痹痛方镇痛抗炎作用探究

1、痹痛方镇痛抗炎作用探究摘要：目的：观察痹痛方镇痛抗炎方面药效学作用，探讨 其治疗类风湿性关节炎的药理学基础。方法：镇痛实验用热 板法与扭体法；抗炎实验采用毛细血管通透性实验、棉球肉 芽肿实验及佐剂性关节炎模型；观察药物对内毒素引起的 tnf-a产生的影响。结果：在热板法与扭体法实验中痹痛方 能明显提髙小鼠痛阈；具有抑制毛细血管通透性、减轻棉球 肉芽肿质量；显著抑制大鼠佐剂性关节炎急性足爪肿胀，对 继发性的足肿胀也有明显的抑制作用。并能明显减少内毒素 引起的tnf-a产生。结论：痹痛方具有明显镇痛抗炎作用。 镇痛作用机制可能通过外周与中枢两种机制介导；而免疫调 节作用可能为其抗风湿炎症的机制之一

2、。关键词：痹痛方；类风湿性关节炎；镇痛；抗炎；肿瘤 环死因子中图分类号：r285. 5文献标识码：a文章编号:1673-7717 (2007) 04-0788-03痹痛方多年来在临床主要用于治疗类风湿性关节炎，具 有一定的临床疗效。主要由全蝎、蟆蚣、制附子、川苇、延 胡索、芍药、丹皮等组成，具有搜风通络、行气止痛等功效。 本试验利用弗氏完全佐剂诱导的大鼠佐剂性关节炎(adjuvant arthritis, aa)等模型，从动物实验角度对痹 痛方的镇痛抗炎作用进行药效学评价。1材料与方法1. 1实验动物与试剂nih小鼠，普通级，bw (20±1) g, 雌雄兼用；sd大鼠，普通级，bw

3、 (200±5) g,雄性，均由 广东省医学实验动物中心提供。盐酸布洛芬(ibuprofen中 美史克)、醋酸泼尼松片(prednisone,仙居制药)，弗氏完 全佐剂(gibcobrl)o 脂多糖(lipololysaccharide,lps, from escherichia coli0111：b4 sigma) o tnf- a elisa 测试盒 (rnd)o痹痛方为院内制剂，由中药饮片水提浓缩而成，实 验中用蒸溜水配成所需浓度。小剂量每ml含0.3g生药，大 剂量每ml含0. 6g生药。本研究中小鼠实验给药20ml/kg体 重、大鼠给药10ml/kg体重。1.2小鼠热板实验

4、11nih小鼠置于(55±0.5) £的水 浴烧杯上，以舔后足所需时间为痛阈(s),各组动物均测两 次给药前的正常阈值，取平均值为基线，剔除基线阈值在30s 以上、阈值10s以内以及跳跃的小鼠。然后分组给药。对照组给等容积蒸憎水，小剂量组给0. 3g/ml痹痛方20ml/kg；大剂量组给0. 6g/ml痹痛方20ml/kg,西药组灌胃给盐酸布诺芬0. 0105g/kg,给药后30、60、90、120min分别测各组小鼠的痛阈，如小鼠在热板上60s仍无痛反应，取出按60s1.3小鼠扭体实验2 nih小鼠分别给等容积蒸馆水、 小剂量中药、大剂量中药及盐酸布诺芬(0.0105 g

5、/kg),给 药后0.5 h,每只小鼠腹腔注射0.6%醋酸0.加l,观察注射 后20min内各鼠的扭体反应次数。1.4小鼠腹腔毛细血管通透性实验31nih小鼠同上给药 0. 5h后尾静脉注射0. 5%伊文斯蓝生理盐水溶液10ml/kg bw, 随即腹腔注射0.6%醋酸10ml/kgbw, 20min后脱颈椎处死， 剪开腹部皮肤肌肉，用6ml生理盐水分数次洗涤腹腔，吸管 吸出洗涤液、合并后加入生理盐水至10ml, 3000r/min离心 15min；取上清液于590nm比色测定od值。1.5大鼠棉球肉芽肿实验3sd大鼠雄性，乙瞇麻醉左 侧腹股沟皮下切口，植入灭菌棉球30mg,分组连续给药7天 (

6、对照组每天给予等容积水，小剂量组给0.3g/ml痹痛方 10ml/kg,大剂量组给0. 6g/ml痹痛方10ml/kg,西药组给醋 酸泼尼松片0. 005g/kg),8天颈椎脱臼处死，取出棉球在6(tc 烘箱放置12h称重，减去原棉球重量即为肉芽肿净重。1.6佐剂关节炎实验4sd大鼠，测左、右足容积，取 均值作为给药前容积，右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂 0. iml,对照组不注射佐剂。每天各组动物给予相应受试药 物，对照组与模型组每天给予等容积水，小剂量组给0. 3g/ml 痹痛方10ml/kg,大剂量组给0. 6g/ml痹痛方10ml/kg,西 药组给醋酸泼尼松片0. 005g/kgo动物每天给药1次，连续 30天。给予佐剂后2、5、10、15、20、25、30天测右足容 积1次，并于第10天起加测左足容积。足肿胀度计算方法: 肿胀度（）=（致炎后足容积-致炎前足容积）/致炎前足容 积。1.7内毒素诱导佐剂关节炎大鼠tnf-a产生5上述佐 剂关节炎实验第30天，每只大鼠给予腹腔注射looug/kg 月旨多糖 （lipololysaccharide, lps, fr