实验8——Vc含量的测定

1、实验八：实验八：VC含量的测定含量的测定（2, 6-二氯靛酚法）二氯靛酚法）1. 引言引言 维生素维生素C是一种己糖醛基酸，有抗坏血病是一种己糖醛基酸，有抗坏血病的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素的作用，所以又称作抗坏血酸。维生素C广泛广泛存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特存在于植物组织中，新鲜的水果、蔬菜，特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑桔等食品中含量尤丰富。桔等食品中含量尤丰富。 OOHOOHOHOHH 维生素维生素C是一种水溶性维生素，是一种水溶性维生素，在酸性介在酸性介质中很稳定，既使加热也不破坏质中很稳定，既使加热也不破坏；但在碱性；

2、但在碱性介质中不稳定，易于分解，特别在碱性条件介质中不稳定，易于分解，特别在碱性条件下加热，可大部分或全部破坏。它们易受空下加热，可大部分或全部破坏。它们易受空气、光、热、酶、金属离子等的影响。气、光、热、酶、金属离子等的影响。 维生素维生素C具有较强的还原性，氧化后的具有较强的还原性，氧化后的产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性产物称为脱氢抗坏血酸，仍然具有生理活性，进一步水解则生成，进一步水解则生成2, 3-二酮古乐糖酸，失二酮古乐糖酸，失去生理作用。去生理作用。CCCHCH2OHOHHOHCCOOOH14CCCHCH2OHOHOHCCOOO142H2H还原型还原型氧化型氧化型2. 实验

3、原理实验原理 还原型抗坏血酸能还原染料还原型抗坏血酸能还原染料2, 6-二氯靛二氯靛酚，本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，酚，本身则氧化为脱氢型。在酸性溶液中，2, 6-二氯靛酚呈红色，还原后变为无色二氯靛酚呈红色，还原后变为无色 。一。一旦溶液中的旦溶液中的VC全部被氧化时，则滴下的染料全部被氧化时，则滴下的染料立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无立即使溶液变成粉红色。所以，当溶液从无色变成微红色时即表示溶液中的色变成微红色时即表示溶液中的VC刚刚全部刚刚全部被氧化，此时即为滴定终点。被氧化，此时即为滴定终点。 2, 6-二氯靛酚：二氯靛酚：氧化态：氧化态：深蓝色深蓝色 还原态：无色还原态

4、：无色碱碱 性：性：深蓝色深蓝色 酸酸 性：性：浅红色浅红色 3. 实验材料、仪器与试剂实验材料、仪器与试剂材料：材料：枣枣仪器：仪器：三角瓶、研钵、移液管、漏斗、铁架三角瓶、研钵、移液管、漏斗、铁架 台、容量瓶，滴定管、分析天平台、容量瓶，滴定管、分析天平试剂：试剂： 2%草酸溶液草酸溶液 标准抗坏血酸溶液（标准抗坏血酸溶液（0.2mg/mL） 0.02% 2, 6-二氯靛酚二氯靛酚4. 实验步骤实验步骤（1）样品处理：）样品处理：称取称取4g枣枣，放在研钵中，加入，放在研钵中，加入少许少许2%草酸溶液研碎，再转入草酸溶液研碎，再转入100mL容量瓶中容量瓶中，加，加2%草酸定容至刻度，过滤

5、备用。草酸定容至刻度，过滤备用。（2）2, 6-二氯靛酚溶液的标定：二氯靛酚溶液的标定：取取5mL标准抗标准抗坏血酸溶液于坏血酸溶液于150mL三角瓶中，加入三角瓶中，加入5mL2%草草酸溶液，用酸溶液，用2, 6-二氯靛酚溶液滴定至微红色，且二氯靛酚溶液滴定至微红色，且15s不褪色。计算出不褪色。计算出1mL染料相当于抗坏血酸的染料相当于抗坏血酸的毫克数。毫克数。另取另取2%草酸溶液草酸溶液10mL做空白。做空白。滴定度滴定度T（mg/mL）= V1-V2CVT：每：每mL2, 6-二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数C：抗坏血酸的浓度，：抗坏血酸的浓度，mg

6、/mLV：吸取抗坏血酸的体积，：吸取抗坏血酸的体积，mLV1：滴定抗坏血酸消耗染料的体积，：滴定抗坏血酸消耗染料的体积，mLV2：滴定空白消耗染料的体积，：滴定空白消耗染料的体积，mL（3）样品溶液的测定：）样品溶液的测定：吸取滤液吸取滤液10mL，用，用已标定的已标定的2, 6-二氯靛酚溶液滴定至出现微红二氯靛酚溶液滴定至出现微红色，且色，且15s不褪色为止，记下消耗染料的体积不褪色为止，记下消耗染料的体积。同时，取。同时，取10mL2%草酸做空白实验。草酸做空白实验。5. 结果计算结果计算T：滴定度（：滴定度（mg/mL）W：样品的质量（：样品的质量（g）V1：滴定样品消耗染料的体积（：滴

7、定样品消耗染料的体积（mL）V2 ：滴定空白消耗染料的体积（：滴定空白消耗染料的体积（mL）V3 ：滴定时吸取样品溶液的体积（：滴定时吸取样品溶液的体积（mL）V4 ：样品定容的体积（：样品定容的体积（mL）抗坏血酸含量（抗坏血酸含量（mg/100g）=WV3（V1-V2）TV4 100（1）所有试剂配制最好用重蒸水。）所有试剂配制最好用重蒸水。（2）某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆）某些水果、蔬菜（如橘子、西红柿等）浆状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。状物泡沫太多，可加数滴丁醇或辛醇。 （3）提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留）提取的浆状物如不易过滤，亦可离心，留取上清液进行滴定。取上清液进行滴定。6. 注意事项注意事项（4）整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血）整个操作过程要迅速，防止还原型抗坏血酸被氧化。滴定过程一般不超过酸被氧化。滴定过程一般不超过2min。滴定所滴定所用的染料不应小于用的染料不应小于1mL或多于或多于4mL，如果样品含，如果样品含抗坏血酸太高或太低时，可酌情增减样液用量或抗坏血酸太高或太低时，可酌情增减样液用量或改变提取液稀释度。改变提取液稀释度。（5）贮存过久的罐头食品，可能含有大量的亚）贮存过久的罐头食品，可能含有大量的亚铁离子（铁离子（Fe