相同得温度处理,发现 植物a得电导率为1。235,植物b得电导率为0、8 34,那么那种植物可能更耐高温一些 BA植物a B植物b14 TTC法测种子生命力,通过温水浸泡
9、过得健康玉米种子,B不会染色A胚芽 B胚乳C胚轴 D胚根】5植物呼吸强度得测定实验过程中,用广口瓶中加入一定量得Ba(OH)2,并悬挂植物 材料,则植物材料呼吸放出得C0:彼容器中Ba(OH) =所吸收,然后用草酸溶液滴定残留 Ba(OH) 2,根据与空白样本对比本可以计算出植物得呼吸速率。如果空白滴定所有草酸量 为V。,样品滴定所用草酸量为V:,有同学做实验滴定得草酸量V。为7。4ml,V1为7、Gm1 ,那么该同学所滴定得结果B_A正确 B错误2、进行酶活力测定时:A )A、底物浓度必须极大于酶浓度B、酶浓度必须极大于底物浓度C、与底物浓度无关D、酶能提高反应得平衡点44、FOIin一酚试
10、剂 Lowry法)测定蛋白质浓度时,用(B )波长比色,测定光密度值。A、26Onm650n m C、5 4 Onm 2 8 Onin5、不连续聚肉烯酰胺凝胶电泳比一般电泳得分辨率高,就是因为具有下列哪种效 应?(ABC) A、浓缩效应B、电荷效应C、分子筛效应D、粘度效应6、硝酸还原酶与亚硝酸还原酶(D )A.都就是诱导酶B .硝酸还原酶不就是诱导酶,而亚硝酸还原酶就是C、都不就是诱导酶D、硝酸还原酶就是诱导酶,而亚硝酸还原酶不就是7、酶得分离提纯过程中,不正确得操作就是(C)A、需在低温下进行,一般在05°C之间 B、酶制剂制成干粉后可保存于4。C冰箱 中C、需经常使用疏基乙醇以
11、防止酶蛋白二硫键发生还原 D、提纯时间尽量短8、在提取叶绿素时,研磨叶片时加入少许C a CO3,其目得就是(D)A.使研磨更充分B.加速叶绿素溶解C.使叶绿素a、b分离 D、保护叶绿素10、一般而言,正常植物叶片得叶绿素与类胡萝卜素得比值为(B)AO 2:1 BO 3:1 C、1 :2 DO 1:311、测定叶绿素总量时,分光光度计选用得波长就是(D )A、663nn B. 6 4 5nm C、430 n m D、652nm四、问答题1、试述植物种子萌发得三个阶段以及各阶段得代谢特点?答:吸胀吸水阶段:为依赖原生质胶体吸胀作用得物理吸水阶段,无论种子就是否通过 休眠还就是有无生命力,均具有此
12、阶段;缓慢吸水阶段:种子吸水受种皮得束缚,原生 质得水合度达到饱与,酶促反应与呼吸作用增强,贮藏物质开始分解,胚细胞得吸水力提 高;生长吸水阶段:在贮藏物质加快转化得基础上,胚根、胚芽中得核酸、蛋白质等原 生质组分合成加快,细胞吸水加强、当胚根突破种皮后,有氧呼吸增强,种子吸水与鲜重 持续增加、2、什么叫质壁分离现象?研究质壁分离有什么意义?答:植物细胞由丁液泡失水而使原生质体与细胞壁分离得现象称为质壁分离。在刚发生 质壁分离时,原生质与细胞壁之间若接若离。称为初始质壁分离、把己发生质壁分离得 细胞置丁水势较高得溶液与纯水中,则细胞外得水分向内渗透,使液泡体积逐渐增大因 而原生质层与细胞壁相接
13、触,恢复原來得状态,这一现象叫质壁分离复原、 研究质壁分离可以鉴定细胞得死活,活细胞得原生质层才具半透膜性质,产生质壁分离 现象,而死细胞无比现象;可测定细胞水势,在初始质壁分离时,此时细胞得渗透势就就 是水势(因为此时压力势为零):还可用以测定原生质透性、渗透势及粘滞性等。3、小篮子法测定萌发得小麦种子呼吸强度,以Ba(OH)2吸收呼吸时放出得CO 2种子重 5g,反应进行20分钟,用0、IN-草酸滴定剩余得Ba(OH)2,用去草酸18ml,空白滴定用 去草酸2 0 ml,计算萌发小麦种子得呼吸强度。答:小麦种子呼吸强度(鲜重小时)=2。64 (mgCo2gFWh)4、农谚讲“旱长根,水长苗
14、”就是什么意思?道理何在?答:这就是指水分供应状况对植物根冠比调节得一个形象比喻。植物地上部生长与消耗 得大量水分,完全依靠根系供应,土壤有效水得供应量直接影响枝叶得生长,因此凡就是 能增加土壤有效水得措施,必然有利地上部生长;而地上部生长旺盛,消耗耗大1:光合产 物,使输送到根系扔机物减少,乂会削弱根系得生长,加之如果水分过多,通气不良,也会 限制根系活动,这些都将使根冠比减少。干旱时,由丁根系得水分环境比地上部好,根系 仍能较好地生长;而地上部则由于抽水,枝叶生长明显受阻,光合产物就可输入根系,有 利根系生长,使根冠比増大、所以水稻栽培中,适当落干晒,可对促进根系生长,増加根 冠比、6、简
15、述气孔开闭得主要机理。答:气孔开闭取决丁保卫细胞及其相邻细胞得水势变化以及引起这些变化得内、外部因 素,与昼夜交替有关、在适温、供水充足得条件下,把植物从黑暗移向光照,保卫细胞得 渗透势显著下降而吸水膨胀,导致气孔开放。反之,当日间蒸腾过多,供水不足或夜幕布 降临时,保卫细胞因渗透势上升,失水而缩小,导致气孔关闭。气孔开闭得机理复杂,至少有以下三种假说:(1)淀粉一一糖转化学说,光照时,保卫细胞 内得叶绿体进行光合作用,消耗C 02,使细胞内PH值升高,促使淀粉在磷酸化酶催化下转 变为1-磷酸葡萄糖,细胞内得葡萄糖浓度高,水势下降,副卫细胞得水进入保卫细胞,气 孔便张开、在黑暗中,则变化相反。
16、(2)无机离子吸收学说,保卫细胞得渗透系统亦可由 钾离子(K+)所调节。光合磷酸化产生ATP. ATP使细胞质膜上得钾一氢离子泵作功,保 卫细胞便可逆着与其周围表皮细胞之间得离子浓度差而吸收钾离子,降低保卫纽1胞水势, 气孔张开。(3)有机酸代谢学说,淀粉与苹果酸存在着相互消长得关系。气孔开放时,葡 萄糖增加,再经过糖酵解等一系列步骤,产生苹果酸,苹果酸解离得H+可与表皮细胞得 K+交换,苹果酸根可平衡保卫细胞所吸入得K+。气孔关闭时,此过程可逆转。总之,苹 果酸与K+在气孔开闭中起着互相配合得作用。7、呼吸代谢得多条途径对植物生存有何适应意义?答:植物代谢受基因得控制,而代谢(包括过程、产物
17、等)乂对基因表达具控制作用,基因 在不同时空得有序即表现为植物得生长发育过程,高等植物呼吸代谢得多条途径(不同 底物、呼吸途径、呼吸链及末端氧化等)使其能适应变化多端得环境条件。如植物遭病 菌浸染时,PPP增强,以形成植保素,木质素提高其抗病能力,乂如水稻根在淹水缺氧条 件下,乙醇酸氧化途径与与氧亲与力高得细胞色素氧化酶活性增强以保持根得正常生 理功能、4. 请介绍3种常用得可溶性蛋白质得测定方法。答:目前常用得有以下几种方法:双缩腺法、LOWry法(FoIin-酚试剂法)、BradfOr d 法(考马斯亮 蓝法)、紫外吸收法。5、简述斐林一酚试剂法测定植物可溶性蛋白质得原理。a答:FOlin
18、-酚试剂法也称 LOWry法,斐林(FOIin)酚试剂法结合了双缩豚试剂与酚试剂与蛋白质得反应,其中包 括两步反应:第一步就是在碱性条件下,蛋白质中得肽键与铜试剂作用生成紫红色得蛋白 质一铜络合物(双缩腋反应);第二步就是此络合物以及蛋白质中酪氨酸与苯丙氨酸等芳 香族氨基酸得残基使磷钳酸-磷钩酸试剂(FOIin试剂)还原,产生磷钳蓝与磷钩蓝得深 蓝色混合物质,在一定得条件下,颜色深浅与蛋白含量成正相关、因此,可利用其在65 0 nm波长下得特定吸收进行比色测定。6、植物组织可溶性蛋白质含量得测定中,斐林一酚试剂法、考马斯亮蓝法两种方法各 有何优缺点?答:斐林一酚试剂法其优点就是:由于加入了 F
19、Ol i n酚试剂后使蛋白质肽键显色效果 增强,从而减少了因蛋白质种类引起得偏差、其灵敏度比双缩豚法高1 00倍。此法操作 简便,适于蛋白质含量较微小得样品测定。可检测得最低蛋白质含量达5ug,通常测 定范围5IoOUg、Oo 0 20。50mg / mL蛋白质,也可用于酪氨酸与色氨酸得定量测 定。缺点就是操作烦琐,耗时较长,要精确控制操作时间,标准曲线不就是严格得直线形式, IL专一性差,干扰物质(酚类、柠檬酸、TriS缓冲液、廿氨酸、糖类、甘油等)较多、 考马斯亮蓝法就是灵敬度更高得一种方法,优点有:灵敏度高,比1 Owry法高4倍 左右,最低检测达1一5微克;测定快速、简便,染色稳定;干
20、扰物质少。缺点就是用丁-不 同蛋白质测定时有较大得偏差;仍有干扰,如SDS、去污剂、Trit O n xl O O等;标准曲 线有轻微得非线性、7、FOl in酚试剂法测定植物可溶性蛋白质时受哪些因素得干扰?答:FOl i n-酚试显色反应就是由络氨酸、色氨酸与半胱氨酸引起得,因此样品中若含有 酚类、柠檬酸与疏基类化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质音络氨酸、色氨酸含量 得不同而使显色强度稍有差异、8、用弟三酮显色法测定植物组织氨基酸时,加入VC得作用就是什么?答:由于该反应得第一步就是苗三酮得还原,而还原型飾三酮在含氧量髙得情况下很容 易再氧化,对反应有干扰,因此,常在反应体系中加入还原剂,
21、以阻止还原型讳三酮得再氧 化。9、昂三酮显色法测定植物组织氨基酸时为什么要除去蛋白质?用10%乙酸除去蛋白 质得原理就是什么?答:由丁蛋白质与多肽中得游离氨基酸也会产生同样反应,因此,对于含大量蛋白质与多 肽得样品,应先用蛋白质沉淀剂将其除去、常用得蛋白质沉淀剂有10%乙酸、磺基水 杨酸(SSA).三 氯乙酸(TCA)、过氯酸(PCA)等,其中以乙酸提取总氨基酸得效果较 好、 原理:1 0%乙酸与蛋白质反应使之沉淀下来()10、用弟三酮显色法测定植物组织氨基酸时,为什么要用无氨蒸馅水?答:氨基酸与苗三酮反应得实质就是还原型苗三酮与另一分子苗三酮与一分子氨得缩 合脱水反应。故,若蒸憎水中含有氨将
22、使氨基酸含量增大、带來误差、11、测定植物组织中游离氨基酸总量有何生理意义?答:测定植物体内游离氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢 变化、植物对氮素得吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。12、测定淀粉酶活性时,3,5二硝基水杨酸试剂(DNS)得作用就是什么?答:淀粉酶水解淀粉生成得麦芽糖,可用3,5-二硝基水杨酸试剂测定。由丁-麦芽糖能将 后者还原生成3-氨基-5硝基水杨酸得显色基团,在一定范围内其颜色得深浅与糖得浓 度成正比,故可求出麦芽糖得含量。13、测定(+)-i½粉酶总活力时,为什么要将淀粉酶原液稀释成淀粉酶稀释液后进行反 应。答:淀粉酶原液主要就是
23、用于钝化P-淀粉酶,从而测定a淀粉酶得活力。而淀粉酶稀 释液主要就是用于测出(+)-淀粉酶总活力,从而可得出P淀粉酶得活力。14、测定淀粉酶活性时,为什么要将酶提取液与淀粉溶液分别放在40C水浴中预保温? 答:因为a淀粉酶得最适温度在40°C50°C之间,在这一温度范围内a淀粉酶得活 性最强,催化淀粉得能力最强、因此,将酶提取液与淀粉溶液分别放在4(TC水浴中预保 温,有利于淀粉酶活性得测定,减少误差。15、测定硝酸还原酶活性得离体法与活体各有何特点?4答:活体法步骤简单,适合快速、 多组测定,重复性不好,应在4。C离体法步骤复朵,但重复性较好。需要在低温与NA DH得条件
24、下进行。1血、为什么用活体法测定硝酸还原酶得材料,在取样前要进行一段 时间得光合作用?答:因为测定前材料在进行光合作用,会积累能量物质,可促进硝酸还原酶得产生。17、活体法测植物体内硝酸还原酶活力实验中,硝酸盐还原过程为何在黑暗中进行? 答:硝酸盐还原过程应在黑暗中进行,以防亚硝酸盐还原为氨。18、活体法测植物体内硝酸还原酶活力实验中,如何判断真空抽气得终点?答:真空抽气时,叶片完全软化沉入杯底,则代表叶片组织间隙得气体得以全部排除,那么 就就是真空抽气得终点。19、用2,6二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量时,为什么强调滴定时间不超过2分 钟答:维生素C具有很强得还原性,如果滴定时间过长,维生
25、素C就会被空气中得氧 气氧化,从而减少维生素C得含量,最终影响到维生素C含量得测定。20、为什么用2,6二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量时,要在测定得同时进行2, 6 二氯酚靛酚溶液得标定答:就是为了知道此时2.6-D染料得滴定度(每ml染料相当于抗坏血酸得mg 数)。就是因为2,6 D染料很不稳定,随着时间得推移,其滴定度一直在变化中,因此 只能现测现用。21、简述滴定法测定VC含量得实验原理。*答:还原型抗坏血酸还原染料2,6-二氯靛 酚,该染料在酸性中呈红色,被还原后红色消失。还原型抗坏血酸还原2,6-二氯靛酚后, 本身彼氧化成脱氢抗坏血酸。在没有朵质干扰时,一定量得样品提取液还原标准2
26、,6-二 氯靛酚得量与样品中所含维生素C得量成正比。心2。为了准确测定果蔬得抗坏血酸 含量,在测定过程应注意些什么?答:实验所用得蒸憎水必须就是无氨水。滤必须用 干燥滤纸。格掌握加入抗坏血酸得含量、准曲线应在测定样品得同时做,以减少操 作及反应条件得误差。定要水沸腾后才能将试管放入加热,而11水浴锅得水位一定要 高于试管内试剂得高度。管从沸水浴中取出,一定要冷水迅速冷却后才能加入乙醇、 (因加热时形成得红色还原型苛三铜,在冷却过程被空气得氧氧化而褪色,而苗三铜与氨 基酸得蓝紫色反应物仍留着,并变得更 加明显、)铜与氨基酸反应生成得颜色在1小 时内保持稳定,所以要抓紧时间比色。灵敏度在很大程度上
27、与H离子浓度有关,最适 PH4、5,应严格控制。23、简述“过氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳”实验中所用得过硫酸彼、四甲基乙 二胺、蔗糖、漠酚蓝、H2O2等试剂得作用就是什么?答:过硫酸筱得作用:使丙烯酰胺(ACr)与交联剂甲叉丙烯酰胺(B i S)聚合成聚丙烯酰 胺凝胶。四甲基乙二胺(TEMED)得作用:作为丙烯酰胺(A C r)与交联剂甲义丙烯酰胺 (BiS)聚合得加速剂。蔗糖得作用:使同工酶沉在点样孔底部,防止同工酶漂浮。 浪酚蓝得作用:可以作为电泳进度得指示分子,起指示作用。H2O2得作用:作为氧化 物,使过氧化物酶同工酶催化H2O2分解,从而来进行植物过氧化物酶同工酶得测 定。24
28、. 什么叫同工酶?测定同工酶有什么意义?答:同工酶:能催化同一种化学反应但其分子结构与带电性质不同得一组酶、(由于同 一种酶可分布于多种脏器组织,它们之中得任何一个发生病变,都可引起酶在血清中得 活力变化。除了少数组织专一性得酶以外,大多数血清酶不能特异地反映某个特定组织得 病变。)而不同脏器或组织得同工酶谱型不同,当其发生病变后,释放到血清中得各种同工 酶得比例也不一致,所以血清酶得同工酶谱型得改变能精确地反映出患病得部位与损伤 得程度,提高了血清酶测定在反映组织病变上得专一性O 25-.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离 过氧化物同工酶实验中,电泳结束后如何进行染色?电泳完毕,将电泳槽取出,倒去缓冲液
29、,取下凝胶管,放入培养皿中、用一个带有长针头得注 射器,吸满水,将针头沿管壁插入,同时慢慢地将注射器中得水推出,并不断转动凝胶管, 将凝胶管挤 脱出來,也可用洗耳球挤压。取0、5ml联苯胺母液+ H20 9o 3 ml+0。 2m 13%H2O2,混匀后倒入盛有凝胶 条得培养皿。此时可以瞧到胶条上出现蓝色或 棕褐色环,即过氧化物酶带,约十min后用口來水冲洗,这时蓝色带也慢慢变成棕褐 色。26、简述聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质得原理聚肉烯酰胺凝胶由丙烯酰胺与交联剂甲义双丙烯酰胺在催化剂作用下聚合而成,具有三 维网状结构,其网孔大小可由凝胶浓度与交联度加以调节。凝胶电泳兼有电荷效应与分子 筛效应
30、、被分离物质 由丁所载电荷数量、分子大小与形状得差异,因此在电泳时产生不 同得泳动速率而相互分离、利用特异性得颜色反应使待测酶着色,这样就可在凝胶中展 现出酶谱。过氧化物酶就是植物体内常见得氧化酶、植物体内许多生理代谢过程常与 它得活性及其同工酶得种类有关。利用过氧化物酶能催化H 2 02把联苯胺氧化成 蓝色或棕褐色产物得原理,将经过电泳后得凝胶置丁有H2O2及联苯胺得溶液染色,出 现蓝色或棕褐色部位即为过氧化物酶同工酶在凝胶中存在得位置,多条有色带即构成过 氧化物酶同工酶谱。29、叶绿素a在蓝光区也有吸收峰,能否用这一吸收峰波长进行叶绿素a得定量分析? 为什么?不能,因为类胡萝卜素得最大吸收
31、带在400500得蓝紫光区,不吸收红光,为了排除类 胡萝卜素得干扰,所以选择叶绿素在红光区得最大吸收峰;并Jl叶绿素得溶液呈绿色, 易与蓝紫光产生遮光效果,混淆实验效果。31、为什么提取叶绿素时干材料一定要用8 0%得丙酮,而新鲜得材料可以用无水丙 酮提取?因为叶绿素分子结构得“头部”就是亲水得,与蛋白质结合很牢,需经过水解作用才可被 提取出來。而干材料中没有水分,故提取叶绿素时干材料一定要用80%丙酮或9 5%乙 醇提取,而新鲜得材料总含有水分,可以赢无水丙酮或乙醇提取。33、影响呼吸速率测定得因素有哪些?答:1 o内部因素。不同种类植物得呼吸速率不同,凡就是生长快得植物呼吸速率就高, 生长
32、慢得呼吸速率就低;一般旱生植物,生长缓慢,呼吸速率比水生植物低;阴生植物所 处得光强度较弱,呼吸也较弱,呼吸速率比阳生植物低。同一种植物在不同得生长发育时 期,呼吸速率也不同,一般在幼苗期、开花期等生长旺盛期,呼吸速率増高。同一种植物得 不同器官,呼吸速率也不同,一般生殖器官比营养器官高,幼嫩组织器官比衰老得组织器 官高,种子内胚得呼吸速率比胚乳高。多年生植物得呼吸速率还表现出季节周期性变化, 在温带生长得植物,春夭呼吸速率最高,夏天略降低,秋夭乂上升,以后一直下降,到冬夭降 到最低点,这种周期性变化除了外界环境得影响外,与植物体得代谢强度、酶活性及呼吸 底物得多寡也有密切关系。2外界因素对呼
33、吸速率得影响、(1)温度:温度呼吸作用得影响主耍表现为温度对呼吸酶 活性得影响。呼吸速率在一定范围内随温度得增高而增高,达到最高值后,继续增高温度, 呼吸速率反而下降、一般植物在OC以下,呼吸作用很 弱或几乎停止,呼吸作用得最适 温度一般在2 5C35°C之间,呼吸作用得最高温度,一般在3 5°C4 5呼吸作用得最低温度因植物种类不同有很大差异。呼吸作用得最适温度总就是比光合作用得最 适温度高。(2)氧气:氧就是有氧呼吸途径运转得必耍因素、从有氧呼吸來瞧,在氧浓度 较低情况下,呼吸速率与氧浓度成正比,达到氧饱与点以后,则无促进作用、氧浓度过高或 过低都会对植物产生毒害。根系
34、缺氧会抑制根尖细胞分裂,影响根系内物质得运输,对植 物生长发育造成严重危害。(3)二氧化碳二氧化碳就是呼吸作用得最终产物,当外界 环境中二氧化碳浓度增高时,脱竣反应减慢,呼吸作用受到抑制、一些植物(如豆科)得种 子由于种皮限制,使呼吸作用释放得CO2难以释出,种皮内积聚起高浓度得CO2 抑制了呼吸作用,从而导致种子休眠。(4)水分植物组织得含水量与呼吸作用有密切 得关系。在一定范围内,呼吸速率随组织含水量得増加而升高。干燥种子得呼吸作用很 微弱,当种子吸水后,呼吸速率迅速增加。因此,种子含水量就是制约种子呼吸作用强弱得 重耍因素。对于整体植物來说,接近萎蔦时,呼吸速率有所增加,如萎鳶时间较长,
35、细胞含水 量则成为呼吸作用得限制因素。影响呼吸作用得外界因素除了温度、氧气、二氧化碳、 水分之外,呼吸底物得含量(如可溶性糖)、机械损伤、一些矿质元素(如磷、铁、铜等)对 呼吸也有显著影响。此外病原菌感染可使寄主得线粒体增多,多酚氧化酶活性提高,抗亂 呼吸与PPP途径增强、34、在呼吸速率测定中哪些步骤容易出现误差?应怎样避免。1)实验过程中应该不时轻轻得摇动,使溶液表面得BaCO薄膜破坏,有利于CO得充 分吸收2)实验过程中还要防止口中呼出得气体进入瓶内3)应该用无CO蒸憎水或 煮沸过得冷开水洗涤广口瓶35、广口瓶橡皮塞上加一碱石灰管有何作用?37、在SOD测定中为什么设照光对照管与暗中空白
36、管?设照光对照管为消除日光灯得光质差异;暗中空白管用來在测定吸收峰时做空白对照 得。3 8、影响SOD活力测定准确性得主要因素就是什么?应如何克服?主要因素就是:1试管,所用试管得玻璃质量要一样,包括厚度,直径,质量2光照条件, 光照条件要求一致,即照光时试管放得高度,背景等各外界条件因素要一致39、植物缺镁与缺铁表现症状有何异同为什么?答:相同点:缺镁与缺铁都呈现缺绿症。不同点:缺镁出现得缺绿症状首先从下部老叶上 表现出來,而缺铁得缺绿症状首先从上部新生叶表现出來、原因就是镁就是参与循环 得元素,即可再利用元素,而铁就是不参与循环得元素,即不可再利用元素、40简要介绍测定光合速率得三种方法及原理?改良半叶法注要就是测定单位时间、单位面积叶片干重得增加量;
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