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文档简介

1、青狐尾草丛生芽诱导探究摘要将青狐尾草作为研究c4光合作用的模式植物,其转 化体系还不成熟。由成熟种子胚诱导的愈伤组织再生获得植 株效率较低,该试验对比含有不同浓度的6-ba和2, 4-d诱 导培养基对青狐尾草的丛生芽诱导效果,结果表明:改良后 的ms培养基并添加6-ba 2 mg/l和2, 4-d 0. 5 mg/l组成 的诱导培养基效果较好。因此,为青狐尾草的遗传转化寻找 到一种比较好的转化对象。关键词青狐尾草;丛生芽;6-ba; 2, 4-d;诱导培养 基中图分类号q943. 1文献标识码a文章编号 1007-5739 (2012) 22-0153-01青狐尾草是nadp-me型的c4植物

2、,为单子叶植物1, 是研究c4光合作用方面具有较大潜能的模式植物2。但在 单子叶植物的遗传转化中,利用组织培养获得再生植株效率 很低。因此,该试验探索了丛生芽的诱导浓度。1材料与方法1.1种子的灭菌及播种用次氯酸钠溶液灭菌后,将种子稍稍晾干,用药匙均匀 撒在ms基本培养基上。1. 2外植体获得将培养皿放在培养箱中置于(23±2) °c.黑暗条件下 萌发。34 d后种子开始萌发,在胚轴生长到0. 52. 0 cm时, 切取幼苗的芽尖放在诱导培养基上诱导丛生芽。根据姜素云等黑麦草丛生芽的培养方法3,设置了含 有不同浓度6-ba和2, 4-d的诱导培养基(表1)。ms基本 培养基

3、选用康奈尔大学burtnell实验室培养青狐尾草愈伤 组织的ms基本培养基配方。1. 3培养条件培养的条件为:18 h时光照,6 h黑暗;光照强度为 600800 lx;温度(23±2) °co 2周后形成丛生芽块,可 看到明显膨大的叶鞘。将叶鞘和幼叶剥离丛生芽块,计算丛 生芽的芽原基数及芽尖数。2结果与分析播种在基本培养基上的青狐尾草种子暗培养35 d后, 大部分开始萌发。在黑暗条件下,下胚轴伸长较快,在芽轴 长度小于2 cm时将0. 5 mm的芽尖切下摆放在诱导培养基上, 每皿可摆放25个芽尖。在丛生芽的诱导过程中,外源激素的浓度配比非常重 要。通过统计诱导出的芽尖数和

4、平均芽原基数,选择效果较 好的浓度。通过对比发现,当2, 4-d浓度为0. 5mg/l. 6-ba 浓度为2 mg/l时,产生丛生芽的芽尖数、平均芽原基数最 多。因此,选择培养基g为诱导培养基(表2)。3讨论在诱导培养过程中,2, 4-d与细胞分裂有关,6-ba与 植株再生细胞的分化有关4-6 o通过对比不同激素组合的 诱导培养基的诱导效果,在不含2, 4-d和6-ba的培养基中, 芽尖很快褐化死亡;在6-ba浓度低于2 mg/l、2, 4-d浓度 低于0.5 mg/l时,产生丛生芽的芽尖数较少,大部分芽尖 死亡;当6-ea浓度高于2 mg/l时,不管2, 4-d浓度高低, 芽尖切口产生的白色

5、细胞团较小,细胞分裂少,进而产生的 丛生芽芽原基很少,而且芽尖容易生长成为绿色叶片,不再 具有分裂能力;当6-ba浓度适宜、2, 4-d浓度过高时,芽 尖切口细胞能力较强,容易分裂膨大为一个细胞团,水渍化 严重,后期不容易转变为丛生芽,分化能力不强。通过对比 发现,当2, 4-d浓度为0. 5 mg/l、6-ba浓度为2 mg/l时, 产生丛生芽的芽尖数、平均芽原基数最多。因此,选择该激 素组合添加入诱导培养基中,其与已有的再生体系相比,青 狐尾草丛生芽获得再生植株比较容易,被认为是一个比较好 的转化材料7-9 o4参考文献1 kellogg e a. phylogenetic aspects

6、 of the evolution of c4 photosynthesism/r f sage, monson r k, c4 plant biology. san diego, ca: academic press, 1999: 411-444.2 zhu x g , long s p , ort d r. improving photosynthetic effciency for greater yieldj. ann rev plant biol, 2010, 61 (10): 235-261.3 姜素云,胡孝瑞,晁相蓉,等黑麦草高效丛生芽 的发生及离体开花的初步研究j.草业学报,2005, 14 (6): 100-106.4 孙骏威,方晓峰,陈珍不同植物生长调节剂对黄 秋葵组织培养的影响j北方园艺,2012 (7): 139-141.5 庾韦花,蒙平,张向军,等.牛尾菜丛生芽诱导及 再生体系研究j 广西农业科学,2010, 41 (7): 646-648.6 韦莹,李力,张占江,等.罗河石斛的组织培养与 快速繁殖j.植物生理学报,2010 (12): 1257-1258.7 罗晓青,蒙秋伊,查兰松,等兴仁金线莲丛生芽 诱导增殖研究j.安徽农业科学,2012, 40 ( 22 ): 11231-11232, 11260.8 杨清林,管天冰,戴传天.台湾

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