L-鸟氨酸盐酸盐细菌内毒素检查方法的建立

1、l-鸟氨酸盐酸盐细菌内毒素检查方法的建鸟氨酸(c5h12n202)是一种碱性氨基酸。在生物体内，鸟 氨酸主要参与鸟氨酸循环(ornithine cycle),又称尿素循 环(urea cycle),将有毒的氨转化为无毒的尿素并排出体外, 对于体内氨态氮的排出有重要作用。其l-鸟氨酸盐酸盐常 用于生产复方氨基酸注射液，临床用于预防和治疗肝性脑 病、肝病或肝性脑病急性期的静脉营养、其他原因引起营养 不良的肠道外营养治疗。对于静脉注射的药品，热原(细菌 内毒素)检查是控制药品质量的关键项目。目前，国内外药典均未收载l-鸟氨酸盐酸盐的细菌内毒素检查方法，也未见该品种细菌内毒素检查方法的报道。为更好地控

2、制其质 量，保证临床用药安全，笔者通过实验，探讨采用鲨试剂检l-鸟氨酸盐酸盐中细菌内毒素的可行性,现报道如下。1实验药品1.1供试品l-鸟氨酸盐酸盐(无锡某氨基酸有限公司，批号：013060k 0130602、0130603,规格：原料药，包装:每袋5 g)o1.2鳖试剂(tal) tali：湛江安度斯生物有限公司，批号: 1209271,规格：0.5 ml,标示灵敏度=0. 25 eu/ml;tal2： 湛江博康海洋生物有限公司，批号：130525l规格:0.5ml, 标示灵敏度=0. 25eu/ml;tal3：湛江安度斯生物有限公司， 批号：1305132 ,规格：0. 1 ml ,标示灵

3、敏度二0. 06 eu/ml;tal4：湛江博康海洋生物有限公司，批号：1304190, 规格:0. 1 ml,标示灵敏度=0. 06 eu/mlo1.3细菌内毒素工作标准品中国食品药品检定研究院，批号：150601-201174,每支含细菌内毒素160 eu。1.4细菌内毒素检查用水（bet水）湛江安度斯生物有限公司，批号：1103110,规格:50 ml,内毒素含量0. 003 eu/mlo2方法与结果按中国药典2010年版二部附录xi e细菌内毒素检查法项下凝胶法，以及中国药品检验标准操作规范2010年 版进行试验。2.1供试品细菌内毒素限值（l）的确定l-鸟氨酸盐酸盐 主要用于生产复方

4、氨基酸注射液，目前尚无单方注射用制 剂，因此，不能采用中国药典2010年版二部附录xi e规 定的方法确定其细菌内毒素限值。目前国外药典亦无该产品 的细菌内毒素检查方法。经查阅中国药典2010年版二部，用于生产复方氨基 酸注射液的各种氨基酸原料药的细菌内毒素限值大致在6eu/g（组氨酸）至50 eu/g（色氨酸）。为保证临床用药安全， 并结合生产厂家的产品质量控制能力，将本品的细菌内毒素 限值（l）定为5 eu/go2.2蛍试剂灵敏度复核按细菌内毒素检查法项下方法进行，结果tali的灵敏度测定值c为0. 125eu/ml,tal2的c 为 0. 25 eu/ml, tal3 和 tal4 的

5、c 均为 0. 06 eu/mlo 4 批 蠻试剂的c均在0.52范围内，均符合规定，可用于试 验。2. 3供试品干扰试验2. 3. 1预实验 目前市售蠻试剂灵敏度 在0.50.03 eu/ml o由公式c二/l计算，供试品溶液的浓度范围应为1006 mg/mlo2. 3.2干扰试验1取3批供试品，用bet水分别制成25 mg/ml的供试品溶液，再用bet水及供试品溶液将同一 支细菌内毒素工作标准品制成05eu/ml、025eu/ml、0125 eu/ml. 0. 06 eu/ml的系列浓度。分别用tali和tal2进 行实验，每一内毒素浓度重复4管，同时设阴性对照（nc）。3结论根据上述实验结果，l-鸟氨酸盐酸盐可采用细菌内毒素检查法（凝胶限度试验），采用灵敏度0. 06eu