最新裂解液作用

1、核酸抽提原理简单炮训核酸捕捉包含样乩的盘解和纯化两大步骤.慾解足使卜羊品中的孩酸游离在裂解体系中的过程.纯化则足使孩酸9 裂解体系屮的其它成分.如蛋白质.盐及其它杂质彻底分离的过程.经典的裂解液几乎林件育去污剂 如SDS. Triton X-100. NP-40. Tveen 20 ：?>和盐（如Tris. EDTA, NaCl ?> 盐的作用除了提供一个合适的裂解环境（如Tris）还包括抑制样品中的核酸酪在裂解过程中对核酸的破坏（如EDTA） 维持孩酸结构的松定（如NaCl）爼 左污剂贝倪通过使蛋白两变性.破坏段结构及解开巧孩酸川连接的蛋白质.从而实现核酸游 离在慫解体系中熨解体

2、系中还可能抽入蛋白酚：利用蛋白酚将蛋白质消化成小的片段.促进垓酸勺蛋白质的分开冋时也便F后 而的纯化廉作以及获得更纯的核酸.也仃虫接使用禺浓度的蛋F顺受性列（如GIT、GuHCl答）裂解的.该方法U经成为了 RN A捕提的主流.却不足基冈组DNA抽提的主濒赧常用的纯化方法.況PC捕捉+醉沉淀：足介质纯化.第种方法足利用PC对熨解体系进行反？I抽捉以去除蛋门 丿员.实现孩酸纭蛋白硕的分离：再用醉将核酸沉淀下來.实现核酸丐盐的分强"第二种方法则足利用荣些固项介质.在臬些持定的条 件下.选择件地吸附核漲而不吸附蛋白质及盐的持点.实现核酸与蛋白価及盐的分离.岛盐沉淀去除蛋白质足第种纯化方法的

3、 个变体.省晚J' PC操作的麻烦.半然.也仃不纯化的抽捉方法但足用途联射限干简单的PCR.梵它杂质如炙糖.乡酌答 的去除.基本上祁尼在这两种方法的呈础上.通过增加一些特别的试剂.或右增加一些觀外的步曝来实现的.2、了解你的实验样品如果你研几某个实鮒佯骷并且要抽提它的核酸.以下的怙息定要先行收集：该样骷的孩酸含fit.矗含BL转殊余质含fib 如果你对样品的待点无所知.半样&稍徹有点圮杂时.抽促核酸的实於就会碰到许多问題.以血液为例.如來你不知道鸟的血液 中有核细胞的含At是人血的干儕左右.而使用人血样的起始虽去捕提鸟血的基因组DNA.怎么可能成功?失敗了又怎么知道佩因 所在？

4、同时.只有对实喲样M有所了解才能正确选择幣解方法绝大部分情况下.使用新鲜样品可以获那址好的结果.对一些朵质含Btifti的样品.如JR使用新鮮徉品抽捉堆闵组DNA足碰 到条质残留过大的何理可以试一下-20C保存天后再抽提的对策.可儀会有总想不到的效果.样骷如采因为某些城闵必须先行 俣存.也要先简化一下样«k 1（11液fd好只保存右核紬胞：将样皿分刘后保存趨免反圾冻融如果实轻室不口备介适的保存条件将 样品先裂解后再保存足个不错的选捋.3、裂解力法的评价含蛋门酚的裂解方法可以认为足抽促闵川H DNA的苗选.农解包押戻蛋门的谢离和与丛冈组DNA相连接的蛋倾的讷 离.蛋白動的作用足使蛍白质

5、变小故而对蛋白质的谢离有戸大的促进作用：冋时.巨大的基因组DNA是很客犷缠“住大分子的东 西的.蛋白质铁蛋白醉消化变小后则不客易被展因组DNA嘟唯.脊利于蛋门做在纯化那作中的去除.使放终获得的垂因组DN A的纯度更烏.另外个思路足.如果基冈组DNA与蛋白质%在一起.在纯化的过程中有两种可能，如果基因组DNA的待性 占优势则纯化时以DNA的形式被保留下来.导致蛋白负的残留：如果蛋白负的特件占优势.则纯化时以蛋白质的形式被去除导 致DNA的损失.有些样如肌肉即使是RNA抽提.也强烈建议使用含蛋白酹的裂解液（或右在操作中的某个时帳使用蛋白 側消化蛋白质（«丙在于这些样D中的蛋白质.足非命难

6、以去除的.该方法足获得般大御率和址倚纯度的堆础.不使用蛋白酚的厶污剂殺解方法.仍然在细胞堆闵组DNA抽很方而右优势.尤其足半得率和纯度耍求不足放岛而经济杵 及操作简单很求要时.控制好裂解液/样品的比例疑该方法成功的关世.该方法结合品盐沉淀町以实现赧简单的操作但纯哎及部 率的稳定性可能会比用PC抽捉的差一些岛浓度蛋白质变性剂（如GIT. GuHCl等）的裂解方法是抽提RNA的首选总RNA的抽泄.最車娶的定快速裂解 细胞眼至干与基因组DNA相连接的蛋白质的裂解以及基因组与蛋白质咚T住的问世.冈为都不会对以厉的纯化产生大的彩响. 可以不考电.岛浓度蛋白履变性剂能快速破坏细胞芻 进而迅速抑制住细胞内的

7、RNA利从而确保了 RNA的尧整性除了极少M 不适用该方法的样品-主要是檢物.其它绝大部分样品的RNA的抽提.都可以以応浓度的蛋白刃芟性列为基础的该方法也可用 干堆丙组DNA捕捉.卑常快迪简单.但纯度不足很心.含CTAB的裂解液.几平成为富含多橢的徉品.如细如桥物的基因组DNA抽捉的苜选裂解方法该方法成功巧否与两个 同索存关:CTAB的质fit :是洗济的彻燥程度 CTAB的质瑕对裂解效率有很大的影响.而且.似乎还说不淸建原因因为 即使是冋一公司生产的纯度样的CTAB.批号不冋.效果就可能差别很大.洗涤去除CTAB要比其它的盐堆些.问时.CTAB 的少册残留也会对卿活性有巨大彫响.所以洗济是否

8、彻库也是该方法成功与否的先桃裂解时的溫度.多使用65C：但如果发现降 解严埜或者得率太低.可以试下37C - 45C这个相对低温的区域SDS碱裂解法足质桂抽捉的前选裂解方法.具仃快速、部率臥 几P无慕因组DNA污架的待点.推別好裂解液/繭体的比 例和操作的面和込该方法成功的关罐.蛋门切的沉淀效幷在4C会更好些所以加入藩液III 在4*C静St 段肘间以及采用 4C离心去蛋白质祁可以ffiittfthl该方法不一定要便用PC纯化但结合PC纯化可以获甜纯度很高的质札RNA的去除可 以第在藩液I "切入RNase A <100ug/ml>或齐在厳后的滨解液屮加入RNase A

9、（25 ug/mb 来实现总的密觉足在 浴液I屮使用RNase ARNA的歿留少些.不过.经典沉淀儿乎没有办法彻底公除RNA歿留.另外.对大放粒（50 kb以 ±>该方法可能会有何理PCR模板的简易裂解方法.也是使用面很广的一类方法.该方法的待点是无復纯化.样&被裂解后BP可宜接取裂解液用于P CR.曹常快速.也1個为不纯化.所以.假阴件（即没有旷墩出來的Rltt）比例也比较岛该方法址简单的裂解液就足水.更余- 点的就会含有一些不会抑制后续的PCR RA.而且能槌高裂解效率.甚至还可能部分消除样阳内抑制PCR反風朵质的东西如T riton X100甲贱版咎.再父余点的就

10、会含育谄如Chelex 100 Z类的能吸附部分杂质的介価操作也川常简单.多使用船度 的变化来实现徉M的裂解.仙糸沸.或者尚盘低盘的多次循环彎.该方法址适合从犬堆样皿中找出阳性样岛.但却不适合用于判 断臬个样品是阳性还是阴性.降低样&使用侵可以捉高阳性牟冈为样品fit的降低.円时慰味若PCR的抑制物fit的降低.选择J合适的後解液下一步就是菱控耐好样後解液的比例.这个问也尊常灌要但却没有获得足够的更视.严朮的多 考资料.都磁该会捉供个简单的比例.仙lml裂解液可以用J- T mg组织或?f C个紬胞：我的建议足你的样&迢绝对耍小于 资料所提供的起始样乩用炙大.并没有具体的说法.

11、如果不足样Aifiltr限.則以能抽很岀满足数次成功实號所綺的核屈il作为决 定样品起蒯d的雄础.会比牧合理的.不要闪为lml袤解液町以抽捉100mg样品.« 定使用lOOrng样曲.裂解液的用fft 农而上9抽提的结果（纯復及禅率没育关系然而.在实际揀作中.对结JK是有比牧大的彩响的.裂解液的用51原則足：偷保能 沏底袈解样品问时使层解休系中核酸的浓醱适中浓哎过低.称导致沉淀效率低.影响那率：浓度过髙去除杂历的过程更余且不 彻底.导致纯度下降.另外.裂解液的用扯足以样M屮蛋白历的含13为基准的.而不疑以核殷件战为垦准这一点务必牢记.4、纯化方法评价PC抽提/醇沉淀方法足个水不过时的

12、方法"稳定、可靠.经济、方便.PC抽捉可以彻底去除蛋白历醉沉淀可以去除 盐，对于Tfi的干净的样P （朵质为蛋门质）.该方法完全可以荻得必历JB的核酸.虽然每次PC抽握邹会损失部分孩酸（因为 不可能将水川全部移取以及低浓啖核酸的醉沉淀效率低但这些何赵都可以諡揀作的凋俺而紂以解决或者謎少彤响.该方法的姐 大的何电地不适合大規模抽捉.PC抽提足去除蛋白质的个菲常有效的手段.苯酚能使蛋白质变性.变性后的蛋白质从水相中被析岀.处于苯酚中或者苯酚/水相Z何.pc抽提的关锻楚要混匀彻，底：要用fit足够.彻嫌混匀才能确保苯酚与蛋白质的充分接触使蛋白质完全变杵. 许炙人总是拟心混匀的剧烈程度足否会

13、对孩酸.尤其楚慕因组DNA造成破坏.实际上大可不血如此小心剧烈的混匀慄作疑会部 分打断大分子的基因组DNA.但该破坏作用不会强烈到DNA变成10kb以内的小片段手剧烈晃动混匀后.爆因组DNA的片 段大部分会大于20kb.这个大小除f 些特别的要求外对PCR和陽切.都足处全适用的.如果要求的片段非常大.如构建 文恋用則不能使用剧烈的混匀方法.而只儀來回21和颇倒混匀此时的关證心裂解液的比例要足够人.使体系不耍太粘冊用 竝要足够.足丙为苯酚去除蛋白切足脊定的徳和度的.趙过了该饱和醱.裂解休系中的蛋白皈不会被次去除必後靠多次抽捉. 方可彻底去除另外.体采太粘稠的坏处是.蛋白质难以彻底去除以及基丙组D

14、NA会断裂得更历害所以要注意裂解液与样骷的 比例.4C离心操作有利干更彻底去除蛋白质PC抽提的另外一个用途是.利用酸性酚可以部分去除DNA的持点.在RNA抽提 时获得DNA戒用做少的RNA.不过竹一点要捉配的足.竹映杭物样品.在公除桨牛余质Z前足不能使用PC摘捉的.否则核腹 必定降解.高盐沉淀蛋白血醉沉淀方法冋样也足-个暮常不错的方法与PC捕捉方法相比除了纯度的稳定性可能要低-点外.该 方法几乎克服J' PC捕捉的所冇竄点.更快、更轻松公除蛋白历所伴怨的好处足可以用大规模抽提.不足足纯反蛋白两残留） 不够稳定.蛋白质的沉淀效率在4C会更好-些.介质纯化方法.足一个越来越受到虹视的方法.

15、其瑕大特点是非常适合大规模垓酸抽捉naw为受人为操作因索影响小. 纯度的稔定性很高凤然纯度不定比PC纯化方法更离）九致命弱点足样乩过就.介质可以分为两大类,类是柱式的.即介 Jft彼预先裝填在下面足通的柱子里:另外类则ffiwn状（Jo Glassmilk.礁性小珠等）01紋状的介质的纯化操作肪经現的蜉沉 淀爰别不大.都是通过数次的加液倒液过程.干谏后.溶解即可获得纯化好的垓酸柱兀纯化的操作虽然也足杠加液倒液过擀但 冈为加入的液体通过离心后会进入另外-个离心管中核戕的柱子充全足分开的.所以洗涤更彻底.操作更省力（不用慄心 将核酸倒掉了.或齐液体的残留不过.介历纯化方法的成本足绘岛的5、醇的沉淀

16、醉的沉淀.目的是使核酸从喪解体聚中沉淀下来从而实现孩酸9英它朵质-主要足盐-的分离.实际操作中.许娄杂质 也会打核酸起被醉沉淀下来尤其足幷其它余氏的浓度也比较赢的时假.醉的沉淀并不足非常转异性的.任何育机大分子及一些盐. 当浓度达到一定水平后.祁可能冋步被沉淀下来-枕核酸而古标准的醇沉淀要求存定的盐及果比例的醉用就.但这决不足说这些盐足必不可少的或者醉的比例足不可更 改的.实际操作中不难发现.当裂解体系中核酸的浓度达到定水平后.即使体系中不含教科书中堆议的盐单麹使用醉也可以使核 酸沉淀下来：或者含右盐使用低比例的醉也可以使核酸沉淀下来（当然得率可能会降低）知逍这一点的总义在于：不菱迷佶 标准方

17、法的唯ft：相反当使用标准方法碰到问題-主要足纯度何題-时.充全可以通过网整沉淀条件来改善.处育参考价值的 足TRIzol捉佻的个沉淀方案：半异丙醉加半岛盐潘液曾代纯件的异丙醉.可以大大降低多畅残留.另外一个何理就足要坚 佶核酸的醉沉淀过程何徉也足其它杂历的沉淀过程：週陷醇沉淀的条件.皿然会降低核酸的得率但冈为可以大大捉高纯度.如果孩酸抽捉的起始样阳足比较"脏啲尿則I：不要使用低區沉淀.低耀沉淀能捉岛沉淀效率：半核酸浓度很低时效果明血 半核酸浓度比牧高时效聚不明显.但却会导致余质的大大增加醉沉谁使用异丙醉还疑乙醉.我没育发现这二者对価fit有大的彫响虽然许多人'发现“乙醇沉淀

18、的梭酸纯度更高.异丙醇沉淀 的核殷比较倉凑帖墜紧颔色不足很白：乙醇沉淀的核酸比较蓬松容易从墜上移幼.颔色比牧白.这足现象促示结论：异丙8? 沉淀的核酸不容易丢掉.但比较堆洗涤.结台丢失和洗涤两个方而综合考电.則建议：少就孩股用异丙醇沉淀（51少洗涤不足问 題.不丢失为先.大fft核酸用乙醇沉淀（皿大丢失不足问£洗涤方S!为先）至于异丙醉沉淀更容易沉淀下盐的说法.我没 有St到过（我儿乎不使用低盅沉淀.难道低沉淀比较容易出现盐沉淀？）我更觉那出现该现象的原因轶在洗涤的不沏底.当然.也不要忘记异丙醇沉:锐体积小.可以使绝门小債抽提操作在1.5ml离心管内完成.但由干其沉淀初很紧揍洗涤时貝

19、中心部分不客易被洗涤到.所以.洗涤异丙醉沉淀的核酸的关-定要便沉淀悬浮起來.-定要放17. «时 何使沉淀址终变成蓬松的白色.如果再洗涤一次.质显决不会育何理的.PEG、LiCk CTAB fll可以用于核酸沉淀.虽然它们远没有醉沉淀的高使用频率但却各有转点.LiCl可以沉淀RNA以去 除DNA. CTAB可以从含多椭的裂解体系屮将核酸沉淀下来.PEG足沉淀圳希颗粒的方便于段.6、洗涤洗涤茴先一定要将沉淀悬浮起来：第二就足要育一定的时何.尤其地半核股沉淀比较大时（使核酸沉淀址终蓬松）：第三足 少fit多次：第四则是去上淸要彻底.教科书中的操作基本上都足"倒掉上淸后倒ZL在吸

20、水纸上片刻".这一描述本身没仃何遞且十分 方便.但因为他來自国外自然就育木土不脳"的问題如果冼心訝足经过硅化的丙为液体几乎不挂壁所以上淸可以去除得M 常彻探：好的管于即使没有经过硅化.wiffla也尊常少.也没育什么问趣：峑的訝子.液体的挂堕非當可观.兀歿留fit务到会彩响 后经的实够.唯不受管子质从彩响的揀作就足倒掉液体培再圾背离心将残液用移液器吸出.定要半记的足观液屮都件有1：步操作屮的杂质其残留笊9混匀程哎、核酸沉淀的大小都有关.赛发时去掉的足乙醉杂脈是不会被赛发去餘的.另外.核酸沉淀的大小及裂解液的裂解能力也决定了洗涤的强唆.沉淀越大裂解液的盘解能力越强.洗涤越要彻

21、底：放55 时间相对要长一点.洗涤次数也耍考农増加41 W的.洗涤定耍用室型的75%乙醉.7、核酸的溶解和保存纯化后的核酸.最后多使用水或者低浓度煖冲液落解：其中RNA以水为主.DNA則炙以弱緘性的Tris或者TE洛解.经 典的DNA潔解方法多提1B使用TE洛解.认为EDTA可以疋少DNA彼可能残留下来的DNase降解的风险:如果操作过程控 制部当DNase的竝留几平楚可以忽略的.充全可以直接使用Tris或者水（pH接近7）滨解DNA垂木匕.核酸任保存中的稔定件9诰度成反比9浓度成M比.虽然也仔冊分实齡人M发现20C保存的DNA比70 C保右:的稳定我和宁可认为这是个例.如果监嗖仟适保存中垓酸

22、发"降解或不消失.林要恳因是梢现留导致的酔解第:M51W则是保存垓酸溶液的pH伉不仟 适导致的水解（RNA在筋酸性更稳定.而DNA在翦緘性更合适还有个不为人廉视的.就足EP詮对核酸的彩响.苗先一 定娶坚佶一点那就是核酸一定会9装它的容器的接触而发生反网达到果种均衡.EP管的材质.首先可能吸附核酸.其衣还可以 讲导孩酸的结构发生某些空化如变性.在核酸的浓度比较高时这个现彖可能观察不到：当核酸浓醱很低时.則比较明W /-在低 浓役的核酸中加入Geletin. Glycogen. BSA可以稳定核酸.虽然己经为实脸所证明.但许多实验人员并没右将该建议当回那.现在制造EP管的讪什现仞川存注町

23、能比廉来的純PP材喷雯但共化学特征.尤）1足对核战稳定性的可能彤响.远没有研究透彻正如现在的质魏可以改造得越来越适用某些要求一样.其负而产 物可能是.摘提的页佗电泳的构型越来越多:除了 151来的种帝型外.还可能出现denatured cc、multimeric forms of cc等 尊惜型.8、核酸质最的检测何题将抽很好的核酸血接用于后续的实验.足唯一可靠的检测方法：除此Z外的枪测方法.都疑相对的.而且并不十分可佶目 前用TiHA实鮒前檢测孩酸历就的方法.混电泳.二足紫外分光光唆仪.电泳检测的主要足孩酸的充整性和大小.只要核酸不足太 小或苟太大（趙出电泳分离范国）该方法还足非常可佶的：电

24、泳还可以用于估计垓酸的浓度.但其准确度与经脸有关：另外电 泳也可能捉供某些杂质污染的怙&但足同样崎经脸有关.紫外分光光度仪檢测的疑纯唆和核殷仔fit然而由就外分光光唆仪不 能确保茸常准确.而该仪器的灵敏度又菲號岛所以.捉供的结果并不十分可f乩-®yi同时进行紫外和电泳检测.综合二苕的结 果可以做岀一个更合理的判断.但由干这两个方法都有欣陪所以.即使出现坏的结果能用于后续实验而好的结果却不能用于后续 实验.也不用大惊小怪关于第外分光光换仪的檢测.笛先.不要使用不能选择波长的仪器：使用那些已经固定了波长的仪器大概可以舁足你彷晚 的开始.没育怙息足可怕的更可怕的足将错误的怙息当仏其

25、次 淀要经命调较仪甌调较可以使用尊常纯的自备核酸 也町以使用犖附（后者足我H05J毎次都使用的方法蓉常简单：只体逍理可以见我以前的帖蚁.后耍记住att A230 : A26 0 :A280 = 1:2 （DNA为1.8） :1为理论上的数也实际测定时会彳些吃别：但如果羞别太大.就育何題彳厂两个的观点：如果A260/A230 > 2 .就趾纯的.帕果A260/A280 > 2.3就足核酸降濟.A260/A230仙采比2.0人许 乡 淀足右杂质殁留的本址什么杂畋我不知道.如來核酸抽捉好后'Ziyffi测定.A260/A280 > 2.3决不捉示核酸降铝氐因fih那些能导致

26、A260/A280 > 2.3的核酸片毁暮常小常規的沉淀是不可能将它怕沉淀下来的*更可能的fit因是，你仪器提 供的A260/A280实亦足A262/A282以至A264/A284的此纯的核酸的吸光tf（在A230足？底在A260足好及在 A280则疋好是半山坡.根?曲线在底和顶的斜林小.在半山坡的斜松ft大的轴点不难得出如下结论< A230和A260的读数 受仪器准确件的彩响比较小而A280受仅粘准确件的彫响比较大.建汶先电泳检测.再用第外分光光喪仪檢测.电泳后.可以百到嘟些样骷根本就不能用如降解太厉巒）以及核殷的大致 浓護.这样就为紫外分光光度位的检测提供了一个参考降解的不必要

27、测了妾测的该取参少fit等9. 问题解符非常堆础的问世就不再罗嗾.II的足想对一些选项众多的问£解答进行简化：如果果丙索占了 70%以上的可能性.我就 只提该因素了还有 些解答与部分人的知识可能相冲夹.也请不要放在心上因为它们也与我当年从书本止学习的知识相冲夹.我 记性差什么都足看充就忘但这也有好处做实峻从来没脊柜也看一看想一想他一做-管用就好.A捕捉过程中的现直及可能的闽因I：孩酸不济解或齐带$窑解蛋门质殘阳（虽然II防更多的资料强洞的足过分丁烘所致）75%乙醉洗涤后.如果绘空 气燥几乎不可能过分丁燥的.尤兵址在閘方港湿的地方.佐证实強：撕取少秋Merck （f）.状CT DNA到

28、个离心箭中.加入 无水乙醉：10分件后彻展去除ZJS仇待乙醉充全挥发后.加入TE10分忡后洛液就僅常均匀而WifflfII：使用异丙醇沉淀孩酸.沉淀为白色多衲残留III：核酸涯擀后为扎白色-多射视留-IV： 75%乙醉洗涤异丙醉沉淀的孩酸时沉淀变犬J'-见10-III.B紫外检测I： A260/A280比们低-蛋俣如果操作过程中使用荥酚则更可能足苯酚观留.II： A260们捉示的含L；勺电泳檢测时捉示的含fit育可见的诱痉-苯酚殘亂C电泳中的现象及可能的尿因I：加样孔右荧光-首先定有DNA的滞留：兀次多仔蛋门畋残附：如果足比牧特殊的样阳其杂历也可能导致荧光蛋 白S几乎不会彼EB染色能出

29、现荧光.则一定含有核酸.班常巨大的基因组DNA （ 50kb）.如果使用普通的琼脂枪电泳.往 往不能电泳出孔单独轿可能沛留在加样孔中产生荧光.更多的时條是比较大的DNA幻殘留的蛋白质结合后电泳不能出孔而在 孔中产生黄光的反网产物.仙聚没有经过纯化去徐酪也非常容易在孔屮出现荧光其廉因足核酸几乎都有比牧强的结合能力 （如用组DNA的PCR产物电泳往往在孔屮邹有义光.而且餐光遥度与体系的特异性成反匕 .如果是柚物样品.还可能由其 它余历残留引起我的经验是：蛋白疑留的荧光有点发闷.其它杂畋残留亮紂很刺眼且薄码悦利.II： RNA非变性电泳显示过多的条带-根本就不是问題.III：总RNA 1唆性电泳显示

30、28S不如18S亮.但条带淸晰无弥散-多提示28S没右被EB饱和.RNA视留多时.Sfflffl DNA的电泳也会有相似現象.简单的补染可以解决此问«!- fl次电泳时.或并降低I：样显.或老增加胶中EB的瓦D降解的现象、原因及对策降解的现象如果抛开何趣电泳所致.可以简单总结如2主帯不再夹出向小片段方向发生为;散.亮哎比较均衡地衮謎. 如果问时还伴随卜列的一个或冇多个现软则需要更逬步的检测：加样孔菲常的亮.弥散发生在主条帯位53的上下两个方向.从加 样孔即开始发生弥散.以现在的裂解液的农解能力而古.降解的发牛主耍足在彻底匀浆ZfW只冇极少lil山不净的洛解液导致以总RNA捕捉 为例.本站就有帖总结为，总RNA的质敷市高到低依次为悬浮紬胞、贴墜细胞、组织（此处的质fit不仅折纯度.也描充幣性才对） 彻底盘解总浮细胞的时间址短彻底裂解组织的时间站长.这就足降解多发生在彻燥匀浆ZiW的个佐证再看看新鲜样骷和冷冻 保mh菲常严洛的冷栋保存和匀浆揀作的确可以确保冷冻样品的核酸的価皿：但足冇许炙实脸室并不ji备严冷的保存乎段.实 36人员的操作也并非完关其结果就足核