人体寄生虫实验课：实验六 粪检

1、1作业：作业：1、绘图：、绘图：1）标本绘图要求：采用点、线绘画法标本绘图要求：采用点、线绘画法 2）用铅笔画）用铅笔画 3）指示线在右侧，末段对期）指示线在右侧，末段对期 2 主要致病阶段成虫：蛔虫、鞭虫、钩虫、蛲虫、丝虫、肝吸虫、姜片虫、肺吸虫、带绦虫、微小膜壳绦虫虫卵：血吸虫幼虫：旋毛虫、斯氏狸殖吸虫、猪带绦虫、孟氏裂头绦虫、细粒棘球绦虫、广州管圆线虫3观察玻片时请先看示教（只可动小螺旋）4 实验目的与要求：实验目的与要求：掌握直接涂片法、饱和盐水漂浮法、沉淀集卵法。掌握直接涂片法、饱和盐水漂浮法、沉淀集卵法。 实验十四：肠道寄生虫病的病原诊断实验十四：肠道寄生虫病的病原诊断粪便检查粪便

2、检查 一、粪便直接涂片法一、粪便直接涂片法 粪便检查是寄生虫病原学检查的 重要部分。 主要用来检查蠕虫卵蠕虫卵、原虫的滋养滋养 体体和包囊包囊。 取一张清洁干净的取一张清洁干净的载玻载玻片片，在中央滴，在中央滴1 12 2滴滴生理盐生理盐水水，用竹签或牙签挑取，用竹签或牙签挑取米粒米粒大小的粪便大小的粪便，在生理盐水中，在生理盐水中均匀涂开均匀涂开，置低倍镜下检查，置低倍镜下检查。如用高倍镜观察，要。如用高倍镜观察，要加盖加盖玻片玻片，以防接触镜头。，以防接触镜头。操操 作作 方方 法法去掉涂片中的去掉涂片中的大颗粒粪便大颗粒粪便、 谷壳谷壳和和纤维纤维，弄破，弄破气泡气泡。粪量适中，厚薄适宜

3、粪量适中，厚薄适宜。 粪量过多，涂片太厚粪量过多，涂片太厚 - - 容易漏诊容易漏诊。 粪量太少，涂片过薄粪量太少，涂片过薄 - - 影响检出率影响检出率。 厚薄标准以透过玻片厚薄标准以透过玻片能看清书本上的字能看清书本上的字 为适宜为适宜。涂片涂片注意问题注意问题 主要优缺点主要优缺点： 优点优点: : 操作操作简便简便、快速快速。缺点缺点: : 粪便用量少，在检查某些寄生虫时，粪便用量少，在检查某些寄生虫时， 如华支睾吸虫卵，如华支睾吸虫卵， 由于虫卵比较小，由于虫卵比较小， 又容易被粪渣杂物遮盖，所以又容易被粪渣杂物遮盖，所以检出率检出率低，溶易漏诊低，溶易漏诊。 为了提高检出率，为了提

4、高检出率，三张涂片较为准确。三张涂片较为准确。人体常见寄生虫卵的鉴别人体常见寄生虫卵的鉴别镜检涂片注意问题镜检涂片注意问题1 1、注意人体常见寄生虫卵的鉴别、注意人体常见寄生虫卵的鉴别人体常见寄生虫卵人体常见寄生虫卵溶组织内阿米巴滋养体溶组织内阿米巴滋养体蓝氏贾第鞭毛虫滋养体蓝氏贾第鞭毛虫滋养体 胞膜胞膜 内质内质2 2、注意寄生虫卵与粪便中异物的区别、注意寄生虫卵与粪便中异物的区别寄生虫卵与粪便中异物的区别寄生虫卵与粪便中异物的区别 用途：溶组织内阿米巴包囊、 结肠内阿米巴包囊、 蓝氏贾第鞭毛虫包囊。 2 2、 包囊碘液染色涂片法包囊碘液染色涂片法 (p71)(p71) 检查检查原虫包囊原虫

5、包囊 操作方法：操作方法： 有有3 3种种在载玻片上滴一滴碘液，涂片， 加盖玻片镜检。 在生理盐水直接涂片上加盖玻片， 从盖玻片一侧边缘滴进1滴碘液，在对侧边缘用草纸吸水，将碘液吸过来，使整个粪膜染成浅黄色或草绿色。使整个粪膜染成浅黄色或草绿色。 不使用草纸，让粪膜一侧染上颜色一侧染上颜色，另一侧保持原色另一侧保持原色，以便于比较鉴别。15 碘液染色法碘液染色法：查包囊 直接涂片法直接涂片法+1小滴碘液小滴碘液碘碘液液吸吸水水纸纸 注意问题：注意问题： 碘液不能太多太浓碘液不能太多太浓，以免着色过深，以免着色过深，影响折光，妨碍观察。影响折光，妨碍观察。 染色后包囊为染色后包囊为淡黄色或黄绿色

6、淡黄色或黄绿色， 糖原泡为糖原泡为深棕色；深棕色； 囊壁、核仁、核膜、拟染色体均囊壁、核仁、核膜、拟染色体均透明无色。透明无色。溶组织内阿米巴包囊溶组织内阿米巴包囊蓝氏贾第鞭蓝氏贾第鞭毛虫包囊毛虫包囊结肠内阿米巴包囊结肠内阿米巴包囊粪检中注意排除粪检中注意排除非虫卵物质非虫卵物质三、饱和盐水浮聚法三、饱和盐水浮聚法 (p72)(p72)用用 途：途：用于检查线虫卵和绦虫卵 线虫卵：蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵蛔虫卵、鞭虫卵、钩虫卵 绦虫卵：带绦虫卵、微小膜壳绦虫卵带绦虫卵、微小膜壳绦虫卵原原 理理: : 比重原理。 用比重大于虫卵比重大于虫卵的液体， 使虫卵上 浮集中在液体表面，以利于检查。 操操

7、作作 方方 法法 取1g1g粪便粪便（约黄豆粒大小），放进 青霉素瓶内青霉素瓶内，加少许饱和盐水饱和盐水，先将粪便调匀，再加饱和盐水至瓶口，挑走粪渣挑走粪渣，去掉去掉气泡气泡，然后用滴管慢慢加饱和盐水，加到略高出瓶口，但不能溢出，最后小心放上载玻片，静止静止1515分钟分钟后，将载玻片垂直提起，并迅速翻转，置镜下检查镜下检查。 饱和盐水浮聚法饱和盐水浮聚法23饱和盐水漂浮法饱和盐水漂浮法：查：查没没卵盖的卵卵盖的卵 粪便：黄豆大小（粪便：黄豆大小（1g） 静止静止15分钟分钟注注 意意 问问 题题 提起玻片时，注意保持垂直，减少倾斜， 避免饱和盐水滴落。 粪量不能过多，也不能太少。过多会影响

8、饱和盐水的比重，太少又会降低检出率。 调粪便时，饱和盐水不能加得太多，否 则难以调匀。饱和盐水不能溢出瓶口。 优优 缺缺 点点 优点优点: : 把虫卵集中在玻片上，比较干净， 检出率高检出率高，特别是比重轻的虫卵， 如钩虫卵检查效果最好。缺点缺点: : 比重大的包囊包囊和吸虫卵吸虫卵不能用这种方法。操作方法操作方法：取1030 g新鲜粪便，先用少许 水将粪便捣烂成糊状，然后加 一定量的水，把金属筛（6080 目/吋）放在漏斗上，过滤于一个 500ml锥形量杯中，加清水冲洗四、四、自然沉淀法自然沉淀法 （水洗沉淀法）(p74)用用 途途：用于检查原虫包囊和蠕虫卵。残渣，拿走金属筛及漏斗，加水至近

9、杯口 沉淀2030分钟后，轻轻倒去上清液，保留沉渣，再加清水至近杯口处静置。如此反复清洗、沉淀三次，最后倒去上清液，沉淀2030分钟后，吸取沉淀物镜检。自然沉淀法自然沉淀法 原理原理: 比重原理比重原理 优点：优点：取粪量多，且虫卵和包囊集中， 检出率较高。缺点缺点: 繁琐，费水费时，对比重接近水的 虫卵（如钩虫卵，微小膜壳绦虫卵） 或包囊（如溶组织内阿米巴包囊、 蓝氏贾第鞭毛虫包囊）， 检出效果差。 倒去上清液时，要一次倒完， 不要中途停顿不要中途停顿，以免将沉渣翻起。 吸取沉渣时，要注意先压去吸管中 的空气，然后慢慢将吸管插进量杯 底部，吸取沉渣镜检吸取沉渣镜检。注注 意意 问问 题题31

10、沉淀集卵法：沉淀集卵法：三张片三张片 粪便：粪便：20g操作时间长：202020 倒上清4/5 倒上清4/5毛蚴孵化法毛蚴孵化法用用 途途：用于日本血吸虫的诊断。原原 理理：虫卵内的毛蚴在适宜条件下，由 于低渗透压，毛蚴分泌排泄物中 的酶活力和毛蚴活动等作用，使 卵壳破裂而孵出毛蚴。 操操 作作 方方 法：法： 取一个三角烧瓶三角烧瓶，放进经自然沉淀法所取得的沉渣沉渣，或经剁烂的含虫卵的肝组织组织，沿瓶壁轻轻加水至离瓶口约1处，20203030（最适宜25）温箱中孵化孵化，46h后用肉眼或放大镜观察结果。在24h内观察23次。毛毛蚴针尖大小蚴针尖大小，银白色银白色，在清水表层作直线运直线运动动。为了易于观察，可用黑纸作衬黑纸作衬。毛蚴孵化法毛蚴孵化法35 课堂作业：课堂作业：一、检查结果一、检查结果 二、二、讨论：讨论：直接涂片法可诊断何种寄生虫？并指明检出直接涂片法可诊断何种寄生虫？并指明检出阶段阶段？ 36 通知通知：（每班提前一天准备棉球、消毒酒精、玻片、镊子、一次性采