原料药中杂质的控制与案例分析药品生物制品检定所胡昌勤ppt课件

1、抗生素室抗生素室纯度控制纯度控制杂质控制杂质控制杂质谱杂质谱控制控制第一次飞跃第一次飞跃第二次飞跃第二次飞跃抗生素室头孢泊肟酯有关物质分析的头孢泊肟酯有关物质分析的hplc色谱图色谱图1=头孢泊肟，2=去甲氧基头孢泊肟酯异构体a，3=头孢泊肟酯异构体a，4=去甲氧基头孢泊肟酯异构体b+3异构体，5=头孢泊肟酯异构体b+反式头孢泊肟酯a，6=反式头孢泊肟酯b，7=n-甲酰基头孢泊肟酯异构体a，8=nac-cpod-prx异构体a，9=n-甲酰基头孢泊肟酯异构体b，10=n-乙酰基头孢泊肟酯异构体b，11=头孢泊肟酯开环二聚体a，12=头孢泊肟酯开环二聚体b抗生素室杂质谱控制的整体解决方案杂质谱控

2、制的整体解决方案抗生素室uq3a： 新原料药中的杂质新原料药中的杂质uq3b： 新药制剂中的杂质新药制剂中的杂质uq3c： 残留溶剂残留溶剂化学药品杂质研究的技术指导原则化学药品杂质研究的技术指导原则抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室（以原料药的响应因子计）抗生素室抗生素室抗生素室nsohhohnnsnoh2nch3och3oco2na抗生素室hnor1nsocoohr2hnor1hnsocoohr2hnor1h2chnsr2coohohnscoohr2or1conhnscoohr2or1conhhhb:抗生素室nscoohr2or1conhhhnscoohr2or1conhhnscoohr2r

3、1conhhnscoohr2or1conhhho-抗生素室hncohcnh2r1nsocoohr2r1nhhnoo分子结构中7位碳侧链上有-氨基的头孢菌素，如头孢氨苄、头孢羟氨苄、头孢拉定、头孢来星、头孢克罗等药物，还可发生分子内亲核反应，生成哌嗪二酮衍生物的降解物 抗生素室nscoohrnhnh2oo6nhnh2o6ohn6nho具有苯苷氨酸侧链的-内酰胺抗生素可以降解为2-羟基-3-苯基吡嗪衍生物，这种化合物具有荧光特性，头孢克洛、氯碳头孢均会产生这种降解产物。 抗生素室hnor1nsocoohch2ococh3hnor1nsocoohch2ohhnor1nsoch2oo当3位碳上的取代基

4、为乙酰氧甲基时，易脱去乙酰基，形成脱乙酰基降解物。在加热、酸性等条件下，可进一步进行分子内部环和，此时生成的主要降解产物为内酯。 抗生素室头孢曲松、头孢噻肟、头孢它啶、头孢地尼等有甲氧亚氨键的头孢菌素均会产生e-异构体，多数在光照的情况易发生此类反应。 抗生素室hnor1nsocoohch2ococh3hnor1nsocoohch2ohhnor1nsoch2oo当3位碳上的取代基为乙酰氧甲基时，易脱去乙酰基，形成脱乙酰基降解物。在加热、酸性等条件下，可进一步进行分子内部环和，此时生成的主要降解产物为内酯。 1. 杂质杂质b、杂质、杂质e可以源于头孢噻肟的降解可以源于头孢噻肟的降解抗生素室抗生素

5、室抗生素室2. 杂质杂质e可以源于起始原料可以源于起始原料3. 杂质杂质e可以源于合成中的可以源于合成中的任一中间过程任一中间过程抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室加替沙星及其十种杂质对照品的色谱图加替沙星及其十种杂质对照品的色谱图加替沙星注射液杂质谱分析加替沙星注射液杂质谱分析 色谱条件：以三乙胺磷酸溶液 三乙胺溶液（1100），用磷酸调节ph值至4.30.05-乙腈（87：13）为流动相，检测波长为325nm，柱温为30，流速为每分钟1ml。 色谱柱:shiseido capcell pak c18抗生素室加替沙星及加替沙星及10个已知杂质的结构式个已知杂质的结构式 抗生素室主要杂质

6、是杂质主要杂质是杂质3和杂质和杂质8生产工艺杂质生产工艺杂质原料的杂质谱分析原料的杂质谱分析抗生素室光照稳定性评价光照稳定性评价 比较光照前后各杂质含量的变化比较光照前后各杂质含量的变化 按随机取按随机取19批样品批样品 uv灯下照射灯下照射10天天 杂质杂质2、杂质杂质4是与光照稳定性密切相关的杂质是与光照稳定性密切相关的杂质 大多数喹喏酮类抗生素对光不稳定，什么是光降解杂质？大多数喹喏酮类抗生素对光不稳定，什么是光降解杂质？抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室如何验证？如何验证？抗生素室jcps，2010，19（4）：285292抗生素室抗生素室抗生素室药物分析杂志，待

7、发表抗生素室抗生素室抗生素室jpba，2009, 49(5): 11921202抗生素室抗生素室 抗生素室抗生素室jpba，2008, 46(3):431-441抗生素室药物杂质的可能来源药物杂质的可能来源抗生素室抗生素室1.原料：原料：红霉素 a、红霉素 b、红霉素 c、红霉素d、红霉素 e、红霉素 f、阿奇霉素b、阿奇霉素c、阿奇霉素e、阿奇霉素f2.中间体：中间体：红霉素a肟（z）、6，9-亚胺醚、氮红霉素a、红霉素a肟（e）、红霉素 c肟（e）、9，11-亚胺醚、红霉素c 6，9-亚胺醚、红霉素a内酰胺 3.副产物：副产物：红霉素-n-氧化物、n-去甲基红霉素a、n-去甲基阿奇霉素a、

8、氨基阿奇霉素a、n-甲酰基-n去甲基阿奇霉素a、n-去甲基-n-苯磺酰基阿奇霉素、阿奇霉素n-氧化物、3-去（二甲氨基）- 3,4-去氢阿奇霉素、 o-甲苯磺酰基红霉素肟、红霉素z肟重排物、氮红霉素11，12-硼酸酯、 n，n-去二甲基n-甲酰基阿奇霉素a、丙基阿奇霉素、3-n， n-去二甲基氨基-酮基阿奇霉素a、阿奇霉素11，12-硼酸酯4.降解产物：降解产物：去克拉克定糖阿奇霉素a、去克拉克定糖氮红霉素、红霉素8， 9-脱水-6，9-半缩酮、红霉素6，9：9，12-螺缩酮阿奇霉素中可能存在的杂质：阿奇霉素中可能存在的杂质：37种种抗生素室模拟色谱图色谱图实际色谱图实际色谱图抗生素室抗生素室

9、抗生素室抗生素室抗生素室样品样品对照对照kav=0抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室头孢地嗪钠头孢地嗪钠 头孢呋辛酯头孢呋辛酯 tskgel g2000hhr 头孢丙烯头孢丙烯 tskgel g2500pwxl 法罗培南法罗培南 tskgel g2000hhr tskgel g2000swxl tskgel g2000swxl 抗生素室sephadex g10 与tsk柱比较62g10柱结果与tsk柱结果的相关性13.70014.67815.54617.33420.11022.26026.973au0.000.020.040.060.080.100.120.14分钟0.002.004.006.0

10、08.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0028.00sephadex g10 tsk聚合物其他聚合物二聚物抗生素室抗生素室头孢泊肟酯有关物质分析的头孢泊肟酯有关物质分析的hplc色谱图色谱图1=头孢泊肟，2=去甲氧基头孢泊肟酯异构体a，3=头孢泊肟酯异构体a，4=去甲氧基头孢泊肟酯异构体b+3异构体，5=头孢泊肟酯异构体b+反式头孢泊肟酯a，6=反式头孢泊肟酯b，7=n-甲酰基头孢泊肟酯异构体a，8=nac-cpod-prx异构体a，9=n-甲酰基头孢泊肟酯异构体b，10=n-乙酰基头孢泊肟酯异构体b，11=头孢泊肟酯开环二聚体头孢泊肟

11、酯开环二聚体a，12=头孢泊肟酯开环二聚体头孢泊肟酯开环二聚体b抗生素室中国新药杂志 ,2008,17(24):23抗生素室中国药学杂志, 2009，44（23）：1821抗生素室抗生素室sephadex g-10系统系统tsk-gel g2000swxl系统系统 柱切换技术柱切换技术0.8ml/mintsk系统系统0.5ml/minc18系统系统抗生素室抗生素室抗生素室批次及批量批次及批量生产日期生产日期生产地点生产地点生产工艺生产工艺产品中单个杂质含量及杂质总量产品中单个杂质含量及杂质总量批次用途批次用途使用的分析方法使用的分析方法抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室利用色谱相关光谱法追踪色利

12、用色谱相关光谱法追踪色谱峰不同色谱系统中的位置谱峰不同色谱系统中的位置抗生素室抗生素室抗生素室u根据杂质来源，产生条件，结合根据杂质来源，产生条件，结合母核母核的质谱裂解规律的质谱裂解规律推断杂质的可能结构推断杂质的可能结构抗生素室头孢菌素类抗生素质谱裂解的一头孢菌素类抗生素质谱裂解的一般规律般规律 青霉素类抗生素质谱裂解的一青霉素类抗生素质谱裂解的一般规律般规律 抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室aca，535：89-99, 2005抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室抗生素室figure 4. effects of mmtd and tda on

13、the zebrafish embryonic development (3-dpf). a-d: the embryos treated with mmtd at 10 g/ml (a), 100 g/ml (b), 300 g/ml (c) and at 500 g/ml (d). e-h: the embryos treated with tda at 100 g/ml (e,f), 300 g/ml (g) and at 500 g/ml (h); i,j: normal embryos as controls at a lateral view (i) and a dorsal vi

14、ew (j). hemorrhage of brain areas is indicated by white arrow, opaque yolk and ye by red arrow, deficient eyes are by slight-blue arrows, colorless and cord-like hearts and enlarged pericardial sacs by yellow arrows, ripple-like notochords by orange arrows.抗生素室抗生素室抗生素室 (a) 5dpf 幼体头部侧面，示 眼窝上 (so1 and so2), 耳囊(o1) 和枕部的 (oc1)的神经丘；(b) o1神经丘毛细胞双染色fm 1-43(红) 和 yo-pro-1 (绿). (c) fm 1-43染色； (d). yo-pro-1 染色。 scale bar = 50 um (a); 10 um (bd).hearing research 213 (2006) 2533抗生素室药物耳毒性检测药物耳毒性检测利用一种特殊染料对斑马鱼幼体头部耳蜗区神经丘毛细胞的染色，检测毛细胞的存活状态，来判断检测物的耳毒性。下图中红色圈示耳蜗区域；给药组