过氧化物酶的显示和观察ppt课件

1、细胞中过氧化物酶的显示与察看细胞中过氧化物酶的显示与察看( peroxisome)微体微体micro-bodies电电镜镜下下的的过过氧氧化化物物酶酶体体电子致密的中心是尿酸氧化酶的结晶，即类核体peroxisomePeroxisomes are simple, membrane-Peroxisomes are simple, membrane-bound vesicles (or microbodies, as bound vesicles (or microbodies, as they are also called) they are also called) A diameter o

2、f 0.1 to 1.0 m that A diameter of 0.1 to 1.0 m that often contain a dense, crystalline often contain a dense, crystalline core of oxidative enzymescore of oxidative enzymesPeroxisomes are multifunctional Peroxisomes are multifunctional organelles, containing more than 50 organelles, containing more

3、than 50 enzymes involved in such diverse enzymes involved in such diverse activitiesactivitiesglyoxysomeglyoxysome乙醛酸循环体乙醛酸循环体: specialized : specialized type of peroxisome, present in plants. type of peroxisome, present in plants. 过氧化物酶体包括过氧化物酶体包括2 2种酶类：种酶类：氧化酶氧化酶(oxidases) (oxidases) 约占过氧化物酶体酶总量的一

4、半约占过氧化物酶体酶总量的一半各种氧化酶作用于不同的底物各种氧化酶作用于不同的底物将氧复原成过氧化氢。将氧复原成过氧化氢。 RH2 + O2 R + RH2 + O2 R + H2O2H2O2过氧化氢酶过氧化氢酶(catalase)(catalase)是过氧化物酶体的标志酶是过氧化物酶体的标志酶约占过氧化物酶体酶总量的约占过氧化物酶体酶总量的40%40%作用是将过氧化氢复原成水作用是将过氧化氢复原成水 RH2 +H2O2 R + 2H2O RH2 +H2O2 R + 2H2O过氧过氧化物化物酶体酶体的增的增殖殖实验原理实验原理 氧化复原酶类的原位显示：根据氧化复原的原理，使氧化复原酶类的原位显

5、示：根据氧化复原的原理，使无色的化合物氧化成有色的物质得以定位。无色的化合物氧化成有色的物质得以定位。 过氧化物酶体系能把许多胺类氧化成有色化合物。本过氧化物酶体系能把许多胺类氧化成有色化合物。本实验用联苯胺混合液处置标本，过氧化物酶可将其氧实验用联苯胺混合液处置标本，过氧化物酶可将其氧化为蓝色或棕色产物。化为蓝色或棕色产物。 根据颜色反响，可断定过氧化物酶的有无或多少。根据颜色反响，可断定过氧化物酶的有无或多少。RH2+ O2 R + H2O2H2O2 + RH2 R + H2O实验步骤 实验一：实验一： 取洋葱鳞片表皮一薄片；取洋葱鳞片表皮一薄片； 置于置于0.85NaCl溶液中溶液中35

6、分钟。培育皿分钟。培育皿1 浸在溶有浸在溶有0.1%钼酸胺的钼酸胺的0.85NaCl溶液中溶液中5分钟。培育皿分钟。培育皿2 在运用联苯胺溶液前，每在运用联苯胺溶液前，每2ml加加10%的过氧化氢的过氧化氢2滴。培育皿滴。培育皿3 浸在联苯胺溶液中浸在联苯胺溶液中2分钟，至切片出现蓝色为止。培育皿分钟，至切片出现蓝色为止。培育皿3 在在0.85%NaCl溶液中洗溶液中洗1min。培育皿。培育皿4 将薄片置于载玻片上展开，盖上盖玻片，显微镜检查。将薄片置于载玻片上展开，盖上盖玻片，显微镜检查。 实验二：实验二： 取马铃薯块茎一个，用徒手切片法切取一小薄片置取马铃薯块茎一个，用徒手切片法切取一小薄片置于载玻片上，于载玻片上， 滴加滴加3的过氧化氢溶液。的过氧化氢溶液。 用煮熟的马铃薯反复上述过程，结果如何？用煮熟的马铃薯反复上述过程，结果如何？实验结果实验结果 1、在显微镜下可见到细胞中有一些染成蓝色、在显微镜下可见到细胞中有一些染成蓝色或棕色的颗粒。即为过氧化物酶存在的部位。或棕色的颗粒。即为过氧化物酶存在的部位。 2、 滴加了过氧化氢溶液的马铃薯组织周围出现气滴加了过氧化氢溶液的马铃薯组织周围出现气泡，提示植物中过氧化氢酶的存在。泡，提示植物中过氧化氢酶的存在。过氧化氢酶能使过氧化氢酶能使H2O2H2O2分解，生成分解，生成H2OH2O