尿酮体尿胆红素尿胆原尿血红蛋白尿肌红蛋白乳糜尿定性检查 ppt课件

1、邱群凤邱群凤2016mar.龙岩市第一医院龙岩市第一医院 当机体能量代谢发生障碍，脂肪分解代谢增加，血中酮体升高，过多的酮体从尿中排出，称为酮尿。实验一实验一 尿酮体改良尿酮体改良rotherarothera法定性检查法定性检查(罗瑟拉)实验一实验一 尿酮体改良尿酮体改良rotherarothera法定性检查法定性检查【原理】【原理】本法对本法对 乙酰乙酸乙酰乙酸 灵敏度为灵敏度为80mg/l80mg/l 丙酮丙酮 灵敏度为灵敏度为 1000mg/l1000mg/l+ +亚硝基铁氰化钠亚硝基铁氰化钠 紫色化合物紫色化合物丙酮丙酮乙酰乙酸乙酰乙酸 碱性条件碱性条件亚硝基铁氰化钠法亚硝基铁氰化钠法

2、( (改良改良rotherarothera法法) )【操作】（详见实验课本【操作】（详见实验课本 p96 p96 ） 1加酮体粉 : 1小勺 2滴加尿液 : 23滴,没过酮体粉为宜 3观察结果 : 如下规则 立即出现深紫色立即出现深紫色强阳性强阳性 +立即呈现淡紫色后渐转深紫色立即呈现淡紫色后渐转深紫色阳性阳性 + +逐渐呈现淡紫色逐渐呈现淡紫色 弱阳性弱阳性 + +5min5min内无紫色出现内无紫色出现 阴性阴性- -【干扰因素干扰因素】假阳性假阳性较多肌酐、肌酸，高色素尿，酞、苯丙酮、左旋多巴代谢物假阴性假阴性 标本收集和保存不当；亚硝基铁氰化钠对温度、热度或光线很灵敏；试带受潮失活。

3、【注意事项】【注意事项】1.试剂配制要准确,易受潮,应密闭、干燥保存；2.乙酰乙酸不稳定,丙酮易挥发,使用新鲜尿液；3.控制反应温度,实验室温度过低时在30水浴箱中完成；4.存在大量非结晶尿酸盐时，可能出现橙色反应影响结果判断，离心除去。 实验二实验二 尿胆红素尿胆红素harrisonharrison法定性检查法定性检查 胆红素胆红素+ +氯化钡氯化钡沉淀沉淀+ +三价铁三价铁胆青素胆青素/ /胆绿素胆绿素/ /胆黄素胆黄素 ( (蓝绿色蓝绿色/ /绿色或黄绿色或黄绿色绿色) )酸性条件酸性条件【原理】【原理】(哈里森)【操作】（详见实验课本【操作】（详见实验课本 p97 p97 ） 1.加尿

4、液: 加尿液5ml2.吸附胆红素: 加2.5ml氯化钡溶液于尿中混匀离心35min弃上清液3.加试剂: 向沉淀表面加fouchet试剂2滴放置片刻,观察沉淀表面颜色变化4.判断结果 沉淀即刻变为蓝绿色沉淀即刻变为蓝绿色强阳性强阳性+沉淀变为绿色沉淀变为绿色 阳性阳性+沉淀逐渐变为淡绿色沉淀逐渐变为淡绿色 弱阳性弱阳性 + +长时间不变色长时间不变色 阴性阴性- -【结果判断】【结果判断】【干扰因素干扰因素】假阳性假阳性水杨酸、阿司匹林、牛黄水杨酸、阿司匹林、牛黄紫红色紫红色干扰干扰harrisonharrison法法. .假阴性假阴性标本标本保存不当（未避光）保存不当（未避光）fouchetf

5、ouchet试剂加入的量不准确试剂加入的量不准确 【注意事项】【注意事项】1. 使用新鲜尿液,避光收集,碱性尿液先酸化;2. 保证硫酸根离子充足,确保能产生沉淀;3. 严格控制加入fouchet试剂量;4. 注意可能影响结果药物的因素;5. 改实验法优点:灵敏度较高,0.9umpl/l实验三实验三 尿胆原改良尿胆原改良ehrlichehrlich法定性检查法定性检查 【原理】【原理】尿胆原尿胆原+ +对二甲氨基苯甲醛对二甲氨基苯甲醛樱红色樱红色化合物化合物 简单快速，分析仪，定性或定量；简单快速，分析仪，定性或定量； 不同试带灵敏度不同（不同试带灵敏度不同（1-4mg/l1-4mg/l）。）。

6、偶氮反应试带不受胆红素影响，对尿胆原特异偶氮反应试带不受胆红素影响，对尿胆原特异。方法学评价方法学评价(埃利希)酸性条件酸性条件【操作】（详见实验课本【操作】（详见实验课本 p99 p99 ） 1.加入氯化钡除去胆红素: 尿液与bacl2比例为 4:12.加尿液:加尿液shang qing ye 2ml3.加试剂:加ehrlichehrlich试剂0.2ml,室温下静置10min4.观察结果:在白色衬纸下,从管口向管底观察颜色变化5.稀释阳性标本并重复操作 ( p99 ) 不变色不变色,加温后无反应加温后无反应阴性阴性-10min后呈微红色后呈微红色 弱阳性弱阳性 + +10min后呈樱红色后

7、呈樱红色 阳性阳性+立即呈深红色立即呈深红色 强阳性强阳性+【结果判断】【结果判断】干扰因素评 价标本因素标本久置，尿胆原氧化为尿胆素-假阴性尿胆原含量 与饮水量、排尿时间、尿液ph有关药物因素假阳性：吩噻嗪类、氯丙嗪类、磺胺类、普鲁卡因假阴性：大量vitc、长期服用广谱抗生素。内源性物质假阳性：卟胆原、吲哚、胆红素红色。 【干扰因素干扰因素】 ehrlichehrlich醛反应醛反应 【注意事项】【注意事项】1尿液标本避光收集2. 尿胆原与饮水量,排尿时间,ph的关系3. 控制试剂与标本比例4. 注意实验温度5. 尿液标本中含有影响结果的物质6. 稀释阳性标本时不高于1:1607. ehrl

8、ich试剂与尿液的比例应控制在10:1实验四实验四 尿血红蛋白邻联甲苯胺法定性检查尿血红蛋白邻联甲苯胺法定性检查 尿液中尿液中hbhb来源：来源： 血管内溶血血管内溶血 尿路出血尿路出血 正常人血浆中游离正常人血浆中游离hbhb微量微量(50mg/l),(50mg/l),与结合珠与结合珠蛋白形成蛋白形成hb-hphb-hp复合物，在单核复合物，在单核- -巨噬细胞系统巨噬细胞系统代谢，故尿中代谢，故尿中hbhb极微。定性：阴性极微。定性：阴性 验证尿液潜在出血的试验验证尿液潜在出血的试验: : 隐血试验隐血试验(occult blood test)【原理】【原理】h h2 2o o2 2 亚铁

9、血红素亚铁血红素o(氧化)（色素原）（色素原）【操作】（详见实验课本【操作】（详见实验课本 p101 p101 ） 1.滴加尿液：先滴1滴在滤纸上2.烘干滤纸：烘干后痕迹处继续滴1滴尿液,反复34次3.加试剂:邻联甲苯胺冰醋酸溶液23滴,再滴3%过氧化氢 23滴4.观察结果:立即观察颜色变化 加入试剂后立即出现黑褐色加入试剂后立即出现黑褐色+加入试剂后立即出现蓝褐色加入试剂后立即出现蓝褐色 +加入试剂后由浅蓝褐色逐渐变为明显的蓝褐色加入试剂后由浅蓝褐色逐渐变为明显的蓝褐色 +加入试剂后加入试剂后10s10s由浅蓝色逐渐变为蓝色由浅蓝色逐渐变为蓝色 + +加入试剂加入试剂2min2min后仍不显

10、色后仍不显色- -【结果判断】【结果判断】 【注意事项】【注意事项】1.器材合格: 滤纸质量优良,试验用具无血迹或脓液2.标本新鲜: 可先煮沸,以破坏白细胞中的过氧化氢酶及其他易热性触酶3. 烘干滤纸: 应少量多次并保证标本量足够4.保证试剂有效5.控制试剂剂量实验五实验五 尿肌红蛋白邻联甲苯胺法定性检查尿肌红蛋白邻联甲苯胺法定性检查 【原理】【原理】肌红蛋白和血红蛋白一样，分子中含肌红蛋白和血红蛋白一样，分子中含血红素基因血红素基因，具有具有类过氧化物酶类过氧化物酶活性能用联苯胺和邻联甲苯胺与活性能用联苯胺和邻联甲苯胺与过氧化氢反应检出过氧化氢反应检出肌红蛋白能肌红蛋白能溶于溶于80%80%

11、饱和度的硫酸铵溶液中而血红饱和度的硫酸铵溶液中而血红蛋白则不能，因而可鉴别蛋白则不能，因而可鉴别【操作】（详见实验课本【操作】（详见实验课本 p102 p102 ） 1. 以磺基水杨酸定性尿蛋白2. 以邻联甲苯胺法定性血红蛋白3. 加尿液,加入硫酸铵沉淀血红蛋白4. 再次定性血红蛋白5. 判断结果 血红蛋白血红蛋白沉淀为蓝色沉淀为蓝色, , 上清液正常上清液正常肌红蛋白肌红蛋白 上清液为蓝色上清液为蓝色, , 无蓝色沉淀无蓝色沉淀血红蛋白血红蛋白+ +肌红蛋白肌红蛋白上清液出现蓝色上清液出现蓝色, , 沉淀亦出现蓝色沉淀亦出现蓝色 【注意事项】【注意事项】1. 标本新鲜2. 加入硫酸铵应缓慢,防局部温度过高,将肌红蛋白一并沉淀3. 可用naoh调节ph至7.07.5实验六实验六 乳糜尿定性检查乳糜尿定性检查【原理】【原理】乳糜由乳糜由脂肪微粒脂肪微粒组成组成, ,可溶于可溶于乙醚乙醚, ,较大脂粒可通过较大脂粒可通过脂溶性染料脂溶性染料苏丹苏丹3 3着色识别着色识别, ,而脂肪被而脂肪被萃取萃取而使尿液而使尿液由乳浊变澄清由乳浊变澄清.