吉林大学核医学2体外分析技术520

1、吉林大学中日联谊医院核医学科china-japan union hospital, jilin university 临床临床核医学核医学诊断诊断核医学核医学治疗治疗核医学核医学体内诊断法体内诊断法in vivo体外诊断法体外诊断法in vitro内照射内照射外照射外照射放射性核放射性核素显像素显像脏器功能脏器功能测定测定体外放射体外放射分析分析体内超微量生物活性体内超微量生物活性物质定量分析技术物质定量分析技术利用核素及其标记物诊断和治利用核素及其标记物诊断和治疗疾病的临床医学学科。疗疾病的临床医学学科。china-japan union hospital, jilin university

2、 临床化学分析临床化学分析10-1210-910-610-310-0pg/mlng/mlm mg/mlmg/mlg/l免疫分析免疫分析治疗药物治疗药物甲状腺激素甲状腺激素性激素性激素变态反应变态反应肿瘤标记物肿瘤标记物传染性疾病传染性疾病维生素维生素血清蛋白血清蛋白常量常量微量微量超微量超微量china-japan union hospital, jilin university 体外分析技术（体外分析技术（in vitro analysis techniquesin vitro analysis techniques）泛指以泛指以离体组织、血液或体液离体组织、血液或体液等作为生物样本，在等作

3、为生物样本，在人体外人体外进行进行的、分析样本中成分或其含量的检测技术。的、分析样本中成分或其含量的检测技术。核医学中指有别于体内进行的放射性核素显像和核素治疗，在核医学中指有别于体内进行的放射性核素显像和核素治疗，在体外体外用放射性核素标记配体（用放射性核素标记配体（ligandligand）为）为示踪剂示踪剂，以结合反，以结合反应为基础，在试管内或反应杯中进行的应为基础，在试管内或反应杯中进行的检测微量生物活性物检测微量生物活性物质的免疫标记技术质的免疫标记技术。定义定义china-japan union hospital, jilin university 分类分类china-japan

4、 union hospital, jilin university 4概述1235放射免疫分析免疫放射分析非放射性标记免疫分析体外分析的临床应用china-japan union hospital, jilin university 7 核医学中建立最早、应用最广泛的体外放射分析技术。核医学中建立最早、应用最广泛的体外放射分析技术。 充分利用了放射性测定的充分利用了放射性测定的高灵敏度高灵敏度和免疫反应的和免疫反应的高特异性高特异性的的优点。优点。 特点：特点： 灵敏度高，可分析灵敏度高，可分析10-910-18g的微量生物活性物质。的微量生物活性物质。 操作简便、成本低。血清、血浆、体液等样

5、本不加提纯操作简便、成本低。血清、血浆、体液等样本不加提纯就可直接测量。就可直接测量。第二节第二节 放射免疫分析技术放射免疫分析技术（radioimmunoassay, radioimmunoassay, riaria）china-japan union hospital, jilin university 1960年美国的berson和yalow 将核技术与免疫学技术结合建立了放射免疫分析法。 首先用于测定血浆胰岛素浓度，由于该法对医学的巨大贡献，1977年yalow获得了nobel prize。history reviewradioimmunoassaychina-japan union

6、hospital, jilin university dr. yalow 在体外条件下, 利用ag与定量的*ag对限量的特异性ab的竞争结合反应，通过测定放射性复合物的量来计算出ag 量的一种超微量分析技术。china-japan union hospital, jilin university 放免试剂盒放免试剂盒china-japan union hospital, jilin university ria的基本原理的基本原理 ag-ab + ag *ag abag+*ag-ab + *ag(b)(f) 4*ag与与ag 免疫活性相同免疫活性相同4 在一定的反应条件下在一定的反应条件下4*

7、ag、ab为恒定量为恒定量4*agag abag= * ag , agab=*agabag *ag , *agab (b) *ag(f)ag 90%，否则放射性杂质多，影响测定的精密度；，否则放射性杂质多，影响测定的精密度；一般标记抗原制备后应在一般标记抗原制备后应在1-2个月使用，时间过长易脱碘（个月使用，时间过长易脱碘（125i），使放射化学纯度降低。），使放射化学纯度降低。china-japan union hospital, jilin university 2.标记抗原标记抗原免疫活性：免疫活性：从标记到使用的全过程中各种因素的影响都会造成标记抗原从标记到使用的全过程中各种因素的影响

8、都会造成标记抗原的免疫活性下降，与抗体反应的能力减弱；的免疫活性下降，与抗体反应的能力减弱；蛋白质分子上标记过多的碘原子也可引起免疫活性的变化，蛋白质分子上标记过多的碘原子也可引起免疫活性的变化，一般每个蛋白质分子上只标记一般每个蛋白质分子上只标记12个个125i原子为宜。原子为宜。china-japan union hospital, jilin university 3.标准品标准品标准品是标准品是已知含量已知含量并并呈梯度浓度呈梯度浓度的系列标准抗原，绘制标准曲的系列标准抗原，绘制标准曲线进行定量的依据。线进行定量的依据。要求：要求：化学结构、免疫活性要与被测抗原完全一致。化学结构、免疫

9、活性要与被测抗原完全一致。放射化学纯度高，影响分析的杂质少。放射化学纯度高，影响分析的杂质少。定量精确。定量精确。现多用与患者样品基质相似的校准品替代标准品。现多用与患者样品基质相似的校准品替代标准品。 china-japan union hospital, jilin university 4.分离方法分离方法分离的目的：放射免疫反应达到平衡后，把分离的目的：放射免疫反应达到平衡后，把*ag-ab和游离抗原和游离抗原分开，分别测定其放射性。分开，分别测定其放射性。常用的分离方法：常用的分离方法： 双抗体法（双抗体法（double antibody method）：）：用抗原免疫动物（如兔）产

10、生抗体作为第一抗体，然后用第用抗原免疫动物（如兔）产生抗体作为第一抗体，然后用第一抗体作为抗原免疫另一种动物（如绵羊），所产生的一抗体作为抗原免疫另一种动物（如绵羊），所产生的抗体成为第二抗体。抗体成为第二抗体。在免疫反应完成后，在免疫反应完成后，“加二抗加二抗”，形成，形成ag+抗抗1+抗抗 2，分子，分子量加大，形成不溶性复合物，通过离心，即可分开。量加大，形成不溶性复合物，通过离心，即可分开。优点：易分离、特异性强、使用方便。优点：易分离、特异性强、使用方便。缺点：易受其他因素干扰、成本高、操作时间长。缺点：易受其他因素干扰、成本高、操作时间长。china-japan union hos

11、pital, jilin university 4.分离方法分离方法 沉淀法（沉淀法（precipitation method）：）：利用某些中性盐和有机溶剂在一定的条件下，能使蛋白质沉利用某些中性盐和有机溶剂在一定的条件下，能使蛋白质沉淀的特性，使淀的特性，使*ag-ab较快速度沉淀。较快速度沉淀。最常用：聚乙二醇。最常用：聚乙二醇。优点：分离速度快，价格便宜。优点：分离速度快，价格便宜。缺点：分离效果易受温度、缺点：分离效果易受温度、ph、蛋白质含量、试剂浓度等、蛋白质含量、试剂浓度等因素的影响，非特异性结合较高。因素的影响，非特异性结合较高。 双抗体法双抗体法+沉淀法：沉淀法：易分离、速

12、度快、特异性强、价格低廉、使用方便，弥补了易分离、速度快、特异性强、价格低廉、使用方便，弥补了操作时间长等不足。操作时间长等不足。china-japan union hospital, jilin university 4.分离方法分离方法 吸附分离法（吸附分离法（absorptive separation method）：）：应用特殊处理的吸附剂，吸附小分子物质，而大分子的抗原应用特殊处理的吸附剂，吸附小分子物质，而大分子的抗原-抗体复合物则在反应液中，经离心达到分离目的。抗体复合物则在反应液中，经离心达到分离目的。最常用：葡萄糖包被的活性炭。最常用：葡萄糖包被的活性炭。优点：简单快速，经济

13、易得。优点：简单快速，经济易得。缺点：非特异性结合较高，干扰因素较多。缺点：非特异性结合较高，干扰因素较多。china-japan union hospital, jilin university 4.分离方法分离方法 固相分离法（固相分离法（solid phase separation method）：）：将抗体或抗原吸附在固相载体上，免疫反应在固相载体上完将抗体或抗原吸附在固相载体上，免疫反应在固相载体上完成，结合终了弃去液体，即可达到分离目的。成，结合终了弃去液体，即可达到分离目的。固相材料：纤维素、凝胶颗粒、多孔玻璃微球等。固相材料：纤维素、凝胶颗粒、多孔玻璃微球等。优点：不需离心，简

14、便快捷且分离效果好。优点：不需离心，简便快捷且分离效果好。缺点：分子抗体与固相连接时会造成亲和力下降，灵敏度会缺点：分子抗体与固相连接时会造成亲和力下降，灵敏度会受影响。受影响。china-japan union hospital, jilin university 操作基本步骤操作基本步骤加样：加样：加样总体积要保持一致，所处的介质环境也要一致。加样总体积要保持一致，所处的介质环境也要一致。孵育：孵育：根据不同的分析对象孵育的温度和时间不同，一般根据不同的分析对象孵育的温度和时间不同，一般 是是37。分离：分离：选择好的分离方法分离游离抗原和抗原抗体复合物。选择好的分离方法分离游离抗原和抗原

15、抗体复合物。测量：测量：测量游离或结合物部分的放射性。测量游离或结合物部分的放射性。数据处理：数据处理：绘制标准曲线和待测物浓度的计算。绘制标准曲线和待测物浓度的计算。 china-japan union hospital, jilin university 一个理想的、没有误差的一个理想的、没有误差的“完美完美”测定，应该是标本或样品中测定，应该是标本或样品中的分析物无论是在一次测定，还是多次重复测定，甚至在的分析物无论是在一次测定，还是多次重复测定，甚至在不同实验室进行测定，其测定结果都应该是一样的，它就不同实验室进行测定，其测定结果都应该是一样的，它就是该样品中该分析物的真实水平，即是该

16、样品中该分析物的真实水平，即真值真值。 真值是一个变量本身所具有的真实值，它是一个理想的概念，真值是一个变量本身所具有的真实值，它是一个理想的概念，在实际工作中，这种在实际工作中，这种理想的测定是不可能达到的理想的测定是不可能达到的。 即即任何任何一种分析方法都会产生误差一种分析方法都会产生误差。36三、质量控制（三、质量控制（quality control,qc）china-japan union hospital, jilin university 37china-japan union hospital, jilin university 38是由于试剂、仪器或操作方法上一个固定的缺陷而

17、造成整批是由于试剂、仪器或操作方法上一个固定的缺陷而造成整批结果倾向性的偏差，影响了结果的准确性。结果倾向性的偏差，影响了结果的准确性。系统误差大小、方向恒定一致或按一定规律变化，即具有再系统误差大小、方向恒定一致或按一定规律变化，即具有再现性，属于偏差（现性，属于偏差（deviationdeviation）。）。系统误差是系统误差是可以避免可以避免的。即通过理论分析的。即通过理论分析/ /实验验证其产生实验验证其产生的原因或规律，可消除或减少。的原因或规律，可消除或减少。由由特定原因特定原因引起、具有一定因果关系并按确定规律产生。引起、具有一定因果关系并按确定规律产生。仪器、试剂、电源、环境

18、、人为因素等。仪器、试剂、电源、环境、人为因素等。china-japan union hospital, jilin university 39偶然性：偶然性：原因不明确原因不明确，其产生无规律。，其产生无规律。产生原因主要是温度波动、振动、电磁场扰动等不可预料产生原因主要是温度波动、振动、电磁场扰动等不可预料和控制的微小变化。和控制的微小变化。随机误差随机误差无法避免无法避免。服从统计规律，增加平行测定次数，可以减少偶然误差。服从统计规律，增加平行测定次数，可以减少偶然误差。. .+a-auxn.china-japan union hospital, jilin university 三、质

19、量控制三、质量控制目的目的：对整个分析过程中的任何环节造成的：对整个分析过程中的任何环节造成的误差误差进行进行经常性的检经常性的检查查，以保证分析误差控制在可接受的范围内。，以保证分析误差控制在可接受的范围内。实验室内部质量控制实验室内部质量控制（室内质控室内质控）：实验室内的专业技术人员通）：实验室内的专业技术人员通过对整个检测系统的性能评价，评价检测结果的精确度。过对整个检测系统的性能评价，评价检测结果的精确度。实验室间质量评价实验室间质量评价（室间质评室间质评）：由地区性或全国性机构通过发）：由地区性或全国性机构通过发放一定数量的样本给各实验室进行检测，再收集各实验室的结放一定数量的样本

20、给各实验室进行检测，再收集各实验室的结果进行比较，得出共性或个性的信息，促进改进，考察实验室果进行比较，得出共性或个性的信息，促进改进，考察实验室的准确性。的准确性。china-japan union hospital, jilin university 零标准管结合率零标准管结合率(b0%):(b0%):最大结合率，当标准抗原为零时标记最大结合率，当标准抗原为零时标记抗原与抗体的结合率。抗原与抗体的结合率。30%30%50%50%，特异性抗体稳定性指标。，特异性抗体稳定性指标。41非特异性结合率非特异性结合率(nsb%):(nsb%):不加特异性抗体时标记抗原与非特不加特异性抗体时标记抗原与

21、非特异性物质的结合率。异性物质的结合率。5%5%10%10%。最低浓度管和最高浓度管的结合率之差应大于最低浓度管和最高浓度管的结合率之差应大于30%30%。标准曲线回归参数：标准曲线回归参数：截距截距a a，斜率，斜率b b值稳定，值稳定，r r0.990.99。斜率。斜率越大，灵敏度越高，但可测范围相对变小。越大，灵敏度越高，但可测范围相对变小。eded2525、eded5050、eded7575 ：结合率在结合率在25%25%、50%50%、75%75%时对应的抗原浓时对应的抗原浓度值，反映标准曲线的稳定性，有助于批间结果的比较。度值，反映标准曲线的稳定性，有助于批间结果的比较。china

22、-japan union hospital, jilin university 指专门用于质量控制目的的标本或溶液，不能用于校准。指专门用于质量控制目的的标本或溶液，不能用于校准。42分定值和不定值两种。分定值和不定值两种。理想的质控品应该具有以下特征：理想的质控品应该具有以下特征：人血清基质；人血清基质；无传染性；无传染性；添加剂和抑菌剂的量尽可能少；添加剂和抑菌剂的量尽可能少；瓶间差异小；瓶间差异小；冻干品复溶后的定性好；冻干品复溶后的定性好；有效期有效期1 1年以上。年以上。china-japan union hospital, jilin university 将所测得的质控品结果按一

23、定的规则逐日绘集在一起。将所测得的质控品结果按一定的规则逐日绘集在一起。4343任选高、中、低三水平质控品进行室内质控。任选高、中、低三水平质控品进行室内质控。最初使用应每月进行一次修正，最初使用应每月进行一次修正，重新计算均值和重新计算均值和sdsd，连续，连续2 23 3个月后，所控项目即可实现常个月后，所控项目即可实现常态化。态化。按不同水平绘制的质控图按不同水平绘制的质控图china-japan union hospital, jilin university 50.852.253.655.056.457.859.260.662.0135791113151719212325272931

24、333537标标 准准 质质 控控 图（期望）图（期望）china-japan union hospital, jilin university 真真 实实 质质 控控 图图china-japan union hospital, jilin university 判断失控的标准是质控规则。判断失控的标准是质控规则。4646当质控结果不能满足某一规则要求时，表示该批检测违背此规当质控结果不能满足某一规则要求时，表示该批检测违背此规则。则。如如1 13s3s或或2 22s2s规则：当一个质规则：当一个质控结果超过控结果超过 3sd 3sd 或连或连续续2 2个结果超过个结果超过 2sd 2sd 时

25、，时，即为失控。即为失控。失控后需查明原因，待纠失控后需查明原因，待纠正后重新检测该批样本。正后重新检测该批样本。china-japan union hospital, jilin university china-japan union hospital, jilin university ria质量控制常用指标质量控制常用指标精密度（重复性）精密度（重复性）：是指同一个样品多次重复测定所得结果的：是指同一个样品多次重复测定所得结果的一致程度。用变异系数（一致程度。用变异系数（cv）表示，）表示，ria通常要求批内通常要求批内cv9.9%)9.9%) 饮食和其他生活习惯的改变饮食和其他生活习

26、惯的改变 精神压力的变化精神压力的变化 平均期望寿命的提高平均期望寿命的提高 检测的灵敏度不断上升检测的灵敏度不断上升 甲状腺疾病与其他疾病密切相关甲状腺疾病与其他疾病密切相关china-japan union hospital, jilin university 在中国每在中国每1515人中即存在人中即存在1 1位甲减患者！全世界有近位甲减患者！全世界有近98%98%的甲减患者并不知道自己的甲减患者并不知道自己已经患病，甲状腺疾病在女性和老年人中更常见已经患病，甲状腺疾病在女性和老年人中更常见 症状通常缓慢出现不引人注意，甲状腺疾病常被误诊为心脏病、抑郁月经症状通常缓慢出现不引人注意，甲状腺

27、疾病常被误诊为心脏病、抑郁月经问题绝经或者高脂血症。问题绝经或者高脂血症。 美国最近的一项研究表明美国最近的一项研究表明 “ “ 9.9% 9.9%的人有甲状腺异常而绝大部分都被忽视的人有甲状腺异常而绝大部分都被忽视 。”甲状腺疾病很常见不甲状腺疾病很常见不易发现且可能导致不良的后果易发现且可能导致不良的后果 .。 china-japan union hospital, jilin university china-japan union hospital, jilin university t3t3：t4t4脱碘脱碘 35%,35%,甲状腺合成甲状腺合成 65%65%。99.6%99.6%与

28、与tbg tbg 结合。结合。 ft3 0.3 %,ft3 0.3 %,有活性。有活性。甲状腺素甲状腺素 t4t4tbg99.96%tbg99.96%ft4ft40.03%0.03%rt3rt3 脱碘脱碘97%97%合成合成3%3%tshtrhchina-japan union hospital, jilin university 甲甲 减减亚亚 临临 床床 甲甲 亢亢严严 重重 graves 病病4.03.02.51.00.50.40.10.01轻轻 度度 graves 病病甲甲 减减 风风 险险甲甲 减减 治治 疗疗妊妊 娠娠 上上 限限低危低危dtc治疗治疗高危高危dtc治疗治疗甲甲 亢

29、亢 风风 险险china-japan union hospital, jilin university 甲状腺自身抗体甲状腺自身抗体甲状腺抗体是指由于自身免疫紊乱产生的针对甲状腺某些成分的免疫球蛋白。临床主要分为两大类：针对甲状腺细胞内容物的抗体甲状腺球蛋白抗体（tgab）甲状腺过氧化物酶抗体（tpoab）针对甲状腺细胞表面tsh受体的抗体tsh受体抗体（trab）china-japan union hospital, jilin university 甲状腺球蛋白抗体、甲状腺过氧化物酶抗体甲状腺球蛋白抗体、甲状腺过氧化物酶抗体甲状腺球蛋白抗体（tgab)和甲状腺过氧化物酶抗体（tpoab)，

30、是由于甲状腺细胞受损，胞浆内的“甲状腺球蛋白”及“过氧化物酶（合成甲状腺激素的关键酶）”溢入血液刺激机体而产生的，是自身免疫性甲状腺炎的标志性抗体，其水平升高表明甲状腺组织处于免疫性炎症活跃状态。tpoab与tgab的临床意义相同，但tpoab无论是敏感性还是特异性都要优于tgab，是诊断甲状腺自身免疫性疾病的首选指标。为了提高检出率，临床通常采取两种抗体联合检测。china-japan union hospital, jilin university 甲状腺球蛋白抗体、甲状腺过氧化物酶抗体甲状腺球蛋白抗体、甲状腺过氧化物酶抗体 临床意义临床意义 病因诊断：此类抗体是诊断自身免疫甲状腺疾病（a

31、itd）的主要依据，显著升高（强阳性）主要见于慢性淋巴细胞性甲状腺炎（桥本氏甲状腺炎）患者，中等程度升高常见于graves病；还可用于aitd与非aitd的鉴别诊断，例如，原发性甲减与继发性甲减的鉴别，前者tpoab、tgab均阳性，后者则呈阴性。 疗效观察：graves病患者经治疗后tpoab及tgab转阴或滴度下降提示疗效较好；如果抗体持续阳性且滴度较高，说明效果不好，停药后病情容易复发。 预后判断：tpoab、tgab升高，提示患者将来发生甲状腺功能减退的风险增加。 tgab还可作为分化型甲状腺癌（dtc）的监测指标。正常情况下，分化型甲状腺癌患者tgab水平会在根治术后逐渐降低，并在1

32、4年内转阴，如果tgab水平再次升高，往往提示肿瘤复发。china-japan union hospital, jilin university tsh受体抗体（trab） 体液免疫b淋巴细胞产生的一类针对tsh受体的甲状腺特异免疫球蛋白 甲状腺刺激抗体(tsab)：与甲状腺滤泡膜上的tsh受体结合，刺激甲状腺肿大，增强其功能活性，是导致graves病（毒性弥漫性甲状腺肿）的主要病因。 tsh刺激阻断抗体(tsbab)：与tsh受体结合后，可抑制甲状腺功能，引起甲低。china-japan union hospital, jilin university tsh受体抗体（trab）临床意义临床

33、意义trab对于graves病的诊断、治疗以及预后评估具有重要价值。graves病患者trab阳性率可达95%以上，故trab阳性可以作为graves病的诊断依据，临床也常用于graves病与其他甲状腺病的鉴别。graves病患者经过治疗甲功恢复正常后，如果trab（指刺激性抗体，即tsab）也随之转为阴性，则停药后复发的可能性小；若药物治疗后trab仍持续阳性，则说明治疗效果欠佳，停药后复发的可能性大。对患有graves 病的孕妇检测trab，有助于预测新生儿甲亢。trab能够通过胎盘，刺激胎儿甲状腺，引起新生儿一过性甲亢（发生率12%）。有助于甲功正常的graves眼病的诊断。临床上有些突

34、眼病人，虽然甲状腺功能正常，但trab强阳性，这种情况同样可以诊断为graves眼病。trab在甲减和自身免疫性甲状腺炎患者也可出现阳性，检测trab有助于上述疾病的病因学诊断。china-japan union hospital, jilin university tgtg是甲状腺合成的基质，正常情况下，外是甲状腺合成的基质，正常情况下，外周血循环中含量极少，只有当甲状腺细胞大量周血循环中含量极少，只有当甲状腺细胞大量破坏时才会从甲状腺细胞中释放入血。破坏时才会从甲状腺细胞中释放入血。 对于甲状腺癌的治疗后监测极其重要。对于甲状腺癌的治疗后监测极其重要。 在甲状腺炎中可以增高。在甲状腺炎中可

35、以增高。china-japan union hospital, jilin university 由甲状旁腺主细胞合成和分泌，和由甲状旁腺主细胞合成和分泌，和降钙素相互作用以维持血钙水平降钙素相互作用以维持血钙水平的稳定性，血钙升高抑制的稳定性，血钙升高抑制pthpth的分的分泌，血钙降低则促进泌，血钙降低则促进pthpth的分泌。的分泌。 pth pth 原、继发甲旁亢原、继发甲旁亢 肾性骨病肾性骨病 异位性异位性pthpth分泌瘤分泌瘤 pthpth 非甲状旁腺的恶性肿瘤和维生素非甲状旁腺的恶性肿瘤和维生素d d中毒中毒引起的高钙血症引起的高钙血症 甲旁腺功能减退甲旁腺功能减退 特发性甲旁

36、腺机能低下特发性甲旁腺机能低下 甲旁腺损伤甲旁腺损伤 由甲状腺滤泡旁由甲状腺滤泡旁c c细胞分泌的，主要功细胞分泌的，主要功能是抑制破骨细胞介导的骨质吸收。能是抑制破骨细胞介导的骨质吸收。 ctct 甲状腺髓样癌的诊断甲状腺髓样癌的诊断 继发性甲状旁腺机能亢进，继发性甲状旁腺机能亢进，是是ctct分泌过多所致分泌过多所致 异位异位ctct的分泌，其它部位的的分泌，其它部位的肿瘤如肺燕麦样细胞癌肿瘤如肺燕麦样细胞癌 高胃泌素血症、胰腺高胃泌素血症、胰腺 ctct 甲状腺缺如甲状腺缺如 手术切除后手术切除后china-japan union hospital, jilin university c

37、hina-japan union hospital, jilin university 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测影像学影像学: ct : ct 核共振核共振ectpetectpet显微诊断：组织显微诊断：组织/ /细胞学细胞学china-japan union hospital, jilin university 存在于肿瘤细胞内或细胞膜表面物质，由肿瘤细胞表达分泌入血液等组存在于肿瘤细胞内或细胞膜表面物质，由肿瘤细胞表达分泌入血液等组织。织。由机体对肿瘤发生免疫反应而产生并进入体液或组织中的物质。由机体对肿瘤发生免疫反应而产生并进入体液或组织中的物质。这两类物质都可以被临床检测到，并用于

38、指导肿瘤的诊断和治疗。这两类物质都可以被临床检测到，并用于指导肿瘤的诊断和治疗。 敏感度（敏感度（sensitivitysensitivity）：肿瘤患者检测结果为正确阳性的百分比。）：肿瘤患者检测结果为正确阳性的百分比。特异度（特异度（specificityspecificity）：健康的或良性病变的个体检测结果为阴性的）：健康的或良性病变的个体检测结果为阴性的百分比。百分比。china-japan union hospital, jilin university 肿瘤标记物 (无形的肿瘤)tumor mass1g10 1mg1061g109 10-100g1010-11 1kg1012临床

39、可检测的肿瘤肿瘤增长tumor cellslead timechina-japan union hospital, jilin university 高危人群恶性肿瘤早期检测高危人群恶性肿瘤早期检测 肿瘤患者的初步诊断肿瘤患者的初步诊断 预后判断预后判断 治疗监测治疗监测 肿瘤复发的早期监测肿瘤复发的早期监测 由于tm特异性不强，个体差异大，应联合检测tm。 采用患者个体基础或达疗效后的水平动态观察变化更具意义。china-japan union hospital, jilin university 头头颈颈部部肿肿瘤瘤耳耳鼻鼻喉喉肿肿瘤瘤甲甲状状腺腺癌癌 食食道道癌癌胃胃癌癌乳乳腺腺癌癌 肺

40、肺癌癌 肝肝癌癌 胰胰腺腺癌癌 胆胆管管胆胆囊囊癌癌肠肠癌癌膀膀胱胱癌癌前前列列腺腺癌癌 生生殖殖细细胞胞癌癌卵卵巢巢癌癌宫宫颈颈癌癌子子宫宫内内膜膜癌癌绒绒毛毛膜膜癌癌淋淋巴巴瘤瘤神神经经肿肿瘤瘤afpceaca12-5ca19-9 ca72-4ca24-2ca-50ca15-3cy21-1、sccnse、progrptpsa 、fpsahcgferr2mtg、anti-tgchina-japan union hospital, jilin university china-japan union hospital, jilin university china-japan union ho

41、spital, jilin university 胎儿发育期由卵黄囊和肝细胞合成的糖蛋白。胎儿发育期由卵黄囊和肝细胞合成的糖蛋白。 参考值：7ng/ml恶性疾病：恶性疾病：afp是诊断原发性肝癌的最佳标志物，诊断阳性率为60%70%。血清afp400g/l持续4周，或200400g/l持续8周者，结合影像检查，可作出原发性肝癌的诊断。生殖胚胎性肿瘤（睾丸癌，畸胎瘤）可见afp含量升高良性疾病：良性疾病：急慢性肝炎，肝硬化患者血清中afp浓度可有不同程度升高，其水平常300ug/l。china-japan union hospital, jilin university 从胎儿及结肠癌组织中发现

42、的一种糖蛋白胚胎抗原，属于广谱性肿瘤标志物。 参考值5g/l。恶性疾病恶性疾病cea在恶性肿瘤中的阳性率依次为结肠癌（70%）、胃癌（60）、胰腺癌（55）、肺癌（50）乳腺癌（40）、卵巢癌（30）、子宫癌（30%）。cea属于粘附分子，是多种肿瘤转移复发的重要标志。良性疾病良性疾病部分良性疾病直肠息肉，结肠炎，肝硬化，肺病疾病也有不同程度的cea水平升高，但升高、程度和阳性率较低。吸烟人群cea升高(15ng/ml)。 china-japan union hospital, jilin university 前列腺癌首选肿瘤标志物前列腺癌首选肿瘤标志物由人前列腺上皮细胞合成并分泌至精浆中的

43、一种糖蛋白，psa主要存在于前列腺组织中，女性体内不存在，正常男性血清中psa的含量很低。参考值4g/l；psa具有器官特异性，但不具有肿瘤特异性。诊断前列腺癌的阳性率为80%。良性前列腺疾病也可见血清psa水平不同程度升高。血清psa测定是前列腺癌术后复发转移和疗效观察的监测指标在血液中以两种形式存在：结合psa和游离psa比值（f-psa/t-psa）是鉴别前列腺癌和良性前列腺疾病的有效指标：f-psa/t-psa0.25多为良性疾病；0.16高度提示前列腺癌。china-japan union hospital, jilin university 一种与胃肠道癌相关的糖类抗原，通常分布于

44、正常胎儿胰腺、胆囊、肝、肠及正常成年人胰腺、胆管上皮等处。检测患者血清ca19-9可作为胰腺癌、胆囊癌等恶性肿瘤的辅助诊断指标，对监测病情变化和复发有很大意义。胃癌、结/直肠癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌等患者的血清ca19-9水平也有不同程度的升高。某些消化道炎症ca19-9也有不同程度的升高，如：急性胰腺炎、胆囊炎、胆汁淤积性胆管炎、肝炎、肝硬化等china-japan union hospital, jilin university 高分子量的粘蛋白。目前诊断胃癌的最佳肿瘤标志物之一，对胃癌具有较高的特异性，其敏感性可达28-80%，若与ca19-9及cea联合检测可以监测70以上的胃癌

45、。ca72-4水平与胃癌的分期有明显的相关性，一般在胃癌的-期增高，对伴有转移的胃癌病人，ca72-4的阳性率更远远高于非转移者。ca72-4水平在术后可迅速下降至正常。在70%的复发病例中，ca72-4浓度首先升高。与其它标志物相比，ca72-4最主要的优势是其对良性病变的鉴别诊断有极高的特异性，在众多的良性胃病患者中，其检出率仅0.7。结/直肠癌、胰腺癌、肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌也有一定的阳性率china-japan union hospital, jilin university 卵巢癌首选肿瘤标志物卵巢癌首选肿瘤标志物ca125存在于上皮卵巢癌组织和病人血清中，是研究最多的卵巢癌标记

46、物，在早期筛查、诊断、治疗及预后的应用研究均有重要意义。ca125对卵巢上皮癌的敏感性可达约70%。其他非卵巢恶性肿瘤（宫颈癌、宫体癌、子宫内膜癌、胰腺癌、肺癌、胃癌、结/直肠癌、乳腺癌）也有一定的阳性率。良性妇科病（盆腔炎、卵巢囊肿等）和早期妊娠可出现不同程度的血清ca125含量升高。china-japan union hospital, jilin university 胰腺和结、直肠癌的标志物胰腺和结、直肠癌的标志物，是最常用的糖类抗原肿瘤标志物，因其广泛存在胰腺、胆囊、肝、胃、结直肠、膀胱、子宫，它的肿瘤识别谱比ca19-9广，因此它又是一种普遍的肿瘤标志相关抗原，而不是特指某个器官的

47、肿瘤标志物。ca50在多种恶性肿瘤中可检出不同的阳性率，对胰腺癌和胆囊癌的阳性检出率居首位，占94.4%；其它依次为肝癌（88%）、卵巢与子宫癌(88%)和恶性胸水（80%）等。可用于胰腺癌、胆囊癌等肿瘤的早期诊断，对肝癌、胃癌、结直肠癌及卵巢肿瘤诊断亦有较高价值china-japan union hospital, jilin university ca242ca242是一种粘蛋白型糖抗原，是胰腺癌和结肠癌较好的肿瘤标志是一种粘蛋白型糖抗原，是胰腺癌和结肠癌较好的肿瘤标志物，但特异性、诊断效率则优于物，但特异性、诊断效率则优于ca19-9ca19-9。与与ca50ca50一起表达，用于胰腺癌

48、、结直肠癌的诊断，在胰腺癌、胆一起表达，用于胰腺癌、结直肠癌的诊断，在胰腺癌、胆囊癌和消化道癌中的灵敏度、特异性更高（囊癌和消化道癌中的灵敏度、特异性更高（ca50ca50、ca19-9ca19-9易受易受肝功能以及胆汁郁积的影响，在良性阻塞性黄疸以及肝实质性肝功能以及胆汁郁积的影响，在良性阻塞性黄疸以及肝实质性损害记疾病时常出现假阳性损害记疾病时常出现假阳性) )。对胰腺癌、大肠癌、肺腺癌、直肠腺癌、食管和乳腺癌、小细胞对胰腺癌、大肠癌、肺腺癌、直肠腺癌、食管和乳腺癌、小细胞肺癌灵敏度较高肺癌灵敏度较高china-japan union hospital, jilin university

49、由由100个氨基酸组成的单链多肽。个氨基酸组成的单链多肽。2-mg是人体白细胞抗原的一个是人体白细胞抗原的一个轻链，是体内所有正常有核细胞合成的一种小分子蛋白质，体液轻链，是体内所有正常有核细胞合成的一种小分子蛋白质，体液中含量甚微且相当恒定。中含量甚微且相当恒定。临床上多用于诊断淋巴增殖性疾病，如白血病、淋巴瘤及多发性骨髓临床上多用于诊断淋巴增殖性疾病，如白血病、淋巴瘤及多发性骨髓瘤。其水平与肿瘤细胞数量、生长速率、预后及疾病活动性有关瘤。其水平与肿瘤细胞数量、生长速率、预后及疾病活动性有关。此外，根据此水平还可用于骨髓瘤患者分期。此外，根据此水平还可用于骨髓瘤患者分期。血清血清2-mg可以

50、在肾功能衰竭、炎症及多种疾病中均可增高。故应可以在肾功能衰竭、炎症及多种疾病中均可增高。故应排除由于某些炎症性疾病或肾小球滤过功能减低所致的血清排除由于某些炎症性疾病或肾小球滤过功能减低所致的血清2-mg增高增高china-japan union hospital, jilin university 是人体内除血红蛋白外含铁最丰富的蛋白质，铁蛋白的含量能反映肝脏储是人体内除血红蛋白外含铁最丰富的蛋白质，铁蛋白的含量能反映肝脏储铁量和体内储铁总量及营养状况，在铁代谢方面起着重要协调。主要铁量和体内储铁总量及营养状况，在铁代谢方面起着重要协调。主要存在肝、脾和骨髓等网状内皮系统内，具有重要的生理功

51、能。存在肝、脾和骨髓等网状内皮系统内，具有重要的生理功能。铁蛋白升高可见于下列肿瘤：急性白血病、何杰金氏病、肺癌、结肠癌、铁蛋白升高可见于下列肿瘤：急性白血病、何杰金氏病、肺癌、结肠癌、肝癌和前列腺癌。检测铁蛋白对肝脏转移性肿瘤有诊断价值，肝癌和前列腺癌。检测铁蛋白对肝脏转移性肿瘤有诊断价值，76%76%的肝的肝转移病人铁蛋白含量高于转移病人铁蛋白含量高于400g/l400g/l，当肝癌时，当肝癌时，afpafp测定值较低的情况测定值较低的情况下，可用铁蛋白测定值补充，以提高诊断率。下，可用铁蛋白测定值补充，以提高诊断率。在色素沉着、炎症、肝炎时铁蛋白也会升高。升高的原因可能是由于细胞在色素沉

52、着、炎症、肝炎时铁蛋白也会升高。升高的原因可能是由于细胞坏死，红细胞生成被阻断或肿瘤组织中合成增多。坏死，红细胞生成被阻断或肿瘤组织中合成增多。china-japan union hospital, jilin university 人附睾蛋白人附睾蛋白4 4（he4he4，也称为，也称为wfdc2wfdc2）属于乳清）属于乳清酸性四酸性四- - 二硫化二硫化 物核心（物核心（wfdcwfdc）蛋白家族，）蛋白家族，可能具有胰蛋白酶抑制剂活性。可能具有胰蛋白酶抑制剂活性。卵巢癌的早期诊断和治疗监测。卵巢癌的早期诊断和治疗监测。卵巢癌与子宫内膜异位症的鉴别诊断。卵巢癌与子宫内膜异位症的鉴别诊断。

53、卵巢癌与子宫内膜癌的鉴别诊断。卵巢癌与子宫内膜癌的鉴别诊断。良性疾病：肾功能不全，呼吸系统疾病，肝脏疾病良性疾病：肾功能不全，呼吸系统疾病，肝脏疾病。china-japan union hospital, jilin university 卵巢癌早期诊断的高敏感性和高特异性的肿瘤标志物卵巢癌早期诊断的高敏感性和高特异性的肿瘤标志物更好的对妇科良性卵巢肿块与卵巢癌进行鉴别诊断。he4用于卵巢癌治疗的监测，早期发现复发和转移。he4 + ca 125联合应用可减少生物标志物阴性卵巢癌的漏诊。ca125联合he4可以减少30-50%单一肿瘤标志物阴性导致的卵巢癌漏诊。china-japan unio

54、n hospital, jilin university 是细胞角蛋白-19的可溶性片段。 cyfra21-1是非小细胞肺癌，特别是肺鳞癌的首选标志物。与cea和nse联合检测对肺癌的鉴别诊断，病情监测有重要价值。cyfra21-1对乳腺癌，膀胱癌，卵巢癌也是很好的辅助诊断和治疗监测指标。china-japan union hospital, jilin university 小细胞肺癌首选肿瘤标志物小细胞肺癌首选肿瘤标志物nse为烯醇化酶的一种同工酶。nse是小细胞肺癌（sclc）的肿瘤标志物，诊断阳性率为91%。有助于小细胞肺癌和非小细胞肺癌（nsclc）的鉴别诊断。对小细胞肺癌的疗效观察

55、和复发监测也有重要价值。神经母细胞瘤，神经内分泌细胞瘤的血清nse浓度可明显升高。china-japan union hospital, jilin university 小细胞肺癌的最佳指标小细胞肺癌的最佳指标胃泌素释放肽（胃泌素释放肽（grpgrp）是从猪内脏分离的）是从猪内脏分离的2727个氨基酸肽，在血个氨基酸肽，在血液中不稳定存在。通过检测胃泌素释放肽前体（液中不稳定存在。通过检测胃泌素释放肽前体（progrpprogrp）反）反应应grpgrp的水平。的水平。临床意义临床意义：恶性疾病：恶性疾病：小细胞肺癌（sclc）早期诊断nsclc和sclc的鉴别诊断progrp结合nse对s

56、clc治疗进行疗效的监测sclc的预后评估良性疾病良性疾病：肾衰竭(350pg/ml)肝脏疾病（100pg/ml）china-japan union hospital, jilin university 宫颈癌：宫颈癌：85%85%肺癌肺癌 ：30%30%头部及颈部癌症：头部及颈部癌症：90%90%食道癌：食道癌：50%50%肛门癌：肛门癌：85%85%皮肤癌：皮肤癌：20%20%scc-agscc-ag检测可用于各类鳞状上皮细胞癌的监测检测可用于各类鳞状上皮细胞癌的监测 “scc-ag scc-ag 可作为鳞状上皮细胞癌特异的标志物。可作为鳞状上皮细胞癌特异的标志物。”china-japan

57、 union hospital, jilin university ca15-3可作为乳腺癌辅助诊断，术后随访和转移复发的指标。对早期乳腺癌的敏感性较低（60%），晚期的敏感性为80%，转移性乳腺癌的阳性率较高（80%）。其他恶性肿瘤也有一定的阳性率，如：肺癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、原发性肝癌等。china-japan union hospital, jilin university s100 s100 蛋白分子量为蛋白分子量为10.5kd 10.5kd 的钙结合蛋白，的钙结合蛋白，s100a1s100a1和和s100b s100b 是最先发现的成员。由中枢神经系统细胞是最先发现的

58、成员。由中枢神经系统细胞表达，特别是星形胶质细胞、黑色素瘤细胞和其他表达，特别是星形胶质细胞、黑色素瘤细胞和其他一些组织也有表达，参考值：一些组织也有表达，参考值：0.1ng/ml 10000 u/ml 提示存在远处转移。ca 125/he4一线治疗后的卵巢癌残留病灶或复发患者，应开始二线治疗 ，绝经前或绝经后女性盆腔肿块的恶性程度的风险评估。china-japan union hospital, jilin university 3) 3) 肿瘤治疗的监测肿瘤治疗的监测初始治疗前即开始治疗的监测肿瘤标志物的连续监测 采用同种试剂检测的结果才具有可比性 一旦更换试剂，需要进行平行试验评估肿瘤标

59、志物水平下降 与半衰期有关 手术或治疗有效肿瘤标志物的检测 初治完成后的检测是必须的（对照水平） 不管患者肿瘤标志物的初始水平在正常范围之内或高于正常值个体患者的基线值 后续随访的基础china-japan union hospital, jilin university 注意: 对于个体患者，如果肿瘤标志物水平在正常范围之内，也未必提示正常。肿瘤标志物的水平再次升高/ 肿瘤标志物升高的速度。 高度提示肿瘤发生复发和转移。 连续动态的监测以个体患者的基线水平为基础，可避免假阳性和假阴性的出现。肿瘤标志物的诊断价值。 肿瘤的复发和转移的早期监测不依赖原发肿瘤标志物的释放!与基线值相比，如出现10

60、0%的增长，具有100%的特异性 。肿瘤标志物联合检测。 增加肿瘤发生转移的诊断价值。* *stieber et al, tumor markers in metastatic breast cancer: high tumor specificity within the reference stieber et al, tumor markers in metastatic breast cancer: high tumor specificity within the reference range. j clin oncol, 2006 asco annual meeting proc