青狐尾草丛生芽诱导探究

1、青狐尾草丛生芽诱导探究摘要将青狐尾草作为研究c4光合作用的模式植物，其转 化体系还不成熟。由成熟种子胚诱导的愈伤组织再生获得植 株效率较低，该试验对比含有不同浓度的6-ba和2, 4-d诱 导培养基对青狐尾草的丛生芽诱导效果，结果表明：改良后 的ms培养基并添加6-ba 2 mg/l和2, 4-d 0. 5 mg/l组成 的诱导培养基效果较好。因此，为青狐尾草的遗传转化寻找 到一种比较好的转化对象。关键词青狐尾草；丛生芽；6-ba； 2, 4-d；诱导培养 基中图分类号q943. 1文献标识码a文章编号 1007-5739 (2012) 22-0153-01青狐尾草是nadp-me型的c4植物

2、，为单子叶植物1, 是研究c4光合作用方面具有较大潜能的模式植物2。但在 单子叶植物的遗传转化中，利用组织培养获得再生植株效率 很低。因此，该试验探索了丛生芽的诱导浓度。1材料与方法1.1种子的灭菌及播种用次氯酸钠溶液灭菌后，将种子稍稍晾干，用药匙均匀 撒在ms基本培养基上。1. 2外植体获得将培养皿放在培养箱中置于（23±2） °c.黑暗条件下 萌发。34 d后种子开始萌发，在胚轴生长到0. 52. 0 cm时, 切取幼苗的芽尖放在诱导培养基上诱导丛生芽。根据姜素云等黑麦草丛生芽的培养方法3,设置了含 有不同浓度6-ba和2, 4-d的诱导培养基（表1）。ms基本 培养基

3、选用康奈尔大学burtnell实验室培养青狐尾草愈伤 组织的ms基本培养基配方。1. 3培养条件培养的条件为：18 h时光照，6 h黑暗；光照强度为 600800 lx；温度（23±2） °co 2周后形成丛生芽块，可 看到明显膨大的叶鞘。将叶鞘和幼叶剥离丛生芽块，计算丛 生芽的芽原基数及芽尖数。2结果与分析播种在基本培养基上的青狐尾草种子暗培养35 d后， 大部分开始萌发。在黑暗条件下，下胚轴伸长较快，在芽轴 长度小于2 cm时将0. 5 mm的芽尖切下摆放在诱导培养基上, 每皿可摆放25个芽尖。在丛生芽的诱导过程中，外源激素的浓度配比非常重 要。通过统计诱导出的芽尖数和

4、平均芽原基数，选择效果较 好的浓度。通过对比发现，当2, 4-d浓度为0. 5mg/l. 6-ba 浓度为2 mg/l时，产生丛生芽的芽尖数、平均芽原基数最 多。因此，选择培养基g为诱导培养基（表2）。3讨论在诱导培养过程中，2, 4-d与细胞分裂有关，6-ba与 植株再生细胞的分化有关4-6 o通过对比不同激素组合的 诱导培养基的诱导效果，在不含2, 4-d和6-ba的培养基中， 芽尖很快褐化死亡；在6-ba浓度低于2 mg/l、2, 4-d浓度 低于0.5 mg/l时，产生丛生芽的芽尖数较少，大部分芽尖 死亡；当6-ea浓度高于2 mg/l时，不管2, 4-d浓度高低, 芽尖切口产生的白色

5、细胞团较小，细胞分裂少，进而产生的 丛生芽芽原基很少，而且芽尖容易生长成为绿色叶片，不再 具有分裂能力；当6-ba浓度适宜、2, 4-d浓度过高时，芽 尖切口细胞能力较强，容易分裂膨大为一个细胞团，水渍化 严重，后期不容易转变为丛生芽，分化能力不强。通过对比 发现，当2, 4-d浓度为0. 5 mg/l、6-ba浓度为2 mg/l时, 产生丛生芽的芽尖数、平均芽原基数最多。因此，选择该激 素组合添加入诱导培养基中，其与已有的再生体系相比，青 狐尾草丛生芽获得再生植株比较容易，被认为是一个比较好 的转化材料7-9 o4参考文献1 kellogg e a. phylogenetic aspects

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