动物细胞组织培养

1、2.3动物细胞工程动物细胞工程1、定义、定义:2、选材：、选材： 动物胚胎或幼龄动物的组织、器官动物胚胎或幼龄动物的组织、器官动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中让这些它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中让这些细胞生长和增殖。细胞生长和增殖。它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。分化程度低，容易培养。动物细胞培养动物细胞培养 3、动物细胞培养条件：、动物细胞培养条件：(1)、无菌、无毒的体外环境、无菌、无毒的体外环境 （添加一定量的抗生素（添加一定量的

2、抗生素 定期更换培养液定期更换培养液 ） 防止培养过程中污染防止培养过程中污染 防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害(2)(2)、培养基、培养基成分：成分：种类：种类： 天然培养基：主要取自动物血清，组织提取液，营天然培养基：主要取自动物血清，组织提取液，营养价值高，成分复杂养价值高，成分复杂合成培养基：人工配置，成分明确，便于控制试验合成培养基：人工配置，成分明确，便于控制试验条件条件葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清动物血清等等?(3)、温度和、温度和ph 36.5+（-）0.5度, 7.2-7.4(4)、气体环

3、境、气体环境 o2和和co2和植物组织培养基相比有何独特之处？和植物组织培养基相比有何独特之处？液体培养基液体培养基 、成分中有动物血清等、成分中有动物血清等4.动物细胞生长特性动物细胞生长特性：细胞贴壁：细胞贴壁： 悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。称为细胞贴壁。要求：要求： 培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。附。细胞的接触抑制：细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑就会停止分裂增殖，这种现

4、象称为细胞的接触抑制。制。 动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶10代细胞代细胞原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加培养液加培养液遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质已改变已改变5.5.过程：过程：剪碎剪碎胰蛋胰蛋白酶白酶（贴（贴壁生壁生长）长）动动物物细细胞胞培培养养原代培养：原代培养：一般细胞繁殖一般细胞繁殖1-10代代，就发生接触抑，就发生接触抑制不再分裂，这种培养就叫原代培养。制不再分裂，这种培养就叫原代培养。传代培养：传代培养：贴满瓶壁贴满瓶壁的细

5、胞由于接触抑制不再分裂，的细胞由于接触抑制不再分裂，需重用胰蛋白酶处理，再需重用胰蛋白酶处理，再分瓶分瓶培养让细胞继续增殖。培养让细胞继续增殖。细胞株：细胞株：原代细胞一般传至原代细胞一般传至10代左右生长停滞，代左右生长停滞，大部分细胞衰老死亡，少数存活到大部分细胞衰老死亡，少数存活到4050代，代，这种传代细胞为细胞株，这种传代细胞为细胞株，遗传物质不改变遗传物质不改变。细胞系：细胞系：细胞株传代至细胞株传代至50代后代后又出现细胞生长又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变遗传物质的改变，出现癌变特点，可以无限制传代，这种传代细胞出现癌变特点，可以

6、无限制传代，这种传代细胞为细胞系。为细胞系。1.胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？物质是什么成份？2.细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消细胞膜的主要成份是什么？胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？化掉吗？3.既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶散成单个细胞要注意什么问题呢？能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？代替胰蛋白酶吗？为什么？ 胰蛋白酶水解蛋白质胰蛋白酶水解蛋白质蛋白质蛋白质蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂能能注意时间的控制注意时间的控制

7、不能，因为两者的最适不能，因为两者的最适ph不同，而正常组织细不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适胞的生存环境与胰蛋白酶的最适ph较接近较接近思考讨论思考讨论5、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？新个体？成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养，使每个细胞与培养液接触液利于培养，使每个细胞与培养液接触不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，因不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，因为动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度为动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的提高而逐渐受

8、到抑制的提高而逐渐受到抑制4、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？6、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖？分裂、增殖？7、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应、如此时细胞数量并未达到人们的需求，应该怎样办？该怎样办？当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象细胞分裂就会停止分裂增殖，这种现象叫接触抑制。叫接触抑制。将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然将贴满细胞壁的细胞用胰蛋白酶处理，然后继续增殖。后继续增殖。这样的过程叫做传代培养这样的过程

9、叫做传代培养8、如何理解原代培养和传代培养？、如何理解原代培养和传代培养？9、传代培养的细胞能一直传代下去吗？、传代培养的细胞能一直传代下去吗？10、有些为何能一直传下去？、有些为何能一直传下去？在第一培养瓶中培养就是原代培养，之在第一培养瓶中培养就是原代培养，之后转移到其它培养瓶中培养就是传代培后转移到其它培养瓶中培养就是传代培养养不都能不都能发生突变，朝着癌细胞方向发展发生突变，朝着癌细胞方向发展11、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？、人类一般保存的是哪类细胞呢？为什么？保存保存10代以内的细胞，因为代以内的细胞，因为1050部分部分细胞的细胞核型可能发生变化，有少部分细胞的细胞核型可

10、能发生变化，有少部分还发生突变向癌细胞方向发展还发生突变向癌细胞方向发展细胞的全能性细胞的全能性细胞株、细胞系细胞株、细胞系植物体植物体培养结果培养结果获得细胞获得细胞或细或细胞产物胞产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株等无病毒植株等培养目的培养目的葡萄糖、动物血清葡萄糖、动物血清糖、植物激素糖、植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物组织和动物细胞培养的比较植物组织和动物细胞培养的比较6、动物细胞培养应用、动物细胞培养应用 大规模培养生产生

11、物制品（病毒疫苗、干大规模培养生产生物制品（病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体）扰素、单克隆抗体） 作为基因工程中的受体细胞作为基因工程中的受体细胞 培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，培养的动物细胞可以用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性判断某种物质的毒性 为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据据1、下列属于动物细胞工程中的工具是（、下列属于动物细胞工程中的工具是（ ） a限制性内切酶限制性内切酶 bdna连接酶连接酶 c胰蛋白酶胰蛋白酶 d果胶酶果胶酶c2、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是、在动物细胞培养的有关叙述中，正确的是（ ）a动物细胞培养的目的就是

12、为了获得大量的动物细胞培养的目的就是为了获得大量的细胞分泌蛋白细胞分泌蛋白b动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞动物细胞培养前要用胰蛋白酶处理使细胞分散分散c细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中中d培养至培养至50代后继续传代的细胞是细胞株代后继续传代的细胞是细胞株b 3.3.动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于（于（ ） a.a.培养基不同；培养基不同； b.b.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行；动物细胞培养不需要在无菌条件下进行； c.c.动物细胞可以传代培养，而植物细胞不能；动物细胞可以传代培养，而植物细胞

13、不能； d.d.动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培动物细胞能够大量培养，而植物细胞只能培 养成植株。养成植株。a4、07年江苏高考题年江苏高考题 动物细胞体外培养时，通常要在培养动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。基中补充一定浓度的某些物质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提供的信息可以响的实验结果。从该图提供的信息可以获得的正确结论有获得的正确结论有( )a正常细胞与癌细胞的增殖速率相同正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 b有无血清对正常细胞培养的影响不同有无血清对正常细胞培养的影响不同c培养基中补充血清有助于正

14、常细胞的培养基中补充血清有助于正常细胞的培养培养 d培养基中是否补充血清对癌细胞的培培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大养影响不大bcd 5 5、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此图回答、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此图回答 ( (1)1)容器容器a a中放置的是动物器官或组织。它一中放置的是动物器官或组织。它一般取自般取自_。(2)(2)容器容器a a中的动物器官或组织首先要进行的中的动物器官或组织首先要进行的处理是处理是_，然后用，然后用 酶处理，酶处理，这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是这是为了使细胞分散开来。这样做的目的是_._. (3) (3)培养首先在

15、培养首先在b b瓶中进行。瓶中的培养基瓶中进行。瓶中的培养基成分有成分有_ _等。在此等。在此瓶中培养一段时间后，一般传到第瓶中培养一段时间后，一般传到第 代代，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为_._.幼龄动物的器官或组织、动物胚胎幼龄动物的器官或组织、动物胚胎剪碎剪碎 胰蛋白胰蛋白 原代培养原代培养10葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清 使每个细胞能与培养液接触使每个细胞能与培养液接触 (4)(4)为了把为了把b b瓶中的细胞分装到瓶中的细胞分装到c c瓶中，用瓶中，用_ 处理，然后配置成处理，然后配置成

16、_，再分装。，再分装。胰蛋白酶胰蛋白酶 细胞悬浮液细胞悬浮液热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练1概念概念将将动物的一个细胞的动物的一个细胞的 ，移入一个已经去掉细胞核，移入一个已经去掉细胞核的的 中，使其中，使其 并发育成一个并发育成一个 ，最，最终发育为动物个体。终发育为动物个体。动物体细胞核移植技术和克隆动物动物体细胞核移植技术和克隆动物细胞核细胞核卵细胞卵细胞重组重组新的胚胎新的胚胎热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活

17、 页页 规规 范范 训训 练练2过程过程热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练3以克隆高产奶牛为例以克隆高产奶牛为例热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练特别提醒特别提醒(1)克隆动物的性状与核供体生物的性状克隆动物的性状与核供体生物的性状基本基本相同相同，但不是完全相同，因为：，但不是完全相同，因为：克隆动物的细胞质遗传物质来自于受体卵母细胞的细克隆动物的细胞质遗传物质来自于受体卵母细胞的细胞质。胞

18、质。生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。生物的性状不仅与遗传物质有关，还受环境的影响。个体发育过程中，遗传物质可能会发生变异。个体发育过程中，遗传物质可能会发生变异。(2)核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核遗核移植过程中细胞核只来自于一个个体，因此核遗传物质与供体的相同，属于传物质与供体的相同，属于无性繁殖无性繁殖，不会改变生物体，不会改变生物体的基因型。的基因型。热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练4应用前景应用前景(1)加加速家畜速家畜 进程，促进优良畜群繁育。进程，促进优

19、良畜群繁育。(2)保护濒危物种。保护濒危物种。(3)转基因克隆动物可作为转基因克隆动物可作为 ，生产许多医用蛋白。，生产许多医用蛋白。(4)转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体。转基因克隆动物细胞、组织和器官可作为异种移植的供体。(5)人的核移植人的核移植 经诱导分化，形成相应的组织、经诱导分化，形成相应的组织、器官后，可以用于组织器官的移植。器官后，可以用于组织器官的移植。(6)研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展过程和治研究胚胎发育及衰老过程，追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病。疗疾病。遗传改良遗传改良生物反应器生物反应器胚胎干细胞胚胎干细胞热热 点点 考考 向向 示示

20、例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体1概念概念 或或 动物细胞结合形成动物细胞结合形成 的过程，也称的过程，也称细胞杂交。细胞杂交。2原理原理 。3诱导融合的方法诱导融合的方法(1)物物理理（效率高）（效率高）、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如、化学方法：与植物体细胞杂交相同，如聚乙二醇、电激法等。聚乙二醇、电激法等。(2)生物方法：灭活的病毒。生物方法：灭活的病毒。两个两个多个多个一个细胞一个细胞细胞膜的流动性细胞膜的流动性一一.细胞融合细胞融合热热 点点 考考 向向 示示

21、 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练5结果结果形形成成 细胞。细胞。6意义意义突突破了破了 方法的局限，使方法的局限，使 成为可能。成为可能。成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和 等的等的重要手段。如：利用重要手段。如：利用 ，为制造单克隆抗体开辟，为制造单克隆抗体开辟了新途径。了新途径。杂交杂交有性杂交有性杂交远缘杂交远缘杂交生物新品种培育生物新品种培育杂交瘤技术杂交瘤技术热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规

22、 范范 训训 练练1对细胞膜融合过程的理解对细胞膜融合过程的理解热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练二二.单克隆抗体单克隆抗体1事实事实(1)b淋巴淋巴细胞特点：产生一种单一抗体，在体外细胞特点：产生一种单一抗体，在体外 (能能/不能不能)无限增殖。无限增殖。(2)骨髓瘤细胞特点：骨髓瘤细胞特点： 。(3)杂交瘤细胞特点：杂交瘤细胞特点：不能不能能无限增殖能无限增殖b淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合得到杂交瘤细胞，交瘤细胞，既能无限增殖，又能产既能无限增殖，又能产生特异性抗

23、体生特异性抗体。热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练2单克隆抗体优点：单克隆抗体优点： 、并并可大量制备。可大量制备。3单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用(1)作作为诊断试剂，具有准确、为诊断试剂，具有准确、 、简易、简易、 的优的优点。点。(2)用于治疗疾病和用于治疗疾病和 。特异性强、灵敏度高特异性强、灵敏度高高效高效快速快速运载药物运载药物热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练4.单克隆抗体的制

24、备过程：单克隆抗体的制备过程：热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练1.1.动物细胞培养过程的顺序是动物细胞培养过程的顺序是( () )。原代培养原代培养传代培养传代培养用胰蛋白酶处理组织，形用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液成分散的细胞悬液a a b b c c d d2.2.在克隆多利羊的过程中，没有运用的技术手段是在克隆多利羊的过程中，没有运用的技术手段是( () )。a a细胞培养细胞培养 b b体细胞核移植体细胞核移植c c胚胎移植胚胎移植 d d基因工程基因工程3.3.一只羊的卵细

25、胞被另一只羊的体细胞核移植后，这个一只羊的卵细胞被另一只羊的体细胞核移植后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下了一只羊羔，这种克隆技术具有多种用途，但结果产下了一只羊羔，这种克隆技术具有多种用途，但是不能是不能( () )。a a有选择地繁殖某一性别的家畜有选择地繁殖某一性别的家畜b b繁殖家畜中的优秀个体繁殖家畜中的优秀个体c c用于保存物种用于保存物种d d改变动物的基因型改变动物的基因型ddd热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范

26、 训训 练练4.4.如图为克隆羊如图为克隆羊“多利多利”的培育过程示意图。下列各项有关表述不的培育过程示意图。下列各项有关表述不正确的是正确的是( )( )a a由于细胞核基因完全来自甲羊，所以克隆羊由于细胞核基因完全来自甲羊，所以克隆羊“多利多利”的性状与的性状与甲羊完全一致甲羊完全一致b b克隆羊克隆羊“多利多利”的培育过程中采用的生物技术有核移植的培育过程中采用的生物技术有核移植c c乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条乙羊的去核卵细胞为重组细胞基因表达提供了细胞内的环境条件件d d此过程说明高度分化的动物细胞核也具有全能性此过程说明高度分化的动物细胞核也具有全能性a热

27、热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练5.5.基因型为基因型为aaaa与基因型为与基因型为bbbb的动物体细胞混合，用灭活的的动物体细胞混合，用灭活的病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞( () )。a aaaaa aaaa b baabb aabb c caabb aabb d dbbbbbbbb6.6.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和b b淋巴细胞融合淋巴细胞融合后，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养后

28、，要用特定的培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是基上不能存活增殖的细胞是( () )。b b淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞b b淋巴细胞自身融合淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞a a b b c c d d7.7.单克隆抗体与常规抗体相比优越之处在于单克隆抗体与常规抗体相比优越之处在于( () )。a a单克隆抗体能够制成单克隆抗体能够制成“生物导弹生物导弹”b b单克隆抗体可以在体外制备单克隆抗体可以在体外制备c c单克隆抗体的特异性强，灵敏度高，产量也大大高于单克隆抗体的特异性强，灵敏度高，

29、产量也大大高于常规抗体常规抗体d d单克隆抗体的制备过程简单单克隆抗体的制备过程简单c ca ac c热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练【例【例1】 回回答下列有关动物细胞培养的问题。答下列有关动物细胞培养的问题。(1)在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表在动物细胞培养过程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面面_时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的_。此时，瓶壁上形成的细胞层数是。此时，瓶壁上形成的细胞层数是_ 。要。要使贴壁的细胞从瓶壁

30、上分离下来，需要用酶处理，可用的酶使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是是_。动物细胞培养动物细胞培养相互接触相互接触接触抑制接触抑制单层单层(或一层或一层)胰蛋白酶胰蛋白酶热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_的现象，但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会的现象，但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成因遗传物质发生改变而变成_细胞，该种细

31、胞的黏着性细胞，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白糖蛋白)的量的量_。(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不被染色，原因是色，而活细胞不被染色，原因是_。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到裂到_期的细胞用显微镜进行观察。期的细胞用显微镜进行观察。(5)在细胞培养过程中，通常在在细胞培养过程中，通常在_ 条件下保存细胞。条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中因为在这种条件下，细胞中_的活性降低，

32、细胞的活性降低，细胞_的速率降低。的速率降低。衰老甚至死衰老甚至死亡亡不死性不死性降低降低减少减少由于活细胞的膜具有选择透过性，由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色活细胞不能着色中中冷冻冷冻(或超低温、或超低温、液氮液氮)酶酶新陈代谢新陈代谢热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练深度剖析深度剖析细胞增殖过程中存在接触抑制现象，需用胰蛋白酶处细胞增殖过程中存在接触抑制现象，需用胰蛋白酶处理后再分瓶培养；在细胞培养过程中，部分细胞的遗

33、传物质会发理后再分瓶培养；在细胞培养过程中，部分细胞的遗传物质会发生改变，会增加细胞分裂的次数；活细胞的细胞膜具有选择透过生改变，会增加细胞分裂的次数；活细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料无法进入细胞内部，因此不能着色。性，大分子染料无法进入细胞内部，因此不能着色。答案答案(1)相相互接触接触抑制单层互接触接触抑制单层(或一层或一层)胰蛋白酶胰蛋白酶(2)衰衰老甚至死亡不死性降低减少老甚至死亡不死性降低减少(3)由于活细胞的膜具有选择由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色内，故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过

34、性，或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色大分子染料能够进入死细胞内而着色)(4)中中(5)冷冻冷冻(或超低温、或超低温、液氮液氮)酶新陈代谢酶新陈代谢(6)抗原抗原热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练【例【例2】 右右图为某哺乳动物的生殖过程图，图为某哺乳动物的生殖过程图，正确的叙述是正确的叙述是 ()。a个体个体2为克隆动物，为克隆动物，c为高度分化的为高度分化的体细胞体细胞b个体个体2的遗传性状与提供的遗传性状与提供b细胞的母细胞的母羊完全不同羊完全不同c产生动

35、物个体产生动物个体2的生殖方式为有性生殖的生殖方式为有性生殖de细胞为完成减数分裂的卵细胞细胞为完成减数分裂的卵细胞动物体细胞核移植和克隆动物动物体细胞核移植和克隆动物热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练深度剖析深度剖析通过克隆技术培育的动物称为克隆动物，提供细胞核通过克隆技术培育的动物称为克隆动物，提供细胞核的是高度分化的体细胞，的是高度分化的体细胞，a项正确；项正确；b项考虑细胞质基因，应该项考虑细胞质基因，应该是是“有相同之处有相同之处”；动物的克隆实际上是无性生殖过程，；动物的克隆实际上

36、是无性生殖过程，c项错项错误；误；e细胞是处于减数第二次分裂中期的卵母细胞，并没有完全细胞是处于减数第二次分裂中期的卵母细胞，并没有完全完成减数分裂，完成减数分裂，d项错误。项错误。答案答案a热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规 范范 训训 练练【巩固【巩固2】 世世界上第一只克隆绵羊界上第一只克隆绵羊“多利多利”的培育程序如下图所的培育程序如下图所示，请看图回答下列问题。示，请看图回答下列问题。热热 点点 考考 向向 示示 例例随随 堂堂 达达 标标 检检 测测课课 堂堂 互互 动动 探探 究究活活 页页 规规

37、 范范 训训 练练(1)写出图中写出图中、所指的生物工程名称：所指的生物工程名称：_；_。(2)实施细胞工程实施细胞工程时，所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原时，所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是：因是：_。(3)“多利多利”面部的毛色是面部的毛色是_，请根据遗传学原理说明判断，请根据遗传学原理说明判断根据：根据：_。(4)继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证明动物细胞的继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证明动物细胞的细胞核也具有细胞核也具有_。(5)请举一例，说明克隆绵羊培育成功的实际意义。请举一例，说明克隆绵羊培育成功的实际意义。_。细胞核移植细胞核移植胚胎移植胚胎移植卵细胞体积大、易操作；卵细胞含营养物质多卵细胞体积大、易操作；卵细胞含营养物质多白色