微生物学基本理论和基本技能强化训练要点

1、微生物学基本理论和基本技能强化训练要点目录：1、 前言2、 微生物学基本理论要点3、 微生物学基本技能要点一、前言微生物学是一门理论性和实践性很强的学科，该课程的教学历来十分重视基本理论和基本技能方面，但是由于教材和课时以及实验室等多方面条件的限制，学生在掌握基本理论和基本技能方面还略有不足。针对以上不足，该学科教学的发展需要为学生提供简练辅助教材和为学生提供开放实验室以满足学生的学习需要。为此特编写此辅助教材。（要求重点掌握的内容用黑体字）二、微生物学基本理论要点1、微生物学概论：要点包括：微生物的定义、分类、作用、微生物学的研究内容、发展史微生物：是一群形体微小、结构简单、肉眼不能直接观察

2、到，需借助显微镜才能看见的一群微小生物。P1微生物的分类：从细胞水平可将微生物分为三大类P3（1） 非细胞型微生物（病毒、类病毒等）（2） 原核细胞型微生物（细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体等）（3） 真核细胞型微生物（真菌、单细胞藻类、原虫等）微生物的作用：（与人类的关系）(略)有益方面：参与物质循环、工业、农业、医药工业等方面的应用、正常菌群对人体的保护有害方面：物质的腐败、病原微生物的危害微生物学：是研究微生物的形态结构、生理、遗传变异，以及微生物的进化、分类和与人类、动植物、自然界之间的关系的一门科学。微生物学发展简史：显微镜的发明、巴斯德、郭霍等科学家对微生物学发展的贡

3、献、现代微生物学发展的重要领域2、细菌的定义：细菌：是一类单细胞并以二分裂方式进行繁殖的原核细胞型微生物。P1203、细菌的形态结构与分类：要点包括：细菌的大小、细菌的基本形态、细菌的不规则形态、细菌的基本结构、细菌的特殊结构、细菌的分类细菌的大小：以微米为测量单位，观察细菌通常使用放大1000倍的显微镜油镜镜头。细菌的基本形态：三大类：球菌、杆菌、螺形菌P120细菌的不规则形态：细菌的形态受温度、pH值、培养基、药物等因素的影响，可出现不规则形态。观察细菌的典型形态通常选用对数期的菌体。P121细菌的基本结构：细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 P122-129了解各基本结构的主要功能了解革兰阳性

4、细菌和革兰阴性细菌细胞壁的主要区别P125(表8-1)了解细菌细胞壁的主要化学成分肽聚糖的结构细菌的特殊结构：荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢 P129-134 了解各特殊结构的主要功能、鉴定意义、与致病性的关系。如荚膜的抗吞噬作用、鞭毛的运动功能、菌毛的粘附作用、是否能杀灭芽孢可作为判断灭菌是否彻底的判断标准。细菌的分类：了解细菌分类的依据，种、型、株的概念、命名P175-1764、细菌的营养与生长繁殖：要点包括：细菌的营养物质组成、细菌生长繁殖所需的基本条件、细菌培养方法、细菌生长曲线规律细菌的营养物质组成：水、碳源、氮源、无机盐、生长因子P140-141 了解这些营养物质对培养细菌的意义细菌生长繁

5、殖所需的基本条件：充足的营养物质、合适的pH值、合适的温度、合适的气体条件P142-144细菌培养方法：培养基的用途和种类P146平板、斜面、菌落等概念P148细菌生长曲线规律：细菌生长曲线体现细菌群体生长的规律。将一定量的细菌接种到新的培养基中，以细菌数的对数为纵坐标、以培养时间为横坐标绘得一条S形状的曲线叫细菌生长曲线。根据细菌生长曲线课将细菌的批培养分为以下4个时期：P145迟缓期：是细菌适应新环境的时期，代谢活跃但细胞不分裂。制剂等的灭菌应选择在此期进行。对数期：是细菌快速生长的时期，代谢活跃、细胞数目呈对数增长、细胞形态和性状典型。此期的菌体适合用于研究，如观察细菌形态、药物敏感试验

6、应选择此期的菌体。稳定期：是细菌积累大量代谢产物的时期，活菌数大致稳定，发酵工业通常以加糖、补料等方式延长此期以获得较高的发酵产量。衰亡期：是细菌死亡、菌体变形、自溶的时期，此期的菌体一般不适合研究或发酵生产。5、细菌的代谢：要点包括：细菌的酶、产能方式、代谢过程、代谢产物、代谢调控细菌的酶：组成酶、诱导酶 P149了解诱导酶的应用意义产能方式：有氧呼吸、发酵、无氧呼吸代谢过程：结合生物化学加以学习代谢产物：分解代谢产物、合成代谢产物，了解分解代谢产物的鉴定意义，熟悉一些常见的细菌生化反应P152代谢调控：是微生物学研究中非常重要和具有很强实用性的知识，但理论课教材多数在此方面知识较为缺乏和零

7、散，考虑到受课时限制和不加重学生负担，不在此作书面陈述。6、细菌的分布：P215要点包括：细菌在自然界的分布、在人体的分布细菌在自然界的分布：土壤（细菌的大本营）、水（大肠菌群数的检测意义）P217、空气（空气的净化意义）细菌在人体的分布：正常菌群的意义：P220正常菌群：在正常人体表以及与外界相通的腔道中分布的一定种类和数量的微生物。正常菌群的生理意义：拮抗病原微生物营养作用抗衰老作用抗肿瘤作用促进免疫作用7、细菌的感染与致病性：P154要点包括：细菌的感染类型、细菌的毒力细菌的感染类型：隐性感染、潜伏感染、显性感染、带菌状态P161细菌的毒力：细菌的毒力构成：侵袭力、毒素 P154-159

8、 细菌内毒素和外毒素性质的比较P156（表8-6）8、细菌的检查方法：要点包括：革兰染色的方法及其应用意义、病原菌的检验程序革兰染色的方法及其应用意义：方法：结晶紫初染（1分钟）-碘液煤染（1分钟）-95%乙醇脱色（适度）-沙黄复染（1分钟） 应用意义：有鉴别细菌、研究细菌致病性、指导临床用药的作用。P137病原菌的检验程序：标本采集-直接镜检-分离培养-纯培养-生物学性状观察、细菌生化反应、血清学鉴定、动物试验、药物敏感试验等P163-1649、消毒灭菌：要点包括：消毒、灭菌概念、P225巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、P227紫外线的杀菌作用、P229消毒剂P231消毒：用理化因素杀死物体中的

9、病原微生物，以防止病原微生物的感染和传播。灭菌：用理化因素杀死物体中所有的微生物，包括细菌的芽孢。巴氏消毒法：是一种对酒类、饮料等进行的低温消毒方法，有利保持食品的风味。联系高温瞬时法体会高温快速灭菌的原理。高压蒸汽灭菌法：掌握其操作要点（保持蒸汽流畅、排冷空气、零磅开盖）、一般的灭菌条件、理解湿热灭菌的优点。紫外线的杀菌作用：紫外线的杀菌作用特点（用于空气、物体表面的消毒）；主要的杀菌机理（破坏核酸）；光复活（使用紫外线杀菌要避免可见光的光复活的修复作用）消毒剂：了解化学消毒剂的主要种类、杀菌机制及其使用10、质粒：要点包括：质粒的概念、质粒的特性、常见的质粒类型P240质粒：细菌染色体外的

10、遗传物质。（决定一些次要性状，可转移或消除）质粒的基本特性：小的环状DNA分子、自主复制、决定一些次要性状、可消除或转移、相容性和不相容性常见的质粒类型：了解F质粒、R质粒等11、转座因子：要点包括：概念、三种类型、意义P241-24212、噬菌体：要点包括：噬菌体概念、温和噬菌体和毒性噬菌体的概念、前噬菌体、溶原性细菌、噬菌体感染的特异性、噬菌体的应用意义噬菌体：感染微生物细胞的病毒。P240毒性噬菌体：生活史中只有一个溶菌周期的噬菌体。温和噬菌体：生活史中有溶菌周期和溶原周期的噬菌体。前噬菌体：整合在细菌染色体上的噬菌体基因组。溶原性细菌：带有前噬菌体的细菌。噬菌体感染的特异性是噬菌体分型

11、的依据 。噬菌体的应用意义：了解13、基因突变的规律：自发性、不对应性、可诱发性、独立性、可遗传性、可逆性 （性状回复而不是基因结构的恢复）P243-24414、DNA损伤的修复：4种修复机制及其意义(略)15、营养缺陷型概念及其意义（略）（P377）16、微生物基因转移和重组的方式：转化、转导、接合、噬菌体转变P244-246转化：受体菌吸收供体菌游离的DNA片段，并整合入受体菌基因组中，从而获得供体菌部分遗传性状的过程。转导：以噬菌体为媒介，将供体菌的部分遗传物质转移至受体菌，使受体菌获得部分供体菌的遗传性状。17、葡萄球菌：要点包括：是常见的化脓性球菌、革兰阳性球菌、据产色素情况分三类葡

12、萄球菌（金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌）、SPA可用于协同凝集试验、耐药菌较为多见（如MRSA）致病性葡萄球菌的鉴定要点（金黄色、透明溶血环、血浆凝固酶试验阳性、发酵甘露醇）(革兰阳性球菌)P27818、链球菌：要点包括：据溶血现象分三类链球菌（甲型链球菌、乙型链球菌、丙型链球菌）、据抗原结构分A-V共20群，致病株大多是A群、抗链球菌溶素O试验辅助诊断链球菌感染（如风湿热）、链球菌感染易引起超敏反应性疾病（如急性肾小球肾炎）P28119、肺炎链球菌：胆汁溶菌试验阳性、菊糖发酵试验阳性（据此区别于甲型链球菌）P28220、奈瑟菌属：革兰阴性双球菌，致病菌主要有脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟

13、菌、培养常采用巧克力平板P28321、肠道杆菌：要点包括：大肠埃希菌、志贺菌属、沙门菌属P285大肠埃希菌：俗称大肠杆菌，是肠道的正常菌群、是环境卫生和食品卫生学的检测指标、是科研上最受到重视的一种细菌。生物学特性：革兰阴性杆菌、兼性厌氧菌、易培养、代谢活跃、乳糖发酵试验阳性（产酸产气）（可区别于痢疾杆菌、伤寒杆菌，有鉴定意义）、IMViC试验：+-。了解致病的血清型（5种）。志贺菌属：俗称痢疾杆菌，是细菌性痢疾的病原菌沙门菌属：沙门菌感染的三种类型：肠热症（伤寒）、食物中毒（胃肠炎）、败血症。肠热症的二次菌血症（理解病原菌的感染情况）。肥达试验：血清学试验（试管凝集法）用沙门菌抗原检测患者血

14、清中的特异性抗体 ，以辅助诊断疾病。肥达试验结果的解释有助理解血清学诊断的一般原理。P28922、弧菌属：霍乱弧菌（霍乱）、副溶血性弧菌 （海产品食物中毒）（略）23、厌氧芽孢梭菌：破伤风梭菌（破伤风）、产气荚膜梭菌（气性坏疽、食物中毒等）、肉毒梭菌（食物中毒）P29424、分枝杆菌属：结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌P291结核分枝杆菌：结核病的病原菌、抗酸性细菌、生长缓慢、罗氏培养基、油菌免疫、结核菌素试验的应用意义、联合用药25、人畜共患病病原菌：布鲁菌属（动物流产、波浪热）、鼠疫耶氏菌、炭疽芽孢杆菌（炭疽病）(略)26、放线菌感染的特征：硫磺样颗粒、瘘管P17427、P297-304支原体：

15、支原体概念、肺炎支原体、溶脲脲原体（泌尿生殖系统感染）28、立克次体：概念、流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病。外斐反应的诊断意义29、衣原体：概念、独特的发育周期、和性病的关系30、螺旋体：概念、钩端螺旋体(钩体病)、梅毒螺旋体（梅毒）31、真菌的形态结构：霉菌、酵母的概念；菌丝的三种类型（营养菌丝、气生菌丝、生殖菌丝）P20232、真菌的培养：沙保培养基、2228培养温度33、真菌的菌落类型：酵母型、类酵母型、霉菌型（菌落）34、真菌的繁殖方式：孢子繁殖、菌丝断裂繁殖35、病原性真菌：皮肤癣菌（嗜角质蛋白特性）、白色假丝酵母菌（最常见的条件致病性真菌）、新型隐球菌（深部感染） 36、病

16、毒的概念（非细胞型微生物）和主要特点（极小、结构简单、细胞内寄生）37、病毒的基本结构：核衣壳P17938、病毒的对称类型：螺旋对称型、20面体对称型、复合对称型39、病毒的增殖过程：（复制周期）吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配与释放P18340、干扰现象：两种病毒感染同一细胞时，可发生一种病毒抑制另一种病毒增殖的现象称为干扰现象。P18541、干扰素的抗病毒作用机制：干扰素抗病毒蛋白抑制病毒复制42、病毒的致病机理：对细胞的作用、对免疫的作用P19043、病毒培养的三种方法：细胞培养、鸡胚培养、动物接种P19444、流行性感冒病毒：流感病毒变异和流感流行的关系（抗原漂移、抗原转换）P3084

17、5、麻疹病毒:急性呼吸道传染病、易感人群：6个月-五岁、飞沫传播、临床症状：发热、上呼吸道炎、结膜炎、口腔粘膜斑（koplic斑）、全身斑丘疹为特征。46、副流感病毒（轻型流感样症状）、腮腺炎病毒（腮腺炎）、呼吸道合胞病毒（婴幼儿细支气管炎、婴幼儿肺炎）、风疹病毒（风疹、新生儿先天性畸形）、腺病毒（流行性角膜结膜炎）、鼻病毒（50%以上普通感冒）、冠状病毒（10-30%普通感冒）、呼肠病毒（轻度上呼吸道感染）(略)47、肠道病毒：脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒、新肠道病毒（主要经粪口途径传播）(略)48、乙型肝炎病毒（HBV）：（3. 5亿无症状携带者，我国10%）P31849、乙型肝炎

18、患者主要的血清标志物有哪些，并说明其在乙型肝炎诊断中的意义：HbsAg：已感染乙肝病毒HbeAg：乙肝病毒复制的标志，强感染性指标抗-HBc：乙肝病毒复制的标志抗-Hbe：恢复的标志，病毒停止复制，传染性减弱抗-HBs：已感染过乙肝病毒，或接种疫苗后获得免疫力 50、HIV的致病机理：HIV通过损害CD4+T淋巴细胞以及影响其它免疫细胞功能导致免疫功能缺陷，在此基础上发生各种机会性感染及淋巴系统的肿瘤。P32951、朊粒(Prion)：传染性蛋白因子、在人和动物中引起以海绵状脑病（TSE）为特征的致死性的中枢神经系统的慢性退化性疾患。如搔痒病、疯牛病、库鲁病、克-雅病、新克雅病(略)52、抗生

19、素概念：抗生素是生物在其生命活动过程中产生的（以及用化学、生物化学方法衍生的），能在低微浓度下有选择性抑制或影响它种生物功能的有机化合物。P33853、 研究开发新抗生素的工作步骤：土壤微生物的分离、筛选、早期鉴别、分离精制、临床前试验研究、临床试验P34154、抗生素发酵的一般流程：孢子制备、种子制备、发酵P34655、次级代谢产物的特点：（1）对微生物自身的生长、繁殖无显著功能（2）与初级代谢紧密相连（3）在一定条件下能大量合成P354-35556、抗生素生物合成的调节与控制要点：（1）受产生菌生长速率的调节（2）受分解代谢物调节（3）需要合适的初级代谢基础（见课件）P354次级代谢产物的

20、生物合成 特点：（1）受产生菌生长速率的调节（2）受分解代谢物调节（葡萄糖效应）（3）需要合适的初级代谢基础（4）受代谢调控不严格（可大量产生、多组分）（见课件）P35457、 抗生素的主要作用机制：抑制细胞壁的合成、影响细胞膜的功能、干扰蛋白质的合成、抑制核酸的合成、干扰细胞的能量代谢P35758、 抗药性产生的遗传学机制：（1）自发突变加药物选择（2）抗药性基因的转移P36359、 抗药性产生的生物化学机制：（1、）产生钝化酶（2）药物作用靶位改变（3）细胞对药物的透性改变P36460、抗药性的控制措施：（1）合理用药（2）新药开发（3）抗药机制研究P36561、抗生素效价的微生物学测定法

21、：管碟法（二剂量法）:计算公式、影响因素(略)62、微生物在其他药物生产中的应用：维生素C二步发酵法、P372氨基酸发酵的代谢调控、P376酶及酶抑制剂的生产意义、P381甾体转化的意义、P386微生态制剂等P390、P22363、药物生产中的微生物来源：空气、水、人体、土壤、原料和包装、厂房和制药设备P39264、GMP：药品生产质量管理规范P39565、防止微生物污染药物的措施：（1）加强药品生产管理（2）进行微生物学检验(3)使用合适的防腐剂P39666、测定药物MIC、MBC的方法：（1）连续稀释法（2）琼脂扩散法P39767、常用的活菌计数法：（1）平板计数法（2）滤膜过滤法P413

22、68、体外抗菌试验的影响因素：（1）试验菌（2）培养基（3）抗菌药物（4）对照试验P40369、药物制剂的微生物学检查：无菌检查、细菌总数和霉菌总数检查、控制菌检查等P40370、菌种的选育和保藏P261菌种选育过程由三个环节组成 ：变异-筛选-表达P261工业菌种特点：有遗传上不够稳定和生活力弱的特点，在使用过程中容易发生菌种衰退现象P261理性化筛选：是运用遗传学、生物化学的原理，根据产物已知的或可能的生物合成途径、代谢调控机制和产物分子结构来进行设计和采用一些筛选方法，以打破微生物原有的代谢调控机制，获得能大量形成发酵产物的高产突变株。P263葡萄糖效应：葡萄糖效应是一种碳源分解代谢物调

23、节，是指能够被优先或迅速利用的碳源（葡萄糖）及其分解代谢物对其他多种代谢酶的调节作用。调解作用包括分解代谢物阻抑和分解代谢物抑制。该作用的强弱程度和该碳源（葡萄糖）的分解代谢速率有关。P383通俗地说：葡萄糖效应是指抗生素发酵过程中葡萄糖被迅速分解利用时，会产生对抗生素发酵的抑制作用。因此抗生素发酵过程中现采用葡萄糖流加工艺来避免葡萄糖效应。(见课件)菌种保藏原理：人工创造条件使菌体的代谢活动处于休眠状态。如低温、干燥、隔绝空气或氧气、缺乏营养物质等，以降低菌种的代谢活动，减少菌种变异，达到长期保存的目的。 P271防止菌种衰退的主要措施如下：P274 尽量减少传代次数；用单核细胞传代；优化菌

24、种的培养条件；选择合适的菌种保藏方法。菌种的复壮方法：1.分离纯化法 2.淘汰法 3.宿主体内复壮法微生态失调的诱因:220-2211、正常菌群寄居部位改变2、不规范使用抗生素3、机体免疫功能下降三、微生物学基本技能要点(略)1、显微镜油境镜头的使用要点：（1）低倍镜对光（2）聚光器上调（3）将油镜头降至最低（4）用粗调缓缓上调镜头至有物像一闪（5）用微调调至物象清晰2、革兰染色方法和应用意义：染色方法：结晶紫初染1分钟后细流水冲洗-碘液媒染1分钟后细流水冲洗-95%酒精脱色（滴加酒精1-2次、脱色时间15-30秒）-沙黄复染1分钟后细流水冲洗，甩干。应用意义：（1）细菌分类鉴定方面的意义：根

25、据染色结果可将细菌分成革兰阳性细菌和革兰阴性细菌两大类。（2）指导临床用药方面的意义：革兰阳性细菌和革兰阴性细菌对药物的敏感性不同。3、标本片的制作过程：涂片（在玻片上将细菌标本均匀涂布成1平方厘米的薄层）-干燥（做到涂片上水迹完全消失）- 固定（缓缓通过火焰3次）-染色（采用相应染色方法）4、观察细菌典型形态的方法：根据对细菌的不规则形态及其影响因素的理解，选择对数生长期的菌体进行观察。这样当拿到细菌标本后，通常一方面直接镜检，另一方面将标本中的细菌培养至对数生长状态后再镜检。5、细菌接种的无菌操作技术：接种环的握持方法、烧灼接种环的方法、试管的握持方法、火焰保护下接种的注意事项6、培养基制

26、备过程：称量-溶解-过滤-调节酸碱度-分装-高压蒸汽灭菌7、细菌的接种培养方法及其主要用途：（1）平板划线的方法：分区划线法。主要用于分离细菌（2）斜面接种法：由下至上涂布。主要用于菌种的扩大培养、传代培养。（3）液体接种法：将粘有菌接种环在培养基内的试管壁研磨，以使细菌均匀分布于培养基。主要用于观察细菌生长现象等研究。（4）半固体穿刺接种法：将粘有细菌的接种针穿刺与培养基中。主要用于观察细菌有无动力。8、细菌生长现象的观察：平板划线（观察及描述菌落的形态）、斜面接种（观察细菌的菌苔）、液体接种（观察均匀混浊生长现象、菌膜生长现象）、半固体接种（观察细菌有无动力）9、细菌的生化反应（糖发酵、I

27、MViC、硫化氢、尿素酶）的原理、方法以及结果判断（理解其在细菌鉴定方面的意义） 10、高压灭菌锅灭菌方法的操作要点：蒸汽要流畅、排尽冷空气、零磅开盖11、紫外线灭菌的机理和特点：灭菌机理：主要是破坏细菌的核酸。作用特点：穿透力低，主要用于物体表面以及无菌室空气的消毒。12、链霉菌菌落观察：菌落特点：小、致密、表面干躁、灰色孢子13、酵母菌菌落观察：菌落特点：大、厚、表面湿润、乳白色14、乙肝病毒表面抗原检测（ELISA）：包被抗体-加待检血清-加酶标抗体-加底物-比色法判断结果15、病毒培养的3种方法：细胞培养、鸡胚培养、动物接种16、药物体外抗菌试验：纸片扩散法（药物敏感试验）：（1）菌种

28、：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌3712-16小时普通肉汤琼脂斜面培养物（2）培养基：MH（肉汤）、MHA（肉汤琼脂）（3）方法：斜面培养物-接种MH-过夜（细菌处于对数生长期）-涂布于MHA-加抗生素滤纸片-37培养24小时-测量抑菌圈直径-对照表15-1判断药敏试验结果17、抗生素效价二剂量测定法计算公式： (UH+UL)-(SH+SL) H lg=- * lg- (SH+UH)-(SL+UL) L18、细菌总数测定方法：试液稀释-取两个合适稀释度试液1ml-平板-加15ml培养基-摇均-平板倒置37培养48小时-计数菌落-报告结果19、霉菌总数测定、无菌检查、热原质检查参考答案及评分标准：1、

29、细菌的基本结构与主要功能(25分)：答：细菌的基本结构包括：细胞壁、细胞质、细胞膜、核质（5分）细胞壁：细菌细胞壁外的一层坚韧有弹性的结构。对细菌细胞具有保护作用。（5分）细胞质：细菌细胞膜内侧的胶状物质。是细菌新陈代谢的重要场所。（5分）细胞膜：是包围细菌细胞质的镶嵌有蛋白质的脂质双层膜。具有选择性主动运输物质进出细胞的功能。（5分）核质：是细菌细胞内紧密盘绕的环状的DNA分子。是细菌主要的遗传物质。（5分）。2、细菌生长曲线规律及其应用意义(25分)答：细菌生长曲线体现细菌群体生长的规律。将一定量的细菌接种到新的培养基中，以细菌数的对数为纵坐标、以培养时间为横坐标绘得一条S形状的曲线叫细菌

30、生长曲线。（5分）根据细菌生长曲线课将细菌的批培养分为以下4个时期迟缓期：是细菌适应新环境的时期，代谢活跃但细胞不分裂。制剂等的灭菌应选择在此期进行。（5分）对数期：是细菌快速生长的时期，代谢活跃、细胞数目呈对数增长、细胞形态和性状典型。此期的菌体适合用于研究，如观察细菌形态、药物敏感试验应选择此期的菌体。（7分）稳定期：是细菌积累大量代谢产物的时期，活菌数大致稳定，发酵工业通常以加糖、补料等方式延长此期以获得较高的发酵产量。（5分）衰亡期：是细菌死亡、菌体变形、自溶的时期，此期的菌体一般不适合研究或发酵生产。（3分）3、病毒感染的致病机制(25分)答：病毒感染的致病机制包括：（一）病毒感染对

31、宿主细胞的直接作用；（二）病毒感染的免疫病理作用。（5分）（一）病毒感染对宿主细胞的直接作用：影响和破坏细胞的生理功能，导致病理状态。1、杀细胞效应：病毒感染导致细胞裂解。（2分）2、稳定状态感染：病毒感染导致被感染细胞发生细胞融合和出现新抗原。（2分）3、包涵体形成：病毒感染导致被感染细胞内出现包涵体。（2分）4、细胞凋亡：某些被病毒感染的细胞可发生细胞凋亡。（2分）5、基因整合与细胞转化：病毒基因与细胞基因整合，影响细胞基因的表达，诱导细胞转化，可诱发细胞癌变。（2分）（二）病毒感染的免疫病理作用：机体免疫系统在清除病毒的同时，可能产生免疫损伤。1、抗体介导的免疫病理作用：例如型超敏反应等

32、。（3分）2、细胞介导的免疫病理作用：例如型超敏反应等。（3分）3、免疫抑制作用：某些病毒感染可抑制免疫，甚至造成免疫缺陷。例如艾滋病病毒的感染。（4分）4、正常菌群的生理作用(25分)答：正常菌群：在正常人体表以及与外界相通的腔道中分布的一定种类和数量的微生物。（5分）正常菌群的生理意义：1、拮抗病原微生物：正常菌群通过占位保护、营养竞争、产生抗菌代谢物等方式拮抗病原微生物。（5分）2、营养作用：正常菌群通过参与营养物质代谢、转化、合成等方式为机体提供营养。例如某些肠道菌可合成某些维生素，供机体需要。（5分）3、抗衰老作用：例如双歧杆菌可以产生超氧化物歧化酶，帮助机体清除一些有害的超氧化物。

33、（2分）4、抗肿瘤作用：正常菌群通过激活免疫细胞或清除致癌物质等机制发挥抗肿瘤作用。（3分）5、促进免疫作用：正常菌群通过促进免疫器官发育和激活免疫细胞等作用促进免疫。（5分）5、细菌耐药性产生机制(25分)答：细菌耐药性产生的遗传学机制是：1、自发突变加药物选择作用；2、耐药基因的转移。细菌耐药性产生的生物化学机制包括：1产生钝化酶 ；2改变细胞膜通透性；3药物作用靶位改变。（10分）1产生钝化酶： 钝化酶最常见的例子有-内酰胺酶，该酶可水解青霉素或头孢菌素的-内酰胺环，使抗生素失去抗菌活性。又如乙酰转移酶、磷酸转移酶、核苷转移酶等可以对氨基糖甙类抗生素进行化学修饰作用，使氨基糖甙类抗生素不

34、能与细菌体内的核蛋白体结合，从而引起抗药性。（5分）2改变细胞膜通透性： 细菌可通过各种途径使抗菌药物不易进入菌体，或将药物通过主动外排机制将药物泵出菌体。细胞膜具有选择性运输物质进出细胞的功能，这种功能与细菌的通道蛋白以及主动外排机制有关。细菌可以通过遗传变异改变通道蛋白或主动外排机制的性质和数量来降低细菌的膜通透性而产生获得抗药性。如某些耐药菌体内存在能将四环素,-内酰胺抗生素和喹诺酮类药物从胞内排出胞外的主动外排机制。（5分）3药物作用靶位改变： 细菌可以通过遗传变异或药物的诱导作用，改变药物作用靶位使之与药物的亲和力降低或增加药物作用靶位的数量而获得抗药性。例如：（1）链霉素的药物作用

35、靶位是细菌核糖体30S亚基上的S12蛋白,若S12蛋白的构型改变,使链霉素不能与其结合而产生抗药性；（2）青霉素作用靶位是存在于细胞壁的青霉素结合蛋白(PBP),PBP具有肽聚糖合成酶的活性,参与细胞壁的合成,是-内酰胺类抗生素的作用靶位,细菌改变了PBP的结构,降低了与青霉素类抗生素结合的亲和力，可导致细菌对青霉素类药物的抗药性。（5分）6、破伤风的防治原则(25分)答：破伤风的防治原则主要包括：1、注射破伤风类毒素；2、伤口清创、扩创，破伤风抗毒素紧急预防；3、抗毒素特异性治疗和抗生素抗菌治疗。（10分）1、注射破伤风类毒素：破伤风属于外毒素感染性疾病，对人群采用破伤风类毒素预防接种，建立

36、对破伤风感染的特异性免疫力。（5分）2、伤口清创、扩创，破伤风抗毒素紧急预防：破伤风多发生于狭窄而深部的创伤以及大面积烧伤，该菌属于厌氧菌，对伤口及时清创、扩创，可以防止形成厌氧环境，进而破伤风菌繁殖，产生外毒素。对于伤口污染严重而又没有经过基础免疫者，可立即注射破伤风抗毒素，紧急预防。（5分）3、抗毒素特异性治疗和抗生素抗菌治疗：对于发病者，抗毒素特异性治疗要足量、及时。注射前要做皮试。抗生素抗菌治疗可采用四环素、红霉素等。（5分）参考答案及评分标准：1、细菌生长繁殖所需的基本条件(25分)答：细菌生长繁殖所需的基本条件包括：1、充足的营养物质；2、合适的温度；3、合适的酸碱度；4、合适的气

37、体条件。（9分）1、充足的营养物质：培养细菌，包括碳源、氮源、无机盐、生长因子、水这些营养成分供应要充足。（4分）2、合适的温度：按照细菌对温度需求不同，可将细菌分为嗜冷菌、嗜温菌、嗜热菌。多数细菌的最适生长温度为37。（4分）3、合适的酸碱度：不同细菌的生长，需要的酸碱度环境有所不同，多数细菌生长的最适pH值范围是7.2-7.4（4分）4、合适的气体条件：影响细菌生长主要的气体条件是氧和二氧化碳，按对氧的需求将细菌分为需氧菌、兼性厌氧菌、厌氧菌，某些病原菌初次分离需要提供5-10%的二氧化碳 。（4分）2、病毒增殖的复制周期(25分)答：病毒增殖的复制周期包括：1、吸附；2、穿入；3、脱壳；4、生物合成；5、装配与释放。（10分）1、吸附：病毒吸附于细胞表面的特异受体。（3分）2、穿入：病毒以吞饮、融合等方式穿入进入宿主细胞。（3分）3、脱壳：需脱壳酶的作用（溶酶体酶或病毒编码的酶）将病毒核酸从核衣壳中释放。（3分）4、生物合成（隐蔽期）：此时期细胞中找不到病毒颗粒，在病毒基因的控制下，进行病毒核酸和病毒蛋白质的合成。（3分） 5、装配与释放：病毒种类不同，在细胞内装配的位置不同。病毒核酸和病毒蛋白质装配成核衣壳以后，无胞膜病毒细胞裂解释放，有胞膜病毒出芽释放。（3分）3、细菌基因转移与重组方式(25分)答：细菌基因转