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文档简介
1、还原性糖还原性糖+斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀+还原性糖:葡萄糖、麦芽糖、果糖还原性糖:葡萄糖、麦芽糖、果糖非还原性糖:蔗糖、淀粉等非还原性糖:蔗糖、淀粉等如果植物组织中积累的成分是淀粉如果植物组织中积累的成分是淀粉和蔗糖,那就无法检测到还原性糖。和蔗糖,那就无法检测到还原性糖。有些植物尽管含有较多的还原性糖,有些植物尽管含有较多的还原性糖,但如果本身含有叶绿素或其他色素,但如果本身含有叶绿素或其他色素,这些色素就会影响实验现象起到遮这些色素就会影响实验现象起到遮盖作用。这些都不适宜做实验材料。盖作用。这些都不适宜做实验材料。苹果和梨是比苹果和梨是比较理想的实验较理想的实验材料。材料。
2、苹果、研钵、小刀苹果、研钵、小刀斐林试剂斐林试剂A液、斐林试剂液、斐林试剂B液、二氧化硅液、二氧化硅量筒、试管架、吸管、试量筒、试管架、吸管、试管夹、试管、滴管管夹、试管、滴管漏斗、纱布漏斗、纱布火柴、酒精灯、三脚架、火柴、酒精灯、三脚架、石棉网、烧杯石棉网、烧杯取一个洗净的苹果切下一块,去皮,取一个洗净的苹果切下一块,去皮,然后切成小块,取一部分切成小块然后切成小块,取一部分切成小块的苹果放在研钵中,加入少许二氧的苹果放在研钵中,加入少许二氧化硅(石英砂),然后研磨,将研化硅(石英砂),然后研磨,将研钵中加入少量水继续研磨。钵中加入少量水继续研磨。将玻璃漏斗插入试管中,在漏斗将玻璃漏斗插入试
3、管中,在漏斗上垫一层纱布,将组织研磨液进上垫一层纱布,将组织研磨液进行过滤,得到苹果的组织样液。行过滤,得到苹果的组织样液。用量筒取两毫升组织样液,用量筒取两毫升组织样液,再用量筒取两毫升新配制好再用量筒取两毫升新配制好的斐林试剂。的斐林试剂。取一只试管,将量好的苹果组织取一只试管,将量好的苹果组织样液倒入试管中,然后将量好的样液倒入试管中,然后将量好的斐林试剂倒入试管中,震荡试管斐林试剂倒入试管中,震荡试管使溶液混合均匀,我们可以看到使溶液混合均匀,我们可以看到此时溶液呈蓝色。此时溶液呈蓝色。将这只试管放入盛有开水将这只试管放入盛有开水的大烧杯中,用酒精灯加的大烧杯中,用酒精灯加热煮沸。热煮
4、沸。溶液的颜色开始是蓝色,溶液的颜色开始是蓝色,然后慢慢变成砖红色。然后慢慢变成砖红色。这个实验就证这个实验就证明了,苹果中明了,苹果中含有还原性糖含有还原性糖的存在。的存在。溶液的颜色从蓝色变成砖红色。溶液的颜色从蓝色变成砖红色。苹果中含有还原性的糖。苹果中含有还原性的糖。8 还原糖有还原糖有 。 试剂:试剂: . (甲液:(甲液:0.1g/ml 的的 , 乙液:乙液:0.05g/ml的的 .)甲乙液必须甲乙液必须 后再加入样后再加入样 液中,液中, 。 必须必须 。葡萄糖,果糖,麦芽糖葡萄糖,果糖,麦芽糖用水浴加热用水浴加热斐林试剂斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀等量混合均匀现配现用
5、现配现用注意事项:注意事项:颜色变化:颜色变化:浅蓝色浅蓝色棕色棕色砖红色砖红色蛋白质蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂紫色络合物紫色络合物比较项目试剂及成分原理溶液浓度方法加热与否结果可溶还原糖的鉴定斐林试剂NaOH和CuSO4砖红色沉淀蛋白质的鉴定双缩脲试剂NaOH和CuSO4溶液呈紫色斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?斐林试剂与双缩脲试剂两者有何不同?新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在碱性在碱性环境下环境下的的Cu2+NaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.05g/mLNaOH浓度为浓度为0.1g/mLCuS04浓度为浓度为0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和
6、CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,摇匀。滴,摇匀。(不能过量不能过量)水浴水浴加热加热不不需需要要蛋白质蛋白质+双缩脲试剂双缩脲试剂紫色络合物紫色络合物豆浆、蛋清、牛奶都是很豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。好的实验材料。本实验我们用蛋清做实验材料,在本实验我们用蛋清做实验材料,在用蛋清做实验材料时,要注意将蛋用蛋清做实验材料时,要注意将蛋清稀释,如果稀释不够,反应后的清稀释,如果稀释不够,反应后的产物会粘固在试管内壁上,使反应产物会粘固在试管内壁上,使反应不容易彻底。不容易彻底。试管架、试管、吸管试管架、试管
7、、吸管蛋清稀释液蛋清稀释液双缩脲试剂双缩脲试剂A液、液、双缩脲试剂双缩脲试剂B液、液、量筒量筒用量筒量取两毫升的蛋清稀用量筒量取两毫升的蛋清稀释液。再用脲尿试剂释液。再用脲尿试剂A液液将量取的蛋清液和双缩脲试将量取的蛋清液和双缩脲试剂剂A液分别倒入到试管中,震液分别倒入到试管中,震荡均匀,此时可见试管内仍荡均匀,此时可见试管内仍然是透明的。然是透明的。再向试管中加入再向试管中加入1至至2滴双滴双缩脲试剂缩脲试剂B液。液。震荡均匀,此时可见试管内震荡均匀,此时可见试管内溶液呈紫色吗,这就表明蛋溶液呈紫色吗,这就表明蛋清液中含有蛋白质。清液中含有蛋白质。蛋清液呈紫色。蛋清液呈紫色。蛋清液中含有蛋白质。蛋清液中含有蛋白质。注意事项:注意事项: 试剂:试剂: ( A液:液:0.1g/ml的的 ; B液:液: 0.01g/ml的的 ) 先加先加 ,再加,再加 。 B液要求量适中,否则液要求量适中,否则多余多余 的的B液液将会将会与与A液液发生反应生发生反应生成成Cu(OH)2显色而遮盖原有的颜色显色而遮盖原有的颜色。 鉴定前,留出一部分组织样液,以便对比鉴定前,留出
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