实验一斐林试剂置换法测定还原糖的含量ppt课件

1、 实验一实验一斐林试剂置换法测定复原糖的斐林试剂置换法测定复原糖的含量含量一、实验原理糖类包括多糖、双糖和单糖，其中单糖和某糖类包括多糖、双糖和单糖，其中单糖和某些双糖具有游离的羰基，称为复原糖，多糖些双糖具有游离的羰基，称为复原糖，多糖和蔗糖无复原性。利用糖的复原性，与斐林和蔗糖无复原性。利用糖的复原性，与斐林试剂氧化剂中的二价铜离子复原为一价试剂氧化剂中的二价铜离子复原为一价铜，进展氧化复原反响，而进展测定铜，进展氧化复原反响，而进展测定. .非复原非复原糖必需转化为复原糖，再进展测定。糖必需转化为复原糖，再进展测定。斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一种氧化剂，反响

2、的终点可用次甲基蓝作指示剂，反响的终点可用次甲基蓝作指示剂，在碱性、沸腾环境下复原呈无色。剂，在碱性、沸腾环境下复原呈无色。根据斐林试剂完全复原所需的复原糖根据斐林试剂完全复原所需的复原糖量，计算出样品复原糖量。量，计算出样品复原糖量。二、试剂与资料1、斐林试剂 甲 69.3g CuSO4.5H2O 1000ml 50ml/组 乙 346g 酒石酸钾钠+100gNaOH 1000ml 50ml/组2、1%次甲基蓝 1g次甲基蓝+100ml水/班 棕色瓶保管3、0.2%规范G 2gG105烘干到恒重加水到 1000ml 2000ml/班 4、碱式滴定管5、样品溶液：待测G液样品1：稀释20倍，1

3、000ml /班样品2：稀释50倍，1000ml /班6、电炉 三、操作方法1、斐林试剂标定A 取甲液5ml+乙液5ml，留意：甲液与乙液混合可生成氧化亚铜沉淀，应将甲液参与乙液，使开场生成的氧化亚铜沉淀重溶置于250ml三角瓶中，参与10ml水，并从滴定管中参与0.2%的规范G假设干毫升约23ml 。量控制在后滴定时耗费G在0.51.0ml) B 电炉上加热至沸，并坚持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝溶液，趁沸以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖规范溶液用0.2%规范G滴定至蓝色消逝，有红棕色沉淀，溶液清亮为终点止。记录耗用的G量为V0,必需在1min内完成。留意：复原的次甲基蓝易被空气中的氧氧化

4、，恢复成原来的蓝色，所以滴定过程中必需坚持溶液成沸腾形状，并且防止滴定时间过长。 2、定糖预备实验 同1法取斐林试剂，加10ml样品液，摇匀于电炉上加热至沸，坚持微沸2分钟，加2滴1%次甲基蓝，用0.2%G滴定至蓝色消逝。记录耗用的G量为V13 3、样品中复原糖测定、样品中复原糖测定 同上法汲取斐林试剂加同上法汲取斐林试剂加10ml10ml样品液样品液( (预先稀释预先稀释) )，补加，补加V0V1V0V1mlml水，并从滴定管中预先参与水，并从滴定管中预先参与V1-1V1-1ml 0.2%Gml 0.2%G，摇匀至电炉上，摇匀至电炉上加热至沸，坚持加热至沸，坚持2min2min微沸，参与微沸

5、，参与2 2滴滴1%1%次甲基蓝，继续用次甲基蓝，继续用G G滴定至蓝色滴定至蓝色消逝。记录耗费的规范消逝。记录耗费的规范G G体积为体积为V V毫毫升。升。四、结果计算复原糖含量复原糖含量( (以以G G计计) ) g/ml) g/ml) = =Vo-V) Vo-V) * *0.002 0.002 * *1/10 1/10 * * n n 式中式中Vo- Vo- 斐林试剂标定值，斐林试剂标定值，ml ml V- V- 样品糖液测定值，样品糖液测定值，ml ml 0.002- 0.002- 规范规范GSGS液浓度，液浓度，g/mlg/ml 10- 10- 样品糖液体积，样品糖液体积，ml ml

6、 n- n- 样品稀释倍数样品稀释倍数 五、本卷须知五、本卷须知本方法测定的是一类具有复原性质的糖，包本方法测定的是一类具有复原性质的糖，包括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等，只是结括葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖等，只是结果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示，所以果用葡萄糖或其他转化糖的方式表示，所以不能误解为复原糖不能误解为复原糖=葡萄糖或其他糖。但假葡萄糖或其他糖。但假设知样品中只含有某一种糖，如乳制品中的设知样品中只含有某一种糖，如乳制品中的乳糖，那么可以以为复原糖乳糖，那么可以以为复原糖=某糖。某糖。分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖规范品配制分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖规范品配制规范溶液分别

7、滴定等量已标定的费林氏液，所耗规范溶液分别滴定等量已标定的费林氏液，所耗费规范溶液的体积有所不同。证明即使同是复原费规范溶液的体积有所不同。证明即使同是复原糖，在物化性质上仍有所差别，所以复原糖的结糖，在物化性质上仍有所差别，所以复原糖的结果只是反映样品整体情况，并不完全等于各复原果只是反映样品整体情况，并不完全等于各复原糖含量之和。假设知样品只含有某种复原糖，那糖含量之和。假设知样品只含有某种复原糖，那么应以该复原糖做规范品，结果为该复原糖的含么应以该复原糖做规范品，结果为该复原糖的含量。假设样品中复原糖的成分未知，或为多种复量。假设样品中复原糖的成分未知，或为多种复原糖的混合物，那么以某种复原糖做规范品，结原糖的混合物，那么以某种复原糖做规范品，结果以该复原糖计，但不代表该糖的真实含量。果以该复原糖计，但不代表该糖的真实含量。五、分析讨论